共刺激信号

摘要： 美国FDA于2021年12月15日批准Orencia(abatacept/阿巴西普,商品名中译“恩瑞舒”)与其他免疫抑制剂联合用药用于成人及2岁以上儿童预防急性移植物抗宿主病,主要适用于非血缘造血干细胞移植(即常说的骨髓移植或者干细胞移植)患者。Orencia(abatacept/阿巴西普)属于T细胞共刺激信号阻滞剂,FDA最早于2005年首次批准用于成人治疗风湿性关节炎,此后多次批准新增适用症,包括多关节型幼年特发性关节炎(polyarticular juvenile idiopathic arthritis)及成人银屑病关节炎(psoriatic arthritis)。

摘要： 目的:研究鼠抗人单克隆抗体B7-1对恶性肿瘤细胞株Daudi(天然表达B7-1分子)体外生长、蛋白表达谱及信号通路的影响。方法:①采用诱生腹水法制备小鼠抗人B7-1单克隆抗体(4E5 mAb),应用Protein A免疫层析法进行亲和纯化,流式细胞术对其纯化后产物的活性进行识别鉴定;②利用MTT法检测不同浓度的4E5 mAb(5、10、20、40μg/ml)对Daudi细胞体外增殖的影响;③应用Label-free蛋白定量技术分析比较4E5 mAb(20μg/ml)处理Daudi细胞48 h后与其对照组(同型对照IgG)蛋白质的差异表达情况,采用平行反应监测(PRM)对差异表达蛋白进行定量验证;④根据蛋白质的GO注释和生物信息学工具KEGG数据库将鉴定出来的差异蛋白质进行生物信息学富集分析。结果:①获得单克隆抗体的量为3.83 mg/ml,该抗体与Daudi肿瘤细胞的阳性结合率为93.7%;②当抗体终浓度为20μg/ml时,4E5 mAb显著抑制Daudi细胞的增殖;③与IgG对照组相比,4E5实验组鉴别出169个蛋白质的定量水平差异有统计学意义,其中131个蛋白质表达呈上调趋势,38个蛋白表达水平呈下调趋势,PRM对差异蛋白定量验证的结果与蛋白组学结果完全一致;④GO数据库分析的差异表达蛋白主要来自线粒体、内质网膜、高尔基体、核质等细胞器,其中又以线粒体附近分布最多,多数参与线粒体翻译延伸和终止、细胞增殖、mRNA剪接、翻译、细胞内蛋白运输等功能。生物信息学工具KEGG富集分析显示差异蛋白主要参与Daudi细胞增殖相关的通路,如PI3KAkt、Ras、DNA replication、AMPK、mTOR、Hippo、VEGF、FoxO、Metabolic等。结论:小鼠抗人B7-1 mAb不仅可以通过与肿瘤细胞膜表面的B7-1分子特异性结合进行相互作用,还能显著抑制天然表达B7-1分子的肿瘤细胞的增殖,且与B7-1 mAb结合后明显改变了肿瘤细胞中蛋白表达谱及与增殖相关的信号通路。

摘要： 目的:制备沉默小鼠B7-2基因的RNAi慢病毒,研究其对体外诱导培养的小鼠树突状细胞B7-2基因表达的干扰效应及对其刺激T细胞增殖的影响.方法:从Gen Bank获取小鼠B7-2基因序列,在其编码区选择3段RNAi靶序列,构建介导B7-2基因RNAi的双发夹RNA慢病毒表达载体,采用DNA测序进行重组载体鉴定.重组慢病毒表达质粒及包装辅助质粒,在脂质体介导下共转染293T细胞制备重组慢病毒并经超高速离心进行浓缩;浓缩慢病毒颗粒感染293T细胞,根据其介导GFP表达的情况测定病毒滴度.分离C57BL/6小鼠骨髓细胞,采用GM-CSF及IL-4诱导DC的分化,LPS刺激48 h促进其成熟,并进行形态以及表型鉴定.采用制备的小鼠B7-2基因RNAi重组慢病毒感染小鼠骨髓源DC,流式分析其感染效率及对DC表面B7-2分子表达的干扰效率;通过慢病毒感染的DC与小鼠脾脏T细胞混合培养测定慢病毒介导B7-2沉默对DC刺激T细胞增殖能力的影响.结果:小鼠B7-2基因RNAi慢病毒表达载体构建正确;获得了针对3靶点序列RNAi和阴性对照的浓缩小鼠B7-2基因RNAi重组慢病毒,滴度达(2～4)×108TU/ml,重组慢病毒能够有效感染DC及抑制其表面的B7-2分子表达,经小鼠B7-2基因RNAi慢病毒感染及介导B7-2沉默后,DC刺激T细胞增殖的能力显著下降(P＜0.05).结论:慢病毒介导小鼠B7-2基因RNA干扰可沉默DC表面B7-2分子的表达及抑制DC诱导的T细胞增殖效应.%Objective: To generate mouse B7-2 gene RNAi lentivirus and study its interference effects on B7-2 expression and T lymphocytes proliferation induced by dendritic cells. Methods: Three sequences specific targeting B7-2 gene and one non-specific sequence were respectively synthesized, and inserted into lentiviral vector, then the recombinant vectors were sequencing. 293 T cells were co-transfected with lentiviral expression plasmid and packaging plasmids to produce recombinant lentivirus which titre was checked according to the expression level of green fluorescent protein ( GFP). Bone marrow cells from C57 BL/6 mice were isolated to differentiate into DCs at the present of GM-CSF, IL-4 and LPS for 48 h, then morphology and phenotypic was identified. DCs were infected by recombinant RNAi lentivirus and then the efficiency of infection and the expression of B7-2 on the surface of DCs were detected by flow cytometry. Effects on the proliferation of T cells were detected by co-culturing with DCs which were infected by B7-2 RNAi lentivirus and murine spleen T cells in vitro. Results: DNA sequencing confirmed that three B7-2 RNAi and one non-specific recombinant lentiviral transfer plasmids were successfully constructed, the titer of recombinant lentivirus was ( 2-4) × 108 TU/ml. The recombinant lentivirus could effectively infect DC and inhibit the expression of B7-2. After the B7-2 recombinant lentivirus infection, the ability of DCs to stimulate the proliferation of T cells decreased obviously ( P＜0. 05). Conclusion: The lentiviral B7-2 gene RNAi vector can effectively silence the expression of B7-2 on the surface of DCs and inhibit the proliferation effect of T cells induced by DCs.

摘要： Objective:To construct lentiviral vector specific for mouse B7-1 RNA interference and study lentivirus-mediated B7-1 gene silencing effects in L929 fibroblast cells.Methods:Three candidate sequences for B7-1 RNAi selected from coding sequence of mouse B7-1 transcription were used to design short hairpin RNA ( shRNA ) templates and then cloned into lentiviral expression plasmid followed with correctness identification of inserted sequence by DNA sequencing.Recombinant lentivirus were prepared by co-transfecting lentiviral expression vector and packaging plasmids into 293T cells.Then the resulting culture supernatant containing infectious lentiviral particles was pooled and centrifuged via ultra-centrifugation.Infectious titer of the preparations was determined by detecting the expression of GFP in 293T cells after transfected by lentivirus.Cultured L929 cells were transfected with lentivirus to deter-mine transduction efficiency and silencing efficacy of B7-1 expression by flow cytometry.Transducted L929 cells were then screened using puromycin to generate stable cell clones followed by flow cytometry analysis of GFP and B7-1 expression.A mixed reaction system consisting of stable B7-1 silencing L929 cells and mouse splenic T cells was used to analyze ability of the established cell line to trigger T cells proliferation.Results: Lentiviral expression vector for mouse B7-1 RNAi was correctly constructed with inserted sequences as designed.Recombinant RNAi lentivirus were prepared with titers ranging (3-5) ×108 TU/ml and efficacy to mediate GFP transgene expression and B7-1 silencing.B7-1 expression and the ability to trigger T cells proliferation of stable L929 cells were suppressed significantly ( P<0.05 ).Conclusion: We generated lentiviral vector specific for mouse B7-1 RNAi with high performance of transduction efficiency as well as B7-1 silencing efficacy and the recombinant RNAi lentivirus can mediated stable B7-1 gene silencing in L929 cells and inhibition of T cells proliferation induced by B7-1/CD28 co-stimulatory signal.%目的：构建介导小鼠B7-1基因RNAi的慢病毒载体，研究其对L929细胞表面B7-1分子表达的沉默效应。方法：从小鼠B7-1基因编码区选择3段RNA干扰靶序列，制备转录双发夹RNA的前体DNA，并克隆至慢病毒穿梭质粒，构建B7-1的RNAi慢病毒穿梭载体，测序鉴定。将重组质粒及辅助质粒共转染293T细胞产生慢病毒，经超速离心获得浓缩慢病毒颗粒。通过测定293T细胞GFP表达水平确定病毒滴度，流式细胞术检测感染效率以及对细胞表面B7-1的干扰效率。病毒感染细胞经嘌呤霉素筛选及克隆培养获得小鼠B7-1基因RNAi慢病毒稳定感染的L929细胞，流式细胞术分析细胞中GFP及B7-1分子表达的状况；将感染细胞与分离的小鼠脾脏T细胞混合培养，分析B7-1稳定沉默细胞刺激T细胞增殖的能力。结果：成功了构建小鼠B7-1基因RNA干扰的重组慢病毒载体；获得了滴度达（3～5）×108 TU／ml的浓缩重组慢病毒，重组慢病毒可有效感染L929细胞介导GFP表达以及沉默其表面的B7-1。经筛选获得慢病毒稳定感染的L929细胞，该细胞表面B7-1分子表达受到抑制，刺激T细胞增殖的能力显著下降（P＜0.05）。结论：构建了能够高效感染及沉默小鼠B7-1分子的RNAi慢病毒载体，该载体可稳定沉默L929细胞表面B7-1分子表达，抑制B7-1／CD28信号诱导的T细胞增殖效应。

摘要： 目的 通过阻断新生血管化角膜兔模型穿透性角膜移植术后共刺激信号配体和受体的结合,探讨联合阻断共刺激信号对兔高风险角膜移植术后免疫排斥反应的影响.方法 缝线法制作新生血管化角膜兔动物模型,随机数字表法将其分组:对照组、MR1组、抗B7-1组、联合处理组,每组12只.术后裂隙灯显微镜下观察角膜排斥反应排斥情况,并记录各组角膜植片存活时间、制作植片生存曲线,比较其差异;术后4周或免疫排斥反应发生时各组随机选取5只兔模型摘取术眼角膜,对植片行组织病理学检查角膜组织结构改变及炎性细胞浸润情况,通过免疫组织化学方法检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)在角膜植片中的表达.结果 与对照组比较,MR1组、抗B7-1组和联合处理组角膜植片均获得了较长的存活时间,差异有统计学意义(P＜0.05).联合处理组分别与MR1组和抗B7-1组比较,生存时间更长,差异均有统计学意义(均为P＜0.05);MR1组和抗B7-1组角膜植片生存时间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).联合处理组兔角膜植片炎性细胞浸润较其他三组明显减少,TNF-α表达平均光密度值显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05);而MR1组与抗B7-1组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 联合应用CD40L和抗B7-1单克隆抗体阻断共刺激通路受体和配体的结合,比单独应用其中一种抗体能更有效地降低新生血管化角膜兔模型穿透性角膜移植术后植片排斥反应的发生率,延长植片的生存时间,提高植片的存活率.

摘要： 目的:探讨白细胞介素10(IL-10)对阻断共刺激信号CD40-CD40配体(CD40-CD40L)所诱导的小鼠移植免疫耐受的影响.方法:移植心脏和脾脏取自行心脏移植后的同种同系受体和同种异系受体[包括接受和未接受抗CD40配体抗体(MR-1)治疗],使用实时定量RT-PCR方法测定IL-10的表达.比较野生型小鼠和IL-10基因去除小鼠受体移植物的存活时间.同时通过使用IL-10受体单克隆抗体(anti-IL-10R mAb)阻断IL-10信号以研究IL-10对CD4+T细胞混合淋巴细胞反应、CD8+T细胞的细胞毒性及树突状细胞(DCs)的免疫抑制活性的影响.结果:移植免疫耐受的移植物较发生排斥反应的移植物表达更高的IL-10.使用MR-1在野生型小鼠受体中诱导出移植物的长期存活,但在IL-10基因去除小鼠受体中却无类似效果.IL-10缺失使T细胞的增殖活性及细胞毒性增强,而DC的免疫抑制活性下降.结论:在阻断共刺激信号CD40-CD40配体所诱导的移植免疫耐受中,IL-10能够促进免疫耐受状态的形成.

摘要： 背景：淋巴细胞异常激活以及核因子κB依赖非特异性的炎症反应是类风湿关节炎关节组织炎症损害的两个重要方面。共刺激信号CD40/CD40L是T细胞识别、活化中最重要的共刺激分子。IκBα有效的抑制核因子κB的途径，可以在中心环节上抑制炎症反应的产生，抑制炎症因子滑膜组织的损害。　　目的：采用 CD40LIg-IRES2-IκBα双基因表达的腺病毒载体转染到关节炎动物模型，探索双基因共表达腺病毒载体转染对免疫性关节炎的治疗效果。　　方法：构建pAdCD40LIg-IRES2-IκBα双基因共表达腺病毒载体。采用含1 g/LⅡ型胶原蛋的完全弗氏佐剂皮下多点注射构建关节炎Wistar大鼠模型。将20只构建成功的关节炎大鼠模型分为未处理组和转染组，分别给予2组大鼠四肢末端关节腔注射生理盐水和pAdCD40LIg-IRES2-IκBα腺病毒载体。　　结果与结论：转染14 d后，与未处理组相比，转染组大鼠关节炎评分、关节液中淋巴细胞CD40L表达水平、关节滑膜组织中核因子κB p65表达水平、关节液内白细胞介素2、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、间质金属蛋白酶3和间质金属蛋白酶9的水平降低。提示共表达CD40LIg和IκBα腺病毒载体局部转染可有效抑制关节炎大鼠关节炎症状，降低关节腔内炎性细胞因子及炎性分子在滑膜组织中的表达，取得良好的治疗效果。%BACKGROUND:Abnormal activation of lymphocytes and nuclear factorκB-dependent non-specific inflammation are two major manifestations of joint damage in rheumatoid arthritis. Co-stimulatory signal CD40/CD40L is the dominant co-stimulatory factor in the recognition and activation of T cel s. IκBαeffectively inhibits nuclear factorκB pathway, prevent the inflammation in the central link, and suppress the damage caused by inflammatory factor in the synovial tissue. OBJECTIVE:To investigate the therapeutic effect of double gene co-expressing adenovirus vector on arthritis based on an arthritis model rat transfected by CD40LIg-IRES2-IκBαco-expressing adenovirus vector. METHODS:The pAdCD40LIg-IRES2-IκBαco-expressing adenovirus vector was established. Arthritic model was established through multi-subcutaneous injections of complete Freund's adjuvant of type col agen II (1 g/L) into Wistar rats. Then 20 arthritic rats were divided into two groups:untreated group and transfection group, receiving an injection of saline and pAdCD40LIg-IRES2-IκBαadenovirus vector to distal joint cavity of limbs, respectively. RESULTS AND CONCLUSION:At 14 days post-transfection, compared with the untreated group, the mean arthritis index score, the CD40L expression of lymphocytes in synovial fluid, the nuclear factor-κB p65 expression in synovial tissue, and levels of interleukin-2, interleukin-6, tumor necrosis factor-α, matrix metal oproteinase-3 and matrix metal oproteinase-9 in synovial fluid of rats in transfection group were significantly lower than those in untreated group. Focal transfection of the CD40LIg-IκBαco-expression adenovirus vector can effectively inhibit arthritic symptoms, and reduce the expressions of inflammatory cytokine in synovial fluid and inflammatory molecule in synovial tissue of arthritic rats, which shows good therapeutic effect.

摘要： 背景：淋巴细胞异常激活以及核因子κB依赖非特异性的炎症反应是类风湿关节炎关节组织炎症损害的两个重要方面。共刺激信号CD40/CD40L是T细胞识别、活化中最重要的共刺激分子。IκBα有效的抑制核因子κB的途径，可以在中心环节上抑制炎症反应的产生，抑制炎症因子滑膜组织的损害。 目的：采用 CD40LIg-IRES2-IκBα双基因表达的腺病毒载体转染到关节炎动物模型，探索双基因共表达腺病毒载体转染对免疫性关节炎的治疗效果。 方法：构建pAdCD40LIg-IRES2-IκBα双基因共表达腺病毒载体。采用含1 g/LⅡ型胶原蛋的完全弗氏佐剂皮下多点注射构建关节炎Wistar大鼠模型。将20只构建成功的关节炎大鼠模型分为未处理组和转染组，分别给予2组大鼠四肢末端关节腔注射生理盐水和pAdCD40LIg-IRES2-IκBα腺病毒载体。 结果与结论：转染14 d后，与未处理组相比，转染组大鼠关节炎评分、关节液中淋巴细胞CD40L表达水平、关节滑膜组织中核因子κB p65表达水平、关节液内白细胞介素2、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、间质金属蛋白酶3和间质金属蛋白酶9的水平降低。提示共表达CD40LIg和IκBα腺病毒载体局部转染可有效抑制关节炎大鼠关节炎症状，降低关节腔内炎性细胞因子及炎性分子在滑膜组织中的表达，取得良好的治疗效果。

摘要： 目的：通过应用CTLA4Ig及anti-CD154分别阻断致敏小鼠的B7/CD28及CD40/CD154共刺激信号途径,探讨其对异基因造血干细胞(HSC)植入的影响,为临床应用异基因造血干细胞移植(HSCT)治疗致敏受者免疫排斥提供实验基础.方法：实验将BALB/c小鼠分4组:①-7天致敏组②-7致敏同时应用CTLA4Ig+anti-CD154组③正常小鼠应用CTLA4lg及anti-CD154的鼠源性对照抗体④正常小鼠空白对照组,每组15只.0天予致死量8Gy直线加速器照射后予荧光标记的C57BL/6小鼠骨髓干细胞经尾静脉注射进行移植.于不同时间点取血或器官组织进行流式细胞仪检测荧光细胞归巢,同时记录生存状况,监测其造血重建的情况.结果：与致敏组相比,应用CTLA4Ig+anti-CD154组能促进异基因HSC植入,诱导免疫耐受,并在28天内完成造血重建.结论：应用CTLA4Ig及anti-CD15能诱导致敏受者对异基因HSC的免疫耐受,促进其植入,并完成造血重建.

摘要： 目的:通过阻断致敏小鼠的B7/CD28及CD40/CD154共刺激信号途径,探讨其免疫功能的变化,为应用于异基因骨髓移植的免疫耐受提供实验依据.方法:将致敏的BALB/c小鼠分成四组:①CTLA 4lg+anti-CD154鼠源性同型对照抗体;②anti-CD154单抗+CTLA 4 Ig鼠源性同型对照抗体;③CTLA4 Ig+anti-CD154单抗;④CTLA4lg及anti-CD154单抗的鼠源性对同型对照抗体.正常BALB/c小鼠应用CTLA4lg及anti-CD154单抗的鼠源性同型对照抗体.剂量为每只小鼠予CTLA 4lg和anti-CD154单抗或相对应的同型对照抗体各500μg,于-7天尾静脉输注,每组小鼠各5只.0天处死各组小鼠,应用流式细胞仪检测脾细胞中CD19+CD69+B细胞数量、CD44h1gh/CD62Lhigh及CD44h1gh/CD62Llow/-T细胞数量.用流式细胞仪或ELISA法检测血清中抗体及细胞因子的变化.结果:小鼠致敏后CD19+CD69+B细胞数量与正常小鼠相比明显升高，差异有统计学意义(p<0.01),阻断B7/CD28或/和CD40/CD154共刺激信号通路后可见抑制(p<0.01)，两者同时阻断具有协同作用(p<0.01)。结论:阻断B7/CD28或CD40/CD154共刺激信号途径均能抑制致敏小鼠的细胞免疫功能及体液免疫功能;同时阻断有协同作用。

摘要： 目的: 选择性阻断ICOS—ICOSL和CD28-B7共刺激信号，观察ICOS—ICOSL信号对角膜移植的调控效应，比较其CD28-B7信号间的作用差异。rn 方法: 制备腺病毒栽体介导的诱导性共刺激分子融合蛋白(AdICOSIg)和细胞毒T细胞抗原4融合蛋白(AdCTLA4Ig)病毒颗粒，体外转染角膜后检测靶蛋白进行活性分析；将AdICOSIg和AdCTLA4Ig分别转染入移植物或受体行局部或全身基因治疗，观察阻断ICOS—ICOSL和CD28-B7信号对DA—Lewis鼠角膜移植物存活的影响；基因治疗7日后检测受体血清中抗腺病毒载体抗体和靶蛋白水平。rn 结果: AdICOSIg和AdCTLA4Ig具有良好生物活性；AdICOSIg仅转染入移植物内可轻微延长存活，AdCTLA4Ig转染入移植物或受体均可显著延长存活；AdCTLA4Ig转染入受体可明显抑制抗病毒抗体生成，且靶蛋白可高水平表达。rn 结论: ICOS—ICOSL抑制角膜移植排斥反应的效应较CD28-B7为弱，ICOS—ICOSL信号在调节免疫反应过程中呈现出独特的机制。

摘要： CD28-B7是T细胞活化所必需的共刺激信号.在系统性红斑狼疮患者存在着CD28-B7共刺激信号,尤其是抗原提呈细胞的B7的表达异常,这些异常可能导致系统性红斑狼疮患者细胞增殖异常及细胞因子分泌异常.LE患者循环B细胞上B7分子的过度表达在自身反应性T细胞向B细胞提供持续的辅助信号而导致自身抗体产生的过程中起着重要作用,所以阻断B7/CD28分子的共刺激信号在SLE的治疗中有一定的临床价值.

摘要： 本发明涉及一种嵌合抗原受体融合蛋白，其从N端到C端包含：(i)包含VH和VL的单链可变区片段(scFv)，其中scFv对人表皮生长因子受体(EGFR)具有低亲和力，解离常数(K

摘要： 本发明涉及肿瘤免疫治疗领域，具体涉及一种新型兼具激活免疫共刺激信号通路和阻断免疫检查点的复制型溶瘤腺病毒AD5 sPD1CD137L及其在抗肿瘤药物中的应用。本发明公开了AD5 sPD1CD137L的设计和构建方法，成功获得了复制型溶瘤腺病毒AD5 sPD1CD137L，该病毒可以在肿瘤细胞内特异性复制，并且能够高表达分泌型融合蛋白sPD1CD137L，该融合蛋白分子能够分泌到胞外，发挥免疫共刺激和阻断免疫检查点的双重功能。实验表明，本发明的新型复制型溶瘤腺病毒具有显著的免疫共刺激和阻断免疫检查点的作用，显著激活抗肿瘤免疫反应，具有显著的抗肿瘤的活性，有极大的开发抗肿瘤药物的前景和价值。

摘要： 本发明公开了一种HVEM共刺激信号驱动的CAIX‑CAR‑T细胞及其制备方法和应用，本发明提供了一种HVEM共刺激信号驱动的CAIX‑CAR‑T细胞，并通过体外试验和体内试验验证了其对实体瘤的治疗效果，结果表明CAIX‑HVEM‑CAR‑T具有更好的治疗效果，本发明构建的HVEM共刺激信号驱动的CAIX‑CAR‑T细胞为解决CAR‑T治疗实体瘤的瓶颈提供了新的思路，在肿瘤治疗领域具有较好的临床应用前景，尤其是在实体瘤的治疗中。

摘要： 本发明涉及免疫治疗技术领域，具体涉及一种多重共刺激信号嵌合抗原受体及其用途。一种多重共刺激信号嵌合抗原受体，由信号肽、HBVSAg抗原结合结构域、胞外铰链区、跨膜区、多重胞内共刺激信号分子和胞内信号转导分子串联构成。本发明嵌合体抗原受体T细胞第一信号被激活时，第二信号CD28多重共刺激分子可以产生强烈的集群效应，杀伤肿瘤细胞。同时，这种多重激活的作用不会像注射CD28的激活型抗体一样，引发强烈T细胞免疫，造成潜在严重毒副作用；本发明的嵌合体抗原受体T细胞对HBV阳性肝癌细胞有很好的杀伤作用，具有较好的应用前景。

摘要： 本发明涉及基因工程领域。本发明提供了一种中国人共刺激信号抑制因子的基因工程制备方法。目前有关细胞毒性T细胞相关抗原4(共刺激信号负调控分子)的生物学研究及基因工程蛋白更适合外国人。本发明对中国人细胞毒性T细胞相关抗原4基因DNA密码子进行改造，采用宿主优势密码子，构建表达载体系列，适合在真核生物和原核生物中表达。经鉴定，获得了具有表达中国人共刺激信号抑制因子的蛋白分子。该基因工程蛋白分子更适合于中国人，而且能大量生产，是一种前景广阔的生物工程免疫耐受诱导剂。

摘要： 本公开涉及一种包含DAP12和共刺激信号分子信号域的嵌合受体及其使用方法。所述嵌合抗原受体包含第一融合肽和第二融合肽，其中：所述第一融合肽包含抗原结合结构域和跨膜结构域；所述第二融合肽包含跨膜结构域、胞质结构域和共刺激结构域。本公开的嵌合抗原受体不仅提高了疗效及可持续性，并且安全性更好，疗效佳。

摘要： 本发明涉及免疫治疗技术领域，具体涉及一种多重共刺激信号嵌合抗原受体及其用途。一种多重共刺激信号嵌合抗原受体，由信号肽、HBVSAg抗原结合结构域、胞外铰链区、跨膜区、多重胞内共刺激信号分子和胞内信号转导分子串联构成。本发明嵌合体抗原受体T细胞第一信号被激活时，第二信号CD28多重共刺激分子可以产生强烈的集群效应，杀伤肿瘤细胞。同时，这种多重激活的作用不会像注射CD28的激活型抗体一样，引发强烈T细胞免疫，造成潜在严重毒副作用；本发明的嵌合体抗原受体T细胞对HBV阳性肝癌细胞有很好的杀伤作用，具有较好的应用前景。

摘要： 本发明属于基因工程与生物免疫治疗技术领域，构建了一种新的嵌合抗原受体(CAR)，其共刺激信号结构域包含新的共刺激分子，即反向的Dectin‑1(RD‑1)胞内区。新构建的嵌合抗原受体与T细胞结合形成的CAR‑T能够更高水平地分泌细胞因子，具有更好的抗肿瘤活性。

摘要： 本发明公开了一种HVEM共刺激信号驱动的CAIX‑CAR‑T细胞及其制备方法和应用，本发明提供了一种HVEM共刺激信号驱动的CAIX‑CAR‑T细胞，并通过体外试验和体内试验验证了其对实体瘤的治疗效果，结果表明CAIX‑HVEM‑CAR‑T具有更好的治疗效果，本发明构建的HVEM共刺激信号驱动的CAIX‑CAR‑T细胞为解决CAR‑T治疗实体瘤的瓶颈提供了新的思路，在肿瘤治疗领域具有较好的临床应用前景，尤其是在实体瘤的治疗中。

摘要： 本发明涉及肿瘤免疫治疗领域，具体涉及一种新型兼具激活免疫共刺激信号通路和阻断免疫检查点的复制型溶瘤腺病毒AD5 sPD1CD137L及其在抗肿瘤药物中的应用。本发明公开了AD5 sPD1CD137L的设计和构建方法，成功获得了复制型溶瘤腺病毒AD5 sPD1CD137L，该病毒可以在肿瘤细胞内特异性复制，并且能够高表达分泌型融合蛋白sPD1CD137L，该融合蛋白分子能够分泌到胞外，发挥免疫共刺激和阻断免疫检查点的双重功能。实验表明，本发明的新型复制型溶瘤腺病毒具有显著的免疫共刺激和阻断免疫检查点的作用，显著激活抗肿瘤免疫反应，具有显著的抗肿瘤的活性，有极大的开发抗肿瘤药物的前景和价值。