HK-2细胞

摘要： 目的 基于肾小管上皮细胞HK-2筛选左金丸中主要生物碱类组分对肾细胞损伤.方法 采用CCK-8法和高内涵筛选技术筛选左金丸主要生物碱中潜在肾细胞损伤成分.通过细胞形态、乳酸脱氢酶和细胞色素C释放率及凋亡相关蛋白表达等进行确证,初步确定造成细胞损伤作用的生物碱,为组分中药配伍组方和配伍减毒提供体外毒理学依据.结果 采用CCK-8法和高内涵技术初步筛选,表明吴茱萸碱(EVO)能够显著降低细胞数目,升高细胞膜通透性,降低线粒体膜电位.此外,细胞形态、细胞凋亡和细胞色素C表达与高内涵筛选结果一致,Western blot实验表明EVO能够诱导细胞凋亡造成肾细胞损伤.结论 EVO可明显导致肾细胞损伤,可能是通过影响线粒体、细胞色素C及细胞膜通透性诱导细胞凋亡.

摘要： 目的探究纳米细菌(NB)损伤人肾小管上皮细胞HK-2并导致晶体滞留的机制。方法应用肾结石患者尿液培养的NB,实验分为5组:对照组(胎牛血清、1640培养液+HK-2细胞)、NB组(NB菌液、胎牛血清、1640培养液+HK-2细胞)、COM组(一水草酸钙,COM悬液、胎牛血清、1640培养液+HK-2细胞)、nHAP组(纳米级羟基磷灰石,nHAP、胎牛血清、1640培养液+HK-2细胞)和四环素干扰组(TET+NB,四环素、NB菌液、胎牛血清、1640培养液+HK-2细胞)。将HK-2细胞分别与各组作用物共培养6、12、24 h后,用光学显微镜观察HK-2细胞的形态学变化;超声粉碎细胞后检测Na^(+)-K^(+)-ATP酶和Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性;检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、过氧化氢(H_(2)O_(2))和丙二醛(MDA)含量。结果HE结果可见,nHAP组和四环素干扰组中HK-2细胞的损伤程度明显低于NB组(P<0.05)。共同培养12、24 h后,NB组和COM组Na^(+)-K^(+)-ATP酶和Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性均低于对照组,H_(2)O_(2)含量均高于对照组(P<0.05),nHAP组Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性均低于对照组(P<0.05),四环素干扰组Na^(+)-K^(+)-ATP酶和Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性均高于NB组(P<0.05)。共同培养6、12、24 h后,NB组和COM组MDA含量均高于对照组(P<0.05),四环素干扰组MDA含量均低于NB组(P<0.05);COM组LDH含量均高于对照组(P<0.05),nHAP组、四环素干扰组LDH含量均低于COM组(P<0.05)。结论HK-2细胞损伤的原因可能是NB通过诱导脂质过氧化反应造成的,NB作用时间越长,损伤程度越重。四环素在一定程度上可以阻止NB对HK-2细胞的损伤。

摘要： 目的研究NBED对铀的促排效果和HK-2细胞损伤的保护作用。方法ICR小鼠分为空白对照组、铀染毒组(0.03 mg)、DTPA-CaNa_(3)(300 mg·kg^(-1))和NBED(300、150、75 mg·kg^(-1))处理组,尾静脉注射醋酸铀酰后立即口服不同剂量促排剂,给药24 h后ICP-MS法测定肾、骨、肝、脾、肌肉中铀含量。HK-2细胞分为空白对照组、铀模型组(80μmol·L^(-1))、DTPA-CaNa_(3)(80μmol·L^(-1))和NBED(80、40、20μmol·L^(-1))处理组与铀共同作用48 h,CCK-8法检测细胞存活率,光镜下观察细胞形态,ICP-MS法检测细胞铀内吞外排比例,生化法检测SOD、GSH、LDH,流式细胞术检测ROS、细胞凋亡和周期变化。结果300 mg·kg^(-1)NBED比铀染毒组减少肾、骨内44.3%、18.8%铀含量;NBED比模型组减少了11%~42%的铀进入细胞,增加了18%~48%的铀排放量,明显提高HK-2细胞存活率、SOD、GSH水平,降低ROS和LDH表达水平以及凋亡率和S期的阻滞。DTPA-CaNa_(3)虽能明显降低小鼠肾铀含量和细胞铀内吞量,但效果明显低于NBED,且对铀致HK-2细胞急性损伤无保护作用。结论NBED是有效的铀促排剂,且优于FDA批准用药DTPA-CaNa_(3),并能降低ROS、LDH生成,增加SOD、GSH含量,降低S期的阻滞和凋亡,从而对铀致HK-2细胞的损伤产生保护作用。

摘要： 该研究探究了呕吐毒素抑制HK2细胞的增殖与诱导凋亡蛋白表达作用。不同浓度的呕吐毒素作用于HK2细胞后,采用MTT法检测呕吐毒素对细胞增殖的抑制作用,通过荧光显微镜观察细胞形态学的变化,流式细胞术检测细胞凋亡率的变化,采用Western bloting法检测凋亡蛋白Bax、bcl-2、NF-KB、Caspase-2、3、6、8、9的表达水平。研究结果表明,呕吐毒素可显著抑制HK2细胞的增殖,具有明显的量效关系,15、30、40、60和80μmol/L的呕吐毒素对HK2细胞的抑制率分别为61.82%、53.64%、42.43%、38.66%和36.54%;30μmol/L的呕吐毒素处理HK2细胞0、12、24、48、72和96 h后,细胞的存活率分别为99.84%、80.51%、60.25%、52.22%、62.50%和71.34%。15、40和80μmol/L的呕吐毒素处理细胞24 h后,细胞的凋亡率分别为2.30%、30.20%和53.50%。Western bloting结果显示呕吐毒素可上调Bax、Caspase-2、3、6、8、9蛋白表达,抑制了bcl-2和NF-KB的蛋白表达。结果表明,呕吐毒素对HK2细胞的增殖有明显的抑制作用,使得细胞发生凋亡,同时对凋亡蛋白的表达具有一定的调节作用。

摘要： 目的:通过培养纳米细菌,探究纳米细菌(nanobacteria,NB)损伤人肾小管上皮HK-2后Na^(+)/K^(+)ATP酶等指标的改变。方法:选取HK-2细胞,随机分为五组:NB组,一水草酸钙(Calcium oxalate monohydrate,COM)组,纳米级羟基磷灰石(Nanograde hydroxuapatite,nHAP)组,四环素干扰组和空白对照组,在不同组中进行培养HK-2细胞,共培养6h,12h和24h时形态学观察;先将乳酸脱氢酶(LDH)、过氧化氢(H_(2)O_(2))以及丙二醛(MDA)的含量检测完之后,再经超声粉碎机粉碎HK-2细胞,最后检测各组培养液中ATP酶(Ca^(2+)/Mg^(2+)ATP酶和Na^(+)/K^(+)ATP酶)的活性。结果:经HE可见,同空白对照组相比,NB组HK-2细胞在实验6h时,可见部分细胞胞体膨胀增大,胞核松散,核膜显示不清,刷状缘结构排列紊乱,随着时间的推移,细胞遭到严重破坏,数目减少。COM组HK-2细胞情况与NB组相似,程度略重。NB组HK-2细胞的数量明显多于nHAP组和四环素干扰组。同空白对照组相比,在6h,12h,24h测得COM组中两种ATP酶活性最低,其次为NB组。nHAP组中两种ATP酶活性明显低于NB组,NB组中的两种ATP酶活性均低于四环素干扰组(P0.05)。结论:HK-2细胞损伤的机制或许由NB诱导脂质过氧化反应造成,也可能联合Na^(+)/K^(+)ATP酶、Ca^(2+)/Mg^(2+)ATP酶活性及LDH、H_(2)O_(2)、MDA的含量来判断其是否受到纳米细菌感染;HK-2细胞被NB作用的时间越长,其HK-2细胞损伤程度越重,晶体黏附量越多;四环素或许可以缓解NB对HK-2细胞的伤害。

摘要： 目的:探讨清肾颗粒含药血清是否能通过抑制氧化应激介导的NF-κB信号通路的活化,从而减轻高糖诱导的HK-2细胞转分化。方法:使用高效液相色谱法分析清肾颗粒中的活性成分。选用同代HK-2细胞随机分为7组,包括空白对照组,渗透压对照组,高糖组,低、中、高剂量清肾颗粒组,以及吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC)组。采用倒置相差显微镜观察细胞形态学改变;MTT法测定各组细胞活性;流式细胞术检测HK-2细胞中活性氧(ROS)含量,ELISA法检测丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;电泳迁移率变动分析(EMSA)检测HK-2细胞中NF-κB p65的DNA结合活性变化;Western blot法检测HK-2细胞中NF-κB p65、p-IκBα、IKKα、MCP-1和ICAM-1的蛋白水平;免疫荧光法检测HK-2细胞中NF-κB p65和α-SMA的蛋白表达情况。结果:通过高效液相色谱法初步明确清肾颗粒中含有绿原酸、盐酸小檗碱、大车前苷、滨蒿内酯、6,7-二甲氧基香豆素、表小檗碱、黄连碱、丹酚酸B、巴马汀、益母草碱、大黄酸和丹参酮IIA。高糖诱导的HK-2细胞与空白对照组比较ROS和MDA水平显著升高(P<0.05),SOD活性显著降低(P<0.05),NF-κB p65、p-IκBα、IKKα、MCP-1、ICAM-1和α-SMA蛋白水平显著升高(P<0.05)。清肾颗粒含药血清干预后高糖诱导的HK-2细胞中ROS和MDA水平显著下降(P<0.05),SOD活性显著升高(P<0.05),NF-κB p65、p-IκBα、IKKα、MCP-1、ICAM-1和α-SMA蛋白水平显著降低(P<0.05)。结论:清肾颗粒含药血清能通过抑制氧化应激介导的NF-κB信号通道的活化,减轻高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化。

摘要： 目的探讨内质网应激抑制剂4-苯基丁酸(4-Phenylbutyric acid,4-PBA)对碘普罗胺引起的人近端肾小管上皮细胞(HK-2细胞)损伤的保护作用及其可能机制。方法实验分为对照组、碘普罗胺组、碘普罗胺+不同浓度4-PBA处理组(分别加入1、2.5、5 mmol/L 4-PBA处理细胞)。采用CCK-8法检测各组细胞细胞活力,用DCFH-DA染色显微镜下观察并用流式细胞仪检测各组细胞活性氧(Reactive oxygen species,ROS)水平,DAPI染色和罗丹明123(Rhodamine,Rh123)染色分别检测细胞核形态和线粒体膜电位(ΔΨm),Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase-3、Bax、Bcl-2表达以及内质网应激相关蛋白CHOP、GRP78、p-JNK、JNK、p-eIF-2α、eIF-2α、p-IRE1α表达。结果与对照组相比,碘普罗胺组细胞存活率及ΔΨm明显降低,ROS水平,凋亡细胞数,Bax/Bcl-2、p-JNK/JNK及p-eIF-2α/eIF-2α比值,Cleaved-Caspase-3、CHOP、GRP78、p-IRE1α蛋白表达明显增高,而加入不同浓度的4-PBA处理后,可部分逆转上述效应,提高细胞存活率及ΔΨm,下调细胞ROS水平,减少细胞凋亡数,降低凋亡相关蛋白以及内质网应激相关蛋白的表达水平。结论4-PBA可通过抑制内质网应激减轻碘普罗胺引起的肾小管上皮细胞损伤。

摘要： 目的体外观察五味子乙素(SchB)对高糖诱导肾小管上皮细胞(HK-2)的影响,并探讨其可能的作用机制。方法将体外培养的HK-2细胞随机分为对照组、对照加药组、高糖组,高糖加药组,对照组以DMEM/F12(葡萄糖浓度为5 mmol/L)培养基培养48 h,对照加药组先用SchB预孵育6 h后再用DMEM/F12(葡萄糖浓度为5 mmol/L)培养基培养48 h,高糖组以DMEM/F12(葡萄糖浓度为30 mmol/L)培养基培养48 h,高糖加药组先用SchB预孵育6 h后再用DMEM/F12(葡萄糖浓度为30 mmol/L)培养基培养48 h。CCK8试剂盒检测各组HK-2细胞的活性,DCFH-DA荧光定量法检测HK-2细胞的活性氧(Reactive oxygen species,ROS)水平,Western blot检测HK-2细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3和氧化应激相关蛋白Nrf2、HO-1的表达量。结果CCK8结果显示,与对照组比较,高糖组与高糖加药组细胞活性均明显下降,差异有统计学意义(P0.05)。DCFH-DA染色结果显示,与对照组比较,高糖组与高糖加药组ROS生成明显增多,差异有统计学意义(P0.05)。Western blot结果显示,与对照组比较,高糖组与高糖加药组Bcl-2/Bax比值、Nrf2、HO-1表达下降,Caspase-3表达上升,差异有统计学意义(P0.05)。结论SchB对高糖诱导HK-2细胞的凋亡和氧化应激有一定的保护作用,其机制可能与调节凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3与调控抗氧化通路Nrf2/HO-1,减少ROS生成有关。

摘要： 目的探究脂质过氧化反应在纳米细菌(NB)损伤HK-2细胞过程中的作用。方法将NB组(NB菌液、胎牛血清、1640培养液+HK-2细胞)、四环素干扰组(四环素、NB菌液、胎牛血清、1640培养液+HK-2细胞)和空白对照组(胎牛血清、1640培养液+HK-2细胞)分别培养6、12、24 h,观察HK-2细胞的形态学变化。用超声粉碎HK-2细胞后检测Na^(+)/K^(+)ATP酶和Ca^(2+)/Mg^(2+)ATP酶活性,并检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、过氧化氢(H_(2)O_(2))和丙二醛(MDA)的含量。结果HE结果可见,四环素干扰组中HK-2细胞的损伤程度明显低于NB组,干扰组细胞在共培养12、24 h时酶活性高于NB组(P<0.05)。在共培养12、24 h时,NB组培养液中H_(2)O_(2)和MDA的含量显著高于对照组(P<0.05),干扰组显著低于NB组(P<0.05)。结论NB损伤人肾小管上皮细胞HK-2的过程中,引起脂质过氧化反应,并且脂质过氧化反应的程度与人肾小管上皮细胞HK-2损伤程度成正相关。

摘要： 目的考察刺苋根不同部位提取物在体外对草酸钙致人肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的保护作用。方法以氯化钙和草酸钠损伤HK-2细胞模型体外筛选,以CCK-8法检测刺苋根不同部位提取物对草酸钙致HK-2细胞损伤的保护作用,并通过HE染色,观察HK-2细胞形态。结果刺苋根不同部位提取物可不同程度提高草酸钙损伤后细胞的存活率,2、1、0.5、0.25 mg·mL^(-1)醇提取液组细胞存活率分别为(105.80±0.08)%、(111.79±0.01)%、(121.43±0.20)%、(128.92±0.00)%;0.5、0.25 mg·mL^(-1)石油醚提取液组细胞存活率分别为(112.72±0.45)%、(99.94±0.28)%;1、0.5、0.25 mg·mL^(-1)乙酸乙酯提取液组细胞存活率分别为(14.04±0.03)%、(111.24±0.08)%、(121.37±0.03)%;1、0.5、0.25 mg·mL^(-1)正丁醇提取液组细胞存活率分别为(103.14±0.14)%、(145.16±0.29)%、(128.45±0.08)%,与模型对照组比较,细胞存活率提高,差异均具有统计学意义。结论刺苋根各不同部位提取物对氯化钙和草酸钠导致的HK-2细胞损伤都有明显的保护作用。

摘要： 本研究在人肾小管上皮细胞系HK-2缺氧/复氧模型上,研究过表达(MR-1 重组腺病毒感染)和沉默(RNAi)了肌纤生成调节因子1(myofibrillogenesis regulator 1,MR-1)对于HK-2缺氧/复氧所致细胞凋亡率、存活率和活力的影响,以细胞荧光染色法和免疫印迹法检测HK-2缺氧/复氧所致微丝骨架F-actin的排布的变化.

摘要： 本研究在人肾小管上皮细胞系HK-2缺氧/复氧模型上,研究过表达(MR-1 重组腺病毒感染)和沉默(RNAi)了肌纤生成调节因子1(myofibrillogenesis regulator 1,MR-1)对于HK-2缺氧/复氧所致细胞凋亡率、存活率和活力的影响,以细胞荧光染色法和免疫印迹法检测HK-2缺氧/复氧所致微丝骨架F-actin的排布的变化.

摘要： 本研究在人肾小管上皮细胞系HK-2缺氧/复氧模型上,研究过表达(MR-1 重组腺病毒感染)和沉默(RNAi)了肌纤生成调节因子1(myofibrillogenesis regulator 1,MR-1)对于HK-2缺氧/复氧所致细胞凋亡率、存活率和活力的影响,以细胞荧光染色法和免疫印迹法检测HK-2缺氧/复氧所致微丝骨架F-actin的排布的变化.

摘要： 本研究在人肾小管上皮细胞系HK-2缺氧/复氧模型上,研究过表达(MR-1 重组腺病毒感染)和沉默(RNAi)了肌纤生成调节因子1(myofibrillogenesis regulator 1,MR-1)对于HK-2缺氧/复氧所致细胞凋亡率、存活率和活力的影响,以细胞荧光染色法和免疫印迹法检测HK-2缺氧/复氧所致微丝骨架F-actin的排布的变化.

摘要： 本研究在人肾小管上皮细胞系HK-2缺氧/复氧模型上,研究过表达(MR-1 重组腺病毒感染)和沉默(RNAi)了肌纤生成调节因子1(myofibrillogenesis regulator 1,MR-1)对于HK-2缺氧/复氧所致细胞凋亡率、存活率和活力的影响,以细胞荧光染色法和免疫印迹法检测HK-2缺氧/复氧所致微丝骨架F-actin的排布的变化.

摘要： 肾疏宁是经过药物的筛选和优化而制定的以疏利少阳为主，兼“和”、“补”、“清”、“消”为一体的纯中药复方制剂。本文结合有关药理学文献报道，选用“和”、“补”的代表方药黄芩、黄芪两种中药材的代表性单体物质：黄芩苷、黄芪甲苷，分别观察其对LX-2与HK-2细胞共培养体系中HK-2表型转化的影响及可能通路。

摘要： 肾疏宁是经过药物的筛选和优化而制定的以疏利少阳为主，兼“和”、“补”、“清”、“消”为一体的纯中药复方制剂。本文结合有关药理学文献报道，选用“和”、“补”的代表方药黄芩、黄芪两种中药材的代表性单体物质：黄芩苷、黄芪甲苷，分别观察其对LX-2与HK-2细胞共培养体系中HK-2表型转化的影响及可能通路。

摘要： 肾疏宁是经过药物的筛选和优化而制定的以疏利少阳为主，兼“和”、“补”、“清”、“消”为一体的纯中药复方制剂。本文结合有关药理学文献报道，选用“和”、“补”的代表方药黄芩、黄芪两种中药材的代表性单体物质：黄芩苷、黄芪甲苷，分别观察其对LX-2与HK-2细胞共培养体系中HK-2表型转化的影响及可能通路。

摘要： 肾疏宁是经过药物的筛选和优化而制定的以疏利少阳为主，兼“和”、“补”、“清”、“消”为一体的纯中药复方制剂。本文结合有关药理学文献报道，选用“和”、“补”的代表方药黄芩、黄芪两种中药材的代表性单体物质：黄芩苷、黄芪甲苷，分别观察其对LX-2与HK-2细胞共培养体系中HK-2表型转化的影响及可能通路。

摘要： 肾疏宁是经过药物的筛选和优化而制定的以疏利少阳为主，兼“和”、“补”、“清”、“消”为一体的纯中药复方制剂。本文结合有关药理学文献报道，选用“和”、“补”的代表方药黄芩、黄芪两种中药材的代表性单体物质：黄芩苷、黄芪甲苷，分别观察其对LX-2与HK-2细胞共培养体系中HK-2表型转化的影响及可能通路。

摘要： 本发明公开了一种HK2低表达的乳腺癌细胞系及其使用的siRNA。siRNA为寡聚核酸siRNA1；寡聚核酸siRNA1由SEQ ID NO：1所示的单链RNA分子和SEQ ID NO：2所示的单链RNA分子组成；寡聚核酸siRNA1的3’端为2个dT修饰。实验证明，寡聚核酸siRNA1可抑制乳腺癌肿瘤的生长、抑制乳腺癌细胞的增殖、降低乳腺癌细胞侵袭能力、降低乳腺癌细胞糖酵解能力和构建HK2低表达的乳腺癌细胞模型。本发明具有重要的应用价值。

摘要： 本发明公开了一种瞬时识别药物诱导HK‑2细胞损伤的阵列传感器的制备方法及其应用，其制备方法包括：将盐酸多巴胺和聚乙烯亚胺加入缓冲液中，混匀搅拌，过滤透析得到猝灭效应优良的聚多巴胺‑聚乙烯亚胺共聚物载体；其可通过静电作用吸附三种不同发射波长的QDs并猝灭其荧光，形成多通道传感器。不同肾毒性药物作用于细胞，细胞膜表面物质改变，诱导传感器QDs游离，形成特征荧光指纹图谱，借助多元统计方法，快速识别药物损伤机制。基于药物损伤的时‑效关系，检测不同时间的荧光信号，绘制动态荧光指纹，进一步实现药物诱导肾细胞损伤的精准分型。该传感器为快速探究药物的肾毒性机制提供一种新工具和新方法。

摘要： 本发明公开了一种建立大肠癌HK2报告基因细胞系的方法，具体为：先设计HK2基因位点特异性sgRNA序列，克隆进质粒PX459；整合HK2基因同源重组序列以及绿色荧光蛋白DNA片段(EGFP)，将上述质粒和整合片段共同电击转化大肠癌细胞系HCT116；通过流式细胞仪单细胞筛选EGFP表达的细胞，并扩增单克隆细胞系；筛选的EGFP表达细胞系通过PCR鉴定及免疫印迹验证阳性HK2报告基因细胞系。该大肠癌细胞系HK2基因和EGFP共同表达，其EGFP表达水平和HK2基因具有高度一致性，故通过检测EGFP表达水平变化可以准确判断HK2基因表达水平。本发明建立细胞系方法简单、易行、高效和精准定位基因位点。

摘要： 本发明公开了一种基于MIM成型的HK30材料的制备方法，包括以下步骤：(1)将HK30不锈钢粉末与钛粉混合均匀得到HK30‑Ti复合粉；(2)将步骤(1)中得到的HK30‑Ti复合粉与粘结剂混合后进行混炼，再制粒得到粒状喂料；(3)将步骤(2)中得到的粒状喂料在注射成形机上注射得到注射生坯；(4)将步骤(3)中得到的注射生坯进行脱脂与真空烧结，即得到HK30材料。本发明还提供一种利用上述HK30材料制备而成的HK30叶片。本发明通过在HK30不锈钢粉末添加Ti，有效提高了烧结温度，进而提升了高温力学性能。

摘要： 本发明公开了一种HK2低表达的乳腺癌细胞系及其使用的siRNA。siRNA为寡聚核酸siRNA1；寡聚核酸siRNA1由SEQ ID NO：1所示的单链RNA分子和SEQ ID NO：2所示的单链RNA分子组成；寡聚核酸siRNA1的3’端为2个dT修饰。实验证明，寡聚核酸siRNA1可抑制乳腺癌肿瘤的生长、抑制乳腺癌细胞的增殖、降低乳腺癌细胞侵袭能力、降低乳腺癌细胞糖酵解能力和构建HK2低表达的乳腺癌细胞模型。本发明具有重要的应用价值。

摘要： 本发明公开的属于糖尿病肾病治疗技术领域，具体为BMSC‑Exo对高糖诱导HK2细胞损伤保护机制的研究方法，该BMSC‑Exo对高糖诱导HK2细胞损伤的保护机制的实验步骤包括HK2细胞的分组与处理、Crispr/Cas9技术构建miR‑886‑5p敲除的HK2细胞系、RNA pull down技术、FISH实验、DN的建立和PAS糖原染色，通过生物信息学预测结合荧光素酶报告载体实验证明miR‑886‑5p与靶基因相互作用，通过RNA pull down实验和FISH实验进一步证明miR‑886‑5p与靶基因结合的关系，通过Rescue实验证明靶基因能够逆转miR‑886‑5p的功能，确认miR‑886‑5p在HK2细胞中发挥作用的机制。

摘要： 本发明公开了一种瞬时识别药物诱导HK‑2细胞损伤的阵列传感器的制备方法及其应用，其制备方法包括：将盐酸多巴胺和聚乙烯亚胺加入缓冲液中，混匀搅拌，过滤透析得到猝灭效应优良的聚多巴胺‑聚乙烯亚胺共聚物载体；其可通过静电作用吸附三种不同发射波长的QDs并猝灭其荧光，形成多通道传感器。不同肾毒性药物作用于细胞，细胞膜表面物质改变，诱导传感器QDs游离，形成特征荧光指纹图谱，借助多元统计方法，快速识别药物损伤机制。基于药物损伤的时‑效关系，检测不同时间的荧光信号，绘制动态荧光指纹，进一步实现药物诱导肾细胞损伤的精准分型。该传感器为快速探究药物的肾毒性机制提供一种新工具和新方法。

摘要： 本发明公开了一种建立大肠癌HK2报告基因细胞系的方法，具体为：先设计HK2基因位点特异性sgRNA序列，克隆进质粒PX459；整合HK2基因同源重组序列以及绿色荧光蛋白DNA片段(EGFP)，将上述质粒和整合片段共同电击转化大肠癌细胞系HCT116；通过流式细胞仪单细胞筛选EGFP表达的细胞，并扩增单克隆细胞系；筛选的EGFP表达细胞系通过PCR鉴定及免疫印迹验证阳性HK2报告基因细胞系。该大肠癌细胞系HK2基因和EGFP共同表达，其EGFP表达水平和HK2基因具有高度一致性，故通过检测EGFP表达水平变化可以准确判断HK2基因表达水平。本发明建立细胞系方法简单、易行、高效和精准定位基因位点。

摘要： 本发明涉及药物领域，具体而言，涉及一种组合物及其在保护被一水草酸钙损伤的HK‑2细胞中的应用。组合物主要包括按质量百分数计的以下组分：5‑11％维采宁‑1、8‑15％维采宁‑2、8‑15％维采宁‑3、15‑60％夏佛塔苷、23‑45％异夏佛塔苷。本发明实施例提供的组合物经过五个化合物的协同协作，保护被一水草酸钙损伤的HK‑2细胞，进一步能够用于制备治疗肾结石的药物。组合物可与HK‑2细胞上的特异位点结合，是发挥药效的有效成分。

摘要： 本发明公开了一种基于MIM成型的HK30材料的制备方法，包括以下步骤：(1)将HK30不锈钢粉末与钛粉混合均匀得到HK30‑Ti复合粉；(2)将步骤(1)中得到的HK30‑Ti复合粉与粘结剂混合后进行混炼，再制粒得到粒状喂料；(3)将步骤(2)中得到的粒状喂料在注射成形机上注射得到注射生坯；(4)将步骤(3)中得到的注射生坯进行脱脂与真空烧结，即得到HK30材料。本发明还提供一种利用上述HK30材料制备而成的HK30叶片。本发明通过在HK30不锈钢粉末添加Ti，有效提高了烧结温度，进而提升了高温力学性能。