纳米细菌

摘要： 目的探究纳米细菌(NB)损伤人肾小管上皮细胞HK-2并导致晶体滞留的机制。方法应用肾结石患者尿液培养的NB,实验分为5组:对照组(胎牛血清、1640培养液+HK-2细胞)、NB组(NB菌液、胎牛血清、1640培养液+HK-2细胞)、COM组(一水草酸钙,COM悬液、胎牛血清、1640培养液+HK-2细胞)、nHAP组(纳米级羟基磷灰石,nHAP、胎牛血清、1640培养液+HK-2细胞)和四环素干扰组(TET+NB,四环素、NB菌液、胎牛血清、1640培养液+HK-2细胞)。将HK-2细胞分别与各组作用物共培养6、12、24 h后,用光学显微镜观察HK-2细胞的形态学变化;超声粉碎细胞后检测Na^(+)-K^(+)-ATP酶和Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性;检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、过氧化氢(H_(2)O_(2))和丙二醛(MDA)含量。结果HE结果可见,nHAP组和四环素干扰组中HK-2细胞的损伤程度明显低于NB组(P<0.05)。共同培养12、24 h后,NB组和COM组Na^(+)-K^(+)-ATP酶和Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性均低于对照组,H_(2)O_(2)含量均高于对照组(P<0.05),nHAP组Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性均低于对照组(P<0.05),四环素干扰组Na^(+)-K^(+)-ATP酶和Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性均高于NB组(P<0.05)。共同培养6、12、24 h后,NB组和COM组MDA含量均高于对照组(P<0.05),四环素干扰组MDA含量均低于NB组(P<0.05);COM组LDH含量均高于对照组(P<0.05),nHAP组、四环素干扰组LDH含量均低于COM组(P<0.05)。结论HK-2细胞损伤的原因可能是NB通过诱导脂质过氧化反应造成的,NB作用时间越长,损伤程度越重。四环素在一定程度上可以阻止NB对HK-2细胞的损伤。

摘要： 目的通过观察Claudin-14在两种实验性大鼠肾结石模型中表达的差异,探究纳米细菌在结石形成过程中的作用。方法选取90只Wistar雄性大鼠,随机分为纳米细菌组(NB组,大鼠尾静脉注射NB+生理盐水灌胃)、乙二醇组(EG组,大鼠1%乙二醇饮水和2%氯化铵AC 2 ml灌胃2周)、空白对照组(NC组,大鼠尾静脉注射生理盐水+生理盐水灌胃),人工采集大鼠血、尿进行钙浓度检测,取大鼠肾脏组织行结石成分分析及免疫组化检测Claudin-14改变。结果NB组、EG组含草酸钙结石分别占总结石数的61.54%、78.95%;NB组与EG组1~10周内血钙、尿钙含量分别比较,差异无统计学意义(P>0.05);EG组第3周后Claudin-14蛋白的表达显著增强,NB组第4周后Claudin-14蛋白的表达开始增强,EG组Claudin-14蛋白的表达显著强于NB组,但NC组Claudin-14蛋白的表达未见明显改变。结论纳米细菌是形成结石的原因之一,草酸钙结晶的形成不仅有纳米细菌的参与,同时Claudin-14所参与的细胞通路也起到了相应的作用,导致尿钙升高,最终形成结石。

摘要： 目的:通过培养纳米细菌,探究纳米细菌(nanobacteria,NB)损伤人肾小管上皮HK-2后Na^(+)/K^(+)ATP酶等指标的改变。方法:选取HK-2细胞,随机分为五组:NB组,一水草酸钙(Calcium oxalate monohydrate,COM)组,纳米级羟基磷灰石(Nanograde hydroxuapatite,nHAP)组,四环素干扰组和空白对照组,在不同组中进行培养HK-2细胞,共培养6h,12h和24h时形态学观察;先将乳酸脱氢酶(LDH)、过氧化氢(H_(2)O_(2))以及丙二醛(MDA)的含量检测完之后,再经超声粉碎机粉碎HK-2细胞,最后检测各组培养液中ATP酶(Ca^(2+)/Mg^(2+)ATP酶和Na^(+)/K^(+)ATP酶)的活性。结果:经HE可见,同空白对照组相比,NB组HK-2细胞在实验6h时,可见部分细胞胞体膨胀增大,胞核松散,核膜显示不清,刷状缘结构排列紊乱,随着时间的推移,细胞遭到严重破坏,数目减少。COM组HK-2细胞情况与NB组相似,程度略重。NB组HK-2细胞的数量明显多于nHAP组和四环素干扰组。同空白对照组相比,在6h,12h,24h测得COM组中两种ATP酶活性最低,其次为NB组。nHAP组中两种ATP酶活性明显低于NB组,NB组中的两种ATP酶活性均低于四环素干扰组(P0.05)。结论:HK-2细胞损伤的机制或许由NB诱导脂质过氧化反应造成,也可能联合Na^(+)/K^(+)ATP酶、Ca^(2+)/Mg^(2+)ATP酶活性及LDH、H_(2)O_(2)、MDA的含量来判断其是否受到纳米细菌感染;HK-2细胞被NB作用的时间越长,其HK-2细胞损伤程度越重,晶体黏附量越多;四环素或许可以缓解NB对HK-2细胞的伤害。

摘要： 目的:探究在纳米细菌所致肾结石的形成过程中骨桥蛋白(OPN)和Tamm-Horsfall蛋白(THP)的表达及相关性分析。方法:随机选取Wistar雄性大鼠90只,随机分成三组,对照组(NC组,大鼠尾静脉注射生理盐水1.2 ml+生理盐水2 ml灌胃)、纳米细菌组(NB组,大鼠尾静脉注射纳米细菌悬液1.2 ml+生理盐水2 ml灌胃)和抗纳米细菌组(NBT组,大鼠尾静脉注射纳米细菌悬液1.2 ml+四环素溶液2 ml灌胃),每周每组随机抽取3只大鼠,采集肾脏等标本后处死,共计10周。运用Western印迹法检测大鼠肾脏组织中OPN、THP的表达量,并分析结果。结果:Western印迹检测各组大鼠肾脏组织中OPN、THP表达量,以第8周为例,结果显示:NB组分泌量最低,NC组居中,NBT组最高,三组之间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,OPN与THP呈正相关(r=0.951,P<0.01)。结论:纳米细菌在导致肾结石的形成过程中起到重要作用,可能是通过诱发肾脏慢性炎性反应,进而引起相关蛋白OPN、THP表达下降,最终导致肾结石的发生。

摘要： 目的探究脂质过氧化反应在纳米细菌(NB)损伤HK-2细胞过程中的作用。方法将NB组(NB菌液、胎牛血清、1640培养液+HK-2细胞)、四环素干扰组(四环素、NB菌液、胎牛血清、1640培养液+HK-2细胞)和空白对照组(胎牛血清、1640培养液+HK-2细胞)分别培养6、12、24 h,观察HK-2细胞的形态学变化。用超声粉碎HK-2细胞后检测Na^(+)/K^(+)ATP酶和Ca^(2+)/Mg^(2+)ATP酶活性,并检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、过氧化氢(H_(2)O_(2))和丙二醛(MDA)的含量。结果HE结果可见,四环素干扰组中HK-2细胞的损伤程度明显低于NB组,干扰组细胞在共培养12、24 h时酶活性高于NB组(P<0.05)。在共培养12、24 h时,NB组培养液中H_(2)O_(2)和MDA的含量显著高于对照组(P<0.05),干扰组显著低于NB组(P<0.05)。结论NB损伤人肾小管上皮细胞HK-2的过程中,引起脂质过氧化反应,并且脂质过氧化反应的程度与人肾小管上皮细胞HK-2损伤程度成正相关。

摘要： 目的探讨乌梅提取物对纳米细菌致肾结石大鼠Tamm-Horsfall(THP)蛋白表达的影响<方法将45只SD雄性大鼠随机分为空白组、对照组和实验组各15只。对照组和实验组尾静脉注射纳米细菌混悬液1 mL制备大鼠肾结石模型,对照组大鼠M静脉注射等量生理盐水。实验大鼠于第2天灌胃1 mL乌梅提取物进行干预,空白组和对照组灌胃等量生理盐水连续干预4周后,用代谢笼收集24 h尿液。检测尿液PH、Ca^2+、柠檬酸(CA)和草酸(Oxa)的含量;采用ELISA试剂盒测定尿液中THP蛋白表达量;取肾脏组织HE染色,观察组织的病理变化以及肾组织中的钙盐结晶形态和结晶量,并进行钙盐结晶量化评分。结果与空白组相比,对照组肾脏组织中钙盐结晶积分显著升高(P<0.05),尿液中pH值和CA水平显著下降(P<0.05),Ca^2+、0xa水平和THP表达升高(P<0.05);与对照组相比,实验组肾脏组织中钙盐结晶积分显著下降(P<0.05),尿液中pH值和CA水平显著升高(P<0.05),Ca^2+、0xa水平和THP表达下降(P<0.05),HE染色显示肾小管内可见晶体沉积减少。结论巧梅提取物通过降低纳米细菌致肾结石大鼠THP蛋白表达和自身聚合,抑制肾脏组织中草酸钙结晶的形成。

摘要： 目的 探讨乌梅提取物对纳米细菌致肾结石大鼠Tamm-Horsfall(THP)蛋白表达的影响.方法 将45只SD雄性大鼠随机分为空白组、对照组和实验组各15只.对照组和实验组尾静脉注射纳米细菌混悬液1 mL制备大鼠肾结石模型,对照组大鼠尾静脉注射等量生理盐水.实验大鼠于第2天灌胃1 mL乌梅提取物进行干预,空白组和对照组灌胃等量生理盐水.连续干预4周后,用代谢笼收集24 h尿液.检测尿液pH、Ca2+、柠檬酸(CA)和草酸(Oxa)的含量;采用ELISA试剂盒测定尿液中THP蛋白表达量;取肾脏组织HE染色,观察组织的病理变化以及肾组织中的钙盐结晶形态和结晶量,并进行钙盐结晶量化评分.结果 与空白组相比,对照组肾脏组织中钙盐结晶积分显著升高(P＜0.05),尿液中pH值和CA水平显著下降(P＜0.05),Ca2+、Oxa水平和THP表达升高(P＜0.05);与对照组相比,实验组肾脏组织中钙盐结晶积分显著下降(P＜0.05),尿液中pH值和CA水平显著升高(P＜0.05),Ca2+、Oxa水平和THP表达下降(P＜0.05),HE染色显示肾小管内可见晶体沉积减少.结论 乌梅提取物通过降低纳米细菌致肾结石大鼠THP蛋白表达和自身聚合,抑制肾脏组织中草酸钙结晶的形成.

摘要： 目的 探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对纳米细菌致大鼠肾结石形成的影响.方法 将45只健康SD雄性大鼠预饲养后随机分为A、B、C 3组.B组和C组尾静脉注射纳米细菌混悬液1 mL制备大鼠肾结石模型,A组大鼠尾静脉注射等量生理盐水.C组于第2日腹腔注射NAC[150 mg/(kg·d)]进行干预,同时A组和B组腹腔注射等量生理盐水,每天1次,连续干预4周后收集24 h尿液.检测尿液Ca2+、草酸钙(Oxa)的含量;处死大鼠取左肾制成10％ 匀浆检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平;取右肾行HE染色,观察组织的病理变化并进行钙盐结晶量化评分.结果 与A组相比,B组肾脏组织中钙盐结晶积分较高,尿Ca2+、Oxa及肾组织中MDA水平较高,而肾组织SOD水平较低(P<0.05),HE染色显示肾小管内可见大量结晶形成;与B组相比,C组肾脏组织中钙盐结晶积分较低,尿Ca2+、Oxa及肾组织中MDA水平均较低,肾组织SOD水平较高(P<0.05),HE染色显示肾小管内晶体沉积减少.结论 NAC可能通过减轻氧化应激,抑制肾脏组织中钙盐结晶的形成.

摘要： 目的探讨肝病患者聚合酶链反应法(PCR)检测血中纳米细菌的临床价值。方法此研究对象为2018年1月至2019年4月入住我院并接受治疗的110例肝病患者和40名同时间段接受健康体检的人员,对其血中纳米细菌分别进行ELASA法及PCR检测,对2种检查方式的结果进行对比。结果经ELASA法检测,有90例患者呈现阳性,60例呈现阴性。PCR技术检测,有110例患者呈现阳性,40例呈现阴性。两种方法检测结果显示,肝病患者纳米细菌的总感染率明显高于健康人(P<0.05);二者检测方法对结果无明显差异。而在检测敏感度与特异度方面,PCR技术敏感度明显高于ELASA法,ELASA法特异度明显高于PCR技术。结论在肝病患者中采用聚合酶链反应法检测纳米细菌,可提高检测结果的敏感度,更好的对临床患者进行筛查,提高临床诊断率。

摘要： 目的：研究肝病患者血浆内毒素升高与纳米细菌(NB)感染的关系，从而对慢性肝病和原发性肝癌的发生发展提供新的认识，以利更好地预防和治疗肝病。rn 方法：采用抗纳米细菌抗体8D10免疫组化染色，检测68例慢性乙型肝炎(CHB)、54例慢性重型乙型肝炎(CSHB)、66例肝硬化(CL)和23例肝癌(HCC)患者血浆中的纳米细菌，同时检测血浆内毒素含量，并与40例健康人群检测结果比较。rn 结果：慢性乙型肝炎、慢性重型乙型肝炎、肝硬化、肝癌病人和健康人血浆纳米细菌免疫组化检测阳性率分别为23.91％、36.84％、38.89％、26.09％和7.50％，各类肝病NB感染率高于健康人(P<0.05)。培养物透射电镜观察发现纳米细菌样微生物结构。内毒素阳性率分别为64.00％、71.74％、80.33％、80.95％和0.00％，肝病阳性率亦高于健康人(P<0.05)。慢性肝病患者纳米细菌阳性组内毒素阳性率为93.33％，NB阴性组为54.72％，两者比较，P<0.005，阳性率差异有统计学意义。肝硬化和慢性重型肝炎患者血浆中NB阳性组与阴性组内毒素阳性率分别为91.67％和50.00％，P<0.005，阳性率差异亦有统计学意义。NB免疫组化阳性组的内毒素定量值为(2316.61±3761.81)pg/ml，阴性的内毒素平均值为(494.56±1729.46)pg/ml，两者比较，P=0.034，结果差异有统计学意义。rn 结论：肝病患者血浆内毒素升高与纳米细菌感染有关。纳米细菌在慢性肝病发生发展中有重要作用。

摘要： 纳米细菌(nanobacteria，NB)是芬兰科学家kajader 发现并命名的新菌种，其直径50～500nm。他的发现弥补了细菌和病毒之间微生物研究的匮乏。由于NB具有体积微小、细胞毒性，具备矿化能力，广泛存在于人和哺乳动物体内的特点，在温泉碳酸盐和火星陨石中发现纳米细菌矿化石.因而引起人类广泛关注.现已发现纳米细菌与多种疾病，尤其是组织器官硬化和结石的形成有密切关系，所以对其检测有十分重要意义。基于此，论述了纳米细菌及其检测方法研究进展状况。

摘要： 本发明涉及一种细菌外膜囊泡、包含该细菌外膜囊泡的纳米疫苗及其制备方法和应用。所述细菌外膜囊泡含有分子胶水蛋白SpyCatcher和/或SnoopCatcher，所述肿瘤疫苗包括所述细菌外膜囊泡以及和所述细菌外膜囊泡以异肽键形式连接的抗原，所述抗原携带SpyTag和/或SnoopTag。本发明通过将含有分子胶水蛋白SpyCatcher和SnoopCatcher的细菌外膜囊泡作为肿瘤疫苗平台，与携带有SpyTag和/或SnoopTag的抗原进行连接即得到肿瘤疫苗，该肿瘤疫苗可以有效激活机体产生固有免疫的同时，实现对多种抗原的特异性杀伤。依照此方法，可以快速获得针对不同来源肿瘤的个性化肿瘤疫苗。

摘要： 本发明公开了一种低细菌粘附、可再生的高强度纳米复合水凝胶制备方法，包括以下步骤：1)聚合反应：将自由基引发剂加入到纳米粒子中，混合得到表面接枝引发剂的纳米粒子，再加入刺激响应型单体进行反应，得到表面接枝响应型聚合物刷的纳米粒子；2)UV交联：将表面接枝响应型聚合物刷的纳米粒子分散于溶剂中，再加入亲水性单体、引发剂和交联剂，混合后进行UV辐射交联，得到一种低细菌粘附、可再生的高强度纳米复合水凝胶。本发明方法制备过程简单高效，得到的纳米复合水凝胶细菌粘附量低、可释放细菌并表面功能再生，并赋予了材料优异的力学性能，为功能材料的制备提供了新思路。

摘要： 本发明涉及通过分析包含在纳米囊泡中的基因来预测包含源自细菌的纳米尺寸细胞外囊泡(即纳米囊泡)的临床样品中严重细菌感染性疾病的致病因子(细菌)的方法。根据本发明，可以提供关于严重细菌感染的细菌的信息，可以预测细菌感染的致病因子，并且可以预测细菌对抗生素的耐药性。

摘要： 本发明公开了一种细菌靶向纳米粒子的制备及其抑杀细菌的应用。该细菌靶向纳米粒子通过结构如式(Ⅰ)所示的带有靶向片段的两亲性聚合物进行自组装制备得到。本发明通过使用光敏剂和甲基丙烯酸二甲氨基乙酯制备聚(N,N‑二甲基氨乙基甲基丙烯酸酯)‑共聚‑聚光敏剂，再以此为大分子链转移剂和甲基丙烯酸正丁酯为疏水单元进行第二嵌段的聚合，并可将其羧基活化与细菌靶向肽连接，通过自组装形成在水中可溶的纳米粒子。得到的纳米粒子可以通过细菌靶向肽选择性的与细菌结合，提高材料的安全性；光动力和物理作用联合抗菌方式提高材料的抗菌活性，同时还不易使细菌产生耐药性，可广泛的应用于抑菌、杀菌领域。

摘要： 本发明提供一种利用自组装的金纳米壳层包覆细菌并借助激光产生光热分解与冷光来杀死与追踪细菌的方法，可以杀死革兰式阳性、阴性与抗药性细菌。本发明不用加任何还原剂即可在细菌表面自行组装产生一层金纳米壳层，由于金有非常好的光热转换效率，故可利用线性连续式与非线性飞秒式激光照射此细菌金纳米材料来产生热并有效率的杀死细菌，亦即光热分解效应；并利用非线性飞秒式激光照射时，此细菌金纳米材料不仅会产生热能，同时具有产生冷光的光学特质，杀死的细菌越多，产生的冷光越强，且可持续放光不会产生光漂白；借助此冷光可当作一指示剂，来追踪与确认细菌的存活，动向与座落的位置。

摘要： 本发明提供一种饮用水的净化方法，它是利用在无纺布上涂布有超微粒强磁性铁氧体的纳米过滤件表面所产生的磁力线的一种简易且低成本的构造，可确实去除砷等有害物凝集于特别是饮用水中所含的铁分而成的凝集物。本发明的饮用水净化方法是将粒径5nm至30nm的超微粒铁氧体涂布于由无纺布所构成的过滤件材料而形成会自该表面放射出磁力线的涂布有该超微粒强磁性铁氧体的纳米过滤件，将该纳米过滤件浸渍于饮用水中并静置一段时间，使磁力线作用于凝集在前述饮用水中的铁分并带有磁性的含有砷及其化合物的凝集物质，通过涂布有前述超微粒强磁性铁氧体的纳米过滤件予以吸附而净化前述饮用水。

摘要： 本发明涉及一种细菌外膜囊泡、包含该细菌外膜囊泡的纳米疫苗及其制备方法和应用。所述细菌外膜囊泡含有分子胶水蛋白SpyCatcher和/或SnoopCatcher，所述肿瘤疫苗包括所述细菌外膜囊泡以及和所述细菌外膜囊泡以异肽键形式连接的抗原，所述抗原携带SpyTag和/或SnoopTag。本发明通过将含有分子胶水蛋白SpyCatcher和SnoopCatcher的细菌外膜囊泡作为肿瘤疫苗平台，与携带有SpyTag和/或SnoopTag的抗原进行连接即得到肿瘤疫苗，该肿瘤疫苗可以有效激活机体产生固有免疫的同时，实现对多种抗原的特异性杀伤。依照此方法，可以快速获得针对不同来源肿瘤的个性化肿瘤疫苗。

摘要： 本发明公开了一种低细菌粘附、可再生的高强度纳米复合水凝胶制备方法，包括以下步骤：1)聚合反应：将自由基引发剂加入到纳米粒子中，混合得到表面接枝引发剂的纳米粒子，再加入刺激响应型单体进行反应，得到表面接枝响应型聚合物刷的纳米粒子；2)UV交联：将表面接枝响应型聚合物刷的纳米粒子分散于溶剂中，再加入亲水性单体、引发剂和交联剂，混合后进行UV辐射交联，得到一种低细菌粘附、可再生的高强度纳米复合水凝胶。本发明方法制备过程简单高效，得到的纳米复合水凝胶细菌粘附量低、可释放细菌并表面功能再生，并赋予了材料优异的力学性能，为功能材料的制备提供了新思路。

摘要： 本发明公开了一种细菌靶向纳米粒子的制备及其抑杀细菌的应用。该细菌靶向纳米粒子通过结构如式(Ⅰ)所示的带有靶向片段的两亲性聚合物进行自组装制备得到。本发明通过使用光敏剂和甲基丙烯酸二甲氨基乙酯制备聚(N,N‑二甲基氨乙基甲基丙烯酸酯)‑共聚‑聚光敏剂，再以此为大分子链转移剂和甲基丙烯酸正丁酯为疏水单元进行第二嵌段的聚合，并可将其羧基活化与细菌靶向肽连接，通过自组装形成在水中可溶的纳米粒子。得到的纳米粒子可以通过细菌靶向肽选择性的与细菌结合，提高材料的安全性；光动力和物理作用联合抗菌方式提高材料的抗菌活性，同时还不易使细菌产生耐药性，可广泛的应用于抑菌、杀菌领域。

摘要： 本发明涉及通过分析包含在纳米囊泡中的基因来预测包含源自细菌的纳米尺寸细胞外囊泡(即纳米囊泡)的临床样品中严重细菌感染性疾病的致病因子(细菌)的方法。根据本发明，可以提供关于严重细菌感染的细菌的信息，可以预测细菌感染的致病因子，并且可以预测细菌对抗生素的耐药性。