鸭疫里氏杆菌

摘要： 了确保本文的研究数据能够切实、可行,本文以养鸭场为例展开分析。在番鸭养鸭场,40多日龄番鸭有1600只;50多日龄番鸭1500只。番鸭均在20日龄进行免疫禽流感但在后续养殖中,番鸭在25~30日龄发病死亡,每天番鸭死亡数3~4只。距离番鸭大批死亡已有7~8 d。分析番鸭死亡原因,初步判断鸭疫里氏杆菌以及沙门氏杆菌混合感染所致番鸭发病后,出现脚软、难以站稳。

摘要： 本试验旨在阐明C5a-C5aR轴在鸭疫里氏杆菌(Riemerella anatipestifer)感染致雏鸭肝损伤中的作用。将保存的鸭疫里氏杆菌复苏培养,同时制备鸭抗凝血,将鸭疫里氏杆菌与鸭抗凝血混匀,分别与抗C5a抗体和抗C5aR抗体孵育后进行全血试验,利用ELISA检测C5a及各炎性因子表达水平;利用鸭疫里氏杆菌感染雏鸭,同时分别用抗C5a抗体和抗C5aR抗体处理进行动物试验,采集主要组织进行病理组织学检查;采集雏鸭外周血和肝组织进行细菌计数;采集外周血分离血清后,进行血清酶活性检测,应用ELISA检测血清C5a及炎性因子水平;采集肝组织,利用荧光定量PCR检测主要炎性因子mRNA转录水平。结果显示,在全血试验和动物试验中,与R.anatipestifer组相比,R.anatipestifer+anti-C5a组和R.anatipestifer+anti-C5aR组C5a、TNF-α、IL-6和IL-1β表达水平显著降低(P<0.05);阻断C5a-C5aR轴可显著降低鸭疫里氏杆菌感染雏鸭的发病率和死亡率,同时减轻雏鸭心、肝和脾组织损伤;阻断C5a-C5aR轴能显著降低鸭疫里氏杆菌感染雏鸭外周血和肝细菌数及谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)和谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)水平;荧光定量PCR检测发现,与R.anatipestifer组相比,R.anatipestifer+anti-C5a和R.anatipestifer+anti-C5aR组C5aR、Sphk1、FGL2、TNF-α和IL-1βmRNA转录水平显著降低(P<0.05)。本研究成功证实C5a-C5aR轴激活有助于鸭疫里氏杆菌感染雏鸭,阻断C5a-C5aR轴可显著减轻雏鸭组织损伤和炎症反应,为进一步研究抗鸭疫里氏杆菌感染药物提供新思路。

摘要： 为了解广东省肇庆市鸭疫里氏杆菌的流行和耐药现状,本试验对当地4个养鸭场疑似传染性浆膜炎的病鸭进行细菌分离纯化、PCR鉴定,并对分离菌株进行了药敏试验、耐药基因、毒力基因检测及ERIC-PCR分型试验。药敏结果表明,14株鸭疫里氏杆菌对新霉素、安普霉素、恩诺沙星、替加环素、复方新诺明高度耐药,耐药率均为100%;对阿莫西林、头孢他啶和环丙沙星敏感度较高,敏感率分别为100%、100%和92.86%。耐药基因检测结果显示,所有分离菌均携带tet(X)和floR耐药基因,tet(B)和su l1耐药基因的检出率分别为64.29%和50%,其余9种耐药基因(aac(6′)-Ⅰb、aph(3')-Ⅱ、bla_(SHV)、bla_(DHA)、qnrA、qnr B、tet(A)、tet(C)、sul2)未被检出。毒力基因检测结果显示,AS87_04050、luxE和wza毒力基因的检出率较高,分别为100%、92.86%和100%,而TbdR 1均未被检出。ERIC-PCR分型试验结果表明,14株鸭疫里氏杆菌均成功分型,相似性在90%时,可分为7个基因型。本实验为广东省肇庆市鸭疫里氏杆菌病的治疗措施提供理论依据。

摘要： 鸭传染性浆膜炎是由鸭疫里氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)引起的鸭,鹅、火鸡等多种家禽和野禽的一种接触性、急性或慢性、败血性传染病,主要侵害1~8周龄的小鸭,临床症状特点为眼和鼻有分泌物、绿色腹泻、共济失调和抽搐;慢性病例出现神经症状;病变特征为纤维素性心包炎、肝周炎、气囊炎、干酪性输卵管炎、关节炎及麻痹。

摘要： 为建立一种能同时快速检测鸭疫里氏杆菌(RA)和鸭坦布苏病毒(DTMUV)的PCR方法,根据NCBI公布的RA dnaB基因和DTMUV PrM基因分别设计并合成两对特异性引物,通过对双重PCR反应的引物浓度和退火温度进行优化筛选.优化引物浓度组合为:RA引物0.5μmol/L,DTMUV引物为1μmol/L,最佳退火温度为53°C.特异性试验表明,该方法对鹅细小病毒、禽流感病毒、新城疫病毒、番鸭细小病毒、I型鸭肝炎病毒、沙门氏菌、大肠杆菌的核酸扩增结果均为阴性,RA和DTMUV的检测结果为阳性.敏感性测定表明,该双重PCR方法最低能检出RA和DNAV-1的核酸量分别为6.7 pg和3.6 pg.本研究建立的检测方法检测实验室保存的8份临床病料,RA的阳性率为62.5％,DTMUV阳性率为37.5％.综上所述,建立的PCR方法特异性强、敏感性和稳定性良好,为RA和DTMUV的临床病料检测提供了技术支撑.

摘要： 为调查鸭疫里氏杆菌对常用抗菌药物的敏感性,试验从广东和山东地区病鸭体内分离到10株病原菌,通过细菌形态观察、革兰氏染色、瑞氏染色和PCR对菌株进行种属鉴定,并采用Kirby-Bauer纸片法测定鸭疫里氏杆菌对15种常见抗菌药物的耐药性.结果表明,分离到10株菌均为鸭疫里氏杆菌;10株菌均对β-内酰胺类(阿莫西林、青霉素、氨苄西林)、氨基糖苷类(庆大霉素、链霉素、大观霉素、卡那霉素)和林可霉素类药物(林可霉素)的耐药率在50％以上,对大环内酯类(红霉素)耐药率较低,为10％;但分离菌株都对喹诺酮类(左旋氧氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星)、四环素类药物(四环素)、氯霉素类(氟苯尼考)和头孢噻呋钠高敏.通过对鸭疫里氏杆菌的耐药性检测,其结果对当地鸭疫里氏杆菌病的临床用药具有一定的指导意义.

摘要： 广东地区某鸭场2周龄左右番鸭出现采食量下降、流泪拉稀、歪头扭脖甚至仰.翻卧地的症状,剖检见心脏和肝脏有纤维素性包膜,初步诊断为鸭传染性浆膜炎。为进一步探明病因,通过采集病料进行细菌分离培养、染色镜检以及分子生物学的鉴定,确定该分离菌为鸭疫里氏杆菌,并命名为RA-GD202006株。药敏试验结果显示:该分离株对阿莫西林、氨苄西林、泰乐菌素、替米考星以及氟苯尼考注射液高度敏感,对大观林可霉素和新霉素中度敏感,建议该鸭场合理选用高度敏感的药物进行治疗。

摘要： cqvip:鸭传染性浆膜炎由鸭疫里氏杆菌感染引起,多为地方流行,一年四季都可发生,病鸭和处于潜伏期的感染鸭是主要传染源,以2~6周龄的鸭发病率最高,成年鸭多为隐性经过;病鸭表现精神不振,体温升高,采食量下降,后期出现神经症状或关节炎,死亡率较高;预防本病需提升养殖场的管理水平,定期进行药物预防,防止鸭群出现应激;对鸭疫里氏杆菌敏感的抗生素是治疗本病的最佳药物,但治疗要尽早,治疗越晚效果越差。

摘要： 本文从鸭传染性浆膜炎的病原、流行病学特点、临床症状、病理变化、诊断治疗及综合防治措施等几个方面进行论述,以期达到对该病预防和控制的目的 ,最大程度减小养殖过程中造成的损失.

摘要： 笔者对鸭疫里氏杆菌病与沙门氏杆菌混合感染的诊断展开讨论,分析了前驱期和明显期的临床症状,通过细菌学检验方法确定病原菌,结合对鸭疫里氏杆菌和沙门氏杆菌两种药敏实验,为养鸭户推荐敏感药物防治,减少经济损失。一、发病情况2019年3月广西壮族自治区北海市海城区高德镇某一养鸭场,存栏40多日龄番鸭1600只,50多日龄半番鸭1500只,在20日龄免疫禽流感疫苗,均在25~30日龄开始发病死亡,一天死亡3~4只,连续十几天。

摘要： 目的：本文主要调查分析了2007-2016年间广东地区158株鸭疫里氏杆菌的优势血清型及其Smal-PFGE分型情况.方法：采用玻片凝集的方法进行血清型鉴定,对鉴定出血清型的菌株进行标准化脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型.结果：表明鸭疫里氏杆菌菌株有89株为Ⅰ型血清型,占总分离株的56.32％.PFGE分型结果可以得到29种不同的Smal-PFGE分型图谱(以相似度≥85％为判断标准),可分为14个簇及15个单一型.结论：1型血清型仍然是广东地区鸭疫里氏杆菌的优势血清型,且同一种血清型的鸭疫里氏杆菌存在着广泛的多样化克隆传播.

摘要： 对广东某鸭场疑似传染性浆膜炎病鸭进行细菌分离鉴定和致病性考察.从濒死鸭脑、肝脏和心血中进行细菌分离,通过鉴别培养、染色镜检、生化实验和PCR检测进行细菌的鉴定,将最终确定为鸭疫里氏杆菌的分离菌株进行扩增培养后,进行动物回归试验,考察其致病性.结果显示分离到的三株细菌均为鸭疫里氏杆菌,动物回归试验中试验组鸭均发病,并表现典型传染性浆膜炎症状,甚至死亡.表明所分离的3株鸭疫里氏杆菌具有较强的致病性.

摘要： 本实验室保存的两株鸭疫里氏杆菌疑有大肠杆菌污染，鉴于此，通过细菌分离培养、菌落形态观察、染色镜检和生理生化实验确定为鸭疫里氏杆菌，并参照《鸭疫里默氏杆菌的分离、鉴定及培养条件优化》文中所使用引物设计PCR反应体系和程序进行菌落PCR鉴定，结果表明：相对传统鉴定方法，PCR方法具有特异性强、敏感性高等特点，可以为鸭疫里氏杆菌的快速鉴定提供有效的工具。

摘要： 选择玉屏风散、四君子汤以及合方玉风君子汤作为口服佐剂,观察其对鸭疫里氏杆菌疫苗免疫的佐剂效果。rn 结果：玉风君子汤能够显著提高受免疫鸭的抗体水平,且对鸭生长没有任何负面影响。

摘要： 提取鸭疫里氏杆菌吉林分离株JL-RA1和儿-RA3总DNA，利用细菌通用引物分别扩增出16S rRNA测得序列大小均为1 478bp，与GenBank中已知的RA 16S rRNA序列进行同源性对比同源性高达99．0％～99．9％。同时，设计特异性引物扩增两株RA保护性抗原OmpA全基因序列，扩增出目的片段序列大小均为1 164bp，与预期结果一致，并与GenBank中已知的鸭疫里默氏杆菌OmpA序列进行同源性对比，同源性达93．3％～100％，编码蛋白质的氨基酸序列同源性为96％～100％。

摘要： 1999年至2006年，从江西省鸭鹅中分离到79株鸭疫里氏杆菌，对分离菌株进行了系统的微生物学特性测定。结果表明分离菌株的培养特性基本一致，但部分生化特性差异较大。江西省分离株对12日龄樱桃谷雏鸭的差异较大，人工感染鸭死亡率0％～100％。建立了鸭疫里氏杆菌的PCR检测方法，该方法能从病料组织培养8h的混合菌群中快速、准确地检测出鸭疫里氏杆菌。以鸭疫里氏杆菌2型江西省分离株制备了灭活铝胶、油乳疫苗，接种5日龄雏鸭，免疫后第5、10、15天用同源菌株人工感染，保护指数均为60左右;25日龄二免后第5天人工感染的保护指数达91．7～100。

摘要： 将复合多糖与免疫效果较好的蜂胶分别作为佐剂,设定不同的浓度制备鸭疫里氏杆菌参考株RA2F2与本地分离株YM1、YM2的三联灭活疫苗,首免后第7天开始采集试验鸭鲜血制备血清,每隔4～5 d采用试管凝集反应监测其抗体滴度,比较各试验组的免疫效果。结果表明：高浓度(10 g／mL)复合多糖佐剂及多糖蜂胶复合佐剂于首免疫后的第1 1天抗体效价均达到1：40;多糖蜂胶复合佐剂最高效价于免疫后的第19天达到1：160,一直维持较高水平,适合作为制备鸭疫里氏杆菌多联灭活疫苗的佐剂,其最适添加比例是15 mg／mL,其中蜂胶与复合多糖的比例是1：2;本研究同时也表明于3～5日龄首免、10～12日龄加强免疫一次是预防鸭疫里氏杆菌病发生的较好免疫程序。

摘要： 本试验为了提高鸭疫里氏杆菌基因工程疫苗免疫效果，将RA OmpA基因与从健康鸭外周血淋巴细胞总RNA中扩增出的DuIL-2基因，两段基因以一段柔性linker相连，利用SOE-PCR技术，构建OmpA-DuIL-2融合基因，并进行了原核表达。经Western-Blot分析结果表明，OmpA基因和鸭IL-2基因融合基因表达的产物具有较好的外膜蛋白抗原性和鸭IL-2免疫原性，为进一步开发和研制新型RA基因工程疫苗奠定了基础。

摘要： 鸭疫里氏杆菌(RA)病是严重危害全世界养鸭业的主要细菌性传染病之一，该病给养鸭业造成了巨大的经济损失。然而，目前对RA的毒力因子和致病机理知之甚少。二肽肽酶Ⅳ(DPP Ⅳ)是多种病原菌重要的毒力因子，能够介导病原菌的粘附、降解结缔组织以及引起血管通透性的变化等，在体内外条件下RAdpp Ⅳ基因的差异表达显著，因此推测二肽肽酶Ⅳ可能是RA重要的毒力因子。本研究采用基因组步移技术分段克隆RA血清1型云梦分离株(RA-YM)dpp Ⅳ全基因，构建含壮观霉素抗性基因的pRE-LSR重组转移质粒，并转化供体菌E.coli X7213，通过接合转移和SacB负向筛选标记完成RA-YM dpp Ⅳ基因缺失突变株的构建与筛选，并利用PCR对突变株进行验证，结果表明获得了比较稳定的dpp Ⅳ基因缺失突变株，为下一步确定DPP Ⅳ是RA关键的毒力因子奠定基础以及为RA基因工程疫苗的设计与研发提供理论依据。

摘要： 鸭疫里氏杆菌病,是由鸭疫里默氏杆菌RA引起的一种主要发生于鸭的细菌性传染病,其特征是引起小鸭纤维素性心包炎、肝周炎、气囊炎.目前,广西该病的发病率逐年上升,且呈现出与鸭大肠杆菌、沙门氏菌混合感染的情况,发病日龄扩大化,死亡率达到5％～8％.由于RA血清型复杂,各菌株的致病性亦有差异,并且随着耐药性菌株的出现,因此,收集广西各地菌株、详细研究并掌握其有关特点和变化规律是使RA的防制水平从根本上得到改善的关键.本研究通过对广西各地送检的疑似感染RA的病鸭进行临床诊断、病原菌的分离鉴定、16S rRNA基因扩增测定和药敏试验的初步调查研究,从而了解近期广西RA的发病特点、分离菌株的生物学特性及药敏特性,为该病的有效预防治疗提供具有针对性的合理可靠的参考依据.

摘要： 本发明属于兽医生物技术领域，具体涉及鸭疫里氏杆菌和大肠杆菌外膜蛋白二联疫苗及其制备方法。本发明的鸭疫里氏杆菌和大肠杆菌外膜蛋白二联疫苗是抗原与油佐剂以体积比1∶1～1∶5的比例乳化配制而成，抗原为鸭疫里氏杆菌RA1型外膜蛋白和/或鸭疫里氏杆菌RA2型外膜蛋白和禽致病性大肠杆菌O78外膜蛋白，动物试验表明，采用本方法制备的疫苗免疫动物后，疫苗的安全性好，免疫效果明显，动物体内能产生高效价的抗体，可以抵御同型鸭疫里氏杆菌和多种血清型大肠杆菌的攻击。

摘要： 本发明属于动物细菌基因工程技术领域，具体涉及鸭疫里氏杆菌phoR基因部分片段缺失弱毒株及应用。所述菌株保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏号为CCTCC NO:M2020432。该菌株缺失了鸭疫里氏杆菌云梦株（RA‑YM）phoP/phoR双组份信号系统中phoR基因的687bp，导致该菌株毒力显著下降，但仍保留有良好的免疫原性。本发明所得的phoR基因缺失株作为一株弱毒疫苗候选菌株，与传统灭活疫苗相比，其生产工艺简单，生产成本较低，通过给雏鸭免疫接种，能提供良好的免疫保护。

摘要： 本发明公开了鸭疫里氏杆菌Cas9基因缺失突变株及其应用，属于动物基因工程疫苗制备技术领域。所述菌株保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏号为CCTCC NO:M 2016247。该菌株缺失了CRISPR‑Cas系统Cas9基因的2070bp，导致该菌株毒力显著下降，但仍保留良好的免疫原性。本发明所得的Cas9基因缺失株与传统灭活苗相比，其培养方法简单，生产成本低，可通过滴鼻或喷雾等方式接种，其操作简单快速，能激发机体产生有效的粘膜免疫，同时也能激发机体的系统免疫。

摘要： 本发明属于动物细菌基因工程技术领域，公开了一段来源于鸭疫里氏杆菌RA‑YM株的基因在作为鸭疫里氏杆菌整合酶中的应用，所述基因的核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示，编码的蛋白为SEQ ID NO.2所示。该整合酶能位点特异性整合至鸭疫里氏杆菌特定位点，表达外源蛋白后，能连续传代仍具有稳定性。本发明所得的该整合酶及整合位点能在鸭疫里氏杆菌中稳定存在，并能介导外源基因的表达，其操作方法简单，稳定性高。

摘要： 本发明属于兽医生物技术领域，具体涉及鸭疫里氏杆菌和大肠杆菌外膜蛋白二联疫苗及其制备方法。本发明的鸭疫里氏杆菌和大肠杆菌外膜蛋白二联疫苗是抗原与油佐剂以体积比1∶1～1∶5的比例乳化配制而成，抗原为鸭疫里氏杆菌RA1型外膜蛋白和/或鸭疫里氏杆菌RA2型外膜蛋白和禽致病性大肠杆菌O78外膜蛋白，动物试验表明，采用本方法制备的疫苗免疫动物后，疫苗的安全性好，免疫效果明显，动物体内能产生高效价的抗体，可以抵御同型鸭疫里氏杆菌和多种血清型大肠杆菌的攻击。

摘要： 本发明提供了一种鸭疫里氏杆菌噬菌体，其通过噬菌体富集、分离及纯化等步骤，初步筛选得到4株鸭疫里氏杆菌噬菌体，分别为WXLRAP2、WXLRAP3、WXLRAP4和Riemerella anatipestifer phage WXLRAP15，然后再对初筛获得的4株噬菌体经过发酵效率、pH耐受性实验、温度敏感性测定及裂解谱测定等复筛，最终筛选得到该具有宽裂解谱、高裂解效率的噬菌体Riemerella anatipestifer phage WXLRAP15，同时，还提供了该噬菌体的分离和纯化方法。本发明的噬菌体Riemerella anatipestifer phage WXLRAP15具有很高的发酵效价，在实验室小量发酵中效价可达2.2x10

摘要： 本发明公开了一种基于RPA‑CRISPR‑Cas12a可视化检测鸭疫里氏杆菌的试剂盒及其应用，所述试剂盒包含特异性crRNA、鸭疫里氏杆菌特异性RPA引物对和探针，所述特异性crRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述特异性RPA引物对的上游引物RPA‑F、下游引物RPA‑R和探针的核苷酸序列依次如SEQ ID NO：3～5所示；探针5’端标记荧光基团，3’端标记淬灭基团。所述试剂盒具有成本低，操作便捷、耗时少、灵敏度高和特异性强等特点，全程在37～40°C环境下进行，可以有效脱离实验室大型仪器的依赖。

摘要： 本发明属于动物细菌基因工程技术领域，具体涉及鸭疫里氏杆菌phoR基因部分片段缺失弱毒株及应用。所述菌株保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏号为CCTCC NO:M2020432。该菌株缺失了鸭疫里氏杆菌云梦株（RA‑YM）phoP/phoR双组份信号系统中phoR基因的687bp，导致该菌株毒力显著下降，但仍保留有良好的免疫原性。本发明所得的phoR基因缺失株作为一株弱毒疫苗候选菌株，与传统灭活疫苗相比，其生产工艺简单，生产成本较低，通过给雏鸭免疫接种，能提供良好的免疫保护。

摘要： 本发明涉及一种鸭疫里氏杆菌高效价阳性血清的快速简便制备方法，属于生物制品领域。包括以下步骤：1）培养基制备：培养基分为液体培养基和固体培养基；2）菌液制备；3）菌液灭活；4）免疫抗体制备；5）免疫；6）抗体滴度检测；7）特异性检测。该方法使用兔作为免疫对象，使用含有合适用量的鸭疫里氏杆菌的灭活抗原对其免疫，7天产生高免血清，试管凝集抗体可以达到1：16。

摘要： 本公开提供了一种鸭疫里氏杆菌单克隆抗体的制备方法，所述方法的具体步骤包括：(1)扩大培养鸭疫里氏杆菌，甲醛灭活，然后利用PBS配置悬液，完成抗原制备；(2)将新制备的抗原与弗氏完全佐剂混合均匀搅拌4h至其乳化，然后皮下注射小鼠，免疫两周后，将新制备的抗原与弗氏不完全佐剂混合均匀搅拌4h至其乳化，再次皮下注射小鼠，免疫一周后获得免疫小鼠，其检测抗体效价为1：6400；(3)取免疫小鼠的脾细胞与SP2/0细胞进行细胞融合；(4)将步骤(3)中的融合细胞进行阳性筛选及克隆化。所述的方法通过提高免疫效果以提高抗体效价来进而减少免疫次数，从而达到了节省时间及材料的效果。