生化鉴定

摘要： 目的:建立食物中毒样品中大肠埃希氏菌(Escherichia coli)的检测方法,并对分离的大肠埃希氏菌进行生化鉴定和药敏分析。方法:根据E. coli特异性基因设计引物和探针序列,建立荧光定量PCR检测体系,并使用VITEK系统对分离的E. coli进行生化鉴定和药敏分析。结果:成功建立了荧光定量PCR检测E. coli的方法,方法检测灵敏度高(LOD为10 CFU·mL^(-1))、特异性强,应用该方法对10份食物中毒样品中的E. coli进行检测,发现4份阳性样本,纯培养后获取4株E. coli,进一步的VITEK生化鉴定结果表明这4株分离株为E. coli,药敏分析结果显示4株E. coli分离株均表现为多重耐药株。结论:本研究建立的荧光定量PCR能够灵敏、准确地检测食物中毒样品中的E. coli,且通过生化鉴定和药敏分析掌握食物中毒样品中E. coli的生化特征,为预防和控制E. coli引发的食物中毒提供了科学依据。

摘要： 目前微生物的数量已超过10万种,而且数目还在不断增加,不同种类的微生物有不同的特性,可根据这些特性进行鉴别,本文介绍并分别列举了生化鉴定技术在食品微生物检测中的应用。

摘要： 长孢洛德酵母菌(Lodderomyces elongisporus)是一种罕见的酵母菌,2008年首次被描述为可以引起血流感染的致病菌[1]。因其与近平滑假丝酵母菌(Candida parapsilosis)生物学特性相似,常规的生化鉴定法总是错误的将其鉴定为近平滑假丝酵母菌[1-2],然而小亚基rRNA基因测序结果显示,两者有亲缘关系但属于不同的种[3]。

摘要： 为探讨非洲鸵鸟(Struthio camelus)腹泻是否与大肠杆菌有关,以9羽非洲鸵鸟粪便为研究对象,将纯化培养后的细菌进行革兰氏染色、细菌形态学鉴定、生化鉴定。结果表明,2~9号菌株在麦康凯培养基生长为红色、湿润的圆形菌落,1号菌株在麦康凯培养基生长为白色透明、湿润的圆形菌落;革兰氏染色均为阴性,镜检均为红色杆菌;9株菌株均能发酵葡萄糖、甘露醇、阿拉伯糖、麦芽糖,大部分菌株能分解山梨醇、乳糖、鼠李糖、蔗糖、棉子糖,1株菌不能发酵乳糖且在麦康凯培养基上呈白色透明菌落,所有菌株均不能利用硫化氢、枸橼酸盐,所有菌株VP试验、尿素反应均为阴性,所有菌株MR试验、吲哚试验均为阳性,9株被检菌株均为大肠杆菌。

摘要： 为比较生化鉴定法、质谱鉴定法和全基因组测序法对双歧杆菌鉴定的差异,本文选取双歧杆菌属不同种类的菌株,分别用VITEK全自动生化鉴定仪、MALDI-TOF质谱和二代测序仪进行鉴定。结果显示,VITEK生化鉴定法无法鉴定至种水平,且实验结果稳定性较差;MALDI-TOF质谱法鉴定双歧杆菌所需的时间最短,但仅能对部分菌种鉴定至种水平;全基因组测序法可以实现双歧杆菌种水平的鉴定,但其实验成本高于前2种方法。MALDI-TOF质谱法和全基因组测序法是双歧杆菌属水平和种水平鉴定必要的补充方法。

摘要： 为验证鸡白痢、鸡伤寒沙门菌分子分型方法的准确性,本研究以3株鸡白痢、鸡伤寒沙门菌国际参考菌株和306株国内分离株为研究对象,采用5种已知的分子分型方法开展验证性实验。结果发现,基于特定基因可变区的2种分型方法具有良好的特异性,其检测结果与生化分型结果一致,而3种基于特定基因单核苷酸多态性的分型方法则出现假阳性或假阴性的结果。上述结果表明,鸡白痢、鸡伤寒沙门菌分子分型方法的准确性仍需进一步验证。

摘要： 为研究速冻调制食品中沙门氏菌及干扰菌的污染状况和生化特性,参照国家标准对6个类别307批次速冻调制食品进行沙门氏菌检测,对分离出的目标菌及干扰菌进行初筛试验和生化鉴定。结果显示,在选择性琼脂平板上沙门氏菌可疑率为41.69%,初筛试验后可疑率降至16.29%,沙门氏菌检出率为0.98%,鉴定出19种干扰菌。速冻调制食品中检测出大量非沙门氏菌干扰菌,其营养需求和生化特征与沙门氏菌相似。鉴定出的干扰菌均为食源性致病菌或条件致病菌,应引起重视并加强监管。

摘要： 从共青地区禽类养殖场的土壤中筛选出了4株地衣芽孢杆菌,其中1株地衣芽孢杆菌产碱性蛋白酶的酶活高达805.53 U/mL。通过酪蛋白培养基初筛,取能够产生水解圈的菌株进行平板划线获得单一菌株,再对菌株进行革兰氏染色和芽孢染色等形态学鉴定及生化特征鉴定筛选,最后对获得菌株进行分子生物学鉴定,16S rDNA测序结果显示4株菌株与地衣芽孢杆菌的同源性在97%以上。结合其形态学鉴定结果和生化特征鉴定结果,确定筛选出来的4株菌株均为地衣芽孢杆菌;最后通过Folin-酚试剂法测定各菌株产碱性蛋白酶粗酶酶活,最终获得的菌株中:菌株2-1-1酶活为805.53 U/mL、菌株2-1-2酶活为688.87 U/mL、菌株2-1-3酶活为593.91 U/mL、菌株3-1-1酶活为729.40 U/mL。

摘要： 从自然患病细鳞鲑体内分离到1株致病菌,经分离培养、生化鉴定、16S rDNA序列分析及人工感染实验确定该病原菌为栖鱼肉杆菌,该菌引起的疾病造成人工养殖细鳞鲑一定规模的死亡,给该物种的保护和恢复带来不利影响。通过药敏试验分析发现,分离菌株对部分抗生素敏感,同时对部分抗生素耐受,因此患病鱼用药治疗过程中应注重药物的选取和用量,避免盲目用药扩大其耐药性。本研究结果对细鳞鲑细菌性疾病的防控及治疗具有一定参考意义。

摘要： 目的:通过参加中国检验检疫科学研究院测试评价中心组织ACAS-PT1091食品中克罗诺杆菌属检测能力验证项目,提升实验室内部检测克罗诺杆菌属的时效性和准确性。方法:将国标法(GB 4789.40-2016)结合VITEK 2 Compact全自动微生物鉴定系统进行检测,同时采用BAX system Q7病原微生物快速检测系统分别进行分析。结果:样品21-M262和21-N690均检出克罗诺杆菌属,21-N690样品中含有干扰菌大肠埃希氏菌,样品21-M262中含有干扰菌弗氏柠檬酸杆菌和大肠埃希氏菌,检测结果均满意。结论:两种检测方法结果一致,BAX System Q7病原微生物快速检测方法相比国标法更加便捷和灵敏,两种方法交互验证,效率更快、准确度更高。

摘要： 为对滨州市地区兔大肠杆菌的耐药性情况进行初步调查,本研究分离鉴定多家兔场大肠杆菌,并进行了生化鉴定试验和药敏试验.共分离鉴定出兔大肠杆菌35株,生化试验结果显示,兔大肠杆菌可分解葡萄糖、甘露醇、蔗糖、乳糖、麦芽糖,M.R试验阳性,V.P试验、氧化酶和过氧化氢酶试验阴性,不液化明胶;27种常用药物的药敏试验结果显示,28(80％)株菌株产生多重耐药性,对头孢曲松的敏感率(92.6％)最高,对头孢哌酮、卡那霉素、新霉素、头孢拉定、氟苯尼考、利福平、头孢氨苄和磷霉素的敏感率依次为:69％、53％、48％、31％、16％、11％、8％、8％.本研究对滨州市多家兔场兔大肠杆菌的耐药种类进行初步的调查,为今后兔场大肠杆菌的防控和治疗提供了前期数据和科学的方法.

摘要： 为了解猪链球菌9型广东分离株毒力因子基因型、基因变异和进化情况,本试验采集发病猪脑脊液、关节液、脾脏、肝脏、淋巴结进行细菌分离培养和生化鉴定,采用PCR方法鉴定其血清型及部分毒力基因,对cps9D、gdh、gapdh与orf24个基因进行序列测定和分析并构建系统发育树.结果显示,分离菌镜检为革兰氏阳性链状球菌,在鲜血琼脂平板中呈β溶血,可发酵大多数糖类,能成功扩增cps9D基因,含重要的保守基因gdh及毒力基因gapdh和orf2,表明分离菌株为9型猪链球菌.分离菌株cps9D、gdh、gapdh、orf2基因核苷酸序列与GenBank上国内外参考菌株的同源性分别为95.9％～100.0％、98.6％～99.8％、98.7％～99.6％和95.5％～99.9％,说明分离菌株与国内外其他猪链球菌9型毒株核苷酸同源性都较高,且与国内外的流行毒株基本一致,未发生太大的变异,系统发育树表明分离株与国内外来源不同的分离株同源性高,亲缘关系密切.

摘要： 从广东省湛江市某养殖场患病的罗氏沼虾幼虾匀浆液内分离到一株优势菌QY170324,通过细菌微量生化鉴定管与16S rDNA序列分析对该株优势菌进行鉴定,并进行了药敏特性分析和人工感染试验.结果显示,该菌为嗜盐性、兼性厌氧,为革兰氏阴性弧菌,能利用蔗糖、甘露糖,赖氨酸脱羧酶、V-P试验均为阳性,在含3％、6％、8％、10％NaCl胨水中均能生长;根据其菌落形态观察、生理生化特性测定,结合《伯杰氏细菌鉴定手册》鉴定该菌为溶藻弧菌,通过PCR扩增该菌的16SrDNA基因,经过测序及BLAST比对,结果与溶藻性弧菌的同源性高达99％;经人工回归感染试验,该菌有较强的致病力.分离的溶藻弧菌QY170324对庆大霉素、四环素、哌拉西林、氧氟沙星、头孢他啶、复方新诺明等抗生素高度敏感,对头孢曲松、卡那霉素、新霉素、米诺环素、麦迪霉素、头孢唑林、多粘菌素B中度敏感,对克林霉素、羧苄西林、头孢氨苄耐药.

摘要： 为了解水禽沙门氏菌对目前常用抗生素的耐药情况,试验采用琼脂二倍稀释法对33株水禽沙门氏菌进行20种常用抗菌药物的敏感性试验.结果表明:33株水禽沙门氏菌对氨苄西林、阿莫西林和恩诺沙星的耐药率高达100.0％;对氯霉素、氟苯尼考、萘啶酸和强力霉素的耐药率均超过80％;对喹嗯啉类药物最为敏感,耐药率仅为12.1％.33株沙门氏菌有19种耐药谱,并且出现严重的多重耐药性,多重耐药率高达97.0％;其中6重耐药菌株占比为36.4％,在多重耐药率中所占比例最高.说明水禽沙门氏菌耐药现象非常严重和复杂,对抗菌药物的耐药谱越来越广,可选药物越来越少,联合用药效果越来越差.

摘要： 为了解水禽沙门氏菌对目前常用抗生素的耐药情况,试验采用琼脂二倍稀释法对33株水禽沙门氏菌进行20种常用抗菌药物的敏感性试验.结果表明:33株水禽沙门氏菌对氨苄西林、阿莫西林和恩诺沙星的耐药率高达100.0％;对氯霉素、氟苯尼考、萘啶酸和强力霉素的耐药率均超过80％;对喹嗯啉类药物最为敏感,耐药率仅为12.1％.33株沙门氏菌有19种耐药谱,并且出现严重的多重耐药性,多重耐药率高达97.0％;其中6重耐药菌株占比为36.4％,在多重耐药率中所占比例最高.说明水禽沙门氏菌耐药现象非常严重和复杂,对抗菌药物的耐药谱越来越广,可选药物越来越少,联合用药效果越来越差.

摘要： 为了解水禽沙门氏菌对目前常用抗生素的耐药情况,试验采用琼脂二倍稀释法对33株水禽沙门氏菌进行20种常用抗菌药物的敏感性试验.结果表明:33株水禽沙门氏菌对氨苄西林、阿莫西林和恩诺沙星的耐药率高达100.0％;对氯霉素、氟苯尼考、萘啶酸和强力霉素的耐药率均超过80％;对喹嗯啉类药物最为敏感,耐药率仅为12.1％.33株沙门氏菌有19种耐药谱,并且出现严重的多重耐药性,多重耐药率高达97.0％;其中6重耐药菌株占比为36.4％,在多重耐药率中所占比例最高.说明水禽沙门氏菌耐药现象非常严重和复杂,对抗菌药物的耐药谱越来越广,可选药物越来越少,联合用药效果越来越差.

摘要： 为了解水禽沙门氏菌对目前常用抗生素的耐药情况,试验采用琼脂二倍稀释法对33株水禽沙门氏菌进行20种常用抗菌药物的敏感性试验.结果表明:33株水禽沙门氏菌对氨苄西林、阿莫西林和恩诺沙星的耐药率高达100.0％;对氯霉素、氟苯尼考、萘啶酸和强力霉素的耐药率均超过80％;对喹嗯啉类药物最为敏感,耐药率仅为12.1％.33株沙门氏菌有19种耐药谱,并且出现严重的多重耐药性,多重耐药率高达97.0％;其中6重耐药菌株占比为36.4％,在多重耐药率中所占比例最高.说明水禽沙门氏菌耐药现象非常严重和复杂,对抗菌药物的耐药谱越来越广,可选药物越来越少,联合用药效果越来越差.

摘要： 为了明确目前广东省水禽源沙门菌的优势血清型及其分子流行病学动态.本研究采用常规方法和PCR扩增分离鉴定了188株水禽源沙门菌;采用玻片凝集法将分离株分为4(B、D、C1、E1)个群别8种血清型;采用PFGE分型法对分离株分子分型,得到PFGE-Xba/带型62种,菌株间相似度在54.1％～100％,分为A～I9个聚类簇与11个单一基因型.结果表明,广东水禽源沙门菌优势血清型为鼠伤寒沙门菌,分子分型分析具有流行病学意义,PFGE-Xba/带型具多样化,其中11种PFGE-Xba/带型在区域和年份小范围集中流行,32种带型跨区域与跨时间交叉分布呈散在“流行暴发”,不同血清型分离株的PFGE-Xba/带型差异较大,相同血清型的分离株PFGE-Xba/带型一般具有相同图谱型或聚类在一起.

摘要： 为了明确目前广东省水禽源沙门菌的优势血清型及其分子流行病学动态.本研究采用常规方法和PCR扩增分离鉴定了188株水禽源沙门菌;采用玻片凝集法将分离株分为4(B、D、C1、E1)个群别8种血清型;采用PFGE分型法对分离株分子分型,得到PFGE-Xba/带型62种,菌株间相似度在54.1％～100％,分为A～I9个聚类簇与11个单一基因型.结果表明,广东水禽源沙门菌优势血清型为鼠伤寒沙门菌,分子分型分析具有流行病学意义,PFGE-Xba/带型具多样化,其中11种PFGE-Xba/带型在区域和年份小范围集中流行,32种带型跨区域与跨时间交叉分布呈散在“流行暴发”,不同血清型分离株的PFGE-Xba/带型差异较大,相同血清型的分离株PFGE-Xba/带型一般具有相同图谱型或聚类在一起.

摘要： 为了明确目前广东省水禽源沙门菌的优势血清型及其分子流行病学动态.本研究采用常规方法和PCR扩增分离鉴定了188株水禽源沙门菌;采用玻片凝集法将分离株分为4(B、D、C1、E1)个群别8种血清型;采用PFGE分型法对分离株分子分型,得到PFGE-Xba/带型62种,菌株间相似度在54.1％～100％,分为A～I9个聚类簇与11个单一基因型.结果表明,广东水禽源沙门菌优势血清型为鼠伤寒沙门菌,分子分型分析具有流行病学意义,PFGE-Xba/带型具多样化,其中11种PFGE-Xba/带型在区域和年份小范围集中流行,32种带型跨区域与跨时间交叉分布呈散在“流行暴发”,不同血清型分离株的PFGE-Xba/带型差异较大,相同血清型的分离株PFGE-Xba/带型一般具有相同图谱型或聚类在一起.

摘要： 本发明提供了一种氯胺类衍生化试剂在双键位置鉴定中的应用，具体地，本发明提供了一种质谱法鉴定长链不饱和分子中双键位置的方法，其特征在于，所述的方法包括使用如下式I所示的化合物作为鉴定试剂。本发明的方法可以有效提高质谱对低浓度样品的检测能力，有利于保证方法的准确性。

摘要： 一种利用枸杞功能叶生理生化指标早期鉴定枸杞白粉病抗性的方法，本发明涉及一种利用枸杞功能叶生理生化指标早期鉴定枸杞白粉病抗性的方法。本发明的目的是为了解决现有无法早期鉴定枸杞种质对白粉病的抗性的问题，本发明以过氧化物酶、苯丙氨酸裂解酶和抗坏血酸过氧化物酶的酶活、丙二醛含量作为枸杞白粉病抗性鉴定的指标。本发明通过早期测定枸杞种质健康功能叶的相关生理生化指标，鉴定该种质是否具有白粉病抗性，为不同用途枸杞的培育、种植以及管理提供依据，为增加枸杞产量、提高育种质量奠定理论基础。本发明应用于枸杞白粉病抗性鉴定领域。

摘要： 本发明公开了一种可视化微生物生化鉴定试剂盒及其鉴定方法。所述生化鉴定试剂盒，包括盒体，内部设置有反应槽及与反应槽连接的加样槽；反应槽为倾斜设置；反应槽和加样槽通过分隔板分隔成若干个反应支槽和加样支槽，每个反应支槽中通过真空干燥的方法固定有生化培养基，加样槽设有一用于引流样液至反应槽的斜面。本试剂盒实现了一次加样，利用水溶液的流动性完成样液分配，省去了每步加样的繁琐过程，减少了污染。反应槽为倾斜设置，试剂盒放在比色卡上更易于记录结果，避免错看，漏看等情况的发生。试剂盒中生化培养基是基于糖发酵反应原理，准确度高。真空干燥技术将培养基干燥固化在反应槽底部上，形成一层薄膜，试剂稳定，易于保存和运输。

摘要： 本发明公开了一种基于人工神经网络的细菌生化鉴定系统及其鉴定细菌的方法，鉴定系统包括下列模块组成：概率人工神经网络处理器模块、数据库模块、人工输入模块、生化结果自动读取输入模块、结果输出显示模块；上述所述的细菌生化鉴定系统以概率人工神经网络处理器模块为中心；鉴定方法包括下列步骤：对样品进行任意数量的生化项目鉴定，将鉴定结果输入到所述细菌生化鉴定系统中，系统中的概率人工神经网络处理器模块会自动将结果与数据库中的数据信息进行匹配鉴定，并通过结果输出显示模块显示结果。本发明鉴定原理更先进，使用十分方便，成本低，结合可视化分析，使得结果输出更直观。

摘要： 本发明公开了一种可视化微生物生化鉴定试剂盒及其鉴定方法。所述生化鉴定试剂盒，包括盒体，内部设置有反应槽及与反应槽连接的加样槽；反应槽为倾斜设置；反应槽和加样槽通过分隔板分隔成若干个反应支槽和加样支槽，每个反应支槽中通过真空干燥的方法固定有生化培养基，加样槽设有一用于引流样液至反应槽的斜面。本试剂盒实现了一次加样，利用水溶液的流动性完成样液分配，省去了每步加样的繁琐过程，减少了污染。反应槽为倾斜设置，试剂盒放在比色卡上更易于记录结果，避免错看，漏看等情况的发生。试剂盒中生化培养基是基于糖发酵反应原理，准确度高。真空干燥技术将培养基干燥固化在反应槽底部上，形成一层薄膜，试剂稳定，易于保存和运输。

摘要： 本发明公开了一种基于人工神经网络的细菌生化鉴定系统及其鉴定细菌的方法，鉴定系统包括下列模块组成：概率人工神经网络处理器模块、数据库模块、人工输入模块、生化结果自动读取输入模块、结果输出显示模块；上述所述的细菌生化鉴定系统以概率人工神经网络处理器模块为中心；鉴定方法包括下列步骤：对样品进行任意数量的生化项目鉴定，将鉴定结果输入到所述细菌生化鉴定系统中，系统中的概率人工神经网络处理器模块会自动将结果与数据库中的数据信息进行匹配鉴定，并通过结果输出显示模块显示结果。本发明鉴定原理更先进，使用十分方便，成本低，结合可视化分析，使得结果输出更直观。

摘要： 本实用新型公开了一种细菌生化鉴定系统。本实用新型提供了一种细菌生化鉴定测试片以及和细菌生化鉴定测试片配套使用的压板，细菌生化鉴定测试片包括覆膜、底板，位于两者之间的离型纸，生化鉴定试纸和指示贴；压板包括压板平面和弹性压框。本实用新型的细菌生化鉴定测试片使生化鉴定试纸处于一个密闭环境中，有效减少水分散失，同时可形成厌氧环境，克服了常规和市场上同类产品在氨基酸脱羧酶、氰化钾等检测项目中滴加液体石蜡油以形成厌氧环境的缺点。本实用新型的细菌生化鉴定测试片培养结束后可直接观察细菌分解糖类产气情况，制作工艺简单，准确性高。

摘要： 本实用新型涉及一种生化培养与生化鉴定装置，属于微生物培养技术领域。它包括配合连接的底盘（1）与顶盖（3），所述底盘（1）包括培养池（11）和容置区（12），所述容置区的凸起（122）围绕培养池（11）呈放射状排列，将容置区（12）分隔成数个扇形库位，所述培养子槽（2）呈空心楔形体，培养子槽（2）窄端朝向培养池（11），搁置在库位内,培养子槽（2c）的顶部设有盖板（21c），靠近盖板（21c）长边的一端设有液体入口孔（211）、气孔（212）、遮挡板Ⅰ（213）和遮挡板Ⅱ（214）。本实用新型将增菌培养、涂布接种、生化鉴别一体化，降低了对操作环境的要求和检测成本，提高了检测效率和结果的稳定性。

摘要： 本申请涉及一种微生物生化鉴定试剂盒用架子，涉及微生物生化鉴定技术领域，其包括支撑板，所述支撑板之间设置有第一基板与第二基板，所述第一基板与第二基板之间呈平行间隔设置，且所述第一基板与第二基板均与所述支撑板可拆卸固定；所述第一基板上开设有通孔，所述通孔在所述第一基板上间隔设置有若干个，试剂管通过通孔插设在所述第一基板上，且试剂管的底端与所述第二基板抵接；所述第一基板上开设有观察窗，所述观察窗与所述通孔对应。本申请具有防止多个试剂管直接堆放在试剂盒内，当工作人员需要拿取某个试剂管时，仅需要透过观察窗进行观察，避免了在试剂盒内翻找，提升工作人员的工作效率的效果。

摘要： 一种新型生化鉴定管测量装置，本申请设计一种对细菌进行生化培养研究学习的自动化新型鉴定管测量装置，装置设置带转盘固定鉴定管的培养观察室，培养观察室内设置灯柱，灯柱外侧设置光传感器及视频头，通过设置的功能区开关对培养观察室条件进行调节控制，通过光传感器及视频头定时或实时记录分析鉴定管内情况，观察记录时鉴定管放置于灯柱与光传感器及视频头之间，通过设备对鉴定管内的情况进分析数据采集，装置设置的培养观察室具有封闭性，在鉴定管接种完菌落后，可有效避免培养过程中空气中的其它菌落对实验造成影响，装置设置拓展接口，可将其进入互联网计算机系统，能实现远程数据观察及共享分析研究。