亮氨酸氨基肽酶

摘要： 目的:研究血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、γ-谷氨酰氨基转肽酶(γ-GT)、亮氨酸氨基肽酶(LAP)水平联合检测甲亢合并肝损害的应用价值。方法:选取我院甲亢患者124例(2019年3月〜2020年3月),及同期健康体检者60例。均检测血清ALT、γ-GT、LAP水平,以肝功能损害标准为“金标准”。比较甲亢患者(合并肝损害、无肝损害)、健康体检者血清ALT、γ-GT、LAP水平,并统计血清ALT、γ-GT、LAP单一诊断及联合诊断甲亢合并肝损害的结果及诊断效能(灵敏度、特异度、准确度)。结果:经肝功能损害标准判断,124例甲亢患者中肝损害患者67例,无肝损害患者57例;甲亢患者血清ALT、γ-GT、LAP水平高于健康体检者,且合并肝损害患者高于无肝损害患者(P0.05)。结论:甲亢合并肝损害患者血清ALT、γ-GT、LAP水平会异常升高,且联合检测能提高诊断灵敏度、准确度,有助于肝损害的早期诊断,具有重要临床应用价值。

摘要： 目的:研究血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、γ-谷氨酰氨基转肽酶(γ-GT)、亮氨酸氨基肽酶(LAP)水平联合检测甲亢合并肝损害的应用价值.方法:选取我院甲亢患者124例(2019年3月～2020年3月),及同期健康体检者60例.均检测血清ALT、γ-GT、LAP水平,以肝功能损害标准为"金标准".比较甲亢患者(合并肝损害、无肝损害)、健康体检者血清ALT、γ-GT、LAP水平,并统计血清ALT、γ-GT、LAP单一诊断及联合诊断甲亢合并肝损害的结果及诊断效能(灵敏度、特异度、准确度).结果:经肝功能损害标准判断,124例甲亢患者中肝损害患者67例,无肝损害患者57例;甲亢患者血清ALT、γ-GT、LAP水平高于健康体检者,且合并肝损害患者高于无肝损害患者(P0.05).结论:甲亢合并肝损害患者血清ALT、γ-GT、LAP水平会异常升高,且联合检测能提高诊断灵敏度、准确度,有助于肝损害的早期诊断,具有重要临床应用价值.

摘要： 目的 探讨甲状腺功能亢进肝损害患者血清亮氨酸氨基肽酶(LAP)、γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平的变化,以分析3者联合检测对甲状腺功能亢进肝损害的诊断价值.方法 回顾性分析江阴市第四人民医院2019年1月至2021年1月收治的120例确诊甲状腺功能亢进患者的临床资料,根据肝功能检查结果将患者分为甲状腺功能亢进无肝损害组(58例)与甲状腺功能亢进肝损害组(62例);另回顾性分析同期60例健康体检者的体检资料,将其作为对照组.比较3组受试者血清促甲状腺激素(TSH)、游离甲状腺素(FT4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、LAP、γ-GT、ALT水平;分析LAP、γ-GT、ALT联合检测对甲状腺功能亢进肝损害的诊断效能.结果 与对照组相比,甲状腺功能亢进肝损害组与甲状腺功能亢进无肝损害组患者血清FT4、FT3、LAP、γ-GT、ALT水平均显著升高,且甲状腺功能亢进肝损害组显著高于甲状腺功能亢进无肝损害组;血清TSH水平均显著降低,且甲状腺功能亢进肝损害组显著低于甲状腺功能亢进无肝损害组;血清LAP+γ-GT+ALT联合诊断对甲状腺功能亢进肝损害的灵敏度、准确度均显著高于血清LAP、γ-GT、ALT单独诊断,且阳性率显著高于ALT诊断;单一诊断中,血清γ-GT检测诊断甲状腺功能亢进肝损害的灵敏度与准确度均显著高于血清ALT(均P0.05).结论 甲状腺功能亢进患者血清FT4、FT3、γ-GT、ALT水平异常升高,且甲状腺功能亢进肝损害患者较甲状腺功能亢进无肝损害患者升高更为明显,对甲状腺功能亢进肝损害患者进行LAP、γ-GT、ALT指标联合检测有利于其早期诊断,以便于临床及时加以干预,控制病情进展.

摘要： 目的 根据预测多房棘球蚴亮氨酸氨基肽酶(Leucine aminopeptidase,LAP)抗原表位的结果,进一步鉴定其优势的T细胞和B细胞抗原表位.方法 构建重组质粒pCzn1-LAP后进行蛋白原核表达与纯化,将纯化的LAP蛋白进行动物免疫后,利用脾脏淋巴细胞增殖、流式细胞术、ELISA pot、ELISA等方法鉴定优势抗原表位.最后,利用SWISS-MODEL软件对LAP蛋白3D结构建模,PyMOL软件对鉴定的LAP优势抗原表位分布进行准确定位.结果 pCzn1-LAP菌株诱导表达的蛋白约为57 kDa,蛋白经过复性后成功纯化.流式细胞术鉴定的Th1型优势抗原表位为LAP79-63、LAP396-410和LAP106-120;Th2型优势抗原表位为LAP13-28、LAP495-510和LAP396-410.ELISA pot鉴定的Th1型优势抗原表位为LAP396-410、LAP504-518和LAP106-120;Th2型优势抗原表位为LAP504-518、LAP313-328和LAP396-410.BALB/c小鼠血清的抗原表位特异性ELISA筛选出的优势B表位结果为LAP464-479、LAP495-510和LAP313-328.LAP蛋白3D结构建模成功,LAP优势抗原表位分布于表面居多.结论 多房棘球蚴LAP蛋白优势T细胞和B细胞抗原表位鉴定成功,使得研制抗多房棘球蚴感染的多价表位疫苗成为可能.

摘要： 目的探究类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者合并骨质疏松(osteoporosis,OP)的影响因素。方法71例RA患者与31例健康人,分别收集不同组的个人资料、实验室检查、骨密度等,并计算出RA患者的DAS28-ESR结果,采用多因素Logistic回归分析RA合并OP发生的影响因素。结果RA患者与健康人相比较骨密度测量值整体偏低,更易发生骨质疏松。多因素Logistic回归分析得出RA合并OP的独立危险因素是高龄、长病程、高滴度亮氨酸氨基肽酶、升高的DAS28-ESR(OR=1.153、1.096、1.177、5.421,P<0.05),差异有统计学意义(P<0.05)。结论RA患者如存在高龄、长病程、高级别疾病活动度等危险因素时,尤其患者体内存在高滴度的亮氨酸氨基肽酶时,应警惕该患者是否合并骨质疏松。

摘要： 目的:探究尿液亮氨酸氨基肽酶(LAP)、α1-微球蛋白(α1-MG)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)对糖尿病早期肾损害的诊断价值.方法:从2020年4-11月到本院就诊的2型糖尿病早期肾损害患者中随机选取56例纳入试验组,从2型糖尿病非肾损害患者中随机选取56例纳入对照组;比较两组就诊时尿相关指标(LAP、α1-MG、NAG)、血相关指标[胱抑素C(Cys C)、β2-微球蛋白(β2-MG)]水平;经ROC曲线分析尿相关指标(LAP、α1-MG、NAG)对糖尿病患者早期肾损害的诊断效能;比较试验组就诊时及治疗4周后尿LAP、α1-MG、NAG水平变化情况;Pearson检验分析糖尿病早期肾损伤患者上述尿相关指标与血相关指标表达水平的相关性.结果:就诊时,试验组尿相关指标(LAP、α1-MG、NAG)、血相关指标(Cys C、β2-MG)显著高于对照组(P<0.05);治疗4周后试验组尿相关指标(LAP、α1-MG、NAG)显著低于就诊时;ROC曲线分析表明尿LAP(AUC=0.770,Cut-off值=15.32 U/L)、α1-MG(AUC=0.847,Cut-off值=5.90 mg/L)、NAG(AUC=0.819,Cut-off值=9.53 U/L)均对糖尿病患者早期肾损害有良好的诊断价值(P<0.05),其中α1-MG的诊断效能最佳;Pearson检验显示试验组就诊时尿LAP与血β2-MG水平呈显著正相关(r=0.315,P<0.05).结论:尿LAP、α1-MG、NAG在糖尿病早期肾损害中发挥重要作用,并对糖尿病患者早期肾损害具有良好的诊断效能和较高的临床应用价值.

摘要： 目的 探究类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者合并骨质疏松(osteoporosis,OP)的影响因素.方法 71例RA患者与31例健康人,分别收集不同组的个人资料、实验室检查、骨密度等,并计算出RA患者的DAS28-ESR结果,采用多因素Logistic回归分析RA合并OP发生的影响因素.结果 RA患者与健康人相比较骨密度测量值整体偏低,更易发生骨质疏松.多因素Logistic回归分析得出RA合并OP的独立危险因素是高龄、长病程、高滴度亮氨酸氨基肽酶、升高的DAS28-ESR(OR=1.153、1.096、1.177、5.421,P<0.05),差异有统计学意义(P<0.05).结论 RA患者如存在高龄、长病程、高级别疾病活动度等危险因素时,尤其患者体内存在高滴度的亮氨酸氨基肽酶时,应警惕该患者是否合并骨质疏松.

摘要： 目的探讨甲状腺功能亢进肝损害患者血清亮氨酸氨基肽酶(LAP)、γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平的变化,以分析3者联合检测对甲状腺功能亢进肝损害的诊断价值。方法回顾性分析江阴市第四人民医院2019年1月至2021年1月收治的120例确诊甲状腺功能亢进患者的临床资料,根据肝功能检查结果将患者分为甲状腺功能亢进无肝损害组(58例)与甲状腺功能亢进肝损害组(62例);另回顾性分析同期60例健康体检者的体检资料,将其作为对照组。比较3组受试者血清促甲状腺激素(TSH)、游离甲状腺素(FT_(4))、游离三碘甲状腺原氨酸(FT_(3))、LAP、γ-GT、ALT水平;分析LAP、γ-GT、ALT联合检测对甲状腺功能亢进肝损害的诊断效能。结果与对照组相比,甲状腺功能亢进肝损害组与甲状腺功能亢进无肝损害组患者血清FT_(4)、FT_(3)、LAP、γ-GT、ALT水平均显著升高,且甲状腺功能亢进肝损害组显著高于甲状腺功能亢进无肝损害组;血清TSH水平均显著降低,且甲状腺功能亢进肝损害组显著低于甲状腺功能亢进无肝损害组;血清LAP+γ-GT+ALT联合诊断对甲状腺功能亢进肝损害的灵敏度、准确度均显著高于血清LAP、γ-GT、ALT单独诊断,且阳性率显著高于ALT诊断;单一诊断中,血清γ-GT检测诊断甲状腺功能亢进肝损害的灵敏度与准确度均显著高于血清ALT(均P0.05)。结论甲状腺功能亢进患者血清FT_(4)、FT_(3)、γ-GT、ALT水平异常升高,且甲状腺功能亢进肝损害患者较甲状腺功能亢进无肝损害患者升高更为明显,对甲状腺功能亢进肝损害患者进行LAP、γ-GT、ALT指标联合检测有利于其早期诊断,以便于临床及时加以干预,控制病情进展。

摘要： 癌症是困扰人类健康的重要疾病,治疗癌症的相关药物研究也一直是科学研究的热点之一.本研究中,我们设计合成一种基于亮氨酸氨基肽酶(LAP)的抗癌前药分子的中间体CPT-Leu-OH,该化合物以L-亮氨酸残基基团作为后续LAP特异性触发药物释放的识别基团,以喜树碱(CPT)作为抗癌药物分子,同时在该化合物的结构上保留有易于修饰的活性基团-羟基,有利于后续引入各种荧光信号输出基团,最终设计合成了一种基于亮氨酸氨基肽酶的前药分子,为LAP相关癌症的诊疗提供新的方法参考.

摘要： 本申请实施例公开了一种亮氨酸氨基转肽酶检测试剂盒，涉及生物检测设备技术领域，具体为一种亮氨酸氨基转肽酶检测试剂盒，包括试剂盒，所述试剂盒的内部通过螺钉固定安装有固定底板，所述固定底板顶部的周侧固定安装有均匀分布的立板，所述立板的侧面活动安装有活动杆，且活动杆的一端固定安装有位于立板内部的夹板。该亮氨酸氨基转肽酶检测试剂盒，在对试剂瓶进行转运时，将试剂瓶卡进固定底板顶部的夹板内部，通过活动杆外部的第一压缩弹簧对夹板施加弹力，从而对夹板内部的试剂瓶进行固定，提高了试剂瓶转运时的稳定性，同时通过固定底板顶部伸缩杆外部的第二压缩弹簧对试剂瓶上下位置进行缓冲，防止试剂瓶撞击损坏。

摘要： 本发明公开了一种比率型亮氨酸氨基肽酶荧光探针及其制备方法和其在肝肿瘤细胞靶向成像中的应用。该比率型亮氨酸氨基肽酶荧光探针其结构式如式III所示：该比率型亮氨酸氨基肽酶荧光探针具有荧光量子产率高、比率计量型特点明显和可实现肝肿瘤细胞靶向成像等优点。该荧光探针被成功应用于肝肿瘤细胞亮氨酸氨基肽酶靶向成像，并取得了较好的应用效果。

摘要： 本发明涉及生物技术领域，具体公开了细粒棘球绦虫亮氨酸氨基肽酶在制备检测细粒棘球蚴病的免疫抗原和/或试剂盒中的应用，其作为免疫抗原能够被自然感染细粒棘球蚴病的绵羊阳性血清识别，应用于间接ELISA检测时，具备较高的特异性和敏感性，临床检测符合率高达97.9％。以细粒棘球绦虫亮氨酸氨基肽酶为免疫抗原建立的检测方法具有良好的诊断效果，可以用于疫区绵羊细粒棘球蚴病的初步筛选。

摘要： 本发明公开一种亮氨酸氨基肽酶质控品的制备方法，包括：采用健康人血清，冻融10‑15次，过滤，滤液pH值7.0～7.5；加入马来酸盐，混合均匀；然后加入刀豆球蛋白A，混合均匀；最终混合物中马来酸盐浓度为5～20mmol/L、刀豆球蛋白A的浓度为0.1～0.4g/L；向上述的混合溶液中加入氨基酸，聚乙二醇，牛血清白蛋白，防腐剂，混合均匀；所得的最终混合物中氨基酸10～100mmol/L、聚乙二醇1～10g/L、牛血清白蛋白1‑10g/L、防腐剂0.2‑0.5g/L；分装，冻干。本发明具有能保证LAP测定稳定性的优点。

摘要： 本发明提供了一种亮氨酸氨基肽酶荧光探针及其制备方法和应用，本发明提供了能快速检测亮氨酸氨基肽酶的发光型荧光探针，简称探针DCM‑LAP；本发明的DCM‑LAP荧光探针与LAP响应后，656nm处的荧光强度增强。本发明DCM‑LAP荧光探针可以通过共聚焦荧光显微镜检测活细胞的LAP，并进行荧光成像。本发明的DCM‑LAP荧光探针合成简单，产率较高，不仅能够对水溶液中LAP进行特异性和快速检测，还可实现肿瘤微环境中(乳腺癌)LAP的检测，具有一定的潜在实用价值。

摘要： 本发明属于小分子化学发光探针技术领域，具体为检测亮氨酸氨基肽酶(LAP)的化学发光探针及其合成方法与应用。本发明包括可被LAP特异性水解的氨基酸底物L‑Leu、1,2‑二氧杂环丁烷类化学发光团以及可自断裂的连接基团。本发明还公开了所述化学发光探针的合成方法和用途。本发明的化学发光探针可用于体内外对LAP的检测，包括细胞内、动物活体和组织、肝癌组织样本中LAP的检测和成像。本发明得到的化学发光探针，具有高灵敏度、信噪比的特点，是一项重要技术突破。本发明属于小分子化学发光探针技术领域，具体为检测亮氨酸氨基肽酶(LAP)的化学发光探针及其合成方法与应用。

摘要： 本发明提供了一种亮氨酸氨基肽酶的测定试剂盒，包括R1试剂和R2试剂，R1试剂包括：10～100mmol/L的两性离子缓冲液、1～10mmol/L的金属螯合剂、1～10g/L的非离子表面活性剂、10～100g/L的NaCl和0.1～1g/L的防腐剂；R2试剂包括：5～50mmol/L的柠檬酸盐缓冲液、0.5～5mmol/L金属螯合剂、8～40 mmol/L的L‑亮氨酰‑P‑硝基苯胺和0.1～1g/L的防腐剂。本发明提高了亮氨酸氨基肽酶的稳定性和选择性，试剂盒表现出良好的重复性和较宽的线性范围，表现出优异的抗干扰能力，能够满足临床上血、尿同测的需求。

摘要： 本发明公开了一种比率型亮氨酸氨基肽酶荧光探针及其制备方法和其在肝肿瘤细胞靶向成像中的应用。该比率型亮氨酸氨基肽酶荧光探针其结构式如式III所示：

摘要： 本发明公开了一种亮氨酸氨基肽酶检测试剂盒，包括R1试剂和R2试剂，所述R1试剂包括三羟基甲基甲烷缓冲液100‑200mmol/L、甘氨酸缓冲液200‑260mmol/L、聚羧基乙二醇氨基1.0‑‑5.0g/L、甲酰胺30‑50mmol/L、IgG1.5‑2g/L、山梨酸20‑30mmol/L，辣根过氧化物酶50‑70mmol/L、其余为去离子水；所述R2试剂包括L‑亮氨酸对硝基苯胺15mmol/L、甘氨酸缓冲液150‑180mmol/L、哌嗪‑N,N‑二(2‑乙磺酸)1‑5mmol/L，其余为去离子水；制成一种亮氨酸氨基肽酶检测试剂盒及其制备方法，其具有抗干扰能力强，同时具有稳定性高的效果。

摘要： 本发明公开了一种性能优异的亮氨酸氨基肽酶检测试剂盒，本试剂盒采用连续监测法检测血液中的亮氨酸氨基肽酶，属于临床体外检测试剂技术领域。本发明试剂盒仅包括试剂R。通过往试剂R中优先选择了B‑R缓冲液，试剂中加入了适量的聚乙二醇2万、N‑β‑羟基乙基乙二胺三乙酸、氯化钠、L‑亮氨酰‑2‑萘胺盐酸盐、Brom‑nitro‑dioxan(BND)、提高了试剂盒的稳定性，线性范围较好，试剂的准确度好，成本低等优点，本发明有利于在市场中进一步的推广使用。