N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶

摘要： 目的探究尿α1-微球蛋白(α1-MG)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶/尿肌酐(NAG/UCr)在慢性HBV感染相关肝病患者肾损伤中的临床价值。方法纳入2019年8月—2020年8月就诊于昆明医科大学第二附属医院的慢性HBV感染相关肝病患者85例,根据患者核苷(酸)类似物(NUC)治疗史,将患者分为NUC治疗组(n=57)和未经NUC治疗组(n=28),根据使用NUC种类,将患者分为ETV治疗组(n=32)和TDF治疗组(n=25);根据HBV血清抗原、抗体标志物检测结果,将患者分为HBeAg阴性组(n=57)和HBeAg阳性组(n=28);根据血清HBV DNA定量检测,将患者分为HBV DNA阴性组(n=47)和HBV DNA阳性组(n=38);根据腹部影像学检查结果,将患者分为非肝硬化组(n=47)和肝硬化组(n=38),收集纳入患者的病史资料及实验室指标,并进行组间比较。计量资料符合正态分布的两组间比较采用t检验;偏态分布两组间比较采用Mann-Whitney U检验。计数资料两组间比较采用χ^(2)检验。采用McNemar检验比较不同指标检测的优劣性。采用Spearman相关性分析探讨各因素与α1-MG、NAG/UCr之间的相关性。采用多元线性回归分析α1-MG、NAG/UCr的独立影响因素。结果未经NUC治疗组、HBeAg阳性组、HBV DNA阳性组的尿α1-MG水平分别较NUC治疗组(Z=-2.054,P=0.04)、HBeAg阴性组(Z=-2.293,P=0.022)、HBV DNA阴性组(Z=-2.229,P=0.026)明显升高。HBV DNA阳性组、肝硬化组的NAG、NAG/UCr水平分别较HBV DNA阴性组(Z值分别为-2.908、-2.824,P值均<0.05)、非肝硬化组(Z值分别为-3.204、-3.412,P值均<0.05)患者明显升高。α1-MG异常患者占比(31.8%)与eGFR异常占比(20.0%)相比较,二者差异有统计学意义(χ^(2)=7.178,P=0.007);α1-MG联合NAG/UCr检测异常占比(35.3%)较eGFR检测异常占比高,差异有统计学意义(χ^(2)=8.049,P=0.005)。α1-MG联合NAG/UCr检测与eGFR检测优劣性比较,差异有统计学意义(P=0.015)。年龄(β=0.246)、HBeAg阳性(β=0.284)、合并肝癌(β=0.291)是α1-MG升高的独立危险因素(P值均<0.05);FIB-4值升高(β=0.352)、合并腹水(β=0.260)、食管胃底静脉曲张(β=-0.248)、HBV DNA阳性(β=0.197)、高水平TBil(β=0.257)均是NAG/UCr升高的独立危险因素(P值均<0.05)。结论慢性HBV感染相关肝病患者的肾损伤可能发生在病毒复制活跃期、肝硬化以及肝脏功能恶化的整个病程进展中,使用NUC抗病毒治疗可以缓解HBV对肾功能的损伤,在一定治疗疗程内是安全可靠的;联合检测尿α1-MG、NAG/UCr诊断早期肾功能损伤较eGFR更具优势,是慢性HBV感染相关肝病患者更有效的肾功能监测方法。

摘要： 目的探讨尿肾损伤分子1(KIM-1)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)及尿微量白蛋白(MAU)水平对阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者急性肾损伤的预测价值。方法选择OSAHS患者137例,其中合并急性肾损伤59例(合并肾损伤组)、未合并急性肾损伤78例(单纯OSAHS组),同期选择体检健康的志愿者67例(健康对照组),采集所有研究对象入组当日清晨清洁中段尿液5 mL,离心留取上清,检测尿KIM-1、NAG及MAU。比较三组尿KIM-1、NAG及MAU水平,绘制尿KIM-1、NAG及MAU水平预测OSAHS患者发生急性肾损伤的受试者工作特征(ROC)曲线,分析尿KIM-1、NAG及MAU水平单独或联合对OSAHS患者急性肾损伤的预测价值。结果合并肾损伤组尿KIM-1、NAG及MAU水平均高于单纯OSAHS组和健康对照组,单纯OSAHS组尿KIM-1、NAG及MAU水平均高于健康对照组(P均0.05)。结论尿KIM-1、NAG及MAU水平对OSAHS患者急性肾损伤均具有一定预测价值,但三者联合时预测价值更高。

摘要： 目的:探讨妊娠期高血压疾病(HDP)孕妇肾损伤程度与尿液N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶(NAG)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、尿视黄醇结合蛋白(RBP)、微量白蛋白(mALB)的相关性。方法:选取2020年1月-2021年5月在本院就诊的HDP患者132例(观察组),其中妊娠期高血压44例,轻度子痫前期35例,重度子痫前期31例,子痫22例;正常妊娠孕妇100例为对照组。检测各组尿液NAG、NGAL、RBP、mALB水平,同时行肾脏彩超检查。结果:观察组尿液NAG、NGAL、RBP、mALB及血流参数加速时间(AT)(18.82±3.40U/L、36.60±8.11 g/L、3.16±0.82mg/L、67.83±19.29mg/L、88.95±12.21 ms)均高于对照组(9.15±1.43U/L、13.02±3.43 g/L、0.50±0.11mg/L、12.10±4.11mg/L、61.01±9.98ms)(P<0.05),而收缩期峰值流速(PSV)(25.58±4.02cm/s)、舒张末期流速(EDV)(12.10±2.43cm/s)和加速度(SA)(1.70±0.34m/s;)均低于对照组(40.42±5.17cm/s、17.43±3.06cm/s、3.50±0.60m/s;);观察组中子痫期患者尿液NAG、NGAL、RBP、mALB及血流参数AT高于其他亚组,PSV、EDV和SA低于其他亚组;观察组伴肾损伤患者NAG、NGAL、RBP、mALB及血流参数AT高于不伴肾损伤患者,而PSV、EDV和SA均低于不伴肾损伤患者(均P<0.05)。NAG、NGAL与PSV、EDV呈负相关,NAG、NGAL、RBP、mALB与AT呈正相关(均P<0.05)。结论:HDP患者尿液NAG、NGAL、RBP、mALB水平升高,并与患者疾病程度和肾损伤有关,与患者肾内动脉血流动力学有一定相关性。

摘要： 目的探讨尿α1-微球蛋白(α1-M)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)对脓毒症急性肾损伤的早期预测价值。方法采用回顾性临床研究方法,选择符合纳入标准的脓毒症/脓毒性休克患者共60例,根据脓毒症确诊7天内是否发生肾损伤,分为脓毒症肾损伤组(26例)和脓毒症非肾损伤组(34例)。收集并比较患者被确诊为脓毒症时的24 h内的尿α1-M、尿NAG、尿β2-微球蛋白(β2-M)、尿微量白蛋白(MA)、尿肌酐(UCr)、尿视黄醇结合蛋白(RBP)、血肌酐(SCr)的实验室结果。结果脓毒症肾损伤组与脓毒症非肾损伤组的尿α1-M、尿NAG、尿β2-M、尿MA、尿RBP、SCr之间差异均有统计学意义(P<0.05),这些指标用于预测脓毒症是否发生肾损伤的曲线下面积(AUC)分别为0.864、0.827、0.735、0.693、0.705、0.824;联合尿α1-M和尿NAG,AUC为0.916。结论尿α1-M、尿NAG对预测脓毒症发生急性肾损伤存在早期预测价值,比血肌酐更优越,且二者联合可进一步提高早期预测价值。

摘要： 为了探讨日本鳗鲡(Anguilla japonica)N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(EC3.2.1.52,NAGase)的分离纯化及其酶学性质,通过硫酸铵沉淀分级分离、Sephadex G-100分子筛凝胶柱层析和DEAE-32离子交换柱层析纯化NAGase,经聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和SDS-PAGE鉴定酶的纯度、测定酶蛋白亚基分子质量;以对-硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖为底物,研究NAGase催化反应的动力学参数,探讨其酶学性质。结果表明:日本鳗鲡肠道NAGase纯酶制剂比活力为2517.40 U/mg,酶蛋白亚基分子质量为69.98 kD,酶的最适pH、最适温度、米氏常数K_(m)和最大反应速度V_(max)分别为6.0、60°C、0.336 mmol/L和7.634μmol/(L·min);酶在pH 4.8—7.2较稳定,在温度60°C以下具有较好的热稳定性,在65°C以上酶迅速失活。Mg^(2+)、Ca^(2+)、Mn^(2+)、Cu^(2+)和Fe^(3+)对NAGase表现出不同程度的激活作用,Na^(+)、Li+和Ba^(2+)对酶活力几乎没有影响,Zn^(2+)、Fe^(2+)、Pb^(2+)和Hg^(2+)对酶活力有不同程度的抑制作用,Hg^(2+)对酶活力抑制作用最强,1.0μmol/L Hg^(2+)可使酶活力丧失83.69%。化学修饰法研究表明,精氨酸胍基不是日本鳗鲡NAGase的必需基团,而赖氨酸ԑ-氨基、半胱氨酸巯基、组氨酸咪唑基、丝氨酸羟基和色氨酸吲哚基是酶的必需基团,二硫键是NAGase活性所必需的。综上所述,实验采用的日本鳗鲡肠道NAGase分离纯化方案有效可行,酶活力易受环境中酸碱度、温度和金属离子的影响,且与其他不同动物来源的NAGase具有相似的必需基团。

摘要： 目的:探究尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶与尿肌酐比值(NAG/Crea)、转铁蛋白(TRF)检测在糖尿病肾病(DN)早期诊断中的应用价值.方法:选取我院2017-03～2020-06早期DN患者102例作为DN组,另选择同期单纯糖尿病(DM)患者102例作为单纯DM组.比较两组临床资料、尿NAG/Crea、TRF水平,评价尿NAG/Crea、TRF与临床指标相关性,分析DN发生的影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线评价尿NAG/Crea、TRF对早期DN的诊断价值.结果:两组DM病程、合并高血压、尿β2微球蛋白(β2-MG)、尿mAlb、血清Cys-C差异有统计学意义(P<0.05);DN组尿NAG/Crea、TRF高于单纯DM组(P<0.05);Pearson相关性分析,尿NAG/Crea(r=0.743、0.748、0.557)、TRF(r=0.524、0.633、0.409)与尿β2-MG、尿mAlb、血清Cys-C呈正相关(P<0.05);Lo-gistic回归分析,DM病程、合并高血压、尿β2-MG、尿mAlb、血清Cys-C、尿NAG/Crea、TRF是DN发生的重要影响因素(P<0.05);ROC曲线分析,将尿NAG/Crea、TRF进行Logistic二元回归拟合,返回预测概率Logit(P)作为独立检验变量,获取联合诊断AUC为0.878,95％CI为0.830～0.926,P<0.001,敏感度为76.47％,特异度为88.24％,优于两者单独诊断(P<0.05).结论:尿NAG/Crea、TRF是诊断早期DN的敏感因子,联合检测具有可靠诊断效能.

摘要： 目的 探讨血清同型半胱氨酸(Hcy)、尿转铁蛋白(TRF)、尿免疫球蛋白G(IgG)、尿α1微球蛋白(αlMG)和尿N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶(NAG)对2型糖尿病(T2DM)患者糖尿病肾病(DN)的早期诊断价值.方法 选择该院2015年1月至2019年9月收治的T2DM患者99例,根据尿微量清蛋白水平分为T2DM组(59例)、早期DN组(EDN组,21例)和DN组(19例);另收集同期该院体检中心体检健康者25例作为健康对照(NC)组.对T2DM组、EDN组、DN组临床表现、查体、糖尿病及其并发症发病情况,血清Hcy、尿TRF、IgG、α1MG、NAG及其影响因素进行回顾性分析,并与NC组进行比较.分析各组差异并绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线).结果 EDN组、DN组与T2DM组和NC组比较,血清Hcy、IgG、α1MG、TRF水平显著升高,DN组尿TRF水平较EDN组进一步升高,尿NAG水平仅在DN组升高.血清Hcy及尿NAG、IgG、α1MG、TRF的ROC曲线下面积(95％CI)、灵敏度和特异度分别为0.755(0.670?0.828)、65.00％、83.30％,0.654(0.555～0.744)、67.70％、66.20％,0.960(0.903?0.988)、83.80％、95.90％,0.792(0.702?0.865)、74.20％、78.30％,0.841(0.757?0.905)、67.70％、97.00％.尿液IgG和TRF 2个指标联合诊断的ROC 曲线下面积为0.968(0.914?0.993),诊断灵敏度为87.10％,特异度为93.20％.结论 血清Hcy及尿α1MG、NAG对DN有辅助诊断价值,尿TRF和IgG联合检测可提高DN的早期诊断效能.

摘要： 目的 探讨单侧输尿管结石梗阻合并肾积水患者不同时间段尿液中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)、尿微量蛋白(mALB)水平变化对同侧肾功能的影响程度及评估梗阻解除后肾功能恢复程度的临床价值.方法 选择该院2018年7月至2019年12月收治的单侧输尿管结石梗阻合并肾积水患者100例作为研究对象,依据发病时间不同将患者分为A、B两组.A组患者发病在1～3d、B组发病4～7d.患者均在行输尿管镜碎石取石术前1 d、术中及术后3 d采集尿液检测NAG、mALB水平,对比分析各组各时间段NAG、mALB水平变化情况.结果 A组术前1 d尿NAG水平与术中及术后3 d比较,差异均有统计学意义(P0.05);A组术前1 d尿mALB水平比术中、术后3 d更低(P<0.05);B组术前1 d尿mALB水平比术中、术后3 d更低(P<0.05);A组与B组术前1 d尿NAG水平比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 对于不同时段单侧输尿管梗阻合并肾积水所致梗阻侧肾损害、健侧肾功能代偿及梗阻解除后的肾损害恢复情况,可通过监测尿NAG、mALB水平进行动态反映.

摘要： 目的:探究尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶与尿肌酐比值(NAG/Crea)、转铁蛋白(TRF)检测在糖尿病肾病(DN)早期诊断中的应用价值。方法:选取我院2017-03~2020-06早期DN患者102例作为DN组,另选择同期单纯糖尿病(DM)患者102例作为单纯DM组。比较两组临床资料、尿NAG/Crea、TRF水平,评价尿NAG/Crea、TRF与临床指标相关性,分析DN发生的影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线评价尿NAG/Crea、TRF对早期DN的诊断价值。结果:两组DM病程、合并高血压、尿β2微球蛋白(β2-MG)、尿mAlb、血清Cys-C差异有统计学意义(P<0.05);DN组尿NAG/Crea、TRF高于单纯DM组(P<0.05);Pearson相关性分析,尿NAG/Crea(r=0.743、0.748、0.557)、TRF(r=0.524、0.633、0.409)与尿β2-MG、尿mAlb、血清Cys-C呈正相关(P<0.05);Logistic回归分析,DM病程、合并高血压、尿β2-MG、尿mAlb、血清Cys-C、尿NAG/Crea、TRF是DN发生的重要影响因素(P<0.05);ROC曲线分析,将尿NAG/Crea、TRF进行Logistic二元回归拟合,返回预测概率Logit(P)作为独立检验变量,获取联合诊断AUC为0.878,95%CI为0.830~0.926,P<0.001,敏感度为76.47%,特异度为88.24%,优于两者单独诊断(P<0.05)。结论:尿NAG/Crea、TRF是诊断早期DN的敏感因子,联合检测具有可靠诊断效能。

摘要： 目的:探究尿液亮氨酸氨基肽酶(LAP)、α1-微球蛋白(α1-MG)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)对糖尿病早期肾损害的诊断价值.方法:从2020年4-11月到本院就诊的2型糖尿病早期肾损害患者中随机选取56例纳入试验组,从2型糖尿病非肾损害患者中随机选取56例纳入对照组;比较两组就诊时尿相关指标(LAP、α1-MG、NAG)、血相关指标[胱抑素C(Cys C)、β2-微球蛋白(β2-MG)]水平;经ROC曲线分析尿相关指标(LAP、α1-MG、NAG)对糖尿病患者早期肾损害的诊断效能;比较试验组就诊时及治疗4周后尿LAP、α1-MG、NAG水平变化情况;Pearson检验分析糖尿病早期肾损伤患者上述尿相关指标与血相关指标表达水平的相关性.结果:就诊时,试验组尿相关指标(LAP、α1-MG、NAG)、血相关指标(Cys C、β2-MG)显著高于对照组(P<0.05);治疗4周后试验组尿相关指标(LAP、α1-MG、NAG)显著低于就诊时;ROC曲线分析表明尿LAP(AUC=0.770,Cut-off值=15.32 U/L)、α1-MG(AUC=0.847,Cut-off值=5.90 mg/L)、NAG(AUC=0.819,Cut-off值=9.53 U/L)均对糖尿病患者早期肾损害有良好的诊断价值(P<0.05),其中α1-MG的诊断效能最佳;Pearson检验显示试验组就诊时尿LAP与血β2-MG水平呈显著正相关(r=0.315,P<0.05).结论:尿LAP、α1-MG、NAG在糖尿病早期肾损害中发挥重要作用,并对糖尿病患者早期肾损害具有良好的诊断效能和较高的临床应用价值.

摘要： 一种检测N‑乙酰‑β‑D‑氨基葡萄糖苷酶的荧光探针及其应用，其属于生物医药技术领域。它可用于测定不同来源生物体系中N‑乙酰‑β‑D‑氨基葡萄糖苷酶的酶活性。以DDAG作为特异性探针反应底物，借助N‑乙酰‑β‑D‑氨基葡萄糖苷酶体外反应体系，以β‑葡萄糖醛酸苷水解反应为探针反应，通过定量检测单位时间内苷元代谢产物的生成量来测定各生物样品中N‑乙酰‑β‑D‑氨基葡萄糖苷酶的活性。本发明可用于不同个体来源人和动物组织样本、不同种属细胞及细胞制备物、以及各种植物和微生物中N‑乙酰‑β‑D‑氨基葡萄糖苷酶活性的定性、定量测定，并可实现对N‑乙酰‑β‑D‑氨基葡萄糖苷酶处置药物能力的评估，以及N‑乙酰‑β‑D‑氨基葡萄糖苷酶抑制剂的开发筛选。

摘要： 本发明公开了一种巴伦葛兹类芽孢杆菌β‑N‑乙酰氨基葡萄糖苷酶及其编码基因与应用。本发明提供的β‑N‑乙酰氨基葡萄糖苷酶PbNag39的酶学性质优异，对几丁二糖的比酶活为28.3U/mg，水解几丁寡糖的终产物均为N‑乙酰氨基葡萄糖。将该β‑N‑乙酰氨基葡萄糖苷酶与几丁质酶协同水解几丁质粉末，可高效制备得到N‑乙酰氨基葡萄糖。本发明的β‑N‑乙酰氨基葡萄糖苷酶具有比酶活高、热稳定性好和水解特性优异的特点，能在较广泛的pH范围内稳定并发挥催化作用，在几丁质转化中具有重要的应用价值。

摘要： 本发明涉及一种酶循环扩增法的N－乙酰－β－氨基葡萄糖苷酶诊断试剂盒，同时本发明还涉及测定N－乙酰－β－氨基葡萄糖苷酶活性浓度的方法原理、试剂的组成及成分，属于医学检验测定技术领域。本发明的试剂盒主要成分包括：缓冲液、苯基－β－乙酰氨基葡萄糖苷、儿茶酚氧化酶、还原型辅酶及稳定剂；通过将样品与试剂按一定的体积比混合，使之发生一系列的酶(偶)促反应，再将反应物置于紫外/可见光分析仪下，检测主波长340nm处吸光度下降的速度大小，从而测算出N－乙酰－β－氨基葡萄糖苷酶的活性浓度。采用本发明完全可以通过紫外/可见光分析仪器得出所需的测定结果。

摘要： 本发明涉及一种N－乙酰－β－氨基葡萄糖苷酶诊断试剂盒，同时本发明还涉及测定N－乙酰－β－氨基葡萄糖苷酶活性的方法原理、试剂的组成及成分，属于医学检验测定技术领域。本发明的试剂盒主要成分包括：缓冲液、间甲酚磺酰二甲酸厄吲基－β－乙酰氨基葡萄糖苷及稳定剂；通过将样品与试剂按一定的体积比混合，使之发生一系列的酶促反应，再将反应物置于可见光分析仪下，检测主波长580nm处吸光度上升的速度，从而测算出N－乙酰－β－氨基葡萄糖苷酶的活性大小。采用本发明完全可以通过可见光分析仪器得出所需的测定结果，便于推广应用。

摘要： 本发明涉及一种N－乙酰－β－氨基葡萄糖苷酶诊断试剂盒，同时本发明还涉及测定N－乙酰－β－氨基葡萄糖苷酶活性的方法原理、试剂的组成及成分，属于医学检验测定技术领域。本发明的试剂盒主要成分包括：缓冲液、苯基－β－乙酰氨基葡萄糖苷、过氧化氢、过氧化物酶、还原型色原、稳定剂及抗干扰剂；通过一系列的酶促反应，最终将无色的还原型色原氧化成有色的染料，从而可以通过可见光分析仪器，在505nm波长处，测定染料含量的高低，进而直接反映出N－乙酰－β－氨基葡萄糖苷酶活性的大小。

摘要： 本发明公开了一种多肽——N－乙酰氨基葡萄糖－1－磷酸二酯－N－乙酰氨基葡萄糖苷酶－15.84，编码此多肽的多核苷酸和经DNA重组技术产生这种多肽的方法。本发明还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如恶性肿瘤，血液病，HIV感染和免疫性疾病和各类炎症等。本发明还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明还公开了编码这种新的N－乙酰氨基葡萄糖－1－磷酸二酯－N－乙酰氨基葡萄糖苷酶－15.84的多核苷酸的用途。

摘要： 一种用于检测N‑乙酰‑β‑D氨基葡萄糖苷酶的试剂，所述检测试剂由R1和R2组成。所述试剂R1为：缓冲液，VRA‑NAG，BSA，氯化镁，EDTA·2Na，Trixon‑X100，SDS，亚硫酸钠，聚乙二醇6000，乙二醇，葡萄糖，β环糊精，冠18醚，防腐剂；试剂R2中含有缓冲液，吐温20，尿素，BSA，防腐剂。本发明首次使用镁离子作为底物螯合剂，镁离子与具有环状结构的VRA‑NAG螯和形成六原子环的螯合物，增强了试剂的稳定性。

摘要： 本发明公开了一种β‑N‑乙酰氨基葡萄糖苷酶159及其克隆表达与应用。通过基因工程手段将β‑N‑乙酰氨基葡萄糖苷酶159的基因构建在质粒pET‑28a(+)上，并转入E.coli BL21(DE3)中表达，该重组酶分子量大小为92kDa，通过对比分析，β‑N‑乙酰氨基葡萄糖苷酶159属于糖苷水解酶GH20家族。对该重组酶进行酶学性质研究表明，纯酶的比活力为16.67 U/mg，其最适温度为40°C，最适pH为9.0，在pH高于7的条件下能保持高于80%的酶活，与其他几丁质酶协同作用时，β‑N‑乙酰氨基葡萄糖苷酶159表现出较高的pH稳定性和协同效应,为高效制备N‑乙酰氨基葡萄糖提供了理论基础。

摘要： 本发明公开了一种N‑乙酰氨基葡萄糖苷酶检测试纸及其制备方法，所述N‑乙酰氨基葡萄糖苷酶检测试纸包括滤纸、底物、显色剂、无机盐溶液、稳定剂和反应促进剂，所述滤纸为棉纤维滤纸，将底物溶解于浓度为0.05M‑3M的无机盐溶液，并加入10g/L‑50g/L稳定剂、10g/L‑50g/L反应促进剂、1g/L‑15g/L显色剂形成N‑乙酰氨基葡萄糖苷酶溶液；将浸入所述N‑乙酰氨基葡萄糖苷酶溶液的滤纸进行沥干和转动流匀，并利用电热鼓风干燥箱对平铺在干燥托板上的所述滤纸进行烘干、裁剪和密封保存，得到N‑乙酰氨基葡萄糖苷酶检测试纸，制备工艺简单、检测速度快、成本低，便于扩大试纸的使用范围。

摘要： 一种N‑乙酰‑β‑D‑氨基葡萄糖苷酶的检测试剂，是由试剂R1和试剂R2组成，所述试剂R1为：柠檬酸缓冲液10～100mmol/L、底物0.1～0.3g/L、抗坏血酸氧化酶1KU/L～5KU/L、氯化镁0.01～0.03g/L、稳定剂1～10g/L、防腐剂2g/L‑5g/L；所述试剂R2为碳酸钠缓冲液10～100mmol/L、曲拉通X‑100是3mL/L～5mL/L、防腐剂2g/L～5g/L。所述柠檬酸缓冲液为25°C，pH为4～5的柠檬酸缓冲液。所述底物为5‑[4‑(3‑甲氧基‑苯甲烯‑绕丹宁)]‑3‑乙酸铵‑N‑乙酰氨基‑β‑D‑葡萄糖苷。所述稳定剂选自EDTA、EDTA‑2Na、乙二醇、亚氨基二乙酸中的一种。所述防腐剂选自NaN3、对羟基苯甲酸甲酯、4‑氯‑3,5‑二甲基苯酚中的一种。本发明以人工合成物5‑(4‑(3‑甲基‑苯乙烯)‑绕丹‑3‑乙酸氨基‑N‑乙酰氨基‑β‑D‑葡萄糖苷作为反应底物，这种底物成本相对低廉，反应生成物显色能力强，提高了试剂的灵敏度。