布鲁杆菌属

摘要： 目的了解内蒙古自治区呼伦贝尔地区羊种1型、3型布鲁菌感染致病后患者的临床特征。方法采用回顾性分析方法,收集2013年6月至2017年8月呼伦贝尔市人民医院收治的布鲁菌病患者的临床病历资料,选取其中血液细菌培养为布鲁菌阳性且经聚合酶链式反应(PCR)和AMOS-PCR方法进行菌种菌型鉴定的71例患者作为研究对象,根据鉴定结果分为羊种1型和羊种3型两组。比较两组患者的一般资料、流行病学特征、临床特征、实验室检查、并发症以及疗效情况。结果71例布鲁菌病患者中,羊种1型22例,其中男性16例、女性6例,年龄为(39.91±16.04)岁;羊种3型49例,其中男性34例、女性15例,年龄为(40.67±18.72)岁。两组间性别构成、年龄比较,差异均无统计学意义(χ^2=0.081,t=0.166,P均>0.05)。羊种1型患者生活在农区10例(45.5%)、牧区10例(45.5%)、城市2例(9.1%),羊种3型患者生活在农区40例(81.6%)、牧区7例(14.3%)、城市2例(4.1%),地区分布比较差异有统计学意义(χ^2=9.276,P0.05)。两组患者出现白细胞计数(WBC)、血小板计数(PLT)减少,红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)升高情况比较,差异均无统计学意义(P均>0.05)。羊种1型、3型患者发生并发症例数分别为12例(54.5%)、14例(28.6%),组间比较差异有统计学意义(χ^2=4.413,P<0.05)。羊种1型患者治愈10例(45.5%)、好转12例(54.5%),羊种3型患者治愈34例(69.4%)、好转15例(30.6%),两组均无无效及复发患者,组间疗效比较差异有统计学意义(χ^2=3.690,P<0.05)。结论内蒙古自治区呼伦贝尔地区羊种1型、3型患者生活地区有差异,羊种1型患者易出现睾丸肿痛症状和布鲁菌病并发症。

摘要： 目的 了解内蒙古自治区呼伦贝尔地区羊种1型、3型布鲁菌感染致病后患者的临床特征.方法 采用回顾性分析方法,收集2013年6月至2017年8月呼伦贝尔市人民医院收治的布鲁菌病患者的临床病历资料,选取其中血液细菌培养为布鲁菌阳性且经聚合酶链式反应(PCR)和AMOS-PCR方法进行菌种菌型鉴定的71例患者作为研究对象,根据鉴定结果分为羊种1型和羊种3型两组.比较两组患者的一般资料、流行病学特征、临床特征、实验室检查、并发症以及疗效情况.结果 71例布鲁菌病患者中,羊种1型22例,其中男性16例、女性6例,年龄为(39.91±16.04)岁;羊种3型49例,其中男性34例、女性15例,年龄为(40.67±18.72)岁.两组间性别构成、年龄比较,差异均无统计学意义(x2 = 0.081,t = 0.166,P均＞0.05).羊种1型患者生活在农区10例(45.5％)、牧区10例(45.5％)、城市2例(9.1％),羊种3型患者生活在农区40例(81.6％)、牧区7例(14.3％)、城市2例(4.1％),地区分布比较差异有统计学意义(x2 = 9.276,P＜0.05).羊种1型、3型患者出现睾丸肿痛症状比例[22.7％(5/22)、6.1％(3/49)]比较,差异有统计学意义(x2 = 4.187,P＜0.05);其他临床特征比较,差异均无统计学意义(P均＞0.05).两组患者出现白细胞计数(WBC)、血小板计数(PLT)减少,红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)升高情况比较,差异均无统计学意义(P均＞0.05).羊种1型、3型患者发生并发症例数分别为12例(54.5％)、14例(28.6％),组间比较差异有统计学意义(x2 = 4.413,P＜ 0.05).羊种1型患者治愈10例(45.5％)、好转12例(54.5％),羊种3型患者治愈34例(69.4％)、好转15例(30.6％),两组均无无效及复发患者,组间疗效比较差异有统计学意义(x2 = 3.690,P＜ 0.05).结论 内蒙古自治区呼伦贝尔地区羊种1型、3型患者生活地区有差异,羊种1型患者易出现睾丸肿痛症状和布鲁菌病并发症.

摘要： 目的观察布鲁菌外膜蛋白(OMP)16脂化型(L16)和非脂化型(U16)对成骨细胞的毒力效应。方法利用大肠埃希菌BL21(DE3)原核表达系统制备L16和U16重组蛋白,并使用镍柱纯化。采用成组设计,利用小鼠成骨细胞系(MC3T3细胞)分别与L16和U16重组蛋白共孵育(L16、U16刺激组),以布鲁菌脂多糖(LPS)刺激物为阳性对照(LPS对照组),未加任何刺激的细胞作为阴性对照,孵育时间为24 h。CCK-8法检测MC3T3细胞的活力;离心收集培养细胞上清,生物发光法测定上清中乳酸脱氢酶(LDH)的释放率,评价L16和U16对MC3T3细胞的毒力作用;进一步使用AnnexinⅤ-PE/7-AAD双染流式细胞术检测MC3T3细胞的凋亡率,以及通过免疫印迹法(WB)检测凋亡执行蛋白Caspase-3的活化水平。结果L16刺激组细胞活力[(56.16±1.63)%]显著低于U16刺激组和LPS对照组[(97.02±1.44)%、(98.64±0.90)%,P均<0.01],LDH释放率[(84.64±0.96)%]显著高于U16刺激组和LPS对照组[(34.82±3.41)%、(26.75±1.95)%,P均<0.01]。AnnexinⅤ-PE/7-AAD染色结果显示,L16刺激组细胞凋亡率为(46.45±2.19)%,而其余组均<1%。WB结果显示,L16刺激组细胞内存在活化的Caspase-3,而U16刺激组和LPS对照组未检测到此活化片段。结论L16能诱导成骨细胞的凋亡,使成骨细胞的增殖受到抑制,而U16的作用不明显,具备完整脂化结构的布鲁菌L16是毒力效应所必需的。

摘要： cqvip:布鲁氏菌是需氧革兰阴性菌的一个属,为人畜共患病病原体[1]。人体直接接触布鲁氏菌感染动物后可被感染而发生布鲁氏菌病;布鲁氏菌感染血管壁局部可形成动脉瘤[2-3],所致主动脉瘤最常见于腹主动脉,其次为升主动脉、降主动脉及髂动脉。动脉瘤腔内修复术(endovascular aneurysm repair,EVAR)是目前治疗动脉瘤的首选方法[4]。本研究观察EVAR联合抗生素治疗4例布鲁氏菌感染性动脉瘤的效果。

摘要： 目的 观察布鲁菌外膜蛋白(OMP) 16脂化型(L16)和非脂化型(U16)对成骨细胞的毒力效应.方法 利用大肠埃希菌BL21 (DE3)原核表达系统制备L16和U16重组蛋白,并使用镍柱纯化.采用成组设计,利用小鼠成骨细胞系(MC3T3细胞)分别与L16和U16重组蛋白共孵育(L16、U16刺激组),以布鲁菌脂多糖(LPS)刺激物为阳性对照(LPS对照组),未加任何刺激的细胞作为阴性对照,孵育时间为24 h.CCK-8法检测MC3T3细胞的活力;离心收集培养细胞上清,生物发光法测定上清中乳酸脱氢酶(LDH)的释放率,评价L16和U16对MC3T3细胞的毒力作用;进一步使用Annexin V-PE/7-AAD双染流式细胞术检测MC3T3细胞的凋亡率,以及通过免疫印迹法(WB)检测凋亡执行蛋白Caspase-3的活化水平.结果 L16刺激组细胞活力[(56.16±1.63)％]显著低于U16刺激组和LPS对照组[(97.02±1.44)％、(98.64±0.90)％,P均＜0.01],LDH释放率[(84.64±0.96)％]显著高于U16刺激组和LPS对照组[(34.82±3.41)％、(26.75±1.95)％,P均＜0.01].Annexin V-PE/7-AAD染色结果显示,L16刺激组细胞凋亡率为(46.45±2.19)％,而其余组均＜1％.WB结果显示,L16刺激组细胞内存在活化的Caspase-3,而U16刺激组和LPS对照组未检测到此活化片段.结论 L16能诱导成骨细胞的凋亡,使成骨细胞的增殖受到抑制,而U16的作用不明显,具备完整脂化结构的布鲁菌L16是毒力效应所必需的.

摘要： 目的了解非布鲁菌病疫区江苏省连云港市布鲁菌分离株的基因分型特征。方法对2018年连云港市第一人民医院临床微生物室血培养分离的13株疑似布鲁菌菌株进行初步鉴定;同时,采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测布鲁菌特异性基因bcsp31和插入序列IS-711,对鉴定结果进行复核和分型。运用多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)进行基因分型,测序结果用Mega 4.0软件进行编辑。结果13株分离株经初步鉴定均为布鲁菌属。经Real-time PCR检测,13株分离株均为羊种布鲁菌。MLVA结果显示,13株羊种布鲁菌分为12个基因型,且聚类在"中地中海簇"中。13株羊种布鲁菌中有3株生物1型、2株生物2型和8株生物3型。结论连云港市分离的布鲁菌菌株均为羊种布鲁菌,MLVA聚类在"中地中海簇"中。

摘要： 目的利用布鲁菌Omp31的单克隆抗体,初步建立布鲁菌抗原流式细胞术(FCM)检测方法,分析该方法在人布鲁菌病(简称布病)临床样本检测中的价值。方法牛种布鲁菌2308、104M、S19,羊种布鲁菌M5-90和猪种布鲁菌S2共5个菌株,经超声破碎,获得其菌液上清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法和蛋白免疫印迹法(Western blot),检测已制备的抗布鲁菌Omp31单克隆抗体5H3对上述5个菌株的识别能力。构建Omp31重组真核表达载体(pcDNA3.1-Omp31)并转染人胚肾细胞(293FT细胞),Western blot检测Omp31蛋白的表达。羊种布鲁菌弱毒疫苗株M5-90侵染人急性单核细胞白血病细胞系(THP-1细胞),构建含菌单核吞噬细胞。将5H3抗体用异硫氰酸荧光素(FITC)或藻红蛋白(PE)标记,采用FCM,利用FITC-5H3抗体检测pcDNA3.1-Omp31转染293FT细胞和含菌单核吞噬细胞,鉴定该抗体对细胞内布鲁菌抗原的识别能力,初步建立FCM的检测方法,并测定FITC-5H3抗体在FCM中的灵敏度。利用双抗体(PE-5H3和FITC-CD14)的流式细胞染色测定人外周血单个核细胞(PBMCs),分析该方法应用于人布病临床检测的可行性。结果抗布鲁菌Omp31单克隆抗体5H3不仅能识别羊种布鲁菌M5-90菌株和猪种布鲁菌S2菌株,还能识别缺失Omp31基因的牛种布鲁菌2308、104M、S19菌株。FITC-5H3抗体可用于流式细胞染色识别细胞内的布鲁菌抗原,表达Omp31的293FT阳性细胞比例约为59.3%,疫苗株M5-90侵染的THP-1阳性细胞比例约为6.2%,检测293FT阳性转染细胞的灵敏度为4%。初步建立了基于PE-5H3和FITC-CD14的双抗体染色的FCM检测方法,该方法检测布病患者PBMCs中的双抗体阳性细胞比例(1.93%)高于健康人群(<0.30%,阴性)。结论利用FCM,初步建立了荧光素标记抗布鲁菌Omp31单克隆抗体5H3检测细胞内布鲁菌抗原的方法,并发现5H3抗体能识别牛种布鲁菌,弥补了布鲁菌抗原检测中Omp31的应用缺陷。此方法的建立为布病病原学检测方法的研究提供了新策略,为检测试剂的开发提供了新材料。

摘要： 目的 了解非布鲁菌病疫区江苏省连云港市布鲁菌分离株的基因分型特征.方法 对2018年连云港市第一人民医院临床微生物室血培养分离的13株疑似布鲁菌菌株进行初步鉴定;同时,采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测布鲁菌特异性基因bcsp31和插入序列IS-711,对鉴定结果进行复核和分型.运用多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)进行基因分型,测序结果用Mega 4.0软件进行编辑.结果 13株分离株经初步鉴定均为布鲁菌属.经Real-time PCR检测,13株分离株均为羊种布鲁菌.MLVA结果显示,13株羊种布鲁菌分为12个基因型,且聚类在“中地中海簇”中.13株羊种布鲁菌中有3株生物1型、2株生物2型和8株生物3型.结论 连云港市分离的布鲁菌菌株均为羊种布鲁菌,MLVA聚类在“中地中海簇”中.

摘要： 目的 利用布鲁菌Omp31的单克隆抗体,初步建立布鲁菌抗原流式细胞术(FCM)检测方法,分析该方法在人布鲁菌病(简称布病)临床样本检测中的价值.方法 牛种布鲁菌2308、104M、S19,羊种布鲁菌M5-90和猪种布鲁菌S2共5个菌株,经超声破碎,获得其菌液上清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法和蛋白免疫印迹法(Western blot),检测已制备的抗布鲁菌Omp31单克隆抗体5H3对上述5个菌株的识别能力.构建Omp31重组真核表达载体(pcDNA3.1-Omp31)并转染人胚肾细胞(293FT细胞),Western blot检测Omp31蛋白的表达.羊种布鲁菌弱毒疫苗株M5-90侵染人急性单核细胞白血病细胞系(THp-1细胞),构建含菌单核吞噬细胞.将5H3抗体用异硫氰酸荧光素(FITC)或藻红蛋白(PE)标记,采用FCM,利用FTTC-5H3抗体检测pcDNA3.1-Omp31转染293FT细胞和含菌单核吞噬细胞,鉴定该抗体对细胞内布鲁菌抗原的识别能力,初步建立FCM的检测方法,并测定FITC-5H3抗体在FCM中的灵敏度.利用双抗体(PE-5H3和FITC-CD14)的流式细胞染色测定人外周血单个核细胞(PBMCs),分析该方法应用于人布病临床检测的可行性.结果 抗布鲁菌Omp31单克隆抗体5H3不仅能识别羊种布鲁菌M5-90菌株和猪种布鲁菌S2菌株,还能识别缺失Omp31基因的牛种布鲁菌2308、104M、S19菌株.FITC-5H3抗体可用于流式细胞染色识别细胞内的布鲁菌抗原,表达Omp31的293FT阳性细胞比例约为59.3％,疫苗株M5-90侵染的THP-1阳性细胞比例约为6.2％,检测293FT阳性转染细胞的灵敏度为4％.初步建立了基于PE-5H3和FITC-CD14的双抗体染色的FCM检测方法,该方法检测布病患者PBMCs中的双抗体阳性细胞比例(1.93％)高于健康人群(＜0.30％,阴性).结论 利用FCM,初步建立了荧光素标记抗布鲁菌Omp31单克隆抗体5H3检测细胞内布鲁菌抗原的方法,并发现5H3抗体能识别牛种布鲁菌,弥补了布鲁菌抗原检测中Omp31的应用缺陷.此方法的建立为布病病原学检测方法的研究提供了新策略,为检测试剂的开发提供了新材料.

摘要： 本发明公开了一种检测结核性分枝杆菌(M.tuberculosis)和分枝杆菌属的组合物，其包含：(i)靶向结核性分枝杆菌特异性基因(IS6110)的引物和/或探针；和(ii)靶向分枝杆菌属特异性基因(内部转录间隔区(ITS))的引物和/或探针；和非必需地，(iii)靶向作为内对照的源自植物的基因的引物和/或探针。当使用所述组合物进行实时多重聚合酶链式反应时，可以通过单个反应检测非结核性分枝杆菌和分枝杆菌属，因此可以以高可靠性快速且容易地实现临床诊断。

摘要： 本发明的课题在于提供一种家畜用饲料或家畜用补充剂、乳杆菌属细菌的生长促进剂及乳杆菌属细菌的生长促进方法，所述家畜用饲料或家畜用补充剂未从外部供给细菌而改善家畜的肠内环境、更具体而言能够增加乳杆菌属细菌在肠内细菌中的构成比例。根据本发明，提供一种家畜用饲料或家畜用补充剂，其含有五层龙属植物、五层龙属植物萃取物及五层龙属植物粉碎物的至少一种，且为了家畜中的乳杆菌属细菌的生长促进而使用。

摘要： 本发明提供一种适于醋酸杆菌属和葡萄糖杆菌属的检测培养基，所提供的培养基中的检测的功能性成分为酵母膏、葡萄糖、无机盐、乙醇和放线菌酮。本发明培养基的组分在检测醋酸杆菌属和葡萄糖杆菌属菌落时呈现特征红色，提高分离鉴别的效果。而且本发明添加氯化钠、磷酸氢二钾、硫酸镁作为鉴别培养基的成分，缩短醋酸杆菌属和葡萄糖杆菌属菌落呈色时间，提高分离鉴别的效率。本发明添加碳酸钙作为鉴别培养基的成分，可用于高产乙酸的醋酸杆菌属和葡萄糖杆菌属分离鉴别，适用于食醋、醋酸行业。

摘要： 本发明提供一对扩增硫化杆菌属16S rRNA基因的引物以及实时PCR定量检测环境中硫化杆菌属(Sulfobacillus)的方法。所述的引物对包括：正向引物的序列是5’-GAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’，反向引物的序列是5’-TTCGTCCCGACAGACAGAG-3’。与传统方法相比，本方法具有时间短、通量大、工作量小、可靠性高的优点，从样品的处理到定量检测环境中硫化杆菌属(Sulfobacillus)的时间缩短至4小时，而且由于是一种起始检测法，检测结果更加准确。

摘要： 本发明公开了一种检测结核性分枝杆菌(M.tuberculosis)和分枝杆菌属的组合物，其包含：(i)靶向结核性分枝杆菌特异性基因(IS6110)的引物和/或探针；和(ii)靶向分枝杆菌属特异性基因(内部转录间隔区(ITS))的引物和/或探针；和非必需地，(iii)靶向作为内对照的源自植物的基因的引物和/或探针。当使用所述组合物进行实时多重聚合酶链式反应时，可以通过单个反应检测非结核性分枝杆菌和分枝杆菌属，因此可以以高可靠性快速且容易地实现临床诊断。

摘要： 本发明提供一种用于检测结核分枝杆菌复合群或分枝杆菌属的组合物，其包含：(i)靶向IS6110的引物和/或探针，所述IS6110为结核分枝杆菌复合群-特异性基因；(ii)靶向rpoB的引物和/或探针，所述rpoB为分枝杆菌属-特异性基因；和视需要的(iii)作为内对照的靶向植物源基因的引物和/或探针。当使用本发明的组合物进行多重实时PCR时，可以通过单轮PCR测定检测结核分枝杆菌复合群和分枝杆菌属。因此，本发明实现了具有高可靠性的快速且容易的临床诊断。

摘要： 本发明涉及包含作为活细胞或其细胞质提取物的属于芽孢杆菌属物种(Bacillus sp.)、乳杆菌属物种(Lactobacillus sp.)和任选地还有片球菌属物种(Pediococcus sp.)的益生菌菌株以及蛋白酶的制剂，以及其用于在人中和在食品生产期间的安全的麸质降解的用途。

摘要： 本发明的课题在于提供一种家畜用饲料或家畜用补充剂、乳杆菌属细菌的生长促进剂及乳杆菌属细菌的生长促进方法，所述家畜用饲料或家畜用补充剂未从外部供给细菌而改善家畜的肠内环境、更具体而言能够增加乳杆菌属细菌在肠内细菌中的构成比例。根据本发明，提供一种家畜用饲料或家畜用补充剂，其含有五层龙属植物、五层龙属植物萃取物及五层龙属植物粉碎物的至少一种，且为了家畜中的乳杆菌属细菌的生长促进而使用。

摘要： 本文披露的是来自类芽孢杆菌属(Paenibacillus)物种或芽孢杆菌属(Bacillus)物种的甘露聚糖酶、编码所述甘露聚糖酶的多核苷酸、含有所述甘露聚糖酶的组合物、以及使用其的方法。含有甘露聚糖酶的组合物适合于用作洗涤剂和用于清洁织物和硬表面，以及用于各种其他工业应用中。

摘要： 本发明提供一种适于醋酸杆菌属和葡萄糖杆菌属的检测培养基，所提供的培养基中的检测的功能性成分为酵母膏、葡萄糖、无机盐、乙醇和放线菌酮。本发明培养基的组分在检测醋酸杆菌属和葡萄糖杆菌属菌落时呈现特征红色，提高分离鉴别的效果。而且本发明添加氯化钠、磷酸氢二钾、硫酸镁作为鉴别培养基的成分，缩短醋酸杆菌属和葡萄糖杆菌属菌落呈色时间，提高分离鉴别的效率。本发明添加碳酸钙作为鉴别培养基的成分，可用于高产乙酸的醋酸杆菌属和葡萄糖杆菌属分离鉴别，适用于食醋、醋酸行业。