LL-37

摘要： 固有免疫系统是微生物入侵宿主的第一道防线,对于人类身体的生存和健康至关重要。抗菌肽是人体固有免疫的重要组成部分之一。LL-37是人类唯一一个Cathelicidins家族的抗菌肽,由37个氨基酸残基组成的两亲性螺旋肽,已被证明具有广谱的抗菌活性。本文重点归纳总结LL-37的抗菌和免疫调节活性,以及细菌和真菌对其产生抗性的研究进展。

摘要： 为探究抗菌肽LL-37对猪链球菌(SS)的体外抑菌作用,本研究通过化学合成法制备抗菌肽LL-37,测定其对猪链球菌2型(SS2)的最低抑菌浓度(MIC),结果显示LL-37对4株SS2临床分离株的MIC值为4μmol/L~8μmol/L,抑菌效果良好;绘制SS2在1μmol/L LL-37条件下的生长曲线,结果显示1μmol/L LL-37即可对SS2的增殖有抑制作用;通过杀菌试验分析LL-37对SS2的杀菌活性,结果显示4μmol/L LL-37能完全杀灭SS2;借助激光共聚焦显微镜(CLSM)评价LL-37对SS2的杀伤作用,结果显示LL-37能够破坏和杀伤SS2的膜结构;使用透射电镜观察LL-37作用后SS2细胞形态的变化情况,结果显示LL-37能使SS2膜结构破坏、内容物流出;采用96孔板微量法检测LL-37对SS2生物被膜(BF)形成的抑制作用,结果显示LL-37能抑制SS2 BF的生成,抑制效果随剂量增加而增强。本研究明确了抗菌肽LL-37对SS2具有抑菌和杀菌作用,进一步利用激光共聚焦显微镜和透射电镜证实了抗菌肽LL-37通过作用于BF对SS2发挥抑菌和杀菌作用的方式,为抗链球菌感染和促进LL-37的临床应用提供了实验依据。

摘要： 目的 探讨支气管扩张症患者的外周血和支气管肺泡灌洗液(BALF)中的抗菌肽LL-37水平与疾病严重程度的关系.方法 154例支气管扩张症患者通过计算支气管扩张严重程度指数(BSI)分为轻度组(54例)、中度组(33例)及重度组(67例).测定上述患者外周血和支气管BALF中的LL-37水平.结果 3组体质量指数、既往1年急性加重次数、改良英国医学研究委员会呼吸困难量表评分、用力肺活量占预计值百分比及HRCT评分差异均有统计学意义(均P＜ 0.05).3组BALF中LL-37水平差异有统计学意义(P＜0.05),BALF中LL-37水平与BSI评分呈正相关(r=0.32,P＜0.05).结论 支气管BALF中的LL-37水平与支气管扩张症疾病严重程度呈正相关.

摘要： 目的:探讨质粒编码的分泌蛋白Pgp3在沙眼衣原体(Ct)感染宿主过程中的作用及机制,为防治Ct引起的泌尿生殖道感染提供实验依据.方法:构建pGEX-6p/Pgp3原核表达重组质粒并转化XL1-Blue大肠杆菌,IPTG诱导表达GST-Pgp3融合蛋白,融合蛋白经亲和层析纯化及GST标签切割后制备Pgp3蛋白.将抗菌肽LL37和Pgp3蛋白共同孵育Ct后感染HeLa细胞,间接免疫荧光技术检测不同处理组Ct包涵体数量.GST pull-down法研究Pgp3与LL37的作用方式及Pgp3的活性片段.结果:LL37与Ct内原体(EB)孵育后感染HeLa细胞,感染率从50％降至10％,不同浓度Pgp3与LL37预先孵育后处理Ct EB再感染HeLa细胞,感染率较LL37组显著升高(P<0.05),且具有剂量依赖性.GST pull-down实验结果显示,LL37可与Pgp3结合,且结合部位位于Pgp3中间段(67～132 aa).结论:Pgp3在Ct感染宿主过程中通过与人类抗菌肽LL37结合,抑制LL37对Ct的杀伤作用,导致Ct感染.

摘要： 目的 探究牙周炎合并2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者龈沟液中抗菌肽人-β-防御素-2(human beta-defensin-2,HBD-2)和LL-37的水平变化规律及其与牙周临床指标的相关性.方法 选取于深圳市慢性病防治中心口腔科和内科就诊的中老年人(45至85岁)为研究对象,分为全身健康并牙周健康对照组22人、全身健康牙周炎组19人、T2DM牙周健康组15人、T2DM合并牙周炎组21人.采用佛罗里达牙周探针进行牙周检查,记录受试者牙周临床指标,包括探诊深度(probing depth,PD)、附着水平(attachment level,CAL)和探诊出血(probing bleeding,BOP).采用酶联免疫吸附法检测龈沟液中抗菌肽HBD-2、LL-37浓度,比较组间抗菌肽HBD-2、抗菌肽LL-37及牙周临床指标间的差异,并进行相关性分析.结果 T2DM合并牙周炎组的PD值大于全身健康牙周炎组(P0.05).结论 中老年T2DM牙周炎患者龈沟液抗菌肽HBD-2、LL-37水平较低,与牙周临床指标PD、CAL无显著相关性.

摘要： 目的 探讨β-连环蛋白(β-catenin)促进铜绿假单胞菌清除的机制.方法 在过表达β-catenin的小鼠巨噬样RAW264.7细胞和骨髓来源巨噬细胞中,铜绿假单胞菌感染后,采用平板计数法检测细菌的清除情况;在过表达β-catenin的RAW264.7细胞和骨髓来源巨噬细胞中,铜绿假单胞菌感染前后,采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)的方法检测抗菌肽LL-37基因的表达;在过表达β-catenin的RAW264.7细胞和骨髓来源巨噬细胞中,应用LL-37小干扰RNA(siRNA)沉默LL-37,铜绿假单胞菌感染后,采用平板计数法检测LL-37回复β-catenin介导的细菌清除作用.结果 在RAW264.7细胞和骨髓来源巨噬细胞中,β-cate-nin促进铜绿假单胞菌的清除;在RAW264.7细胞和骨髓来源巨噬细胞中,铜绿假单胞菌感染后,β-catenin促进LL-37基因的表达;进一步实验发现,LL-37可回复β-catenin介导的细菌清除作用.结论 β-catenin通过调控LL-37促进铜绿假单胞菌的清除.

摘要： 目的探究牙周炎合并2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者龈沟液中抗菌肽人β防御素2(human betadefensin2,HBD2)和LL37的水平变化规律及其与牙周临床指标的相关性。方法选取于深圳市慢性病防治中心口腔科和内科就诊的中老年人(45至85岁)为研究对象,分为全身健康并牙周健康对照组22人、全身健康牙周炎组19人、T2DM牙周健康组15人、T2DM合并牙周炎组21人。采用佛罗里达牙周探针进行牙周检查,记录受试者牙周临床指标,包括探诊深度(probing depth,PD)、附着水平(attachment level,CAL)和探诊出血(probing bleeding,BOP)。采用酶联免疫吸附法检测龈沟液中抗菌肽HBD2、LL37浓度,比较组间抗菌肽HBD2、抗菌肽LL37及牙周临床指标间的差异,并进行相关性分析。结果T2DM合并牙周炎组的PD值大于全身健康牙周炎组(P0.05)。结论中老年T2DM牙周炎患者龈沟液抗菌肽HBD2、LL37水平较低,与牙周临床指标PD、CAL无显著相关性。

摘要： 抗菌肽(antimicrobialpeptide,AMPs)是由各种细胞和组织在所有复杂的生命形式中产生的具有不同序列的短的阳离子两亲性肽.AMPs作为宿主防御的第一重防护线,在人体对感染和炎症的反应中起着至关重要的作用.动物体内的AMPs主要由吞噬细胞和黏膜上皮细胞产生,并通过蛋白质水解作用形成具有生物活性的成熟形式,成熟的AMPs对广泛的病原体有效,包括革兰氏阴性和革兰氏阳性细菌、分枝杆菌、真菌、寄生虫和某些包膜病毒.以AMPs的免疫活性为切入点,进而论述抗菌肽免疫调节功能.

摘要： 本发明涉及植物天然产物制备技术领域，具体涉及一种同时提取三七皂苷、三七黄酮和三七多糖的方法及其应用。提取方法包括以下依次进行的步骤：使用体积分数为70‑90％的乙醇溶液对药粉进行热浸提取；接下来使用蜡样芽胞杆菌发酵处理药渣，获得发酵终体系；再使用微波辅助对发酵体系中的功效成分进行提取，获得提取液Ⅱ和药渣Ⅱ；最后使用微波辅助对药渣Ⅱ进行提取，获得提取液Ⅲ。其中，提取液Ⅰ、提取液Ⅱ和提取液Ⅲ中分别含有三七总皂苷、三七总黄酮和三七总多糖，上述活性成分均具有较好的抗氧化活性。本方案的制备方法可以应用于抗氧化剂的制备的实践操作用，为相关药品和化妆品等的制备和研发提供性质优良的原材料。

摘要： 一种从三七生粉提取分离三七皂甙R1、人参皂甙Re、三七素的方法，它包括以下步骤：三七生粉以甲醇浸提，得甲醇提取液和残渣，将甲醇提取液浓缩干燥，获得甲醇提取物，甲醇提取物加水，并以石油醚萃取，取水相，以正丁醇萃取，得正丁醇相，蒸干后，得三七皂甙粗提取物，该皂甙粗提取物分离得三七皂甙R1和人参皂甙Re；甲醇提取后三七生粉残渣以水提取，得到水提取物，水提取物以正丁醇萃取，将水层冷冻干燥得三七素粗提取物，三七素粗提物进一步分离纯化得三七，本方法操作简单、新颖。

摘要： 本发明涉及分子技术领域，具体涉及三七SSR标记在三七皂苷R1含量确定上的用途，三七皂苷R1与位点SSR35，SSR43，SSR89，SSR2‑6有关联。本发明对SSR标记与三七皂苷R1的关联性研究，有利于高含量三七皂苷R1三七育种的开展。

摘要： 本发明提供了三七干燥工艺和三七粉制备工艺及其得到的冻干三七和三七粉。三七干燥工艺包括以下步骤：对新鲜三七进行冷冻干燥，得到冻干三七；干燥包括3个阶段：第一干燥阶段的工艺参数包括：加热温度为5‑20°C，加热时间为10‑20h，真空度为25‑35Pa；第二干燥阶段的工艺参数包括：加热温度为20‑40°C，加热时间为3‑12h，真空度为15‑25Pa；第三干燥阶段的工艺参数包括：加热温度为40‑60°C，加热时间为15‑25h，真空度为2‑15Pa。上述三七干燥工艺可减少有效成分流失，保留三七的色泽、气味、形态。三七粉的制备工艺采用超微粉碎方法，工艺操作简单，制得的三七粉有效成分含量高、粒度均一。

摘要： 本发明涉及植物天然产物制备技术领域，具体涉及一种同时提取三七皂苷、三七黄酮和三七多糖的方法及其应用。提取方法包括以下依次进行的步骤：使用体积分数为70‑90％的乙醇溶液对药粉进行热浸提取；接下来使用蜡样芽胞杆菌发酵处理药渣，获得发酵终体系；再使用微波辅助对发酵体系中的功效成分进行提取，获得提取液Ⅱ和药渣Ⅱ；最后使用微波辅助对药渣Ⅱ进行提取，获得提取液Ⅲ。其中，提取液Ⅰ、提取液Ⅱ和提取液Ⅲ中分别含有三七总皂苷、三七总黄酮和三七总多糖，上述活性成分均具有较好的抗氧化活性。本方案的制备方法可以应用于抗氧化剂的制备的实践操作用，为相关药品和化妆品等的制备和研发提供性质优良的原材料。

摘要： 本发明公开了三七二醇、三七三醇皂苷以及三七素的制备方法及其装置，涉及三七素提取技术领域，解决了现有技术中无合适的三七二醇皂苷和三七三醇皂苷工业化生产装置以及方法等技术问题,本发明包括粉碎装置、搅拌釜一、超声波提取装置、过滤装置、搅拌釜二、分液器、反应釜一、反应釜二、减压浓缩器一、干燥器一、减压浓缩器二、真空结晶器、干燥器二、洗脱装置、减压浓缩器三、除杂装置以及葡聚糖凝胶柱；本发明将节省大量的人力、物力，经过特有的技术一次取得三七中含有的三七三醇皂苷、三七二醇皂苷、三七素，从而克服了现有技术的缺陷，节省了大量的资源，其社会效益和经济效益更加清楚，将三七的综合利用的经济效益更加显著。

摘要： 一种以三七、三七根、三七花为原料的饮用酒，其特征在于：将三七、三七根、三七花分别泡入50度的纯粮食酒，浸泡一定时间后取出三七、三七根、三七花，加入50度纯粮食酒进行陈酿，陈酿后进行均质后混合，再根据成品酒的酒精度要求进行调配，过滤后灌装为成品；本发明所提供的饮用酒，具有三七、三七根、三七花苦甘醇和、微苦回甘的复合香味，并保留了三七、三七根、三七花所特有的皂甙、氨基酸、微量元素等成分，在饮用酒的同时，达到了三七、三七根、三七花的药用和食用功效。饮用这种酒，可以健胃生津止渴，滋补肝肾，强壮筋骨，降血压、降血脂、减肥、防癌、抗癌、提神补气，提高心肌供氧能力，增加肌体免疫能力。

摘要： 一种从三七生粉提取分离三七皂甙R1、人参皂甙Re、三七素的方法，它包括以下步骤：三七生粉以甲醇浸提，得甲醇提取液和残渣，将甲醇提取液浓缩干燥，获得甲醇提取物，甲醇提取物加水，并以石油醚萃取，取水相，以正丁醇萃取，得正丁醇相，蒸干后，得三七皂甙粗提取物，该皂甙粗提取物分离得三七皂甙R1和人参皂甙Re；甲醇提取后三七生粉残渣以水提取，得到水提取物，水提取物以正丁醇萃取，将水层冷冻干燥得三七素粗提取物，三七素粗提物进一步分离纯化得三七，本方法操作简单、新颖。

摘要： 本发明公开了一种用于鉴定三七或含三七制品的引物对、探针及方法。本发明的用于鉴定三七或含三七制品的引物对包括序列表中序列1所示的正向引物和序列表中序列2所示的反向引物。本发明的探针为序列表中序列3所示的核酸分子。本发明将实时荧光PCR检测技术应用在三七的鉴别中并找到特异性强的引物来实现简单、快速、准确鉴定三七或含三七制品的方法。

摘要： 本发明涉及中药提取、分离领域，尤其涉及从黑参中提取、分离和鉴定出的一对差向异构体及其提取分离方法。所述的化合物为一对差向异构体，分子式为C