JAK2V617F

摘要： 目的:探究雷帕霉素(Rapa)对JAK2 V617F阳性HEL细胞增殖凋亡及程序性死亡受体1与其配体(PD-1/PD-L1)的影响。方法:体外培养JAK2 V617F突变阳性的人红白血病HEL细胞,分别加入浓度为10nM、50nM和100nM的Rapa,设立对照组,CCK-8检测细胞增殖抑制率。Caspase 3/7活性检测试剂盒检测各组细胞Caspase 3/7活性,Transwell小室观察各组细胞迁移能力,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况及PD-1/PD-L1表达情况,实时荧光定量聚合酶链反应检测各组细胞中JAK2和PD-1、PD-L1 mRNA变化,蛋白质印迹法检测各组哺乳类雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达。选取5名健康志愿者,分离其淋巴细胞与HEL细胞共培养,加入不同浓度的Rapa,流式细胞术检测各组Treg细胞数量变化。结果:CCK-8检测结果显示:不同终浓度Rapa(10nM、50nM、100nM)在72h时对细胞增殖抑制率分别为(33.33±4.6)%、(49.12±3.72)%、(55.16±4.14)%(P<0.05)。在浓度50nM和100nM的Rapa作用HEL细胞24h后,其Caspase 3/7活性较对照组显著升高(均P<0.05),流式细胞术结果显示与对照组相比细胞凋亡率明显增加(P<0.05),PD-L1蛋白表达较对照组明显下降(P<0.05),JAK2和PD-L1 mRNA表达量较对照组显著下调(P<0.01)。健康志愿者淋巴细胞与HEL细胞共培养24h后,其Treg细胞增加(P<0.05),而加入Rapa可使Treg细胞呈剂量依赖性下调(P<0.05)。蛋白质印迹法检测结果显示Rapa能够剂量依赖性抑制mTOR蛋白表达。结论:Rapa可能通过影响mTOR进而干扰JAK2通路,导致HEL细胞增殖受抑,PD-L1表达减低,Treg细胞受抑。

摘要： 目的 探索地西他滨和芦可替尼对TET2敲降HEL细胞的杀伤及协同作用.方法 利用shRNA构建TET2敲降的HEL细胞系;利用CCK-8法检测TET2敲降HEL细胞的增殖情况;通过测定半数致死量(IC50)和克隆形成实验评价TET2敲降HEL对芦可替尼和地西他滨的敏感性,并结合Chou-Talalay法计算地西他滨和芦可替尼在TET2敲降HEL细胞中的协同抑制效应.结果 成功建立TET2敲降HEL细胞系两株,TET2敲降后HEL细胞增殖能力增加.72 h的药物敏感试验证实TET2敲降HEL细胞对地西他滨耐药.另外,克隆形成实验表明,TET2敲降后HEL细胞对芦可替尼和地西他滨的敏感性均有所下降.芦可替尼和地西他滨在TET2敲降HEL细胞中有显著的协同抑制效应.结论 地西他滨与芦可替尼协同作用提示其可能是加速急变期JAK2V617F和TET2双突变MPN患者有效的联合用药方案.

摘要： 目的 本研究以携带JAK2V617F纯合突变的人红白血病细胞HEL为基础,建立ASXL1和JAK2V617F双突变模型,为研究JAK2V617F与ASXL1协同参与MPN疾病进展的机制以及寻找新的药物治疗靶点奠定基础.方法 利用CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术建立ASXL1基因敲除的HEL细胞系,并进行一系列细胞功能实验来验证ASXL1敲除对HEL细胞增殖、克隆形成以及对化疗药物的敏感性的影响.结果 成功构建ASXL1基因完全敲除的HEL细胞系(HEL-AKO),模拟JAK2V617F突变与ASXL1基因功能缺失性突变并存.细胞功能实验发现,HEL-AKO细胞较HEL细胞迁移能力变强,增殖能力变慢,细胞周期G2/M期的进程延长,且HEL-AKO细胞的克隆形成能力减弱,药物敏感实验表明,与HEL细胞相比,HEL-AKO细胞对JAK抑制剂芦可替尼产生一定耐受.结论 运用CRISPR-Cas9基因编辑技术能够实现对JAK2V617F突变的人红白血病细胞系HEL细胞系的特定编辑,且ASXL1基因敲除之后会对HEL细胞的生物学功能产生明显影响.

摘要： 目的:应用多重PCR与毛细管DNA电泳法检测骨髓增殖性肿瘤(MPN)主要致病基因中的JAK2V617F及CALR第九外显子突变,并对该方法的检测性能进行评价.方法:同时设计特异性的JAK2617F等位基因突变PCR引物以及CALR基因第九外显子扩增引物,对引物进行Cy5荧光标记,所有引物在同一PCR反应管中进行扩增,并将PCR产物进行毛细管电泳分析,同时验证该方法的检测限、灵敏度,并与商品化试剂盒进行对比.结果:多重PCR与毛细管电泳技术结合可在一个PCR反应中同时检测JAK2 V617F与CALR基因突变,可以在0.01 ng的基因组DNA中检测出JAK2V/617F突变,可在0.1 ng的基因组DNA检测出JAK2 V617F与CALR双阳性突变,至少可检测出0.1％的JAK2V617F阳性突变,该方法与商品化诊断试剂盒进行对比结果相一致.结论:基于多重PCR与毛细管电泳技术,可在外周血中同时检测JAK2V617F与CLAR基因第九外显子突变,该方法为MPN的诊断提供了新的分子检测手段.

摘要： 目的 探讨BCR-ABL阴性骨髓增殖性肿瘤(MPN)患者JAK2V617F、CALR、MPL基因突变情况及临床特点.方法 选取北京大学首钢医院2016年1月至2019年12月收治的135例BCR-ABL阴性的MPN患者,其中血小板增多症(ET)90例,真性红细胞增多症(PV)28例,原发性骨髓纤维化(PMF)17例.患者均行骨髓穿刺术,应用聚合酶链式反应(PCR)扩增技术检测骨髓液中基因JAK2V617F、MPL、CALR表达水平.比较BCR-ABL阴性MPN患者的基因突变情况;比较BCR-ABL阴性MPN患者的临床特点;比较不同基因突变的ET、PV、PMF患者血栓发生情况.结果 135例BCR-ABL阴性MPN患者中有126例(93.33％)可检测到基因突变,其中JAK2V617F突变阳性患者有98例,CALR突变患者有22例,MPL突变患者有6例;135例BCR-ABL阴性的MPN患者中,ET组的发病年龄偏高,女性多于男性,但3组发病年龄、性别比较,差异无统计学意义(P>0.05);白细胞计数(WBC)水平由高到低依次为PMF组、PV组、ET组,HGB水平由高到低依次为PV组、ET组、PMF组,PLT水平由高到低依次为ET组、PV组、PMF组,WBC、HGB、PLT水平组间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05);PMF组患者脾肿大发生率高于PV组及ET组(P<0.05);ET组、PV组、PMF组血栓发生率分别为42.22％、67.86％、17.65％,PV组发生率明显高于ET组、PMF组(P<0.05).结论 BCR-ABL阴性MPN患者中,JAK2V617F、CALR、MPL基因突变率、分布、血栓栓塞事件等均有各自的特点,其中以PV患者JAK2V617F基因突变阳性率最高,且PMF患者WBC水平、脾肿大发生率最高,HGB、PLT水平最低;此外,CALR突变阳性患者同JAK2V617F突变阳性患者相比,发病年龄更年轻、血栓发生率更低,提示预后较好.

摘要： 目的探讨BCR-ABL阴性骨髓增殖性肿瘤(MPN)患者JAK2V617F、CALR、MPL基因突变情况及临床特点。方法选取北京大学首钢医院2016年1月至2019年12月收治的135例BCR-ABL阴性的MPN患者,其中血小板增多症(ET)90例,真性红细胞增多症(PV)28例,原发性骨髓纤维化(PMF)17例。患者均行骨髓穿刺术,应用聚合酶链式反应(PCR)扩增技术检测骨髓液中基因JAK2V617F、MPL、CALR表达水平。比较BCR-ABL阴性MPN患者的基因突变情况;比较BCR-ABL阴性MPN患者的临床特点;比较不同基因突变的ET、PV、PMF患者血栓发生情况。结果135例BCR-ABL阴性MPN患者中有126例(93.33%)可检测到基因突变,其中JAK2V617F突变阳性患者有98例,CALR突变患者有22例,MPL突变患者有6例;135例BCR-ABL阴性的MPN患者中,ET组的发病年龄偏高,女性多于男性,但3组发病年龄、性别比较,差异无统计学意义(P>0.05);白细胞计数(WBC)水平由高到低依次为PMF组、PV组、ET组,HGB水平由高到低依次为PV组、ET组、PMF组,PLT水平由高到低依次为ET组、PV组、PMF组,WBC、HGB、PLT水平组间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05);PMF组患者脾肿大发生率高于PV组及ET组(P<0.05);ET组、PV组、PMF组血栓发生率分别为42.22%、67.86%、17.65%,PV组发生率明显高于ET组、PMF组(P<0.05)。结论BCR-ABL阴性MPN患者中,JAK2V617F、CALR、MPL基因突变率、分布、血栓栓塞事件等均有各自的特点,其中以PV患者JAK2V617F基因突变阳性率最高,且PMF患者WBC水平、脾肿大发生率最高,HGB、PLT水平最低;此外,CALR突变阳性患者同JAK2V617F突变阳性患者相比,发病年龄更年轻、血栓发生率更低,提示预后较好。

摘要： 目的:分析研究骨髓增殖性肿瘤(MPN)患者发生血栓事件的危险因素.方法:对391例骨髓增值性肿瘤患者出现血栓事件的情况进行综合分析,其中男195例,年龄15～72岁,平均年龄56岁;女196例,年龄16～60岁,平均年龄48岁.结果:所有MPN患者中105例发生血栓事件,血栓发生率为26.9％(105/391).血栓发生率在男女性别之间差异无统计学意义(χ2=0.59,P>0.05);而年龄≥45岁的患者高于年龄<45岁的患者,差异有统计学意义(χ2=16.81,P<0.05);JAK2-V617F阳性的患者高于阴性患者,差异有统计学意义(χ2=23.59,P<0.05);外周血白细胞数量≥10×109/L的患者高于白细胞<10×109/L的患者,差异有统计学意义(χ2=28.3,P<0.05);外周血血小板数量≥300×109/L的患者高于血小板数量<300×109/L的患者,差异有统计学意义(χ2=29.14,P<0.05);外周血血红蛋白含量≥160g/L的患者高于血红蛋白含量<160g/L的患者,差异有统计学意义(χ2=30.58,P<0.05).采用多因素Logistic回归分析方法,以年龄、性别、白细胞、血小板、血红蛋白、JAK2-V617F阳性为自变量,以血栓为因变量,结果显示:高龄、高白细胞计数、高血小板计数、高血红蛋白含量、JAK2-V617F突变阳性是血栓事件发生的危险因素.结论:MPN患者容易发生血栓事件,对于骨髓增值性肿瘤患者临床出现引发血栓的危险因素时,需要提高注意,应提早采取措施.

摘要： 目的 探讨伴有JAK2 V617F基因突变的慢性粒细胞白血病(CML)患者的临床特点、发病机制、治疗及预后.方法 对东莞市人民医院新诊断的1例伴有JAK2 V617F突变的CML患者的临床特征以及予酪氨酸激酶抑制剂(TKI)治疗后的疗效进行观察,并进行相关文献复习.结果 患者发病时巨脾,白细胞计数(WBC)显著增多,伴有JAK2 V617F突变,但临床分期仍处于慢性期. TKI靶向治疗期间,WBC降至正常,但贫血并未获得显著改善,脾脏虽有缩小,但难以恢复正常.结论 当CML患者经TKI 单药靶向治疗而疗效不佳时,不应单纯考虑疾病进展,而应考虑是否伴随有JAK2 V617F基因突变,并进一步探讨以TKI为基础的联合方案的疗效.

摘要： JAK2V617F突变的发现引发了一系列意想不到的关于骨髓增殖性肿瘤(MPNs)基础和临床研究,在短短几年中出现了许多关于该类疾病的新发现.在这些新的发现中一项重要结果是修订了世界卫生组织对这类疾病分类和诊断,骨髓增殖性肿瘤仍是基于最初由William Dameshek定义的概念,保留作为经典Ph-阴性MPNs的特定亚类.这类MPNs包括原发血小板增多症,真性红细胞增多症和原发性骨髓纤维化.新的分子表达能作为一个更好的方法来分类MPNs患者吗?有几项研究已经证实原发性血小板增多症和原发性骨髓纤维化根据JAKV617F突变的存在与否可以分类为特定的亚型.现在我们可以定义JAK2阳性MPNs为独立疾病区别于JAK2阴性的MPNs吗?本文将综述JAK2突变基因在MPNs的诊断,预后和治疗中的意义.

摘要： JAK2V617F突变的发现引发了一系列意想不到的关于骨髓增殖性肿瘤(MPNs)基础和临床研究,在短短几年中出现了许多关于该类疾病的新发现.在这些新的发现中一项重要结果是修订了世界卫生组织对这类疾病分类和诊断,骨髓增殖性肿瘤仍是基于最初由William Dameshek定义的概念,保留作为经典Ph-阴性MPNs的特定亚类.这类MPNs包括原发血小板增多症,真性红细胞增多症和原发性骨髓纤维化.新的分子表达能作为一个更好的方法来分类MPNs患者吗?有几项研究已经证实原发性血小板增多症和原发性骨髓纤维化根据JAKV617F突变的存在与否可以分类为特定的亚型.现在我们可以定义JAK2阳性MPNs为独立疾病区别于JAK2阴性的MPNs吗?本文将综述JAK2突变基因在MPNs的诊断,预后和治疗中的意义.

摘要： JAK2V617F突变的发现引发了一系列意想不到的关于骨髓增殖性肿瘤(MPNs)基础和临床研究,在短短几年中出现了许多关于该类疾病的新发现.在这些新的发现中一项重要结果是修订了世界卫生组织对这类疾病分类和诊断,骨髓增殖性肿瘤仍是基于最初由William Dameshek定义的概念,保留作为经典Ph-阴性MPNs的特定亚类.这类MPNs包括原发血小板增多症,真性红细胞增多症和原发性骨髓纤维化.新的分子表达能作为一个更好的方法来分类MPNs患者吗?有几项研究已经证实原发性血小板增多症和原发性骨髓纤维化根据JAKV617F突变的存在与否可以分类为特定的亚型.现在我们可以定义JAK2阳性MPNs为独立疾病区别于JAK2阴性的MPNs吗?本文将综述JAK2突变基因在MPNs的诊断,预后和治疗中的意义.

摘要： JAK2V617F突变的发现引发了一系列意想不到的关于骨髓增殖性肿瘤(MPNs)基础和临床研究,在短短几年中出现了许多关于该类疾病的新发现.在这些新的发现中一项重要结果是修订了世界卫生组织对这类疾病分类和诊断,骨髓增殖性肿瘤仍是基于最初由William Dameshek定义的概念,保留作为经典Ph-阴性MPNs的特定亚类.这类MPNs包括原发血小板增多症,真性红细胞增多症和原发性骨髓纤维化.新的分子表达能作为一个更好的方法来分类MPNs患者吗?有几项研究已经证实原发性血小板增多症和原发性骨髓纤维化根据JAKV617F突变的存在与否可以分类为特定的亚型.现在我们可以定义JAK2阳性MPNs为独立疾病区别于JAK2阴性的MPNs吗?本文将综述JAK2突变基因在MPNs的诊断,预后和治疗中的意义.

摘要： 本发明涉及为JAK抑制剂的5‑氯‑2‑二氟甲氧基苯基吡唑并嘧啶化合物，特别是本文描述了式(00A)化合物和作为Janus激酶抑制剂的应用方法。所要求保护的用途是治疗炎症和哮喘。

摘要： 本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种二氢吡咯并嘧啶类选择性JAK2抑制剂或其药学上可接受的盐。与现有技术相比，本发明提供的吡咯并嘧啶类化合物、其立体异构体及其药学上可接受的盐具有更好的两面神激酶抑制活性，且其对JAK2抑制靶点选择性显著优于现有化合物，且本发明的优选化合物表现出良好的药代动力学性质，具有开发成为选择性JAK2抑制剂的潜力。

摘要： 本发明涉及通式(I)的化合物或其药学上可接受的盐；其中W和X各自独立地是氧或硫；A是氮、CH、C－CN、或C－(C

摘要： 本发明公开了芍药二酮作为JAK1抑制剂在治疗类风湿性关节炎中的应用，本发明通过实验验证发现，芍药二酮能够结合Janus kinase(JAK)1的ATP结合位点，通过抑制JAK1发挥治疗类风湿性关节炎的作用，可将其用于类风湿性关节炎治疗药物的制备中，本发明为本领域研制高效安全、毒副作用低的类风湿性关节炎治疗药物提供了新的思路和方向。

摘要： 本发明提供适用作JAK激酶抑制剂的式(I)化合物：其中变量在本说明书中定义；或其药学上可接受的盐。本发明还提供包括这些化合物的药物组合物和使用这些化合物治疗呼吸道疾病的方法。

摘要： 本发明公开了一种新颖的4，6‑二取代氨基嘧啶类JAK激酶抑制剂的制备与应用，并提供了可用于预防、治疗和/或改善自身免疫疾病(例如，牛皮癣、类风湿性关节炎、炎性肠炎疾病、斯耶格伦氏综合征、白塞氏病、多发性硬化、系统性红斑狼疮等等)等等的药物，其具有优良的JAK激酶(janus kinase)抑制活性。本发明还提供包含所述化合物的药学上可接受的组合物和用于制备这些化合物的方法。

摘要： 本发明涉及为JAK抑制剂的5‑氯‑2‑二氟甲氧基苯基吡唑并嘧啶化合物，特别是本文描述了式(00A)化合物和作为Janus激酶抑制剂的应用方法。所要求保护的用途是治疗炎症和哮喘。

摘要： 本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种二氢吡咯并嘧啶类选择性JAK2抑制剂或其药学上可接受的盐。与现有技术相比，本发明提供的吡咯并嘧啶类化合物、其立体异构体及其药学上可接受的盐具有更好的两面神激酶抑制活性，且其对JAK2抑制靶点选择性显著优于现有化合物，且本发明的优选化合物表现出良好的药代动力学性质，具有开发成为选择性JAK2抑制剂的潜力。

摘要： 本发明提供了一种有下式(Ⅰ)表示的化合物或其药学上可接受的盐；

摘要： 本文描述了式(00A)化合物和作为Janus激酶抑制剂的应用方法。所要求保护的用途是治疗炎症和哮喘。