光感受器细胞

摘要： 目的探讨腺苷A_(2A)受体(A_(2A)R)拮抗剂ZM241385对视网膜脱离(RD)动物模型视网膜光感受器细胞的保护作用。方法选取健康雄性SPF级C57BL/6J小鼠48只作为研究对象。将实验小鼠随机分为对照+二甲基亚砜(DMSO)组、对照+ZM241385组、RD+DMSO组、RD+ZM241385组,每组12只。RD模型建立后,实验小鼠立即腹腔注射ZM241385(3 mg·kg^(-1),剂量不超过0.2 mL)或同体积DMSO,连续给药3 d。采用免疫荧光染色检测视网膜中Müller细胞谷氨酰胺合成酶(GS)的表达,Western blot检测单核细胞趋化蛋白(MCP)-1、肿瘤坏死因子(TNF)-α、Cleaved caspase 3和B细胞淋巴瘤抗体(Bcl)-2的表达。结果免疫荧光染色结果显示:RD+DMSO组小鼠视网膜Müller细胞GS荧光强度较对照+DMSO组显著降低,而RD+ZM241385组小鼠视网膜Müller细胞GS荧光强度较RD+DMSO组显著升高。RD+DMSO组小鼠视网膜MCP-1、TNF-α蛋白表达水平较对照+DMSO组均显著升高,差异均有统计学意义(均为P<0.001),而RD+ZM241385组小鼠视网膜MCP-1、TNF-α蛋白表达水平较RD+DMSO组均显著降低,差异均有统计学意义(均为P<0.001)。与对照+DMSO组相比,RD+DMSO组小鼠视网膜Cleaved caspase 3蛋白表达水平显著升高,Bcl-2蛋白表达水平显著下降,差异均有统计学意义(均为P<0.001)。而与RD+DMSO组相比,RD+ZM241385组小鼠视网膜Cleaved caspase 3蛋白表达水平显著下降,Bcl-2蛋白表达水平显著升高,差异均有统计学意义(均为P<0.001)。结论A_(2A)R拮抗剂ZM241385通过促进RD小鼠视网膜Müller细胞GS表达,抑制炎症细胞因子MCP-1、TNF-α的表达,缓解光感受器细胞凋亡。

摘要： 目的 观察661W细胞低氧条件下基因表达水平和信号通路的早期改变,寻找潜在功能性靶基因.方法 将培养的小鼠661W细胞分为低氧处理组、常氧对照组.低氧处理组细胞置于37°C、体积分数分别为1％、5％CO2的三气培养箱中培养;常氧对照组细胞置于37°C、体积分数为5％CO2培养箱中培养.培养4 h后,采用高通量测序技术对两组661W细胞进行转录组测序,筛选显著差异表达基因(DEG).对筛选得到的DEG进行聚类热图分析、基因注释(GO)功能富集分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)的信号通路富集分析和蛋白互作网络(PPI)分析.采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)对DEG mRNA表达进行验证.结果 共筛选出506个DEG,其中上调基因459个,下调基因47个.GO功能富集分析结果显示,DEG主要富集的生物过程是细胞对低氧反应、糖酵解、细胞增生负调控及凋亡等.KEGG信号通路富集分析结果显示,糖酵解与糖异生、果糖代谢、磷酸戊糖途径以及淀粉和蔗糖代谢等糖代谢途径被显著富集.缺氧诱导因子(HIF)-1α信号通路、糖酵解、FoxO信号通路、胰岛素信号通路和腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信号通路参与了上述过程.PPI分析结果显示,低氧相关的关键基因是Aldoa、Aldoc、Gpi1、Hk2、Hk1、Pfk1、Pfkp、Vhl、Fbxo10、Fbxo27.RT-PCR检测结果显示,低氧处理组细胞中15个DEG mRNA表达水平均较常氧对照组升高,差异有统计学意义(P＜0.05).N-myc下游调控基因-1(Ndrg1)、Mt1及血管内皮生长因子A(VEGFA)mRNA表达水平有低氧时间依赖性.结论 低氧下DEG主要为糖代谢相关基因、细胞对缺氧反应相关基因以及调控增生和凋亡相关基因.HIF-1α信号通路、糖酵解、FoxO信号通路和AMPK信号通路参与了低氧下661W细胞的早期改变.Aldoa、Aldoc、Gpi1、Hk2、Hk1、Pfkl、Pfkp、Vhl、Fbxo10、Fbxo27可能在661W细胞应对低氧反应中起到关键作用.Ndrg1、Mt1及VEGFA可作为研究缺血、缺氧相关眼底疾病的潜在功能性靶基因.

摘要： 目的 观察去小胶质细胞化对早期糖尿病小鼠视网膜光感受器细胞的影响.方法 选取6～8周龄的SPF级雄性C57BL/6J小鼠作为实验动物,未经处理的5只作为空白对照组(A组),10只采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射法成功诱导出糖尿病后的小鼠随机等分为B、C两组.A、B组继续喂养标准实验饲料4周,C组在喂养1周标准实验饲料后添加含290 mg·kg-1 PLX3397(集落刺激因子1受体拮抗剂)的AIN-76A(标准饮食配制的啮齿类实验动物纯化饲料)3周以去除小胶质细胞.4周后于同一时间点处死各组动物,眼球标本均于处死后即刻获取并固定.制备视网膜石蜡切片,HE染色后光学显微镜下观察视网膜结构;小胶质细胞特异性抗体P2ry12免疫荧光化学法检测小胶质细胞在视网膜上的分布,并测算平均吸光度(D)值以间接代表小胶质细胞的数量;TUNEL法测定光感受器细胞的凋亡情况;将上述观察指标在三组间进行比较.结果 光镜观察视网膜结构显示,与A组相比,B组神经纤维层变水肿,内丛状层、内核层及外核层排列变疏松;C组也出现上述改变,但程度较轻.小胶质细胞的免疫荧光化学检测结果显示:A组可在视网膜内层检测到少量的小胶质细胞;B组的小胶质细胞则分布于视网膜全层,提示其由内层向全层发生迁移;C组在各层均未检测到小胶质细胞.B组视网膜P2ry12的D值均较A组和C组高(t=3.478、8.166,均为P<0.05),A组也明显高于C组(t=30.409,P<0.001).光感受器细胞每高倍视野凋亡数A、B、C三组分别为(0.67±0.87)个、(9.22±1.56)个、(2.22±0.97)个,B组与A组及C组相比差异均有统计学意义(t=14.360、11.408,均为P<0.001);A组凋亡细胞数较C组少,差异均有统计学意义(t=-3.585,P=0.02).结论 在糖尿病早期小胶质细胞参与了糖尿病视网膜光感受器细胞的损害过程,通过早期对小胶质细胞进行耗竭化处理可缓解视网膜的水肿和外核层细胞的凋亡.

摘要： 光感受器细胞是视网膜具有光转化能力的一类特殊神经细胞.在老年性黄斑变性(AMD)的发展过程中,继发于RPE丧失、新生血管渗漏及疤痕化等的光感受器细胞死亡是晚期患者发生不可逆性视力损害的重要机制.研究表明,视网膜炎性微环境是参与上述光感受器细胞死亡相关过程的主要因素之一.衰老、光氧化损伤等因素诱导下,RPE细胞、视网膜神经胶质细胞、血源性巨噬细胞及炎症因子等多种促炎机制共同影响视网膜微环境,并最终导致光感受器细胞损伤和AMD疾病进展.深入了解AMD患者视网膜炎症与光感受器细胞死亡的相关性,有望为探讨AMD的致盲机制和治疗策略提供新的思路.

摘要： 目的 本实验采用光损伤小鼠模型,探讨杞菊地黄丸联合美托洛尔的光感受器细胞保护效应及视网膜重塑相关机制.方法 采用BALB/c小鼠,随机分为正常对照组、光损伤模型组、美托洛尔治疗组、杞菊地黄丸治疗组及杞菊地黄丸联合美托洛尔治疗组,给药一周后进行24 h暗适应,末次给药后15 min以10 000 lux白光光照30 min对小鼠进行造模,3天后采用视网膜电图(electroretinogram,ERG)进行视网膜功能分析,7d后采用光学相干断层扫描(optical coherence tomography,OCT)对视网膜结构进行分析并测量视网膜外核层(outer nuclear layer,ONL)厚度,最后进行眼球取材、切片、病理学及免疫组织化学分析进一步明确各组视网膜光感受器细胞、双极细胞、水平细胞及Müller细胞病理改变情况.结果 (1)OCT、ONL厚度及HE染色分析结果表明,与正常对照组完整的视网膜形态及ONL厚度相比较,光损伤模型组小鼠视网膜ONL结构受损严重,ONL厚度显著降低(P＜0.05);与光损伤模型组相比较,美托洛尔及杞菊地黄丸治疗组均存在不同程度的视网膜ONL结构破坏,其中美托洛尔给药组视网膜ONL形态与光损伤模型组结果相似,杞菊地黄丸治疗组视网膜尚可见视网膜ONL结构层次,ONL厚度测量结果表明美托洛尔与杞菊地黄丸给药组ONL厚度较模型组显著增加(P＜0.05);与光损伤模型组和美托洛尔治疗组及杞菊地黄丸治疗组相比,杞菊地黄丸联合美托洛尔给药组小鼠视网膜结构清晰,ONL厚度显著增加(P＜0.05).(2)ERG分析结果表明,正常对照组小鼠视网膜电图a波及b波振幅随着刺激增强而上升;与正常对照组相比较,光损伤模型组小鼠a波及b波振幅显著降低(P＜0.05);与光损伤模型组相比,美托洛尔治疗组小鼠视功能未见改善,杞菊地黄丸组小鼠视网膜电图振幅增加(P＜0.05);与光损伤模型组和美托洛尔治疗组及杞菊地黄丸治疗组相比较,杞菊地黄丸联合美托洛尔治疗组a波及b波振幅显著增加(P＜0.05).(3)免疫组织化学分析结果表明,正常对照组小鼠视网膜光感受器细胞外节视紫红质(rhodopsin,RHO)和中波敏感视蛋白(mid-wavelength sensitive cone opsin,M-opsin),双极细胞标志蛋白激酶Cα(protein kinase Cα,PKCα),水平细胞标志蛋白钙结合蛋白D(Calbindin D)以及Müller细胞标志蛋白胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)免疫阳性正常;与正常对照组相比较,光损伤模型组小鼠视网膜上述神经元标志蛋白免疫阳性染色显著减弱甚至消失,GFAP表达模式异常,提示胶质异常增生;与光损伤模型组相比较,美托洛尔治疗组上述视网膜神经元免疫阳性并无差异,杞菊地黄丸治疗组视网膜双极细胞和水平细胞免疫阳性显著增强,但光感受器细胞标志蛋白和Müller细胞免疫阳性并无差异;与模型组及美托洛尔治疗组和杞菊地黄丸治疗组相比较,杞菊地黄丸联合美托洛尔治疗组视网膜光感受器细胞、双极细胞、水平细胞标志蛋白免疫阳性显著增强,GFAP免疫阳性减弱.结论 杞菊地黄丸联合美托洛尔干预对光感受器细胞结构及功能具有显著的保护效应,可能与其促进视网膜修复性重塑相关.

摘要： 目的:探讨股静脉注射不同剂量的碘酸钠后观察C57BL/6J小鼠视网膜色素上皮形态学及视网膜功能的变化.方法:选取30只6-8周龄C57BL/6J的雄性小鼠,随机分为正常对照组6只,实验1组(静脉注射碘酸钠10 mg/kg)6只,实验2组(静脉注射碘酸钠20 mg/kg)6只,实验3组(静脉注射碘酸钠35 mg/kg)6只,实验4组(静脉注射碘酸钠50 mg/kg);正常对照组注射同等剂量的生理盐水.实验组分别经股静脉注射碘酸钠10、20、35、50 mg/kg,于注射后1周行电生理检测,1周、2周行OCT检测.所有小鼠2周后摘除眼球制作冰冻切片以及RPE细胞平铺片进行HE染色、免疫荧光染色.结果:正常对照组小鼠视网膜各层排列整齐,各层之间分界清晰,外核层形态正常,RPE层细胞排列紧密.注射后1周,通过ERG可发现碘酸钠10 mg/kg组小鼠视锥细胞功能已出现损伤,但OCT显示视网膜形态正常;而20 mg/kg以及35 mg/kg小鼠除了视锥细胞功能出现损伤,视杆细胞的功能均降至对照组1/2;且视网膜外核层均出现异常高亮区,外层视网膜丧失分界清晰的结构.注射后2周,10 mg/kg组小鼠通过RPE细胞平铺片即可发现RPE细胞已出现轻微损伤.而20 mg/kg、35 mg/kg组小鼠通过OCT可发现外核层与对照组相比均明显变薄,视网膜出现退行性改变;且通过HE染色和RPE细胞平铺片以及冰冻切片,我们可以发现20 mg/kg、35 mg/kg小鼠外核层出现波浪状改变,单层RPE细胞的连续性被破坏,呈现剂量依赖性.结论:碘酸钠20 mg/kg组经静脉注射后,可以很好的模拟年龄相关性黄斑变性的发病过程,视网膜出现明显的形态和功能变化,为视网膜色素变性提供一个较好的小鼠动物模型.

摘要： 目的研究淫羊藿对光感受器细胞的保护作用,为淫羊藿配伍应用治疗相关视网膜退行性疾病提供药效学依据。方法将雌性BALB/c小鼠随机分为未光照组(No light)、光照组(light vehicle)、淫羊藿干预组(Epimedium),每组6只。采用强光照射的方法制备小鼠光感受器细胞退行性病变模型,以临床常用剂量淫羊藿水煎液腹腔注射小鼠2次。采用光学相干断层扫描技术分析视网膜结构,采用视网膜电图分析视网膜功能,采用免疫组织化学的方法分别分析光感受器细胞视紫红质(rhodopsin)和视蛋白M(opsin-M)、双极细胞蛋白激酶Cα(PKC-α)、水平细胞钙结合蛋白D(calbindin-D)和神经胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达;采用TUNEL法分析视网膜细胞凋亡情况。结果光照后,小鼠视网膜外核层缺失,视网膜功能受损;视网膜Rhodopsin、Opsin-M、PKC-α、Calbindin-D和GFAP等蛋白表达缺失或异常;外核层出现大量TUNEL阳性细胞。淫羊藿干预的小鼠视网膜结构完整、功能正常;上述蛋白与未光照小鼠相比,未见异常表达;视网膜外核层未见细胞凋亡。结论淫羊藿对光损伤引起的光感受器细胞退行性改变具有显著的治疗作用。

摘要： 目的探讨胡黄连对光损伤诱导的光感受器细胞退行性病变的保护效应。方法将BALB/c小鼠随机分为正常对照组(No Light)、光损伤模型组(Light_Vehicle)、胡黄连低剂量组(Light_HHL_L)、胡黄连中剂量组(Light_HHL_M)和胡黄连高剂量组(Light_HHL_H)5组,每组6只。其中正常对照组和光损伤模型组均以每20 g小鼠体质量200μL纯水溶剂灌胃,胡黄连低(167 mg/kg)、中(500 mg/kg)、高(1.5 g/kg)剂量组小鼠接受每20 g小鼠体质量200μL胡黄连水煎液灌胃治疗。连续给药7 d,给药第4天所有小鼠开始接受暗适应,第7天给药后0.5 h进行光损伤造模。光照后第7天利用光学相干断层扫描(OCT)影像学检查及苏木素-伊红(HE)染色,观察小鼠视网膜形态结构变化,并分析视网膜外核层(ONL)厚度变化;利用视网膜电图(ERG)观察小鼠视网膜a、b波振幅变化,并分析其视网膜功能改变;利用免疫组织化学法对视紫红质(Rhodopsin)和中波敏感视蛋白(M-opsin)进行染色,观察视杆细胞和视锥细胞的病理改变情况;利用TUNEL法对视网膜细胞凋亡进行原位观察。结果正常对照组视网膜各层形态结构完整,ONL厚度正常,细胞核排列整齐,ERG暗视a波和b波振幅绝对值随刺激强度增加而增加,Rhodopsin和M-opsin表达正常,视网膜各层未见凋亡细胞。与正常对照组比较,光损伤模型组视网膜结构明显受损,ONL厚度显著变薄(P<0.01),细胞核排列疏松紊乱,ERG暗视a波和b波振幅显著降低(P<0.05),Rhodopsin和M-opsin表达明显降低,ONL可见大量凋亡细胞。与光损伤模型组比较,胡黄连高剂量组视网膜形态结构维持完好,ONL细胞核排列整齐,胡黄连有效抑制ONL厚度变薄(P<0.01),显著抑制ERG暗视a波和b波振幅降低(P<0.05),胡黄连干预后Rhodopsin和M-opsin表达明显增加,ONL几乎未见凋亡细胞。结论胡黄连可显著抑制光损伤诱导的光感受器细胞凋亡,对光损伤小鼠视网膜形态结构和视功能具有显著的保护效应。

摘要： 本发明的目的是提供一种电子照相光感受器基底，其可以高生产率容易地进行生产并防止出现图象缺陷。本发明为电子照相光感受器基底(1)，其具有形成在其表面中的细槽，且其特征在于当基底表面在平面上展开时，该槽为弯曲且不连续的。

摘要： 公开了一种光感受器筒和具有所述光感受器筒的图像形成设备。所述光感受器筒包括：第一组件，所述第一组件构造为包括第一框架和安装在所述第一框架处的光感受器；第二组件，所述第二组件构造为包括可拆卸地与所述第一框架组合的第二框架和安装在所述第二框架处且清洁所述光感受器的表面的清洁单元；至少一个第一按压构件，所述至少一个第一按压构件构造为将所述清洁单元按压至所述光感受器；和至少一个第二按压构件，所述至少一个第二按压构件构造为在与所述第一按压构件按压所述清洁单元的方向相反的方向上按压所述清洁单元。

摘要： 本发明提供一种具有优良电子转移功能的化合物，可用于电子照相的光感受器和有机EL的应用。本发明还提供电子照相的光感受器，由于使用这种化合物而电特性优良，并能稳定地重复使用，还提供使用这种光感受器的电子照相设备。本发明涉及具有下面通式(I)表示的结构的醌基化合物，含这种化合物的电子照相的光感受器，以及使用这种光感受器的电子照相设备。式(I)中(R1至R4各自表示烷基等；R5表示芳基等；R6表示卤原子等；X表示硫原子或氧原子；n表示0－3的整数；当n是2或3时，R6可以一起形成环或稠环)。

摘要： 一种电照相光感受器，它具有高光稳定性和对氧化气体如臭氧和NOx的高耐久性，在重复使用时机械性能如印版寿命、耐磨性、抗刮伤性和滑动性能优良，还具有优良的电性能。具体地说，本发明涉及一种电照相光感受器，包括导电基物和设置于其上的至少一层光敏层，该光敏层包括电荷产生物质、电荷传输物质和粘结剂树脂，其特征在于选择聚芳基化合物树脂作为粘结剂树脂，并且光敏层和/或在该层外侧上形成的层包含吸光化合物，该吸光化合物为其在420－520nm范围内的吸光度(相对于四氢呋喃溶液的值)具有至少一个最大值的化合物，并且其与含该化合物的层具有相容性。

摘要： 本发明提供一种新的光感受器神经元细胞纯化学诱导方法，通过将一组小分子抑制剂添加至无血清基础培养基中，将多能干细胞快速转化为光感受器神经元细胞，与目前国际通行的血清加视黄醇的诱导方法相比，本发明不使用血清，使用化学小分子替代视黄醇，保证了光感受器神经元发育所需要的视觉循环的运行的同时也排除了血清的不利因素。

摘要： 眼内注射腺相关病毒(AAV)载体已经是将基因药物递送到视网膜中的明确途径。目前，需要将所述载体注射到视网膜下空间中以向视锥细胞提供基因递送。在这种方法中，基因递送限于与注入流体局部“小泡”接触的细胞。此外，视网膜下注射期间发生的视网膜脱离在具有视网膜变性的眼睛中是一种隐患。在此，本发明人建立了几种新的载体‑启动子组合以克服与中央凹中AAV介导的视锥细胞转导有关的局限性，并在小鼠模型、人类诱导多能干细胞衍生的类器官、人类死后视网膜外植体和活猕猴中进行了支持性研究。他们表明，AAV9变体当被注入距中央凹几毫米远的视网膜下空间中时，提供了有效的中央凹视锥细胞转导，且不会使这个脆弱的区域脱离。这种递送方式依赖于视锥细胞特异性启动子，并导致与光遗传学视力恢复相容的高水平转基因表达。因此，本发明涉及在对象的视锥细胞光感受器中表达目的多核苷酸的方法，所述方法包括视网膜下递送治疗有效量的重组AAV9衍生载体，所述载体包含如SEQ ID NO:11所示的VP1衣壳蛋白以及在如SEQ ID NO:12所示的pR1.7启动子控制下的目的多核苷酸。

摘要： 本发明涉及人参皂苷Rb1和Rd组合在制备治疗视网膜退行性病变药物中的应用。本发明采用视网膜光损伤的小鼠模型，模拟多种视网膜退行性病变发生过程中的共同关键病理环节，研究人参皂苷Rb1和Rd组合对视网膜光损伤小鼠模型的干预效应，结果表明该药物组合能维持视网膜外核层形态、有效防止视网膜外核层退行性损伤、防止视网膜外核层厚度降低，抑制光感受器细胞死亡，拮抗视网膜色素上皮细胞及光感受器细胞氧化应激、有效抑制视网膜损伤相关免疫炎症反应、显著改善视网膜退行性病变。因此人参皂苷Rb1和Rd组合可用于制备治疗包括年龄相关性黄斑变性、视网膜色素变性、Stargardt病、视锥‑视杆细胞营养不良、糖尿病视网膜病变等在内的多种视网膜退行性病变药物。

摘要： 本发明提供了由多能干细胞产生光感受器细胞和光感受器祖细胞的方法。此外，提供了光感受器细胞和光感受器细胞的组合物，以及其治疗用途的方法。示例性的方法可以产生光感受器细胞和/或光感受器细胞的基本纯的培养物。

摘要： 本发明涉及胡黄连在治疗视网膜退行性病变中的应用。本发明采用视网膜光损伤小鼠模型，模拟多种视网膜退行性病变发生过程中的共同关键病理环节‑光感受器细胞氧化应激相关退行性改变，研究胡黄连对光感受器细胞的保护效应，结果表明该药物可维持视网膜光感受器细胞结构与功能的完整性，有效拮抗光损伤引起的视网膜外核层退行性改变、防止视网膜外核层厚度降低，抑制光感受器细胞死亡，维持视网膜功能。因此胡黄连可用于治疗包括年龄相关性黄斑变性、视网膜色素变性、Stargardt病、视锥‑视杆细胞营养不良、糖尿病视网膜病变等在内的多种视网膜退行性病变。

摘要： 本发明公开了一种检测和定量视网膜光感受器细胞光损伤的方法，过程为：稳定培养视网膜光感受器细胞，在多个细胞培养基中接种细胞后对其培养、传代，直至细胞长满整个培养基，停止培养；将多个细胞培养基分为测试组和对照组，设定不同的光照时间、不同的光照强度及不同波长的光源分别对测试组进行处理；回收处理过的视网膜光感受器细胞，测定回收的测试组和对照组的细胞活力CV；通过计算机深度学习和建模分析，构建LED光源对视网膜光感受器细胞的光损伤程度的模型。本发明探索出光源的特性对光感受器细胞光损伤的影响，为光源的研究提供了理论支持。