视网膜色素上皮细胞

摘要： 目的探讨褪黑素(MT)联合锌(Zn)对H 2O 2诱导的人视网膜色素上皮(ARPE)细胞氧化损伤的保护作用。方法常规培养ARPE细胞株(ARPE-19),利用不同浓度H 2O 2处理ARPE-19细胞,将细胞存活率接近50%的H 2O 2浓度作为氧化损伤浓度。将ARPE-19细胞分为:不同浓度MT(10-5 mol·L^(-1)、10-6 mol·L^(-1)、10-7 mol·L^(-1))+ZnCl 2(15μmol·L^(-1))组,ZnCl 2组(采用15μmol·L^(-1) ZnCl 2培养细胞),H 2O 2组(不添加MT和ZnCl 2培养细胞),空白对照组(细胞不做任何处理)。采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。采用试剂盒测量各组细胞内活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)的含量。ELISA检测各组细胞内白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达量。结果当H 2O 2浓度为300μmol·L^(-1)时,细胞存活率为(54.31±1.91)%,此时细胞存活率接近50%,后续实验中均选择该浓度作为氧化损伤浓度。ZnCl 2组、10-5 mol·L^(-1) MT+ZnCl 2组、10-6 mol·L^(-1) MT+ZnCl 2组、10-7 mol·L^(-1) MT+ZnCl 2组细胞凋亡率分别为3.05%、1.17%、1.50%、1.71%,与空白对照组(0)相比差异均无统计学意义(均为P>0.05)。H 2O 2组、ZnCl 2组、10-7 mol·L^(-1) MT+ZnCl 2组细胞内ROS含量分别为空白对照组的1.76倍、1.59倍、1.41倍,差异均有统计学意义(均为P0.05)。H 2O 2组细胞内MDA的含量较空白对照组显著提高(P0.05)。H 2O 2组、ZnCl 2组、10-7 mol·L^(-1) MT+ZnCl 2组细胞内IL-6和TNF-α的表达量均显著高于空白对照组,差异均有统计学意义(均为P0.05)。结论MT联合Zn能有效降低H 2O 2损伤所致ARPE-19细胞内ROS的含量,随之减少细胞内MDA的含量,同时也能抑制IL-6和TNF-α的表达量,从而起到保护RPE细胞的作用。

摘要： 目的 探讨不同浓度2型转化生长因子-β(TGF-β2)对视网膜色素上皮细胞(RPE)生物学特性及纤维化指标结缔组织生长因子(CTGF)的调控。方法 RPE细胞分别用0,1,5,10,15 ng/ml TGF-β2处理,并用CCK-8检测细胞增殖活性确定合适的TGF-β2浓度范围。根据CCK-8结果确定后续实验分为0,1,5,10 ng/ml TGF-β2组,倒置显微镜观察RPE细胞的形态变化,细胞划痕试验检测细胞的迁移能力,Western blot检测纤连蛋白(Fibronectin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMΑ)、钙黏附蛋白E(E-cadherin)、闭锁小带蛋白(ZO-1)、CTGF的表达,PCR检测Fibronectin、α-SMA在mRNA水平的变化。结果 CCK-8结果显示,随着TGF-β2浓度的增加,细胞增殖显著增加(P0.05),而Fibronectin的表达差异具有统计学意义(P<0.05)。PCR结果显示随着TGF-β2浓度增加Fibronectin、α-SMA的mRNA表达均提高,其中5 ng/ml、10 ng/ml TGF-β2组与0 ng/ml组间,5 ng/ml和10 ng/ml组间差异具有统计学意义(均P<0.05)。纤维化指标CTGF蛋白的表达随着TGF-β2浓度增加逐渐升高,且两两之间比较差异具有统计学意义(均P<0.05)。结论 TGF-β2可以诱导RPE细胞发生上皮间充质转化(EMT)过程,通过CTGF调节组织的纤维化过程。

摘要： 目的:探讨脱氧胆酸基接枝的壳聚糖衍生物负载姜黄素纳米粒的合成方法及该药物纳米粒对人视网膜色素上皮(hRPE)细胞的作用。方法:合成姜黄素/壳聚糖-脱氧胆酸纳米粒并分析其性能。将负载荧光染料异硫氰酸荧光素的壳聚糖-脱氧胆酸及姜黄素/壳聚糖-脱氧胆酸作用于hRPE细胞24h后,于倒置荧光显微镜下观察避光培养1、3、5d后二者与hRPE细胞的相互关系。结果:通过将姜黄素与壳聚糖-脱氧胆酸混合制成负载药的壳聚糖衍生物纳米粒为淡黄色;药物从纳米粒中的释放在96h后达到平衡,累积释放药物量为31.6%。异硫氰酸/壳聚糖-脱氧胆酸与hRPE细胞作用1d后,壳聚糖-脱氧胆酸纳米粒大部分仍位于近细胞膜的部位;作用3d后,纳米粒逐渐向细胞核会聚,且大部分位于细胞核周围;作用5d后,可看到壳聚糖-脱氧胆酸纳米粒已进入细胞核,且纳米粒可能在细胞内溶酶体的作用下有部分降解。姜黄素/壳聚糖-脱氧胆酸纳米粒和hRPE细胞作用的关系与壳聚糖-脱氧胆酸大致相同。结论:通过壳聚糖-脱氧胆酸包载的姜黄素纳米粒能持续释放出姜黄素,具有较持久的缓释功能。

摘要： 目的:探讨缺氧条件下辛伐他汀(Sim)对体外培养的人视网膜色素上皮(RPE-19)细胞的影响及其可能机制。方法:将体外培养的人RPE-19细胞随机分为三组:对照组、缺氧组(培养基中CoCl_(2)的最终浓度为125μmol/L)和Sim处理组(在含有125μmol/L CoCl_(2)的RPE-19细胞培养基中加入3μmol/L Sim)。24h后,观察RPE-19细胞的形态,用MTT法检测细胞增殖,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫印迹法检测缺氧诱导因子1-α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)的分泌水平和蛋白表达,采用免疫印迹法检测自噬蛋白的表达水平,TUNEL法检测细胞凋亡。结果:缺氧条件下RPE-19细胞的形态发生了明显变化。缺氧组RPE-19细胞中HIF-1α和VEGF的蛋白表达明显增加,Sim治疗后显著降低。Beclin1和LC3B蛋白在CoCl_(2)+Sim组中的表达水平有所下降,且表达水平显著低于对照组和CoCl_(2)组。缺氧条件下,Sim抑制了RPE-19细胞增殖,促进了细胞的凋亡。结论:Sim可抑制缺氧条件下RPE-19细胞HIF-1α和VEGF蛋白的表达,抑制细胞增殖,促进凋亡,Sim促进RPE-19细胞凋亡的机制可能与其抑制自噬有关。

摘要： 目的探讨视网膜色素上皮细胞通过分泌含有miR-4488的外泌体抑制糖尿病视网膜病变进展的分子机制。方法将人视网膜色素上皮细胞系ARPE-19细胞分为空白组、高糖组。将人视网膜微血管内皮细胞(HRMECs)分为NG组、HG组、NG+外泌体组和HG+外泌体组。空白组、NG组和NG+外泌体组细胞用含5.5 mmol·L^(-1)正常浓度葡萄糖的培养基培养24 h;高糖组、HG组和HG+外泌体组细胞用含30 mmol·L^(-1)高浓度葡萄糖的培养基培养24 h;NG+外泌体组和HG+外泌体组细胞在培养基中分别加入空白组或高糖组ARPE-19细胞分泌的外泌体40μg·L^(-1)。PKH67绿色荧光标记外泌体;利用CCK-8法、Transwell小室法检测HRMECs增殖、迁移和血管生成。取空白组和高糖组ARPE-19细胞外泌体进行miRNA微阵列分析。采用双荧光素酶报告分析检测miR-4488和转化生长因子β受体Ⅱ(TGFβR2)基因序列的靶向关系。采用Western blot或免疫荧光染色检测各组HRMECs中TGFβR2、Smad2、p-Smad2ser467或Desmin、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。结果空白组和高糖组ARPE-19细胞分泌的被PKH67标记的外泌体加入培养基后都可被HRMECs吸收。与NG组相比,HG组HRMECs细胞增殖率、迁移率、血管结点数和血管总长度、TGFβR2和p-Smad2ser467蛋白表达量、Desmin和α-SMA蛋白荧光强度均增加(均为P0.05)。与空白组相比,高糖组ARPE-19细胞分泌的外泌体中miR-4488相对表达量增加,且miR-4488模拟物和TGFβR2wt共转染可增加双荧光素酶活性(均为P<0.05)。结论在高糖条件下,ARPE-19细胞释放的外泌体可通过miR-4488/TGFβR2/Smad信号通路抑制HRMECs间充质转化。

摘要： 目的探讨高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)中含有卵巢肿瘤结构域的6B反义RNA 1(OTUD6B-AS1)的功能及其作用机制。方法取ARPE-19细胞,加入含30 mmol·L^(-1)葡萄糖的培养基培养,设为高糖组,另取ARPE-19细胞不做任何处理设为对照组。用Lipofectamine^(TM) 2000转染试剂分别将过表达空质粒(pcDNA-NC组)、OTUD6B-AS1过表达质粒(pcDNA-OTUD6B-AS1组)和OTUD6B-AS1过表达质粒+miR-21-5p模拟物(pcDNA-OTUD6B-AS1+miR-21-5p mimics组)转染进高糖诱导的ARPE-19细胞。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中OTUD6B-AS1和miR-21-5p的表达;用CCK-8法检测各组细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡情况;细胞划痕实验检测各组细胞迁移能力;荧光素酶报告基因实验验证OTUD6B-AS1与miR-21-5p的靶向关系。结果与对照组比较,高糖组ARPE-19细胞中OTUD6B-AS1表达量显著降低、miR-21-5p表达量显著升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与对照组比较,高糖组细胞凋亡率显著升高,细胞增殖率和迁移率均显著降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与pcDNA-NC组比较,pcDNA-OTUD6B-AS1组中细胞增殖率和迁移率显著升高,细胞凋亡率显著降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示,OTUD6B-AS1可靶向miR-21-5p。与pcDNA-OTUD6B-AS1组比较,pcDNA-OTUD6B-AS1+miR-21-5p mimics组细胞凋亡率显著升高,细胞增殖率和迁移率显著降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论OTUD6B-AS1可抑制高糖诱导的ARPE-19细胞凋亡,并促进细胞增殖和迁移,其作用机制与miR-21-5p有关。

摘要： 增生性玻璃体视网膜病变(PVR)是一种发生在孔源性视网膜脱离(RRD)自然病程中或复位手术后的严重并发症,常常导致患者视力丧失。目前,临床缺乏有效的治疗方法。PVR病理特征是多种细胞在细胞因子的作用下发生的过度炎症反应和异常增生,最终在视网膜表面形成增殖膜及进一步的牵拉性视网膜脱离(TRD)。对PVR发病机制的深入研究将有助于为其治疗寻找有前景的分子靶标。近年研究发现,血管内皮生长因子(VEGF)及视网膜色素上皮(RPE)细胞的上皮-间充质转化(EMT)在PVR发病中发挥着重要作用。本文就VEGF及RPE细胞EMT在PVR发病中的作用,以及二者的相互联动机制进行了总结,以期为PVR的治疗和临床研究提供新的思路。

摘要： 目的分析薯蓣皂苷元对人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)增殖、凋亡和细胞内超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、丙二醛含量的影响。方法将ARPE-19分为正常培养组、碘酸钠预处理组和薯蓣皂苷元10、20、40、80μg/ml剂量组。检测各组细胞增殖、凋亡浓度变化和细胞中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、丙二醛含量的变化。结果碘酸钠预处理组增殖浓度低于正常培养组及薯蓣皂苷元20、40和80μg/ml剂量组,差异有统计学意义(P0.05)。结论薯蓣皂苷元通过增加超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活力,降低丙二醛含量,促进ARPE-19细胞增殖,阻止ARPE-19细胞凋亡,抑制碘酸钠对ARPE-19细胞的氧化应激反应,且与剂量具有相关性。

摘要： 目的基于miR-34a/沉默信息调节因子1(SIRT1)轴探讨柚皮素对H_(2)O_(2)诱导的人视网膜色素上皮细胞(RPE)氧化损伤的保护作用。方法MTT法检测不同浓度的柚皮素对H_(2)O_(2)诱导的人视网膜色素上皮细胞ARPE-19存活率的影响以选取适宜柚皮素浓度为后续实验浓度。取对数期生长的ARPE-19细胞分为对照组、H_(2)O_(2)组(200μmol/L)、20μg/mL柚皮素组、20μg/mL柚皮素+mimics NC组、20μg/mL柚皮素+miR-34a mimics组。采用RT-qPCR检测细胞中miR-34a和SIRT1 mRNA的表达,MTT法及Annexin V-FITC/PI双染分别检测细胞存活与凋亡情况,荧光探针检测细胞内ROS水平,生化法检测SOD活性、MDA和GSH水平,并采用JC-1法检测线粒体膜电位(MMP),Western blot检测SIRT1及Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达。结果与对照组相比,H_(2)O_(2)组ARPE-19细胞中miR-34a表达、ARPE-19细胞凋亡率、ROS、MDA含量、Bax和Caspase-3表达显著升高(P<0.05),SIRT1 mRNA表达、ARPE-19细胞存活率、SOD、GSH含量、MMP水平、SIRT1和Bcl-2表达显著降低(P<0.05);与H_(2)O_(2)相比,柚皮素可改善H_(2)O_(2)诱导的ARPE-19细胞损伤,下调miR-34a表达,降低ROS、MDA、Bax和Caspase-3含量(P<0.05),上调SIRT1、MMP、Bcl-2表达,增加GSH、SOD活性(P<0.05);上调ARPE-19细胞miR-34a的表达,可逆转柚皮素对H_(2)O_(2)诱导的RPE细胞氧化损伤的保护作用。结论柚皮素可能通过下调miR-34a,促进SIRT1的表达,抑制RPE细胞凋亡,保护H_(2)O_(2)诱导的RPE细胞氧化损伤。

摘要： 目的探讨薯蓣皂苷(Dio)对高糖(HG)诱导的视网膜色素上皮(RPE)细胞损伤的保护作用,并分析其机制。方法用细胞计数试剂8(CCK-8)法筛选葡萄糖浓度和无细胞毒性的Dio剂量范围。将ARPE-19细胞分为对照组(5 mmol·L^(-1)葡萄糖处理48 h)、模型组(50 mmol·L^(-1)葡萄糖处理48 h)和低、中、高剂量Dio处理组(分别用50 mmol·L^(-1)葡萄糖联合0.5 mmol·L^(-1)、2.0 mmol·L^(-1)和8.0 mmol·L^(-1) Dio处理48 h)。CCK-8法检测细胞活性;FITC标记膜联蛋白-V/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)染色检测细胞凋亡;荧光探针法检测活性氧(ROS)水平;试剂盒法检测丙二醛(MDA)水平、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;JC-1染色检测线粒体膜电位;Western blot法检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、cleaved Caspase-3和Yes相关蛋白(YAP)的表达水平;免疫荧光法观察YAP的表达。结果筛选的葡萄糖浓度为50 mmol·L^(-1),Dio的无细胞毒性的剂量为0.5 mmol·L^(-1)、2.0 mmol·L^(-1)、8.0 mmol·L^(-1)。与对照组比较,模型组细胞活性、线粒体膜电位、CAT和GSH-Px活性以及Bcl-2蛋白和YAP蛋白表达水平均明显降低(均为P<0.001),细胞凋亡水平、ROS和MDA水平以及cleaved Caspase-3蛋白和Bax蛋白表达水平均明显升高(均为P<0.001);与模型组比较,低、中、高剂量Dio处理组细胞活性、线粒体膜电位、CAT和GSH-Px活性以及Bcl-2蛋白和YAP蛋白表达水平均明显升高(均为P<0.05),细胞凋亡水平、ROS和MDA水平以及cleaved Caspase-3蛋白和Bax蛋白表达水平均明显降低,且均呈剂量依赖性(均为P<0.05)。结论Dio可通过激活YAP信号,降低氧化应激反应和抑制线粒体介导的细胞凋亡途径,进而减轻HG诱导的RPE细胞损伤。

摘要： 目的：探讨二甲基亚砜(Dimethyl Sulfoxide,DMSO)对体外培养兔视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium,RPE)增殖及迁移的影响. 方法：用含有不同浓度DMSO细胞培养基,培养兔RPE细胞24、48、72小时,采用透射电镜(Transmission ElectronMicorscope,TEM)观察细胞形态变化;MTT比色法检测多个浓度DMSO(0.2％、0.5％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％)对兔RPE细胞OD值的影响并计算其存活率,选取其中三个浓度组进一步检测;流式细胞术(FCM)检测DMSO(1.0％、2.0％、4.0％)对兔RPE细胞凋亡率的影响;划痕实验检测DMSO(2％)对兔RPE细胞迁移能力的影响. 结果：MTT检测：同时相内除0.2％DMSO干预组外,各浓度DMSO组细胞存活率明显低于正常对照组,差异具有统计学意义(P＜0.01);FCM检测：干预24h时,高剂量组(4％DMSO)与正常对照组相比,细胞凋亡率明显增高(P＜0.01);干预48h、72h时,中、高剂量组(4％DMSO)与正常对照组相比,细胞凋亡率明显增高(P＜0.05或P＜0.01).划痕实验结果显示：划痕后正常组兔RPE细胞的迁移能力明显强于DMSO干预组兔RPE细胞的迁移能力,DMSO干预组划痕内仅有少量细胞,正常组划痕内细胞已基本长满. 结论：DMSO干预兔RPE细胞后,随时间的增长可明显抑制其增殖及迁移,且诱导细胞凋亡呈剂量依赖性.

摘要： 山萘酚属于一种天然多酚类物质,存在于多种食物(例如蓝莓类和豆类等食物)以及某些中药(例如覆盆子、菊花、银杏叶和黄芪等中药)中,据文献报道：山萘酚具有较强的抗氧化活性和多种生物学功能,包括抗炎和抗癌等生物活性.通过体外细胞实验研究了山蔡酚对眼部不同组织细胞(包括角膜上皮、晶状体上皮、视神经节细胞、Muller细胞及视网膜色素上皮细胞)的氧化损伤保护作用及其相关分子作用机制。

摘要： 本文研究460-480nm蓝光光照视网膜色素上皮细胞后,聚ADP核糖聚1对视网膜色素上皮细胞氧化损伤的保护作用,探讨光致视网膜细胞氧化损伤保护的新途径.

摘要： 本文通过碘酸钠腹腔注射建立C57BL/6小鼠氧化应激模型,观察补肾养血明目方对碘酸钠诱导小鼠视网膜色素上皮细胞氧化应激的保护作用.

摘要： 目的：观察黄芪多糖(APS)对过氧化氢损伤的人视网膜色素上皮细胞氧化损伤的保护作用.rn 方法：培养的人视网膜色素上皮细胞系(human retinal pigment epithelium,ARPE-19)分为正常对照组、过氧化氢损伤组和不同浓度(1000 mg·L-1、500 mg· L-1) APS干预组,正常对照组不做处理,过氧化氢损伤组加入200μmol·L1的过氧化氢,APS干预组加入不同浓度(1000 mg·L-1、500 mg·L-1)APS后加入200μmol·L-1的过氧化氢.用倒置荧光显微镜观察各组细胞形态变化;MTT检测细胞活性;DAPI染色观察细胞核形态学变化;实时细胞电子分析系统(real-time cell electronic sensing system,RT-CES)实时记录细胞生长状态;应用caspase-3活性检测试剂盒测定各组细胞中caspase-3 的活性.rn 结果：过氧化氢损伤组细胞皱缩，悬浮细胞增多，APS干预后细胞状态改善。MTT显示1000 mg·L-1,500 mg·L-1浓度的APS孵育24h后细胞存活率分别为(99.86±3.64)%和(101.03±3.52)%，与正常对照组相比，差异无统计学意义(P＞0.05)，过氧化氢损伤组细胞存活率为(56.49±2.30)%，比正常对照组显著降低，不同浓度黄芪多糖干预后，细胞存活率升高到(88.14±2.97)%和(80.75±3.13)%,与过氧化氢损伤组相比差异具有显著地统计学意义(均为P＜0.O1)。DAPI染色显示正常细胞核均匀淡染，过氧化氢损伤组出现强荧光点和致密的细胞核，APS处理后凋亡程度减轻。RT-CES显示APS处理可以减少过氧化氢造成的细胞损伤。Caspase-3检测发现过氧化氢造成细胞caspase-3水平升高，APS处理后caspase-3水平下降。rn 结论：APS可以抑制过氧化氧诱导的ARPE-19的凋亡，这为APS的临床应用提供了一定的实验基础。

摘要： 研究体外培养的人视网膜色素上皮细胞的生长特性及可见光对其影响.用倒置相差显微镜和透射电镜观察人视网膜色素上皮(hRPE)细胞形态和超微结构,用计数法和噻唑蓝(MTT)法绘制生长曲线.从光照时间、光照时有无血清、光照后是否换液、光照后培养时间这4方面考查可见光对hRPE细胞的损伤情况.实验结果表明,体外培养的hRPE细胞为多角形,有极性,细胞器正常,生长旺盛.(8423±359)Ix的可见光光照2h就能对hRPE细胞造成显著损伤.光照时间为5h,光照时培养液中含10％胎牟血清,光照后不换培养液,光照后培养时间为24h,此条件下hRPE损伤率为58％.体外培养的hRPE细胞具有正常的形态结构和生长规律.可见光可对hRPE细胞造成损伤,并且损伤程度有时间积累效应.因此,在日常生活中应尽可能避免阳光直射,减少光照时间,以降低视网膜光损伤发生率,保护眼睛.

摘要： 目的:研究体外培养的人视网膜色素上皮细胞的生长特性及可见光对其影响.方法:用倒置相差显微镜和透射电镜观察hRPE细胞形态和超微结构,用计数法和MTT法绘制生长曲线.从光照时间,光照时有无血清、光照后是否换液、光照后培养时这四方面考察可见光对hRPE细胞的损伤情况.结果:体外培养的hRPE细胞为多角形,有极性,细胞器正常,生长旺盛.(8423±359)/x的可见光光照2小时就能对hRPE细胞造成显著损伤.光照时间为5h,光照时培养液中含10％胎牛血清,光照后不换培养液,光照后培养时间为24h,此条件下hRPE损伤率为58％.结论:体外培养的hRPE细胞具有正常的形态结构和生长规律.可见光可对hRPE细胞造成损伤,并且损伤程度有时间积累效应.因此,在日常生活中应尽可能避免阳光直射,减少光照时间等,以降低视网膜光损伤发生率保护眼睛.

摘要： 本研究将具有优异理化性能与超大比表面积的二维纳米材料石墨烯引入到bFGF体系。此外，将采用本课题组前期发明的边缘功能化球磨法，一步法制备具有高水相分散性与良好生物相容性的羟基功能化石墨烯(GOH)，有效简化合成工艺，提高石墨烯在纳米载药体系中的应用可行性。

摘要： 眼底自发荧光是近年来发展的一项非侵入性眼底成像技术，它能够显示视网膜色素上皮细胞的分布情况以及够反映其功能，可以作为色素上皮细胞代谢活力的一个指标。频域OCT能在立体层面上对视网膜各层情况进行清楚的扫描。联合这两项检查技术有助于确定某些视网膜疾病发病机制、诊断及其预后评价。本文就自发荧光联合频域OCT在眼底病中的一些图像进行解读分析。

摘要： 目的：活血散结方含药血浆对PDGF干预RPE细胞IGF1蛋白表达的影响.方法：采用含药血浆与PDGF对体外培养的RPE细胞进行分组干预,并采用western blot方法检测RPE细胞中IGF1表达的情况.结果：PDGF干预可以促进RPE细胞中IGF1蛋白的高表达,与正常血浆组比较有极显著性差异(P＜0.01);活血散结含药血浆具有类似AG1296的抑制IGF1蛋白高表达的作用,PDGF+含药血浆组与PDGF组比较有极显著性差异(P＜0.01).结论：活血散结方能抑制PVR的形成,其作用机制可能是通过抑制PDGF的活性,进而抑制RPE细胞增殖并抑制其释放IGF1来实现的.

摘要： 本发明涉及一种用于在体外获得人类视网膜祖细胞的方法，该方法包括以下步骤：(i)将人类多能干细胞的贴壁培养物放置于促神经培养基中；以及，(ii)使所述培养物保持在所述促神经培养基中，直至出现色素细胞和/或神经上皮样结构。有利地，可进行额外的步骤，以获得RPE细胞和/或神经视网膜前体。

摘要： 本发明涉及一种用于获得人视网膜祖细胞的体外方法，包括以下步骤：(i)将人多能干细胞的贴壁培养物置于干细胞特异性促神经培养基中，所述培养物不含饲养细胞；和(ii)在所述干细胞特异性促神经培养基中维持所述培养物，直至出现色素细胞和/或神经上皮样结构。有利地，可以进行另外的步骤以获得RPE细胞和/或神经视网膜的前体。

摘要： 本发明涉及一种用于在体外获得人类视网膜祖细胞的方法，该方法包括以下步骤：(i)将人类多能干细胞的贴壁培养物放置于促神经培养基中；以及，(ii)使所述培养物保持在所述促神经培养基中，直至出现色素细胞和/或神经上皮样结构。有利地，可进行额外的步骤，以获得RPE细胞和/或神经视网膜前体。

摘要： 本发明涉及一种诱导人羊膜上皮细胞向视网膜色素上皮细胞分化的方法及其在治疗视网膜退行性疾病中的应用，该方法为向人羊膜上皮细胞中添加含有10‑100mM烟酰胺和1‑10μM曲古抑菌素A的诱导组合物，诱导产生的细胞高表达MITF、PMEL17、RPE65、Bestrophin等视网膜色素上皮细胞的典型基因。将利用该方法诱导产生的细胞注射到RCS大鼠视网膜下腔，通过ERG以及眼底检测发现大鼠眼睛电生理信号明显增强，眼底结构明显改善，眼球切片HE染色显示其视网膜厚度明显增加，经过上述方案诱导分化后的细胞经注射后对大鼠的视力有一定程度的恢复。本发明中的诱导复合物能够用于人羊膜上皮细胞向视网膜色素上皮细胞的分化以及治疗视网膜损伤相关的眼部疾病。

摘要： 本发明的复合体为包含神经视网膜、视网膜色素上皮细胞片和水凝胶的复合体，神经视网膜和视网膜色素上皮细胞片分别来源于人多能干细胞，神经视网膜中形成有至少包含视细胞层的神经视网膜层，视细胞层至少包含选自由视细胞、视细胞前体细胞及视网膜前体细胞组成的组中的1种以上的细胞，水凝胶的熔点为20°C～40°C，神经视网膜和视网膜色素上皮细胞片的整体包埋于水凝胶中，神经视网膜和视网膜色素上皮细胞片各自的表面的切线方向大致平行，神经视网膜的顶端面与视网膜色素上皮细胞片的顶端面相对，二者被水凝胶隔离而不接触。

摘要： 本发明涉及一种视网膜色素上皮细胞上皮－间充质转换模型及其应用。将ARPE‑19细胞用胰酶消化后，再转入无血清含N2和非必需氨基酸的DMEM‑F12培养基中，并在陪替氏培养皿中培养，即得视网膜色素上皮细胞上皮－间充质转换模型；该模型用于研究视网膜色素上皮细胞发生上皮－间充质转换的分子机制及寻找上皮－间充质转换的干预靶向。与现有技术相比，本发明方法简单易行、重复性好。

摘要： 本发明涉及一种诱导人羊膜上皮细胞向视网膜色素上皮细胞分化的方法及其在治疗视网膜退行性疾病中的应用，该方法为向人羊膜上皮细胞中添加含有10‑100mM烟酰胺和1‑10μM曲古抑菌素A的诱导组合物，诱导产生的细胞高表达MITF、PMEL17、RPE65、Bestrophin等视网膜色素上皮细胞的典型基因。将利用该方法诱导产生的细胞注射到RCS大鼠视网膜下腔，通过ERG以及眼底检测发现大鼠眼睛电生理信号明显增强，眼底结构明显改善，眼球切片HE染色显示其视网膜厚度明显增加，经过上述方案诱导分化后的细胞经注射后对大鼠的视力有一定程度的恢复。本发明中的诱导复合物能够用于人羊膜上皮细胞向视网膜色素上皮细胞的分化以及治疗视网膜损伤相关的眼部疾病。

摘要： 本发明公开了视网膜色素上皮细胞与间充质干细胞在制备治疗视网膜退行性疾病的药物中的应用。胎儿来源的视网膜色素上皮细胞与间充质干细胞在制备治疗视网膜退行性疾病的药物中的应用。所述的视网膜退行性疾病优选老年性黄斑变性。本发明将胎儿来源的视网膜色素上皮细胞与间充质干细胞共同移植治疗视网膜退行性疾病模型小鼠，比单纯的fRPE和单纯的MSC移植治疗，对视网膜损伤后修复功能效果更好。并且，共同移植比单纯一种细胞的移植，移植后存活的细胞数更多，光感受器细胞解救效果更强。并且，共同移植显著抑制了退行性疾病模型小鼠的炎症反应，并促进内源性生长因子的分泌。

摘要： 本发明的复合体为包含神经视网膜、视网膜色素上皮细胞片和水凝胶的复合体，神经视网膜和视网膜色素上皮细胞片分别来源于人多能干细胞，神经视网膜中形成有至少包含视细胞层的神经视网膜层，视细胞层至少包含选自由视细胞、视细胞前体细胞及视网膜前体细胞组成的组中的1种以上的细胞，水凝胶的熔点为20°C～40°C，神经视网膜和视网膜色素上皮细胞片的整体包埋于水凝胶中，神经视网膜和视网膜色素上皮细胞片各自的表面的切线方向大致平行，神经视网膜的顶端面与视网膜色素上皮细胞片的顶端面相对，二者被水凝胶隔离而不接触。

摘要： 本发明涉及一种视网膜色素上皮细胞上皮－间充质转换模型及其应用。将ARPE-19细胞用胰酶消化后，再转入无血清含N2和非必需氨基酸的DMEM-F12培养基中，并在陪替氏培养皿中培养，即得视网膜色素上皮细胞上皮－间充质转换模型；该模型用于研究视网膜色素上皮细胞发生上皮－间充质转换的分子机制及寻找上皮－间充质转换的干预靶向。与现有技术相比，本发明方法简单易行、重复性好。