HepG2.2.15细胞

摘要： 目的探讨C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)基因对肝癌HepG2.215细胞株乙型肝炎病毒(HBV)复制的影响。方法用CRP基因过表达载体、CRP基因沉默载体、CRP基因突变载体及CRP基因空载体的慢病毒转染并筛选HepG2.215细胞稳定株进行研究。分为实验组、阴性对照组和空白对照组。采用RT-qPCR检测各组CRPmRNA表达水平,Western blot检测CRP蛋白表达水平,定量PCR检测HBVcccDNA、HBVDNA表达水平,免疫荧光检测乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)表达情况,透射电镜检查观察HepG2.215细胞病毒复制情况,采用ELISA检测培养上清中HBsAg、HBeAg的表达水平,采用RT-qPCR检测HBVmRNA、HBVpgRNA的表达。结果CRP在HepG2.215细胞中的表达高于HepG2细胞(P<0.05)。CRP基因过表达组与阴性对照组相比较,HepG2.215细胞CRP蛋白和CRPmRNA、HBVcccDNA、HBVpgRNA及HBcAg表达升高,沉默CRP基因上述各项指标表达水平下降(P均<0.05);CRP基因过表达组与空白对照组相比较,HepG2.215细胞HBVmRNA、HBVDNA、HBsAg、HBeAg表达水平升高;CRP基因沉默组与空白对照组相比较,上述各项指标表达均降低(P均<0.05);CRP基因突变表达组与空白对照组相比较,HepG2.215细胞HBsAg表达水平升高(P<0.05)。结论CRP可促进肝癌HepG2.215细胞HBV的复制,并促进HBV相关抗原HBsAg、HBeAg、HBcAg的表达。CRP突变对HBsAg表达有一定促进作用。

摘要： 目的采用改良Alu-PCR技术检测HepG2.2.15细胞中HBV整合位点。方法对传统检测HBV整合的Alu-PCR技术进行改良简化,检测HepG2.2.15细胞中的HBV整合位点,HepG2细胞进行对照。RT-PCR定量检测HepG2.2.15细胞中检测到的HBV整合位点和cccDNA水平。结果在HepG2.2.15细胞中检测到一插入Alu重复序列的HBV整合位点,病毒结合端为1228 nt,嵌合片段有3bp的同源序列(CTG)。加入双氧水(H_(2)O_(2))的HepG2.2.15细胞中该整合位点水平为(-1.13±0.07)lg拷贝/细胞高于未加入H_(2)O_(2)的(-2.10±0.82)lg拷贝/细胞,差异有统计学意义(P<0.01)。加入H_(2)O_(2)的HepG2.2.15细胞中cccDNA水平为(-1.94±1.45)lg拷贝/细胞,未加入H_(2)O_(2)的为(-1.79±1.40)lg拷贝/细胞,差异无统计学意义(P=0.915)。该整合位点和cccDNA水平无显著相关性(P=0.463)。结论采用简易、经济的改良Alu-PCR技术检测HBV整合位点有效简化了实验步骤和节省实验费用,大大降低了HBV整合研究的门槛。对整合位点的定量检测显示肝细胞持续损伤可导致HBV整合细胞的优势克隆扩增。

摘要： 目的 研究复方虎杖方体内外抗乙肝病毒作用.方法 体外实验采用CCK-8染色法检测复方虎杖方水提物、醇提物对HepG2.2.15细胞株的抗增殖活性,采用化学发光微粒子免疫检测法测定HBsAg、HBeAg含量,采用实时荧光定量PCR法检测HBV-DNA含量;体内实验采用血清斑点杂交法(Dot blot)测定给药5、10 d后及停药3 d后鸭血清中的DHBV-DNA含量.结果 体外结果显示,复方虎杖方水提物、醇提物能有效抑制HepG2.2.15细胞增殖活性,IC50分别为51.28 mg/mL和46.78 mg/mL;复方虎杖方能有效抑制HepG2.2.15细胞分泌HBsAg、HBeAg,具有明显的剂量依赖关系,醇提物对HBeAg分泌的抑制作用明显强于水提物;复方虎杖方醇提物能有效抑制HepG2.2.15细胞HBV-DNA复制,但水提物效果不明显.体内结果显示,复方虎杖方能有效抑制鸭血清中DHBV-DNA复制,且能显著抑制停药后的病毒反跳.结论 复方虎杖方体内和体外均有一定的抗乙肝病毒作用,研究为该方的开发应用奠定了基础.

摘要： 目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)preS1、preS2 DNA同聚嘌呤区设计的锁核酸在体外对HBV复制和表达的抑制作用.方法 设计并合成锁核酸,以Lipo3000作为载体转染至锁核酸-脂质体组,设空白对照组,运用荧光定量PCR、化学发光免疫分析等技术观察锁核酸对HBsAg表达、HBV DNA复制的抑制作用,采用CCK8比色法观察锁核酸对HepG2.2.15细胞基本代谢的影响.结果 加入锁核酸后,HBsAg、HBV DNA表达量相对于空白对照组逐渐降低,并随时间呈递增趋势,其中,preS1的3023-3037nt位点在第9天对HBsAg表达的抑制率达(61.94±4.11)％,对HBV DNA复制的抑制率达(56.08±3.22)％;preS2的3305-3320nt位点在第9天对HBsAg表达的抑制率达(72.93±4.14)％,对HBV-DNA复制的抑制率达(61.79±3.40)％.结论 HBV preS1编码链的3023-3037nt位点和preS2编码链的3305-3320nt位点的反基因锁核酸片段对HB-sAg表达和HBV-DNA复制的抑制效果最为明显,两者均可以作为抗HBV治疗的有效靶位.

摘要： 目的 利用慢病毒载体和RNAi干扰技术沉默稳定转染了HBV全基因组的肝癌细胞HepG2.2.15的BUBR1基因,并检测沉默后对细胞增殖的影响.方法 设计BUBR1基因的小干扰RNA,构建稳定遗传的慢病毒载体质粒,并进行测序鉴定.测序正确后用293T细胞进行包装并获得具有高感染性的BUBR1 shRNA重组慢病毒,用重组慢病毒感染HepG2.2.15细胞,通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达情况;Real-time PCR检测沉默效果;MTT法检测沉默BUBR1后对HepG2.2.15细胞增殖的影响.结果 测序结果证明干扰载体中的特异性干扰序列完全正确,测序鉴定正确的BUBR1 shR-NA重组慢病毒转染293T细胞48 h,荧光显微镜下可见绿色荧光,病毒滴度约为10-9 TU/mL;制备成功的重组慢病毒BUBR1 shRNA以MOI=10感染HepG2.2.15细胞,72 h后转染率均达80％以上,用嘌呤霉素筛选得到稳转细胞株;Real-time PCR检测显示3对shRNA靶点转染HepG2.2.15细胞后,均显著下调BUBR1 mRNA的转录水平;MTT结果显示沉默BUBR1对HepG2.2.15细胞增殖没有明显影响.结论 成功构建BUBR1基因慢病毒干扰载体,该病毒载体能有效沉默HepG2.2.15细胞的BUBR1基因,沉默后不影响HepG2.2.15细胞的增殖.

摘要： 目的利用慢病毒载体和RNAi干扰技术沉默稳定转染了HBV全基因组的肝癌细胞HepG2.2.15的BUBR1基因,并检测沉默后对细胞增殖的影响。方法设计BUBR1基因的小干扰RNA,构建稳定遗传的慢病毒载体质粒,并进行测序鉴定。测序正确后用293T细胞进行包装并获得具有高感染性的BUBR1 shRNA重组慢病毒,用重组慢病毒感染HepG2.2.15细胞,通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达情况;Real-time PCR检测沉默效果;MTT法检测沉默BUBR1后对HepG2.2.15细胞增殖的影响。结果测序结果证明干扰载体中的特异性干扰序列完全正确,测序鉴定正确的BUBR1 shRNA重组慢病毒转染293T细胞48 h,荧光显微镜下可见绿色荧光,病毒滴度约为10-9 TU/mL;制备成功的重组慢病毒BUBR1 shRNA以MOI=10感染HepG2.2.15细胞,72 h后转染率均达80%以上,用嘌呤霉素筛选得到稳转细胞株;Real-time PCR检测显示3对shRNA靶点转染HepG2.2.15细胞后,均显著下调BUBR1 mRNA的转录水平;MTT结果显示沉默BUBR1对HepG2.2.15细胞增殖没有明显影响。结论成功构建BUBR1基因慢病毒干扰载体,该病毒载体能有效沉默HepG2.2.15细胞的BUBR1基因,沉默后不影响HepG2.2.15细胞的增殖。

摘要： 目的 探讨NLRC5在Hep G2.2.15细胞中的表达情况及其对主要组织相容性复合体Ⅰ类分子(M HC-Ⅰ类分子)表达的调节作用.方法 将实验分为Hep G2组、Hep G2+IFN-γ组、Hep G2.2.15组、Hep G2.2.15+IFN-γ组、Hep G2.2.15+pcDNA3.1-NLRC5-GFP组、Hep G2.2.15+pc DNA3.1组,检测NLRC5转录水平及蛋白表达情况,以及过表达NLRC5后MHC-Ⅰ类分子表达情况.结果 与Hep G2细胞相比,Hep G2.2.15细胞中的NLRC5转录水平、蛋白表达水平、MHC-Ⅰ类分子的表达水平降低(P<0.05).Hep G2细胞加入IFN-γ后,NLRC5的转录水平及蛋白表达水平均增加(P<0.05),Hep G2.2.15细胞蛋白水平无明显变化.与未转染组相比,过表达NLRC5蛋白后的Hep G2.2.15细胞表面的MHC-Ⅰ类分子表达上调(P<0.05).结论 HBV感染导致MHC-Ⅰ类分子表达下调,而NLRC5可上调MHC-Ⅰ类分子的表达.

摘要： 目的:研究体内、体外乙型肝炎病毒(hepatitisB virus,HBV)复制水平与肝细胞内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ER stress)反应基因表达的相关性.方法:选择7例慢性HBV感染者作体内研究,用液氮冷冻保存肝脏穿刺活检组织,检测肝功能并提取mRNA;体外研究分三组,转染组(HepG2.2.15)为HBV基因转染人肝癌细胞株,对照组(HepG2)为人肝癌细胞株,干预组(3TC)为50μg/mL拉米夫定作用于HBV基因转染人肝癌细胞.分别培养2天、4天、6天后收集细胞提取mRNA.HBV DNA载量的测定用实时定量聚合酶链反应(PCR);活化转录因子4(ATF4)、转录因子C/EBP同源蛋白(CHOP)、活化转录因子6(ATF6)、X盒结合蛋白1(XBP1)及葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的mRNA表达,用SYBR Green荧光定量逆转录聚合酶链反应(SYBR Green RT-PCR)检测,以β-actin为内参照;GRP78的表达用蛋白免疫印迹法(WB)检测.结果:体内研究结果表明:XBP1、GRP78、CHOP及ATF6基因表达水平与病毒载量、炎症程度及肝组织纤维化程度无显著相关性(P＞0.05);ATF6与GRP78基因表达水平和HBV DNA水平呈显著正相关(P＜0.05).体外研究结果表明:干预组细胞培养2天至6天HBV DNA水平下降,CHOP、GRP78、ATF6及XBPl基因表达水平在三组之间差异无统计学意义(P＞0.05);WB结果表明,转染组细胞GRP78的表达培养4天与6天相比差异无统计学意义(P＞0.05),干预组培养6天后与转染组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:研究结果提示体内HBV复制水平与肝细胞ER stress反应显著相关,而肝脏炎症程度及肝脏纤维化程度等与ER stress反应无明显相关性;体外三组细胞之间ER stress基因的表达无显著差异(P＞0.05).

摘要： 目的：体外考查半乳糖基化白蛋白融合干扰素α2b(GHSA-IFN)的生物学活性。方法：GHSA-IFN作用HepG2.2.15细胞后，应用SRB法检测细胞增殖情况；酶联免疫分析检测细胞培养上清中HBsAg与HBeAg的表达；流式细胞分析细胞周期的变化；Hochest33342/PI双染观察细胞形态变化；Western Blot检测Bcl-2/Bax的表达。结果：GHSA-IFN作用HepG2.2.15细胞后，细胞增殖有所抑制。细胞培养上清中HBsAg的表达明显受抑，且呈时间、剂量依赖性；而HBeAg的表达虽然受抑，但不明显。流式细胞分析发现细胞被阻滞于G0/G1期。Hochest33342/PI双染观察发现，在一定浓度范围内GHSA-IFN可诱导细胞凋亡，直至死亡。Western Blot检测发现药物浓度大于5000U/ml时Bcl-2的表达降低而Bax的表达增加。结论：GHSA-IFN能明显抑制HepG2.2.15细胞分泌HBsAg，抑制其增殖，有望应用于乙型肝炎的临床治疗。

摘要： 目的：体外考查半乳糖基化白蛋白融合干扰素α2b(GHSA-IFN)的生物学活性。方法：GHSA-IFN作用HepG2.2.15细胞后，应用SRB法检测细胞增殖情况；酶联免疫分析检测细胞培养上清中HBsAg与HBeAg的表达；流式细胞分析细胞周期的变化；Hochest33342/PI双染观察细胞形态变化；Western Blot检测Bcl-2/Bax的表达。结果：GHSA-IFN作用HepG2.2.15细胞后，细胞增殖有所抑制。细胞培养上清中HBsAg的表达明显受抑，且呈时间、剂量依赖性；而HBeAg的表达虽然受抑，但不明显。流式细胞分析发现细胞被阻滞于G0/G1期。Hochest33342/PI双染观察发现，在一定浓度范围内GHSA-IFN可诱导细胞凋亡，直至死亡。Western Blot检测发现药物浓度大于5000U/ml时Bcl-2的表达降低而Bax的表达增加。结论：GHSA-IFN能明显抑制HepG2.2.15细胞分泌HBsAg，抑制其增殖，有望应用于乙型肝炎的临床治疗。

摘要： 目的：体外考查半乳糖基化白蛋白融合干扰素α2b(GHSA-IFN)的生物学活性。方法：GHSA-IFN作用HepG2.2.15细胞后，应用SRB法检测细胞增殖情况；酶联免疫分析检测细胞培养上清中HBsAg与HBeAg的表达；流式细胞分析细胞周期的变化；Hochest33342/PI双染观察细胞形态变化；Western Blot检测Bcl-2/Bax的表达。结果：GHSA-IFN作用HepG2.2.15细胞后，细胞增殖有所抑制。细胞培养上清中HBsAg的表达明显受抑，且呈时间、剂量依赖性；而HBeAg的表达虽然受抑，但不明显。流式细胞分析发现细胞被阻滞于G0/G1期。Hochest33342/PI双染观察发现，在一定浓度范围内GHSA-IFN可诱导细胞凋亡，直至死亡。Western Blot检测发现药物浓度大于5000U/ml时Bcl-2的表达降低而Bax的表达增加。结论：GHSA-IFN能明显抑制HepG2.2.15细胞分泌HBsAg，抑制其增殖，有望应用于乙型肝炎的临床治疗。

摘要： 目的：体外考查半乳糖基化白蛋白融合干扰素α2b(GHSA-IFN)的生物学活性。方法：GHSA-IFN作用HepG2.2.15细胞后，应用SRB法检测细胞增殖情况；酶联免疫分析检测细胞培养上清中HBsAg与HBeAg的表达；流式细胞分析细胞周期的变化；Hochest33342/PI双染观察细胞形态变化；Western Blot检测Bcl-2/Bax的表达。结果：GHSA-IFN作用HepG2.2.15细胞后，细胞增殖有所抑制。细胞培养上清中HBsAg的表达明显受抑，且呈时间、剂量依赖性；而HBeAg的表达虽然受抑，但不明显。流式细胞分析发现细胞被阻滞于G0/G1期。Hochest33342/PI双染观察发现，在一定浓度范围内GHSA-IFN可诱导细胞凋亡，直至死亡。Western Blot检测发现药物浓度大于5000U/ml时Bcl-2的表达降低而Bax的表达增加。结论：GHSA-IFN能明显抑制HepG2.2.15细胞分泌HBsAg，抑制其增殖，有望应用于乙型肝炎的临床治疗。

摘要： 目的：体外考查半乳糖基化白蛋白融合干扰素α2b(GHSA-IFN)的生物学活性。方法：GHSA-IFN作用HepG2.2.15细胞后，应用SRB法检测细胞增殖情况；酶联免疫分析检测细胞培养上清中HBsAg与HBeAg的表达；流式细胞分析细胞周期的变化；Hochest33342/PI双染观察细胞形态变化；Western Blot检测Bcl-2/Bax的表达。结果：GHSA-IFN作用HepG2.2.15细胞后，细胞增殖有所抑制。细胞培养上清中HBsAg的表达明显受抑，且呈时间、剂量依赖性；而HBeAg的表达虽然受抑，但不明显。流式细胞分析发现细胞被阻滞于G0/G1期。Hochest33342/PI双染观察发现，在一定浓度范围内GHSA-IFN可诱导细胞凋亡，直至死亡。Western Blot检测发现药物浓度大于5000U/ml时Bcl-2的表达降低而Bax的表达增加。结论：GHSA-IFN能明显抑制HepG2.2.15细胞分泌HBsAg，抑制其增殖，有望应用于乙型肝炎的临床治疗。

摘要： 目的：体外考查半乳糖基化白蛋白融合干扰素α2b(GHSA-IFN)的生物学活性。方法：GHSA-IFN作用HepG2.2.15细胞后，应用SRB法检测细胞增殖情况；酶联免疫分析检测细胞培养上清中HBsAg与HBeAg的表达；流式细胞分析细胞周期的变化；Hochest33342/PI双染观察细胞形态变化；Western Blot检测Bcl-2/Bax的表达。结果：GHSA-IFN作用HepG2.2.15细胞后，细胞增殖有所抑制。细胞培养上清中HBsAg的表达明显受抑，且呈时间、剂量依赖性；而HBeAg的表达虽然受抑，但不明显。流式细胞分析发现细胞被阻滞于G0/G1期。Hochest33342/PI双染观察发现，在一定浓度范围内GHSA-IFN可诱导细胞凋亡，直至死亡。Western Blot检测发现药物浓度大于5000U/ml时Bcl-2的表达降低而Bax的表达增加。结论：GHSA-IFN能明显抑制HepG2.2.15细胞分泌HBsAg，抑制其增殖，有望应用于乙型肝炎的临床治疗。

摘要： 目的:研究HAS-IFN对HepG 2.2.15细胞增殖、凋亡及HBsAg与HBeAg表达的影响。方法:应用SRB法检测HAS-IFN作用HepG 2.2.15细胞对其增殖的抑制作用，酶联免疫法检测HAS-IFN对HepG 2.2.15细胞HBsAg与HBeAg的表达的影响。Hochest33342、PI双染观察细胞的凋亡和死亡，Western Blot印迹检测Bel-2、Bax的表达。结果: HAS-IFN作用HepG 2.2.15细胞后增殖都有所抑制，培养上清中HBsAg，HBeAg表达在3天后就有抑制作用，6天后HBsAg表达的抑制作用明显增加，而HBeAg表达的抑制作用与3天后的结果相似。Hochest33342、PI双染和Western Blot印迹显示HAS-IFN可引起细胞的凋亡，Bcl-2/Bax比值下降。结论:HAS-IFN体外可抑制HBsAg、HBeAg表达，且对HepG2.2.15细胞的增殖也有所抑制，并可引起细胞的凋亡。

摘要： 目的:研究HAS-IFN对HepG 2.2.15细胞增殖、凋亡及HBsAg与HBeAg表达的影响。方法:应用SRB法检测HAS-IFN作用HepG 2.2.15细胞对其增殖的抑制作用，酶联免疫法检测HAS-IFN对HepG 2.2.15细胞HBsAg与HBeAg的表达的影响。Hochest33342、PI双染观察细胞的凋亡和死亡，Western Blot印迹检测Bel-2、Bax的表达。结果: HAS-IFN作用HepG 2.2.15细胞后增殖都有所抑制，培养上清中HBsAg，HBeAg表达在3天后就有抑制作用，6天后HBsAg表达的抑制作用明显增加，而HBeAg表达的抑制作用与3天后的结果相似。Hochest33342、PI双染和Western Blot印迹显示HAS-IFN可引起细胞的凋亡，Bcl-2/Bax比值下降。结论:HAS-IFN体外可抑制HBsAg、HBeAg表达，且对HepG2.2.15细胞的增殖也有所抑制，并可引起细胞的凋亡。

摘要： 目的:研究HAS-IFN对HepG 2.2.15细胞增殖、凋亡及HBsAg与HBeAg表达的影响。方法:应用SRB法检测HAS-IFN作用HepG 2.2.15细胞对其增殖的抑制作用，酶联免疫法检测HAS-IFN对HepG 2.2.15细胞HBsAg与HBeAg的表达的影响。Hochest33342、PI双染观察细胞的凋亡和死亡，Western Blot印迹检测Bel-2、Bax的表达。结果: HAS-IFN作用HepG 2.2.15细胞后增殖都有所抑制，培养上清中HBsAg，HBeAg表达在3天后就有抑制作用，6天后HBsAg表达的抑制作用明显增加，而HBeAg表达的抑制作用与3天后的结果相似。Hochest33342、PI双染和Western Blot印迹显示HAS-IFN可引起细胞的凋亡，Bcl-2/Bax比值下降。结论:HAS-IFN体外可抑制HBsAg、HBeAg表达，且对HepG2.2.15细胞的增殖也有所抑制，并可引起细胞的凋亡。

摘要： 目的:研究HAS-IFN对HepG 2.2.15细胞增殖、凋亡及HBsAg与HBeAg表达的影响。方法:应用SRB法检测HAS-IFN作用HepG 2.2.15细胞对其增殖的抑制作用，酶联免疫法检测HAS-IFN对HepG 2.2.15细胞HBsAg与HBeAg的表达的影响。Hochest33342、PI双染观察细胞的凋亡和死亡，Western Blot印迹检测Bel-2、Bax的表达。结果: HAS-IFN作用HepG 2.2.15细胞后增殖都有所抑制，培养上清中HBsAg，HBeAg表达在3天后就有抑制作用，6天后HBsAg表达的抑制作用明显增加，而HBeAg表达的抑制作用与3天后的结果相似。Hochest33342、PI双染和Western Blot印迹显示HAS-IFN可引起细胞的凋亡，Bcl-2/Bax比值下降。结论:HAS-IFN体外可抑制HBsAg、HBeAg表达，且对HepG2.2.15细胞的增殖也有所抑制，并可引起细胞的凋亡。

摘要： 本发明公开了一种细胞抗逆基因片段及改造的HepG2细胞，其中细胞抗逆基因片段，由CPS1、OATP1B3两种基因片段顺序构成。以该基因片段改造的HepG2细胞，促细胞生长因子ALR分泌增加5％，肝细胞生长因子HGF分泌增加一倍，反应到促肝损伤后恢复速度提高10倍，细胞抗逆能力大大提升。

摘要： 本发明公开了一种增强解毒功能基因片段及改造的HepG2细胞，其中增强解毒功能基因片段，由OTC、ARG1、OATP1B1三种基因片段顺序构成。以该基因片段改造的HepG2细胞，白蛋白表达提高了一倍；谷草转氨酶的表达提高10％；细胞色素P450家族中内源性解毒能力相关的关键蛋白分泌增加，解毒能力提高：CYP2C9分泌提高5倍，CYP2D6分泌提高50倍，CYP2A6分泌提高2倍，CYP3A4分泌提高100倍。

摘要： 本发明公开了一种胆红素代谢功能基因片段及改造的HepG2细胞，其中胆红素代谢功能基因片段，由UGT1A1、GS、OATP1B1三种基因片段顺序构成。以该基因片段改造的HepG2细胞，UGT1A1蛋白表达提高了120倍，相对于正常肝细胞提高了15倍；OATP1B1蛋白表达提高了接近10倍，基本接近正常肝细胞水平；反应到胆红素代谢酶活性的提高了15倍；凝血因子Ⅴ分泌提高了70％；凝血因子Ⅹ分泌提高了10倍，达到正常肝细胞的五分之一。

摘要： 本发明在人肝癌细胞系HepG2/C3A中同时稳定表达激活型的AKT1和激活型的MEK1，首次获得可在无血清添加和无生长因子添加的完全化学成分限定培养基中生长的人肝癌细胞群C3A810。利用该细胞群作为反应器成功重组表达人血清白蛋白（human serum albumin，HSA），表明该细胞可作为包括人血清白蛋白在内的血浆蛋白药物、人血清白蛋白融合的细胞长效细胞因子等多种人用重组蛋白药物的反应器。

摘要： 枸橼酸喷托维林抑制肝癌HepG2细胞增殖的作用技术领域：本发明涉及一种非临床抗肿瘤药物枸橼酸喷托维林，被发现具有抗肿瘤作用，主要是能够显著抑制肝癌HepG2细胞的增殖。要解决的技术问题：利用肝癌HepG2细胞筛选一些非临床抗肿瘤药物，发现具有抗肿瘤作用的非临床抗肿瘤药物枸橼酸喷托维林。解决该问题的技术方案的要点：应用浓度为75μM的枸橼酸喷托维林处理肝癌HepG2细胞48h，通过显微镜观察细胞形态和数量变化。再进行细胞生存率，LDH活性检测和细胞凋亡检测。主要用途：枸橼酸喷托维林能够显著抑制肝癌HepG2细胞的增殖，可能用于肝癌患者的临床治疗。

摘要： 本发明涉及一种抗肝癌细胞HepG2侵袭表型的组合物。该组合物由五没食子酰葡萄糖与5‑氟尿嘧啶组成，具有协同抑制HepG2癌细胞增殖作用，在6‑36μM五没食子酰葡萄糖与3.125‑200μM的5‑氟尿嘧啶的浓度范围内有显著协同作用。具有协同作用的浓度范围宽，浓度依赖性强的特点。该组合物可减少5‑氟尿嘧啶用量和毒副作用并减缓对5‑氟尿嘧啶的抗药性。

摘要： 本发明公开了一种细胞抗逆基因片段及改造的HepG2细胞，其中细胞抗逆基因片段，由CPS1、OATP1B3两种基因片段顺序构成。以该基因片段改造的HepG2细胞，促细胞生长因子ALR分泌增加5％，肝细胞生长因子HGF分泌增加一倍，反应到促肝损伤后恢复速度提高10倍，细胞抗逆能力大大提升。

摘要： 本发明公开了一种提高HepG2细胞克隆形成率的单克隆增强培养基和方法，涉及HepG2细胞克隆技术领域。单克隆增强培养基的组分包括RPMI‑1640培养基、DMEM培养基、胎牛血清、肝细胞生长因子和胰岛素样生长因子‑1；提高HepG2细胞克隆形成率的方法如下：将HepG2细胞依次进行原代培养和传代培养后，采用有限稀释法制备单克隆，且在培养至24～48h后，将基础培养基更换为单克隆增强培养基，继续培养形成单克隆。使用本发明的单克隆增强培养基，HepG2细胞的单克隆形成率显著提高，这一发明解决了常规培养条件下HepG2细胞的单克隆形成率较低的问题。

摘要： 本发明在人肝癌细胞系HepG2/C3A中同时稳定表达激活型的AKT1和激活型的MEK1，首次获得可在无血清添加和无生长因子添加的完全化学成分限定培养基中生长的人肝癌细胞群C3A810。利用该细胞群作为反应器成功重组表达人血清白蛋白（human serum albumin，HSA），表明该细胞可作为包括人血清白蛋白在内的血浆蛋白药物、人血清白蛋白融合的细胞长效细胞因子等多种人用重组蛋白药物的反应器。

摘要： 1,5,6‑三甲氧基‑2,7‑二羟基菲对HepG‑2细胞作用的检测方法、应用，属于医药技术领域，通过细胞划痕实验证实1,5,6‑三甲氧基‑2,7‑二羟基菲可抑制HepG‑2细胞的迁移；通过Hoechst33258荧光染色、AnnexinV‑FITC/PI双染、PI单染细胞凋亡检测均证实1,5,6‑三甲氧基‑2,7‑二羟基菲可诱导细胞凋亡；通过PI单染细胞周期方法证实，1,5,6‑三甲氧基‑2,7‑二羟基菲可诱导HepG‑2细胞G0/G1期阻滞，1,5,6‑三甲氧基‑2,7‑二羟基菲通过激活p53蛋白发挥抗肿瘤的作用，应用于制备治疗和/或预防肝癌的药物。