HBV

摘要： Objective:Hepatitis B virus(HBV)infection is a major public health problem worldwide.However,the regulatory mechanisms underlying HBV replication remain unclear.Cullin 4 B-RING ubiquitin E3 ligase(CRL4 B)is involved in regulating diverse physiological and pathophysiological processes.In our study,we aimed to explain the role of CUL4 B in HBV infection.Methods:Cul4 b transgenic mice or conditional knockout mice,as well as liver cell lines with CUL4 B overexpression or knockdown,were used to assess the role of CUL4 B in HBV replication.Immunoprecipitation assays and immunofluorescence staining were performed to study the interaction between CUL4 B and HBx.Cycloheximide chase assays and in vivo ubiquitination assays were performed to evaluate the half-life and the ubiquitination status of HBx.Results:The hydrodynamics-based hepatitis B model in Cul4 b transgenic or conditional knockout mice indicated that CUL4 B promoted HBV replication(P<0.05).Moreover,the overexpression or knockdown system in human liver cell lines validated that CUL4 B increased HBV replication in an HBx-dependent manner.Importantly,immunoprecipitation assays and immunofluorescence staining showed an interaction between CUL4 B and HBx.Furthermore,CUL4 B upregulated HBx protein levels by inhibiting HBx ubiquitination and proteasomal degradation(P<0.05).Finally,a positive correlation between CUL4 B expression and HBV pg RNA level was observed in liver tissues from HBV-positive patients and HBV transgenic mice.Conclusions:CUL4 B enhances HBV replication by interacting with HBx and disrupting its ubiquitin-dependent proteasomal degradation.CUL4 B may therefore be a potential target for anti-HBV therapy.

摘要： 通过包被原料活性筛选、方阵滴定试验及灵敏度与稳定性试验分析,优选试剂生产所需的生物活性原材料;重新标定乙肝两对半定量校准品,转为国际单位 (IU),并将优化后的试剂与进口同类产品进行临床比对.研究结果显示,优化后的各试剂灵敏度较高,稳定性符合国家相关要求;HBs Ag阳性血浆的原始浓度值为3 200 IU·m L^(-1).采用优化后的定量诊断试剂盒与进口雅培试剂盒同时测定280例临床血清标本,结果显示,HBs Ag、HBs Ab试剂盒总符合率为 98.2%,HBe Ag、HBe Ab 试剂盒总符合率分别是 96.4% 和 96.0%,HBc Ab 试剂盒总符合率为 97.1%.表明优化的试剂盒可定量测定乙型肝炎5项标志物,性能良好,达到进口产品水平,可以满足临床需求.

摘要： 目的观察氧化槐定碱抑制HBV诱发肝纤维化的机制。方法采用细胞间非接触式的共培养体系进行培养,同时建立HBV诱发肝纤维化的动物模型,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测LX-2细胞抑制率,qRT-PCR法检测α-SMA、collagenⅠmRNA水平,Western blot检测细胞纤维化、自噬、AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达水平,运用AKT-siRNA、雷帕霉素、自噬抑制剂(3-MA)探讨自噬对肝纤维化的影响。结果体外实验显示:0.5-32 mg·L^(-1)氧化槐定碱抑制LX-2细胞的增殖(P<0.05);与对照组比较,氧化槐定碱4、8、16、32 mg·L^(-1)组α-SMA、collagenⅠmRNA表达水平降低,Beclin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ水平上调,p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR水平下调(P<0.05);与氧化槐定碱16 mg·L^(-1)组比较,氧化槐定碱16 mg·L^(-1)+AKT-siRNA组抑制率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ明显增加,p-AKT/AKT、collagenⅠ明显降低(P<0.05);与氧化槐定碱16 mg·L^(-1)组比较,氧化槐定碱16 mg·L^(-1)+3-MA组抑制率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ明显降低,p-AKT/AKT、collagenⅠ明显增加(P<0.05)。体内实验显示:与氧化槐定碱组比较,氧化槐定碱+雷帕霉素组ALT、AST、collagenⅠ、p-mTOR/mTOR水平明显下调,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ水平明显上调;氧化槐定碱+3-MA组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ水平明显下调,collagenⅠ、p-mTOR/mTOR明显上调(均P<0.05)。结论氧化槐定碱能调控肝细胞自噬,上调细胞纤维化水平,其机制可能与调控AKT/mTOR信号通路有关。

摘要： 目的探讨黄芪多糖对肝癌Hep G2.215细胞体外增殖的抑制作用及其作用机制。方法CCK-8法测定不同浓度黄芪多糖作用于Hep G2.215细胞48 h、72 h后对其增殖影响;平板细胞克隆实验测定不同浓度黄芪多糖对Hep G2.215细胞克隆生长的影响;流式细胞术检测黄芪多糖对Hep G2.215细胞周期和凋亡的影响。结果CCK-8检测结果显示,当黄芪多糖给药浓度达1000 μg/ml时,对Hep G2.215细胞生长具有抑制作用,且与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。平板细胞克隆实验表明,低浓度(100 μg/ml)的黄芪多糖对Hep G2.215细胞克隆形成具有抑制作用,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞术检测结果显示,G2/M期细胞比例与对照组相比呈下降趋势(P<0.05),经过黄芪多糖处理的Hep G2.215细胞,细胞凋亡率高于对照组(P<0.05)。结论黄芪多糖对肝癌Hep G2.215细胞生长具有抑制作用,其机制可能是通过阻滞Hep G2.215细胞进入G2/M期,激活了细胞凋亡系统,从而诱导细胞凋亡。

摘要： 目的:探究抑制性受体TIGIT在HBV免疫应答中的作用及靶向TIGIT在HBV免疫治疗中的可能应用。方法:利用高压注射pAAV-HBV1.2质粒获得HBV携带小鼠,利用流式细胞术分析NK细胞和T细胞上TIGIT的表达。通过单克隆抗体阻断和基因缺陷验证TIGIT在HBV免疫应答中的作用。结果:HBV携带小鼠NK细胞和T细胞显著上调表达TIGIT;抗体阻断TIGIT后HBV携带小鼠血清HBsAg水平显著降低,且HBsAg转阴率增高。抗体阻断TIGIT增加肝脏中NK细胞及T细胞数量并增强其分泌细胞因子的功能。TIGIT分子的缺陷亦导致HBV携带小鼠血清HBsAg水平显著降低。结论:靶向阻断TIGIT在HBV免疫治疗中具有潜在的应用价值。

摘要： 目的探究HBV相关慢加急性肝衰竭(HBV-related acute-on-chronic liver failure,HBV-ACLF)患者血清中微小核糖核酸(microRNA,miR)-122和高迁移率族蛋白1(high-mobility group box-B1,HMGB1)水平及其与病情、预后的关系。方法回顾性分析2016年1月—2018年1月我院收治的120例HBV-ACLF患者的一般及临床资料。根据临床结局,将患者分为存活组(53例)和死亡组(67例)。比较2组患者的一般资料、实验室检查指标及血清miR-122、HMGB1水平。多因素Logistic回归分析影响患者预后的因素。Pearson检验分析miR-122、HMGB1水平分别与TBIL、PA、终末期肝病评分模型(the model of end-stage liver disease score,MELD)评分的相关性。ROC曲线分析miR-122和HMGB1水平对患者的死亡预测价值,获得最佳临界值。根据临界值将患者分为A组、B组和C组,用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,比较3组患者在3年随访期间的生存率。结果存活组和死亡组患者的年龄、身体质量指数、并发症、病情分期、MELD评分、ALB、球蛋白、TBIL、ALT、AST、LDH、PT、PTA、HBV DNA、miR-122、HMGB1相比,差异均具有统计学意义(P均<0.05)。年龄、并发症、病情分期、MELD评分、TBIL、PT、PTA、miR-122、HMGB1均是影响患者预后的危险因素(P均<0.05)。miR-122、HMGB1水平分别与TBIL、MELD评分呈显著正相关,与PTA呈显著负相关(P均<0.05)。miR-122和HMGB1预测患者死亡的最佳临界值分别为31.42和14.56μg/L。A组患者预后3年内生存率显著高于B组和C组(P均<0.05)。结论miR-122和HMGB1水平与HBV-ACLF患者的病情和死亡预后密切相关,可间接反映患者的病情严重程度,在HBV-ACLF的诊断及预后中具有重要价值。

摘要： 原发性肝癌居我国非成熟死亡原因的首位,其中肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)占90%以上。慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染是HCC发生的主要原因。HBV致癌依赖三大因素:病毒复制、整合和进化,其中HBV X基因(HBV X gene,HBx)在这些过程中起主要作用。HBx还能通过表观遗传修饰促进病毒复制,然后通过整合到宿主基因组产生C-端截短型HBx(c-terminal truncated HBx,Ct-HBx)和整合突变,因此也是HBV进化的主要区域。同时,HBx还通过影响关键基因的表达,参与多种信号通路,从而直接促进HCC的发生发展。本文总结了近年来HBx及其变异在HBV-HCC发生发展过程中的作用及机制。

摘要： 乙型肝炎病毒(HBV)攻击肝脏,可以引起急性、慢性肝病,并导致肝硬化和肝细胞癌。虽然乙肝疫苗已广泛使用,治疗方法也在不断进步,但HBV仍威胁着人类的健康。最近研究表明,微小RNA(miRNA)已经成为基因功能的重要调节剂。关于miRNA在乙型肝炎病毒基因表达方面的调控作用是现代抗病毒研究的重点。miRNA可以调控病毒复制和发病机制,包括直接或间接抑制,激活免疫反应,表观遗传调节等等,这些机制可以适当地与诊断或治疗方法一起使用。文章主要总结了miRNA在乙肝生物学方面的不同作用。

摘要： 目的评价聚乙二醇干扰素Peg-IFN在乙型肝炎病毒(HBV)相关原发性肝癌(HCC)手术切除术后及介入术后抗复发中的应用价值。方法随机选取2011年1月至2015年6月大连市第六人民医院接受手术切除和(或)介入术后的HBV相关HCC患者60例,患者无性别限制,年龄均>18周岁;其中接受术后Peg-IFN治疗的患者30例;术后未接受Peg-IFN治疗患者30例。统计两组患者术后1年、2年、3年及5年的复发率、生存率。结果接受Peg-IFN治疗组1年、2年、3年及5年的生存率为93.33%(28/30)、83.33%(25/30)、60.00%(18/30)、50.00%(15/30);未接受Peg-IFN治疗组1年、2年、3年及5年的生存率为76.67%(23/30)、63.33%(19/30)、53.33%(16/30)、46.67%(14/30)。接受Peg-IFN治疗组1年、2年、3年及5年的复发率分别为6.67%(2/30)、23.30%(7/30)、46.67%(14/30)、70.00%(21/30);未接受Peg-IFN治疗组1年、2年、3年及5年的复发率分别为26.67%(8/30)、46.67%(14/30)、66.67%(20/30)、86.67%(26/30)。结论HBV相关HCC患者手术切除术后和(或)介入术后应用Peg-IFN可更好地降低术后复发率,提高患者生存率。

摘要： 目的:探索慢性乙型肝炎肝组织中Atg7、LC3水平对HBV复制水平的影响。方法:在2018年3月-2020年5月选取140例健康体检者(对照组)、140例慢性乙型肝炎患者(观察组)为实验对象,均进行肝组织中Atg7、LC3水平筛查以及HBV病毒载量测定,对比两组Atg7、LC3、HBV-DNA,并经Pearson法分析HBV-DNA与Atg7、LC3相关性;经ROC曲线分析各类筛查方式的预测价值。结果:观察组Atg7、LC3、HBV-DNA水平高于对照组(P<0.05)。经Pearson法分析,HBV-DNA与Atg7、LC3呈正相关性,慢性乙型肝炎发生与Atg7、LC3、HBV-DNA呈负相关性。经ROC曲线分析,Atg7预测HBV复制水平高表达的AUC为0.814,LC3筛查预测的AUC为0.845,Atg7联合LC3筛查预测的AUC为0.914。结论:HBV感染可引起Atg7、LC3表达增加,自噬增强,早期筛查Atg7、LC3水平,可预测HBV复制高表达情况,尽早预判疾病发生、发展,便于临床诊疗。

摘要： 本研究以不同乙型肝炎患者为研究对象，采用流式细胞术测定CTL细胞的HLA-A2的基因表型，采用免疫斑点吸附试验(ELISPOT)测定乙肝患者针对HBV四个重要表位肤的特异性CTL的数琶和功能变化，分析不同乙肝人群特异性CTL免疫应答差异，探讨感染HBV后不同个体临床转归差异的机制。

摘要： 本研究以不同乙型肝炎患者为研究对象，采用流式细胞术测定CTL细胞的HLA-A2的基因表型，采用免疫斑点吸附试验(ELISPOT)测定乙肝患者针对HBV四个重要表位肤的特异性CTL的数琶和功能变化，分析不同乙肝人群特异性CTL免疫应答差异，探讨感染HBV后不同个体临床转归差异的机制。

摘要： 本研究以不同乙型肝炎患者为研究对象，采用流式细胞术测定CTL细胞的HLA-A2的基因表型，采用免疫斑点吸附试验(ELISPOT)测定乙肝患者针对HBV四个重要表位肤的特异性CTL的数琶和功能变化，分析不同乙肝人群特异性CTL免疫应答差异，探讨感染HBV后不同个体临床转归差异的机制。

摘要： 本研究以不同乙型肝炎患者为研究对象，采用流式细胞术测定CTL细胞的HLA-A2的基因表型，采用免疫斑点吸附试验(ELISPOT)测定乙肝患者针对HBV四个重要表位肤的特异性CTL的数琶和功能变化，分析不同乙肝人群特异性CTL免疫应答差异，探讨感染HBV后不同个体临床转归差异的机制。

摘要： 本研究以不同乙型肝炎患者为研究对象，采用流式细胞术测定CTL细胞的HLA-A2的基因表型，采用免疫斑点吸附试验(ELISPOT)测定乙肝患者针对HBV四个重要表位肤的特异性CTL的数琶和功能变化，分析不同乙肝人群特异性CTL免疫应答差异，探讨感染HBV后不同个体临床转归差异的机制。

摘要： 本研究以不同乙型肝炎患者为研究对象，采用流式细胞术测定CTL细胞的HLA-A2的基因表型，采用免疫斑点吸附试验(ELISPOT)测定乙肝患者针对HBV四个重要表位肤的特异性CTL的数琶和功能变化，分析不同乙肝人群特异性CTL免疫应答差异，探讨感染HBV后不同个体临床转归差异的机制。

摘要： 目的：构建携带HBVC基因的重组MVA假病毒颗粒,为进一步评价其作为基因治疗工具的价值奠定基础。方法 将HBVC基因通过基因重组构建入穿梭载体pSC11,得到质粒pSC11-C,将此质粒转染MVA病毒感染的原代鸡胚细胞单层,通过同源重组得到MVA-C,采用特异性PCR鉴定重组病毒。经过X-gal筛选,9次克隆传代得到单克隆重组病毒。将病毒培养物经蔗糖梯密度离心纯化后滴定病毒滴度。结果 采用PCR和基因测序等鉴定证实得到的假病毒颗粒携带HBVC基因,并且具有良好的抗原性。重组病毒的滴度为2.6×10pfu/ml。结论 本试验成功的构建了携带HBVC基因的重组MVA假病毒颗粒MVA-C,为研究HBV慢性感染的基因治疗提供了新的途径。

摘要： 目的：构建携带HBVC基因的重组MVA假病毒颗粒,为进一步评价其作为基因治疗工具的价值奠定基础。方法 将HBVC基因通过基因重组构建入穿梭载体pSC11,得到质粒pSC11-C,将此质粒转染MVA病毒感染的原代鸡胚细胞单层,通过同源重组得到MVA-C,采用特异性PCR鉴定重组病毒。经过X-gal筛选,9次克隆传代得到单克隆重组病毒。将病毒培养物经蔗糖梯密度离心纯化后滴定病毒滴度。结果 采用PCR和基因测序等鉴定证实得到的假病毒颗粒携带HBVC基因,并且具有良好的抗原性。重组病毒的滴度为2.6×10pfu/ml。结论 本试验成功的构建了携带HBVC基因的重组MVA假病毒颗粒MVA-C,为研究HBV慢性感染的基因治疗提供了新的途径。

摘要： 目的：构建携带HBVC基因的重组MVA假病毒颗粒,为进一步评价其作为基因治疗工具的价值奠定基础。方法 将HBVC基因通过基因重组构建入穿梭载体pSC11,得到质粒pSC11-C,将此质粒转染MVA病毒感染的原代鸡胚细胞单层,通过同源重组得到MVA-C,采用特异性PCR鉴定重组病毒。经过X-gal筛选,9次克隆传代得到单克隆重组病毒。将病毒培养物经蔗糖梯密度离心纯化后滴定病毒滴度。结果 采用PCR和基因测序等鉴定证实得到的假病毒颗粒携带HBVC基因,并且具有良好的抗原性。重组病毒的滴度为2.6×10pfu/ml。结论 本试验成功的构建了携带HBVC基因的重组MVA假病毒颗粒MVA-C,为研究HBV慢性感染的基因治疗提供了新的途径。

摘要： 本发明公开了一种包括CD180结合配体和与其相连的乙型肝炎抗原的组合物及其应用。乙型肝炎抗原包括乙型肝炎病毒包膜蛋白的pre‑S1和/或pre‑S2区域(HBVpreS1/S2Ag)、L‑HBsAg、M‑HBsAg、S‑HBsAg或其抗原片段或突变体。

摘要： 描述了乙型肝炎病毒(HBV)疫苗和用于抑制HBV基因表达的RNAi试剂的治疗组合。还描述了使用所公开的治疗组合诱导针对HBV的免疫应答或治疗HBV诱导的疾病的方法，特别是在具有慢性HBV感染的个体中。

摘要： 描述了乙型肝炎病毒(HBV)疫苗和用于抑制HBV基因表达的RNAi试剂的治疗组合。还描述了使用所公开的治疗组合诱导针对HBV的免疫应答或治疗HBV诱导的疾病的方法，特别是在具有慢性HBV感染的个体中。

摘要： 本文提供了可用于治疗或预防HBV感染或HBV诱发的疾病，更特别地HBV慢性感染或由HBV慢性感染诱发的疾病的二氢嘧啶衍生物，及其制药或医学应用。

摘要： 一种在受试者中治疗HBV感染的方法，包括向所述受试者以约0.1mg/kg至约80mg/kg的剂量施用抗pre‑S1抗体或其片段。还涉及用于治疗HBV感染的用途的抗pre‑S1抗体或其片段。

摘要： 提供了可用于治疗或预防HBV感染或HBV诱发的疾病、更特别地是HBV慢性感染或由HBV慢性感染诱发的疾病的二氢嘧啶衍生物、及其制药或医学应用。

摘要： 本文提供了可用于治疗或预防HBV感染或HBV诱发疾病，更特别地HBV慢性感染或由HBV慢性感染诱发的疾病的二氢嘧啶衍生物，及其制药或医学应用。

摘要： 本发明提供了用于引发针对HBV的免疫应答的HBV免疫原性多肽、编码此类多肽的多核苷酸、表达此类免疫原性多肽的载体；包含此类多肽、多核苷酸或载体的药物和免疫原性组合物和试剂盒，以及用于治疗和/或预防HBV的方法。

摘要： 本发明涉及肽及其鉴别和结合对HBV感染的肝细胞具有特异性的T细胞的能力。在本发明的第一方面，提供了包含选自由以下项组成的组的氨基酸序列的肽：STLPETAVVRR、STLPETAVVR、STLPETTVVRR、STLPETTVIRR、STPPETTVVRR、STLPETTVVGR和STIPETTVVRR，其中该肽源自乙型肝炎病毒核169并且能够结合HLA‑A*1101，并且当结合HLA‑A*1101时，能够鉴别对乙型肝炎病毒具有特异性的T细胞。在本发明的第二方面，提供了表达T细胞受体(TCR)分子的T细胞，其中该TCR分子包含选自包括以下项的组的氨基酸序列：CASGDSNSPLHF、CASSGGQIVYEQYF、CSARGGRGGDYTF和CASSQDWTEAFF，该T细胞受体能够结合根据本发明的第一方面的肽。

摘要： 本发明涉及用于治疗乙型肝炎病毒感染的组合物和方法。特别地，本发明涉及用于治疗慢性乙型肝炎患者的组合疗法，所述组合疗法包括施用靶向HBV的治疗性寡核苷酸和TLR7激动剂。