低密度脂蛋白受体

摘要： 目的通过研究异常血流动力对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)摄取、合成及外排胆固醇的影响,进一步探讨异常血流动力和胆固醇代谢在动脉粥样硬化(AS)形成机制中的作用。方法待细胞生长良好后,换用新的含有低密度脂蛋白(LDL)和三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)的培养液,同时施加作用力。按照细胞所受作用力不同,随机分为应力组、壁面压力组、对照组A和对照组B。在各自作用力的作用下培养24 h。收集细胞和培养液待用。用酶法检测4组培养液中LDL浓度和胆固醇浓度。用高效液相色谱法检测HUVEC内和细胞膜中胆固醇的含量。分别用实时定量RT-PCR法和蛋白免疫印迹法检测低密度脂蛋白受体(LDLR)、羟-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMG-CR)、ABCA1的mRNA和蛋白表达水平。结果与对照组B相比较,应力组培养液中LDL含量明显减少,细胞内胆固醇含量明显增高,而且LDLR和HMG-CR的mRNA和蛋白表达明显增高。壁面压力组培养液中胆固醇含量明显增高,细胞膜中胆固醇含量明显降低,而且ABCA1的mRNA和蛋白表达明显增高。对照组A培养液中LDL含量明显降低,胆固醇含量明显增高,而且LDLR、HMG-CR和ABCA1的mRNA和蛋白表达均明显增高。结论应力通过上调LDLR和HMG-CR的mRNA和蛋白的表达促进VEC摄取LDL和合成胆固醇,壁面压力通过上调ABCA1的mRNA和蛋白的表达促进内皮细胞膜外排胆固醇。异常血流动力使血管内皮细胞胆固醇代谢平衡紊乱进而引起AS。

摘要： 目的:探讨微小RNA-152(miR-152)在子宫内膜癌(EC)组织中的表达和作用,为研究EC的发病机制和靶向治疗方案提供依据。方法:选取21例EC患者癌组织(肿瘤组)和39例非EC患者内膜组织(对照组)及人EC RL95-2细胞和293T细胞为研究对象。收集肿瘤组和对照组患者的年龄、身高、体质量(BM)、体质量指数(BMI)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、腰围(WC)和腹围(AC)等临床资料,检测2组患者甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、Ki-67和低密度脂蛋白受体(LDLR)水平,生物信息学方法预测miR-152下游与增殖和侵袭相关的靶基因LDLR表达,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测肿瘤组和对照组患者子宫内膜组织中miR-152表达水平,Western blotting法和免疫组织化学检测法检测肿瘤组和对照组患者子宫内膜组织中LDLR蛋白表达水平,Person相关分析法分析LDLR mRNA表达与患者一般资料、生化指标及miR-152表达的相关性。将RL95-2细胞分为空质粒组(转染miR-NC空质粒)、miR-152组(转染miR-152-mimics)、miR-152-mimics+pcDNA3.1-vector组(同时转染miR-152-mimics和pcDNA3.1-vector)和miR-152-mimics+pcDNA3.1-LDLR组(同时转染miR-152-mimics和pcDNA3.1-LDLR)。CCK-8法检测各组细胞增殖率,Transwell法检测各组细胞的侵袭细胞数,双荧光素酶报告基因实验检测各组293T细胞中荧光素酶活性。结果:肿瘤组患者子宫内膜组织中miR-152表达水平明显低于对照组(P<0.05),LDLR mRNA和蛋白表达水平均高于对照组(P<0.05或P<0.01)。双荧光素酶报告基因检测,LDLR为miR-152的靶基因。Person相关分析,肿瘤组患者子宫内膜组织中LDLR mRNA表达与Ki-67、BMI、TC、TG、BM和WC呈正相关关系(r=0.4490,r=0.4377,r=0.4472,r=0.4706,r=0.5882,r=0.5130,P<0.05),与miR-152的表达呈负相关关系(r=-0.4378,P<0.05)。与空质粒组比较,miR-152组RL95-2细胞增殖率降低(P<0.05),侵袭细胞数减少(P<0.05);与miR-NC组比较,miR-152组RL95-2细胞增殖率降低(P<0.05),侵袭细胞数减少(P<0.05);与miR-152-mimics+pcDNA3.1-vector组比较,miR-152-mimics+pcDNA3.1-LDLR组细胞增殖率升高(P<0.01),侵袭细胞数增多(P<0.01)。结论:miR-152通过降低LDLR的表达抑制EC细胞增殖和侵袭。

摘要： 目的:探讨丹酚酸B(Sal B)对小鼠动脉粥样硬化病变和氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的小鼠巨噬细胞胞葬作用的影响,阐明Sal B抗动脉粥样硬化的作用机制。方法:将32只雄性低密度脂蛋白受体基因敲除(LDLR-/-)小鼠随机分为对照组、模型组、Sal B组和阿托伐他汀组,每组8只。对照组小鼠给予普通饲料喂养,其他各组小鼠给予高脂饲料喂养12周。对照组和模型组小鼠每日给予生理盐水腹腔注射,Sal B组小鼠给予Sal B溶液腹腔注射,阿托伐他汀组小鼠给予阿托伐他汀溶液灌胃。检测各组小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)水平,油红O染色法观察小鼠主动脉粥样硬化斑块面积百分率。RAW264.7细胞分为对照组、ox-LDL组(采用40 mg·L^(-1) ox-LDL诱导24 h),低、中和高剂量Sal B组(给予含1.25、2.50和5.00 mg·L^(-1) Sal B的培养基)。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blotting法检测各组小鼠主动脉组织及RAW264.7细胞中AXL、MERTK、TYRO3和乳脂球表皮生长因子8(MFGE8)mRNA及蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组小鼠血清TC、TG和LDL-c水平升高(P<0.05),小鼠主动脉粥样硬化斑块面积百分率升高(P<0.05),小鼠主动脉组织中AXL、MERTK、TYRO3和MFGE8 mRNA及蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,Sal B和阿托伐他汀组小鼠血清TC、TG和LDL-c水平降低(P<0.01),小鼠主动脉粥样硬化斑块面积百分率降低(P<0.01),小鼠主动脉组织中AXL、MERTK、TYRO3和MFGE8 mRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05或P<0.01)。与对照组比较,ox-LDL诱导组RAW264.7细胞中AXL、MERTK、TYRO3和MFGE8 mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与ox-LDL诱导组比较,Sal B组RAW264.7细胞中AXL、MERTK、TYRO3、MFGE8 mRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05或P<0.01)。结论:Sal B通过上调胞葬相关分子表达,促进LDLR-/-小鼠及RAW264.7细胞的胞葬作用,从而发挥抗动脉粥样硬化的作用。

摘要： 目的:基于CRISPR/Cas9技术构建低密度脂蛋白受体(LDLR)基因敲除的免疫缺陷小鼠模型,并对血液胆固醇水平进行分析评价,为构建具有高脂血症的免疫系统人源化小鼠模型提供新方法。方法:基于CRISPR/Cas9技术,将有效识别LDLR基因外显子2和18的sgRNA/Cas9 mRNA注射到NOD SCID小鼠的受精卵中,通过对新生小鼠基因型鉴定筛选得到基因敲除的F0代阳性(LDLR^(+/-),Aa)小鼠,再将此小鼠与NOD SCID(LDLR^(+/+),AA)小鼠繁育,鉴定得到能稳定遗传基因型的F1代(Aa)小鼠。将F1代阳性杂合小鼠与NOD SCID小鼠繁育,获得大量基因序列完全相同的F2代(Aa)小鼠,在F2代间进行大规模繁育,获得的F3代小鼠依据基因型和性别进行分组,分别为雄性AA、雄性Aa、雌性AA和雌性Aa,对体质量进行监测,同时采集外周血进行血液胆固醇水平检测。结果:通过上述构建方法获得了NOD SCID LDLR^(+/-)(Aa)小鼠,经过8周的体质量检测,Aa杂合子基因型在生长发育过程中并不影响小鼠体质量,雌性Aa的胆固醇水平为(100.80±4.42)mg·dL^(-1),雄性Aa的胆固醇水平为(120.56±11.16)mg·dL^(-1),与阴性对照(基因型为AA的小鼠)比较,胆固醇水平明显升高(P<0.05);雌性AA的胆固醇水平为(60.78±2.11)mg·dL^(-1),雄性AA的胆固醇水平为(75.43±10.06)mg·dL^(-1),两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在不影响小鼠体质量的前提下,通过CRISPR/Cas9技术在NOD SCID背景下成功构建出了胆固醇水平自发升高的小鼠模型。

摘要： 目的 利用荧光偏振方法建立体外低密度脂蛋白受体的诱导型降解因子(IDOL)/低密度脂蛋白受体(LDLR)的蛋白相互作用评价体系。方法 通过PCR扩增获得人IDOL蛋白全长cDNA,并与pET-30a(+)原核表达质粒进行重组,转化至大肠杆菌系统进行表达并纯化。将FITC荧光标记的LDLR多肽片段与His-IDOL共同孵育,利用荧光偏振方法,分别对多肽浓度、蛋白浓度以及反应时间进行优化,建立体外IDOL/LDLR的蛋白相互作用评价体系。结果 将pET-30a-IDOL重组质粒进行大肠杆菌原核表达,获得人全长IDOL蛋白。将His-IDOL重组蛋白进行His Trap柱亲和纯化,并与FITC-LDLR进行反应,最终确定500 nmol/L FITC-LDLR和2μmol/L His-IDOL于25°C、100 r/min振荡、避光孵育1 h为IDOL/LDLR相互作用最适反应体系。结论 利用荧光偏振方法成功构建了IDOL/LDLR蛋白相互作用评价体系,该体系为基于IDOL/LDLR相互作用的抗动脉粥样硬化的小分子抑制剂的开发和评价提供了实验基础。

摘要： 前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)作为一种丝氨酸蛋白酶,具有靶向降解低密度脂蛋白受体(LDLR)的特殊功能,循环中的PCSK9主要来源于肝脏,但在胰腺、肾脏、肠道和中枢神经系统等中也有表达。虽然PCSK9通过调节肝脏LDLR的表达来调节胆固醇代谢,但体外和体内的研究表明,PCSK9还参与了其他多种生理过程,本综述系统阐述了PCSK9在各个系统的作用以及其通过影响LDLR表达对脓毒症的影响。

摘要： 1低密度脂蛋白受体结构及功能低密度脂蛋白受体(low density lipoprotein receptor,LDLR)是一大类同源结构的细胞表面受体的原型,是一种富含半胱氨酸的糖蛋白,在多种细胞基础生理过程中起信号受体的作用[1]。其主要在细胞粗面内质网合成和折叠,然后通过高尔基复合体运送到细胞膜表面[2]。在细胞膜表面的LDLR主要负责将携带低密度脂蛋白的颗粒转运到细胞内[3]。

摘要： 前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)是一种主要在肝细胞中表达的分泌型丝氨酸蛋白酶。PCSK9能够与低密度脂蛋白受体(LDLR)结合形成复合物,并通过溶酶体途径使LDLR降解,从而减少细胞表面LDLR的数量,最终导致血浆低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)水平升高。近年来,PCSK9抑制剂成为一个治疗高胆固醇血症及动脉粥样硬化性心血管疾病(ASCVD)药物研发的新热点。目前全球上市了三款PCSK9抑制剂,包括依洛尤单抗(Evolocumab)、阿利珠单抗(Alirocumab)及小干扰RNA药物Inclisiran(Leqvio)。本文对PCSK9的结构、功能、抑制剂的研究进展进行了综述。

摘要： 胆固醇是机体内一种重要的脂质成分,它不仅参与形成细胞膜而且是合成胆汁酸及类固醇激素的原料。低密度脂蛋白受体(low density lipoprotein receptor,LDLR)参与胆固醇的代谢过程,在维持机体细胞胆固醇稳态中发挥着重要作用。LDLR的表达受到转录、转录后及翻译后水平的精确调节,其表达失调将导致多种疾病的发生发展。本文主要从LDLR的分子调节机制、LDLR表达失调导致的靶器官损害及以LDLR为靶点的药物研发进展等方面加以综述,为进一步深入了解脂代谢紊乱相关疾病的进展提供理论依据,也为开发更有效、副作用更少的LDLR靶点药物提供新的见解。

摘要： 家族性高胆固醇血症(familial hypercholesterolemia,FH)是一种常染色体单基因显性遗传代谢性疾病,编码低密度脂蛋白受体(low-density lipoprotein receptor,LDLR)的LDLR基因是最常见的致病基因,LDLR基因突变可致细胞膜表面的LDLR缺失或功能异常,影响机体低密度脂蛋白(low-density lipoprotein,LDL)的代谢,导致胆固醇代谢障碍,最终使血清低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)和总胆固醇(total cholesterol,TC)水平升高[1-2]。

摘要： 低密度脂蛋白受体(LDL-R)和载脂蛋白E(ApoE)基因打靶的小鼠是目前应用最为广泛的高胆固醇血症及动脉粥样硬化(AS)的动物模型.与小鼠相比,大鼠的体重是其10倍以上,手术操作便利,多种创伤性疾病模型成熟,且能够获得大量的心血管组织样品.但基于传统的胚胎干(ES)细胞打靶方法制备基因敲除大鼠的技术难度大,目前鲜见报道.笔者利用TALEN介导的在体基因组编辑新方法,首次制备成功LDL-R敲除(LDL-R KO)和ApoE敲除(ApoE KO)的大鼠模型并对其血脂和AS情况进行分析.应用TALEN介导的基因组编辑方法成功的制备了LDL-R和ApoE敲除两种大鼠,其血浆胆固醇增高并发生AS,可以作为新的高胆固醇血症和AS的动物模型.

摘要： 低密度脂蛋白受体(LDLR)介导血浆低密度脂蛋白、极低密度脂蛋白的摄取和细胞内降解,对于维持血浆脂蛋白代谢平衡起到十分重要的作用;LDLR基因突变会导致血脂代谢紊乱,而血脂异常与动脉粥样硬化密切相关,是心脑血管疾病,尤其是冠状动脉粥样硬化性心脏病及脑梗死发生和发展的重要危险因素。本文主要探讨了低密度脂蛋白受体(LDLR)及作用，LDLR基因结构及基因多态性特点，重点讨论了LDLR基因多态性与血脂异常、高血压及心脑血管疾病之间的关系，并对LDLR基因多态性的临床应用进行了展望。

摘要： 目的:研究低密度脂蛋白受体(low density lipoprotein receptor,LDL-R)基因Hinf I酶切位点多态性与高胆固醇血症的关系.方法：应用聚合酶链技术-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测548例高胆固醇血症、290例边缘高胆固醇血症及187例正常血脂人群LDL-R基因第9、10、14外显子的Hinf I酶切位点多态性.结果及结论：低密度脂蛋白受体基因Hinf I位点存在基因多态性，H+H+基因型及H+等位基因与高胆固醇血症，尤其是男性高胆固醇血症有着密切的关系，是中国人高胆固醇血症产生的原因之一。

摘要： 本文筛查FH纯合患儿核心家系LDL-R基因突变,生物信息学方法预测新突变蛋白三级结构变化,初步阐明致病机制,进而对该家系再次妊娠母亲在孕早期取胎儿绒毛膜,提取胎儿DNA,检测胎儿LDL-R基因,并与家系纯合患儿及其父母比对,明确胎儿携带致病突变位点及数目,推断是否为纯合患儿,实现产前诊断.研究表明，①入选家系符合FH的临床诊断;②该家系含有2个不同的LDL-R基因突变,且均为终止突变,在国内外为首次发现,其中1个为新突变;③新突变位点导致的LDL-R蛋白三级结构改变可能为致使LDL-R表达降低,进而影响LDL-R功能缺失的机制;④该核心家系成员的临床诊断与基因表型相符;⑤根据胎儿产前基因诊断结果推断该胎儿为杂合.本研究将基础研究成果大胆尝试于临床实践,实现基础遗传学研究到临床应用的转化,弥补基础实验与临床应用之间的鸿沟.

摘要： 目的:课题组既往研究显示,辛伐他汀能够不依赖于其降脂效应,减轻阿霉素肾病大鼠肾脏炎症反应;IL-1β破坏胞内胆固醇对低密度脂蛋白受体(LDLr)的反馈调节,加重足细胞泡沫样改变.本研究进一步观察阿霉素肾病大鼠肾小球硬化过程中LDLr的表达变化,及辛伐他汀对其表达的影响,以探讨脂质导致肾脏损害及他汀类药物肾脏保护的机制.方法:雄性SD大鼠随机分为正常对照组、阿霉素肾病组(模型组)和阿霉素肾病辛伐他汀治疗组(治疗组),分别灌胃给药11周,采用RT-PCR和western-blot技术检测LDLr、胆固醇调节元件结合蛋白-2 (SREBP-2) mRNA和蛋白在肾脏的表达,酶比色法和油红染色法检测肾组织内胆固醇含量,光镜观察肾小球硬化的情况.结果:模型组肾脏LDLr,SREBP-2 mRNA和蛋白表达明显增强(均P＜0.01)，肾组织内胆固醇沉积和肾小球硬化明显(均P＜0.01);辛伐他汀降低肾脏LDLr, SREBP-2 mRNA和蛋白表达、肾组织内胆固醇沉积和肾小球硬化程度(分别P＜0.05或P＜0.01)。结论:肾脏LDLr表达上调，可能导致阿霉素肾病大鼠肾脏脂质沉积增多，加重肾小球硬化:辛伐他汀降低肾脏LDLr表达，减轻肾小球硬化，其机制可能与其抑制肾脏局部炎症反应有关。

摘要： 研究目的: 研究导致家族性高胆固醇血症(FH)的突变基因，进一步丰富导致该病的突变基因数据库信息，探讨该病的病因和发病机制。 研究方法: 1.收集1个FH家系，通过临床、病理、生化、超声成像等方法，确定诊断。 2.收集FH家系外周血，常规低渗法溶血，酚一氯仿法提取DNA. 3.全基因组外显子测序，将得到的数据与已有人类基因组图的外显子数据、以及150个对照组全基因外显子对比，排除SNP后，寻找候选突变基因。 4.用患者其他家族成员样本验证发现的突变位点，确认所发现的突变基因为该家系的致病突变基因。 研究结果: 外显子测序发现先证者LDLR一对等位基因上分别各有一个突变:一个是第9号外显子第1246位碱基C→T移换，造成第416位氨基酸，精氨酸变为色氨酸。另一个是第10号外显子1448位碱基的G→A移换，导致第483位氨基酸密码子由TGG转换为TAG，色氨酸变为提前终止密码，使LDLR蛋白的其余部分终止合成。具有同样症状的先证者的妹妹也具有同样的二个复合杂合突变。而其仅患高胆固醇血症的母亲、外祖母只具有第一个突变，仅患高胆固醇血症的患者的父亲、祖母只具有第二个突变。同一地区的无关正常对照组150位正常人不具有同样突变。 研究结论: 所发现的二个突变是该家系的致病基因突变。此突变为全球首次报道，丰富了LDLR的基因突变数据库，为该家系的产前诊断提供了依据。

摘要： 研究目的: 研究导致家族性高胆固醇血症(FH)的突变基因，进一步丰富导致该病的突变基因数据库信息，探讨该病的病因和发病机制。 研究方法: 1.收集1个FH家系，通过临床、病理、生化、超声成像等方法，确定诊断。 2.收集FH家系外周血，常规低渗法溶血，酚一氯仿法提取DNA. 3.全基因组外显子测序，将得到的数据与已有人类基因组图的外显子数据、以及150个对照组全基因外显子对比，排除SNP后，寻找候选突变基因。 4.用患者其他家族成员样本验证发现的突变位点，确认所发现的突变基因为该家系的致病突变基因。 研究结果: 外显子测序发现先证者LDLR一对等位基因上分别各有一个突变:一个是第9号外显子第1246位碱基C→T移换，造成第416位氨基酸，精氨酸变为色氨酸。另一个是第10号外显子1448位碱基的G→A移换，导致第483位氨基酸密码子由TGG转换为TAG，色氨酸变为提前终止密码，使LDLR蛋白的其余部分终止合成。具有同样症状的先证者的妹妹也具有同样的二个复合杂合突变。而其仅患高胆固醇血症的母亲、外祖母只具有第一个突变，仅患高胆固醇血症的患者的父亲、祖母只具有第二个突变。同一地区的无关正常对照组150位正常人不具有同样突变。 研究结论: 所发现的二个突变是该家系的致病基因突变。此突变为全球首次报道，丰富了LDLR的基因突变数据库，为该家系的产前诊断提供了依据。

摘要： 研究目的: 研究导致家族性高胆固醇血症(FH)的突变基因，进一步丰富导致该病的突变基因数据库信息，探讨该病的病因和发病机制。 研究方法: 1.收集1个FH家系，通过临床、病理、生化、超声成像等方法，确定诊断。 2.收集FH家系外周血，常规低渗法溶血，酚一氯仿法提取DNA. 3.全基因组外显子测序，将得到的数据与已有人类基因组图的外显子数据、以及150个对照组全基因外显子对比，排除SNP后，寻找候选突变基因。 4.用患者其他家族成员样本验证发现的突变位点，确认所发现的突变基因为该家系的致病突变基因。 研究结果: 外显子测序发现先证者LDLR一对等位基因上分别各有一个突变:一个是第9号外显子第1246位碱基C→T移换，造成第416位氨基酸，精氨酸变为色氨酸。另一个是第10号外显子1448位碱基的G→A移换，导致第483位氨基酸密码子由TGG转换为TAG，色氨酸变为提前终止密码，使LDLR蛋白的其余部分终止合成。具有同样症状的先证者的妹妹也具有同样的二个复合杂合突变。而其仅患高胆固醇血症的母亲、外祖母只具有第一个突变，仅患高胆固醇血症的患者的父亲、祖母只具有第二个突变。同一地区的无关正常对照组150位正常人不具有同样突变。 研究结论: 所发现的二个突变是该家系的致病基因突变。此突变为全球首次报道，丰富了LDLR的基因突变数据库，为该家系的产前诊断提供了依据。

摘要： 研究目的: 研究导致家族性高胆固醇血症(FH)的突变基因，进一步丰富导致该病的突变基因数据库信息，探讨该病的病因和发病机制。 研究方法: 1.收集1个FH家系，通过临床、病理、生化、超声成像等方法，确定诊断。 2.收集FH家系外周血，常规低渗法溶血，酚一氯仿法提取DNA. 3.全基因组外显子测序，将得到的数据与已有人类基因组图的外显子数据、以及150个对照组全基因外显子对比，排除SNP后，寻找候选突变基因。 4.用患者其他家族成员样本验证发现的突变位点，确认所发现的突变基因为该家系的致病突变基因。 研究结果: 外显子测序发现先证者LDLR一对等位基因上分别各有一个突变:一个是第9号外显子第1246位碱基C→T移换，造成第416位氨基酸，精氨酸变为色氨酸。另一个是第10号外显子1448位碱基的G→A移换，导致第483位氨基酸密码子由TGG转换为TAG，色氨酸变为提前终止密码，使LDLR蛋白的其余部分终止合成。具有同样症状的先证者的妹妹也具有同样的二个复合杂合突变。而其仅患高胆固醇血症的母亲、外祖母只具有第一个突变，仅患高胆固醇血症的患者的父亲、祖母只具有第二个突变。同一地区的无关正常对照组150位正常人不具有同样突变。 研究结论: 所发现的二个突变是该家系的致病基因突变。此突变为全球首次报道，丰富了LDLR的基因突变数据库，为该家系的产前诊断提供了依据。

摘要： 目的：根据诊断标准收集FH患者;根据前期调查的国际最新全基因组关联研究(GWAS)结果,95个与胆固醇代谢相关的基因(位点),结合胆酸代谢过程中的基因,设计靶向外显子捕获芯片进行外显子富集并结合二代测序结合建立新的检测方法,检测已经明确基因诊断的FH患者外周血DNA验证该芯片的可靠性;进而对未检测到基因突变的患者进行检测,采用传统测序在家系成员中验证,生物信息学明确导致胆固醇水平增高的可能的分子机制.对筛查过程中未见报道的特殊突变进行体外细胞学实验探讨突变对胆固醇代谢的影响,探讨该患者高胆固醇血症的遗传机制.为了解汉族FH患者的遗传背景提供依据.rn 方法：1.查阅国际最新的GWAS结果95个与胆固醇代谢相关的基因(位点),结合胆酸代谢过程中的基因,通过巧妙设计简化筛选范围,建立胆固醇和胆酸代谢相关基因的靶向外显子捕获芯片;2.收集40例患者的病史,进行体格和生化指标检查;3.入选10例已知基因诊断的FH杂合患者,提取10例患者的DNA;应用靶向外显子捕获及测序并生物信息学分析筛选致病基因,验证芯片和测序平台的可靠性;4.入选15例纯合表型但常规方法未检测出基因突变的患者和15例新入组的纯合患者;提取30例患者的DNA,应用靶向外显子捕获及测序筛选已知和未知致病基因,经生物信息学分析和家系内验证明确未知基因突变,检验芯片发现未知突变的能力;5.对发现新突变的先证者进行核心家系验证,明确突变来源;6.对捕获测序的SNP进行综合分析,明确中国汉族人群与血脂水平密切相关的基因;7.结合正常人测序数据及患者本身的血脂水平筛选汉族FH人群的易感SNP;8.抽取新突变患者静脉血,流式细胞仪检测患者外周血淋巴细胞的受体功能,验证新突变是否为致病性突变;9.对1例新突变江苏汉族FH家系先证者进行病史询问、心电图、眼底检查、周围血管及心脏超声、核素心肌灌注显像检查,10.结合家系成员发病情况分析结果,根据陈再嘉主编的《临床冠心病学》和美国诊断标准明确临床诊断,初步确定遗传模式。rn 结果：1.设计靶向捕获芯片仅包含167个基因,大大缩小了筛选范围;2.入选患者均符合家族性高胆固醇血症诊断,排除继发性高脂血症,部分患者有皮肤黄色瘤;3.靶向外显子捕获测序方法可以100％筛选出10例已知基因诊断患者的突变基因及位点,检测出已知突变基因和位点,证明靶向外显子捕获测序芯片及平台可靠;4.靶向外显子捕获测序方法在30例未检测出基因突变的患者中发现C356G新的LDLR基因突变位点,证明该技术不仅可检测出已知突变,也可以检测出未知突变;5.去除已知基因后中国汉族人群与血脂水平密切相关的Top10基因分别为PLEC、TYW1B、LACTB、LILRA3、MLXIPL、TRPS1、LPA、HPR、ARHGEF10L和IRS16.核苷酸序列分析发现:江苏Ⅰ号家系先证者LDL-R基因第8外显子(E8) C356G杂合新突变,遗传于母亲;核心家系成员测序验证发现先证者父亲存在另一杂合突变(E9)I402T;7.结合正常人测序数据及患者的血脂水平,发现11个与血脂密切相关的SNP;8.流式细胞仪检测患者的突变蛋白受体功能发现,突变受体的内化和结合LDL的功能受损分别为正常人47％和32％;9.先证者的高脂血症为遗传所得,心电图未见明显缺血改变,周围血管超声未见斑块,超声心动图可见结构性异常改变,10.江苏Ⅰ号家系先证者胆固醇和低密度脂蛋白水平极度增高,分别为24.65mmol/L和15.00mmol/L,合并多发性皮肤黄色瘤表现,可诊断为重症FH纯合子患者;江苏Ⅰ号家系11名成员中有7人可诊断为FH杂合子患者;家系具有常染色体显性遗传模式;rn 结论：1.靶向外显子捕获测序方法是一种快速、准确、高效的筛查FH突变的方法,费用低廉适合中国临床及科研应用.2.捕获测序不仅可诊断已知突变位点,也可以诊断未知突变位点,及大量的SNP信息,这些微效基因可以解释无主效基因突变患者的发病机制;2.家族性高胆固醇血症是一种复杂的多基因疾病,主效和微效基因突变均可引起该病;4.江苏Ⅰ号先证者存在LDL-R基因C356G杂合突变,在国内外未见报道,为新致病突变;5.流式细胞检测证实LDLR新突变位点C356G为致病性突变位点.

摘要： 本发明涉及低密度脂蛋白(LDL)中的胆甾醇或极低密度脂蛋白(VLDL)中的胆甾醇的定量法，其特征在于在糖化合物和/或蛋白增溶剂的存在下测定试样中LDL中的胆甾醇含量或VLDL中的胆甾醇含量。

摘要： 本发明涉及抑制Dickkopf 2(DKK2)和低密度脂蛋白(LDL)受体相关蛋白5(LRP5)之间的交互作用和/或抑制LRP5阻抑肿瘤形成的发现。因此，在本文所述的各种实施方式中，本发明的方法涉及通过向患者施用有效量的阻断DKK2和LRP5之间的相互作用的抑制剂来治疗癌症的方法、通过向患者施用有效量的LRP5消耗剂来治疗癌症的方法、在受试者中提供抗肿瘤免疫的方法和在受试者中刺激对细胞群或组织的NK和T细胞介导的免疫反应的方法。此外，本发明包括用于治疗癌症的药物组合物。

摘要： 本发明公开了LRP6激动或拮抗结合分子(例如抗体或Fab片段)和它们分别促进或抑制Wnt途径信号传导的用途。所述LRP6激动或拮抗结合分子可以分别用来例如诊断、改善其症状、防御和治疗与Wnt途径信号传导的异常低水平或异常高水平相关的Wnt信号传导病症。与Wnt信号传导的异常上调相关的可治疗病症的非限制性实例是癌症(例如结肠癌)。可以诊断、防御和治疗的病症的非限制性实例包括癌症、骨病症(例如骨质疏松症和骨关节炎)、糖尿病、神经变性疾病如阿尔茨海默病、和纤维化病症。

摘要： 本发明提供了一种用于降低体内胆固醇酯转移蛋白介导的胆固醇酯在高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)之间转移的方法，所述方法包括施用治疗有效量的一种或者多种下述化合物：其中R为甾醇或者甾烷醇(stanol)部分，R2源于抗坏血酸，R3为氢或者任意的金属，碱土金属，或者碱金属；及其所有的盐，因此血浆HDL和LDL由于这种给药方式得以控制。

摘要： 本发明公开一种直接测定高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇的方法，采用优化浓度和比例的聚乙烯硫酸三钾(polyvinylsulphateK－salt，PVS)和聚乙二醇独甲醚(Methoxypolyethylene glycol，PEGME)，即优化的化学沉淀法，联合对高密度脂蛋白胆固醇或低密度脂蛋白胆固醇反应性较好的表面活性剂进行特异性的高密度脂蛋白胆固醇或低密度脂蛋白胆固醇的含量测定。

摘要： 本发明涉及一种细胞分析法检测低密度脂蛋白受体相关蛋白4抗体，包括步骤：采用pReceiver‑M98质粒，构建出用EGFP标记LRP4的完整开放阅读框架的真核表达载体，得到重组质粒；将重组质粒转染培养好的HEK293T细胞，得到携带重组质粒的HEK293T细胞；将携带重组质粒的表达细胞依次进行培养、细胞固定、封闭和孵育，然后采用荧光显微镜进行观察，检测出低密度脂蛋白受体相关蛋白。本发明提供的采用细胞分析法检测低密度脂蛋白受体相关蛋白4抗体，因抗原抗体一一对应，特异性几乎达到100％，为重症肌无力患者的诊治提供了必要的实验依据，对重症肌无力患者的诊治提供了新的方向，具有重要的意义。

摘要： 本发明公开了一种用于低密度脂蛋白受体相关蛋白5（LRP5）基因突变检测的试剂、PCR检测方法及应用，属于基础生物研究及生物检测技术领域。检测试剂包括引物、肽核酸荧光探针及野生型互补的肽核酸序列，正向引物如序列表中SEQ ID NO.1、NO.3；反向引物如序列表中SEQ ID NO.2、NO.4；肽核酸荧光探针如序列表中SEQ ID NO.5、NO.6；野生型互补肽核酸序列如序列表中SEQ ID NO.7、NO.8。本发明从转录水平能快速发现Wnt信号通路下游LRP5基因突变情况，具有特异性强、灵敏度高等显著优点，为抗癌药物筛选，新靶向药物探讨、基础科学研究提供工具。

摘要： 本发明公开了一种用于低密度脂蛋白受体相关蛋白6（LRP6）基因突变检测的试剂、PCR检测方法及应用，属于基础生物研究及生物检测技术领域。检测试剂包括引物、肽核酸荧光探针及野生型互补的肽核酸序列，正向引物如序列表中SEQ ID NO.1、NO.3；反向引物如序列表中SEQ ID NO.2、NO.4；肽核酸荧光探针如序列表中SEQ ID NO.5、NO.6；野生型互补肽核酸序列如序列表中SEQ ID NO.7、NO.8。本发明从转录水平能快速发现Wnt信号通路下游LRP6基因突变情况，具有特异性强、灵敏度高等显著优点，为抗癌药物筛选，新靶向药物探讨、基础科学研究提供工具。

摘要： 本发明属生物技术领域，涉及低密度脂蛋白受体相关蛋白配体多肽修饰的脑肿瘤靶向基因递释复合物。本发明的脑肿瘤靶向基因递释复合物具有BBB和胶质瘤双重靶向作用，治疗基因能够在胶质瘤细胞中表达并杀灭肿瘤细胞，和能够在BCECs中表达后通过细胞旁分泌的方式将基因产物TRAIL蛋白释放至细胞外与肿瘤细胞结合后起到杀伤作用，因此针对脑胶质瘤在脑内的浸润性生长特点，该脑肿瘤靶向基因递释复合物能够在杀灭胶质瘤主体的同时有效抑制零星胶质瘤细胞的扩散。

摘要： 本发明公开了一种新的多肽——人低密度脂蛋白受体相关蛋白8.69,编码此多肽的多核苷酸和经DNA重组技术产生这种多肽的方法。本发明还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法,如胆固醇代谢紊乱及其相关产物的生理功能紊乱性疾病等。本发明还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明还公开了编码这种新的人低密度脂蛋白受体相关蛋白8.69的多核苷酸的用途。