鸭疫里默氏菌

摘要： 为了解感染鸭疫里默氏菌后鸭肠道形态结构的变化,采用石蜡切片、HE染色方法测定鸭感染鸭疫里默氏菌1、2、3、5、9、14 d十二指肠、空肠和回肠3个小肠段肠黏膜厚度、肠绒毛高度和隐窝深度,并计算绒毛高度和隐窝深度比值。结果表明,与对照组相比,在感染鸭疫里默氏菌1~9 d后,鸭的十二指肠、空肠和回肠肠黏膜厚度和肠绒毛高度变化一致,均表现为明显下降;隐窝深度在3个小肠段的变化不同;肠绒毛高度/隐窝深度的值在感染鸭疫里默氏菌的3个小肠段中总体均呈下降趋势。说明感染鸭疫里默氏菌显著影响了鸭小肠形态结构,该研究为鸭疫里默氏菌的致病机制研究奠定了基础。

摘要： 为了解莆田市番鸭源鸭疫里默氏菌对大环内酯类药物的耐药性和相关耐药基因携带情况,对本实验室分离鉴定的49株番鸭源鸭疫里默氏菌菌株采用K-B纸片扩散法进行药敏试验,提取菌株基因组DNA,采用PCR方法对大环内酯类药物的ermA、ermB、ermC、ermF、ereD等5种耐药基因进行检测,阳性产物送公司测序并对序列进行分析。结果表明,49株鸭疫里默氏菌菌株对红霉素、阿奇霉素的耐药率很高,分别为100%(49/49)、89.80%(44/49)。49株对红霉素和44株对阿奇霉素耐药的鸭疫里默氏菌菌株中,均未检测到ermA、ermB、ermC等3种耐药基因,但85.71%以上菌株检测出ermF、ereD两种耐药基因,在鸭疫里默氏菌大环内酯类药物耐药基因中占主导作用,据此推测,目前莆田市鸭疫里默氏菌对大环内酯类药物耐药的主要原因是由ermF和ereD耐药基因介导的。

摘要： 为了解鸭疫里默氏菌(Riemerella anatipestifer,RA)贵州分离株OmpA基因遗传特性和用作基因工程亚单位疫苗开发的可能性,以13株RA贵州分离株(RA-SS-1~12株和RA-AS-1株)为研究对象,用RA OmpA基因特异性引物对13株RA贵州分离株进行PCR扩增,将扩增得到的OmpA基因片段与pMD19-T载体连接,转化大肠埃希氏菌DH5α感受态细胞,经PCR和双酶切鉴定为阳性克隆后进行测序;用生物信息学软件将13株RA贵州分离株与国内外15株参考株OmpA基因序列进行核苷酸同源性分析和遗传进化分析,并对RA OmpA蛋白进行理化性质分析、跨膜结构和信号肽预测、B细胞抗原表位预测、二级和三级结构预测。结果表明,13株RA贵州分离株OmpA基因全长均为1164 bp,可编码387个氨基酸,株间核苷酸同源性为100%,与参考株GZ-RA8、GZ-RA9、GZ060302、SD-RA2018和Yb2株的同源性达100%”;RA OmpA蛋白属亲水性蛋白,无跨膜和信号肽区域,含有较多的优势抗原表位结构,且OmpA基因高度保守并具有良好的抗原特性,其可作为制备RA基因工程亚单位疫苗的候选蛋白。

摘要： 为研究氨苄青霉素(AMP)和鸭疫里默氏菌噬菌体的协同作用,在亚MIC浓度AMP下,测定噬菌体RAP15对鸭疫里默氏菌RAf63生长的影响、RAP15形成的噬菌斑大小、增殖效果、不同噬菌体株对RAf63的裂解情况。动物试验比较噬菌体、AMP、二者合用对RAf63攻击的治疗效果。结果,亚MIC浓度的AMP下,RAP15对RAf63生长的抑制作用提高了4倍、RAP15噬菌斑的大小没有发生变化、RAP15培养后子代噬菌体增加,部分噬菌体株表现出裂解RAf63的能力。RAf63人工感染番鸭后,AMP和RAP15联合治疗组,比单用其中任何一种的效果都更好。研究表明,在体外抑制鸭疫里默氏菌的生长或体内治疗其感染,AMP和噬菌体都具有协同作用。该研究为应用AMP和噬菌体联合制剂来防控传染性浆膜炎提供了理论依据。

摘要： 为确定某22日龄雏番鸭死亡原因,无菌采集病死番鸭的脑组织分离细菌,PCR鉴定;采集病变脏器研磨后检测雏番鸭常见病原。结果分离到1株鸭疫里默氏菌,敏感药物有氨苄西林、阿莫西林、头孢唑林、头孢曲松、头孢西丁、头孢他啶、头孢吡肟、四环素、强力霉素、环丙沙星、氟苯尼考。常见病毒检测,仅番鸭呼肠孤病毒检测为阳性。综合临床症状、剖检病变及实验室检测结果,诊断为番鸭呼肠孤病毒与鸭疫里默氏菌共感染病例。

摘要： 鸭传染性浆膜炎是危害养鸭业最主要的细菌性疾病之一。该文报道对从5家鸭病中诊断分离出的鸭疫里默氏菌进行药敏试验,筛选出泰乐菌素、青霉素、氟苯尼考、磺胺间甲氧嘧啶为敏感药物,用来指导临床用药,取得较好效果。

摘要： 为了解莆田某鸭场雏番鸭的死因,通过病料采集、细菌分离培养、革兰氏染色镜检、PCR鉴定及药敏试验等实验室检测,确诊该病为鸭疫里默氏菌病。其中分离菌对氨苄西林、阿莫西林、头孢唑林、强力环素、氟苯尼考敏感;对恩诺沙星中度敏感;对硫酸链霉素、硫酸庆大霉素、硫酸卡那霉素、阿米卡星、红霉素、环丙沙星、复方新诺明、多粘菌素耐药,药敏试验在临床上对指导用药有帮助。

摘要： 为揭示鸭疫里默氏菌在鸭组织中的分布规律,用荧光定量PCR检测法,对人工感染鸭疫里默氏菌鸭组织中鸭疫里默氏菌进行检测.结果表明,获得的熔解曲线为单一的峰,扩增曲线为"s"形,标准曲线扩增效率为99.7％.人工感染鸭疫里默氏菌1、2、3、5、9、14 d鸭脾脏、脑、心脏、肺脏和肝脏组织中的鸭疫里默氏菌载菌量均在2 d达定殖高峰,载菌量多少按组织排序依次为脑＞心＞脾＞肺＞肝,按时间排序依次为2 d＞3 d＞1 d＞5 d＞9 d＞14 d.

摘要： 鸭疫里默氏菌病是严重危害鸭健康的细菌传染病之一,该病具有四季多发、传播途径广泛、其致病菌可在养殖场长期存在、经常继发或并发于其他疾病等特征.临床上,疫苗免疫是防控鸭疫里默氏菌病的重要方法.目前鸭疫里默氏菌疫苗主要有活疫苗、灭活疫苗、多价苗、联苗、菌体成分疫苗等,但都存在一定的缺陷和不足,因此研究更理想的疫苗是控制鸭疫里默氏菌病的重点.近年来,根据当地鸭疫里默氏菌血清型流行情况筛选当前流行血清型毒力较强的菌株研制灭活疫苗之外,还有通过基因工程技术构建原生质体结合的联苗和菌体成分疫苗.本文综述了鸭疫里默氏菌疫苗的研究、应用及应用效果和前景,同时讨论了各类型疫苗的优缺点,以期为以后鸭疫里默氏菌病疫苗的研究提供参考.

摘要： 试验旨在分析鸭疫里默氏菌(RA)感染不同时期鸭肠道菌群结构变化规律,探讨鸭疫里默氏菌对鸭肠道微生物的影响及引起鸭致病的可能机制.采用细菌16S V4-V5区扩增通用引物,扩增鸭疫里默氏菌未感染组(鸭疫里默氏菌感染0d组),鸭疫里默氏菌感染后1、2、3、5、9和14 d的鸭直肠内容物样本DNA,将扩增得到的产物进行DNA建库后基于Ion S5TM XL测序平台测序.测序得到的Raw Reads数据总量为4710688条序列,平均每个样本84119条序列.共注释到数据库的操作分类单元(OTUs)数目为4528.Alpha多样性分析结果表明,菌群多样性指数Shannon和Simpson在鸭疫里默氏菌感染组和未感染组间差异不显著(P＞0.05),菌群丰富度指数Chao1、Ace、Observed-species和PD-whole-tree在鸭疫里默氏菌感染后0～5 d逐渐降低,从5～14 d又逐渐增加,尤其在鸭疫里默氏菌感染后3和5d均显著低于未感染组(P＜0.05).Beta多样性分析表明,未感染组与6个时间点的感染组间菌群差异均显著(P＜0.05),其中,未感染组与感染后3d的物种差异最大,之后依次为感染后2、5、9、1和14 d.物种丰度聚类热图显示,在未感染组和不同时间感染组,物种丰度相对较高的微生物菌属均不同.在门水平,鸭疫里默氏菌感染组主要以厚壁菌门(Firmicutes)、unidentified-Bacteria、拟杆菌门(Bacteroidetes)、梭杆菌门(Fusobacteria)及变形菌门(Proteobacteria)为主;在属水平,Bacteroides在感染组和未感染组均为优势菌属,感染组中弯曲杆菌属(Campylobacter)和梭杆菌属(Fusobacterium)明显增加.本试验分析了鸭疫里默氏菌未感染组和感染不同时间组肠道菌群的差异,寻找到一些特征菌属,可为鸭疫里默氏菌的致病性研究提供理论依据.

摘要： 为了原核表达鸭疫里默氏菌噬菌体RAP44的裂解酶基因.以噬菌体RAP44的基因组为模板,用PCR方法扩增裂解酶基因,与表达载体pGEX-6P-1连接,将重组质粒转化至Escherichia coli BL21(DE3)中表达,利用谷胱甘肽-Sepharose 4B亲和柱纯化表达蛋白.成功构建了表达载体pGEX-N,转化菌经IPTG诱导后成功表达出了分子量约为37 ku的可溶性重组蛋白.获得了纯化的鸭疫里默氏菌噬菌体裂解酶重组蛋白,为裂解酶的功能研究奠定了基础.

摘要： 本研究根据鸭疫里默氏菌铁依赖抑制子(RaDtxR)基因序列特征设计特异性引物,利用PCR方法从已鉴定的Ⅱ型鸭疫里默氏菌基因组DNA中目的基因片段,将扩增片段经胶回收后克隆到pMD 18-T载体后进行序列测定.将测序结果用生物信息学软件进行分析表明,所获得RaDtxR基因编码有完整的开放阅读框,全基因长度为654 bp,编码217个氨基酸.所编码的蛋白大小为24.82 ku,理论等电点为5.69,不稳定系数为38.45,属于稳定蛋白质类.将其和GenBank中RaDtxR基因进行核苷酸同源性分析,其和鸭疫里默氏菌疫苗株(GenBank号CP003787)的核苷酸同源性为100％,和其他4株核苷酸同源性为99.8％,仅在186位处存在无意突变.将其对本研究室分离鉴定的鸭大肠杆菌、禽多杀性巴氏杆菌和沙门氏菌均没有扩增到条带,表明RaDtxR基因可作为鸭疫里默氏菌鉴别诊断的靶基因.结果表明,本研究成功克隆到鸭疫里默氏菌铁依赖抑制子基因,为研究鸭疫里默氏菌铁依赖抑制子基因相关功能奠定基础.

摘要： 目的：分析73株11型鸭疫里默氏菌的药物敏感性,鉴定10株11型鸭疫里默氏菌的致病性,明确RA1229株的免疫保护力。方法：纸片法进行药敏试验。经易感鸭皮下注射,测定菌株的致病性。免疫鸭后进行保护力试验检测候选疫苗株的保护性。结果：90％以上菌株敏感的药物有头孢唑啉、氟苯尼考和头孢氨苄,其他敏感药物依次为阿莫西林、氨苄青霉素、强力霉素、壮观霉素、丁胺卡那霉素和利福平。皮下注射1×107 CFU的活菌,10株分离菌对10日龄樱桃谷鸭的致死率均超过80％。RA1229制备的灭活疫苗免疫实验鸭后14天,对5株11型鸭疫里默氏菌的攻击均能提供90％以上的保护率。结论：近期治疗11型鸭疫里默氏菌引起的感染,首选头孢唑啉、氟苯尼考和头孢氨苄等。分离株RA1229可作为制备灭活疫苗的候选菌株。

摘要： 鸭疫里默氏菌(Riemerella anatipestifer)感染引起的鸭传染病浆膜炎是鸭、鹅和火鸡等禽类的一种接触传染性疾病，本文对一肉用种鸭群中患关节炎的病例进行诊断,通过病原分离和鉴定,确定为鸭疫里默氏菌感染,并对分离菌株进行药敏试验,为鸭疫里默氏菌性关节炎的防治及进一步研究其感染机制提供了重要资料.

摘要： 从湖北天门某鸭场送检的具有输卵管炎的疑似鸭疫里默氏菌病死鸭的脑中分离出3株细菌。经细菌形态学鉴定、培养特性、生化试验、血清鉴定、细菌16SrRNAPCR鉴定及动物回归试验证明该3株菌为血清型1型的鸭疫里默氏菌，其致病性强，并分别命名为TM-R1，TM-R2，TM-R3。该3株菌对先锋霉素，美满霉素，氧哌嗪青霉素等高度敏感，对氯洁霉素、多粘霉素B、麦迪霉素、卡那霉素耐药，其中TM-R2、TM-R3对红霉素耐药，而TM-R1对红霉素中度敏感。

摘要： 本实验对鸭疫里默氏菌(包括6个血清型)、大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌和多杀性巴氏杆菌进行了16SrRNA基因片段的扩增和测序,并将测序结果进行了同源性比较和酶切分析.根据16SrRNA的测序结果及EcoRⅠ和HaeⅢ酶切片段分析,可将鸭疫里默氏菌与其它临床症状易混淆的细菌感染相区别,因而为鸭疫里默氏菌与其它细菌的鉴别诊断提供了一种快速、准确的分子生物学方法.

摘要： 目前,国际上将鸭疫里默氏菌(Riemerella anati pestifer,RA)区分为21个血清型,国内已流行10多种血清型,10型分离株可进一步区分为5个不同的亚型,其中一个亚型还存在一个变异株,国内还有部分分离株不属于1～19型.本文报道我国广东和浙江还存在另一个不同于1～19型的血清型.

摘要： 基于表型分类,鸭疫里默氏菌(Riemerella anatipestifer,RA)曾被放在多个不同的菌属.虽然Segers等(1993)结合表型指标及rRNA-DNA杂交分析结果,在黄杆菌科中为该菌单独成立了里默氏菌属,但随后又出现了新的分类问题.本文旨在结合细菌分类学的发展趋势,以16S rRNA基因为标记对RA进行种属分类和鉴定.

摘要： 以鸭疫里默氏菌吉林分离株JL-RAI OmpA基因(登录号HQ707077)和鸭DulL-2成熟片段基因(登录号AY193713)为模板，分别设计带有linker的特异性引物，在OmpA基因的下游和DuIL-2基因的下游，引入互补的linker，PCR扩增出OmpA-linker基因，序列大小为1182bp和linker-DuIL-2成熟蛋白基因，序列大小为381bp。利用SOE-PCR技术，成功的构建了OmpA-DuIL-2融合基因，片段大小为1551bp，将其转入大肠杆菌表达载体pET-28a中，构建pET-OmpA-DuIL-2融合表达载体，转化至大肠杆菌Rosetta(DE3)中，IPTG诱导表达，经SDS-PAGE分析得到分子量大小约为61kDa的融合蛋白，经Western-Blot分析该融合基因同时具OmpA和DuIL-2的免疫原性。

摘要： 从云南省的昆明、宜良、安宁、玉溪、红河等地及云南周边地区鸭场罹患鸭传染性浆膜炎的病死鸭或濒死鸭的脑组织中分离到鸭疫里默氏杆菌(RA)231株。通过血清型鉴定,其中血清2型54株占23.38%,1型46株占19.91%,13型13株占5.63%;自制YNRA-103、YNRA-108、YNRA-121参考阳性血清,与RA血清1型、2型、13型菌株之间进行的凝集试验结果表明无交叉凝集反应,为独立的血清型。将自制的血清与末定型菌株进行血清学试验,其中YNRA-103血清型23株,占9.97%：YNRA-108血清型11株,占4.76%;YNRA-121血清型11株,占4.76%;未定型73株,占31.6%。rn 表明在我省及周边地区流行的鸭疫里默氏菌有六个以上血清型,优势血清型为2型、1型和YNRA-103型。回归试验结果表明各血清型菌株对雏鸭均具较强的致病性,其临床症状及病理变化与自然发病及死亡病例相一致。

摘要： 本发明公开了一种鸭疫里默氏菌感染鸭的酶联免疫检疫方法，该方法包括用鸭疫里默氏菌肽酶S8(peptidase S8)蛋白包板、洗板、封板、加样、加入酶标二抗及底物液后加入终止液，测定吸光度等程序步骤，对鸭血清中抗鸭疫里默氏菌肽酶S8蛋白的抗体水平(利用吸光度表示)进行测定，利用抗体水平的测定值与参考值进行比较，测定值大于参考值就表示被检测的血清来源于鸭疫里默氏菌感染鸭。

摘要： 本发明涉及一种利用噬菌体PhiX174的E基因和葡萄球菌核酸酶A基因转化制备鸭疫里默氏菌前菌影疫苗的方法与应用方法。该方案首先将噬菌体PhiX174的E基因和葡萄球菌核酸酶A基因通过柔性连接臂(Gly

摘要： 本发明的目的在于提供了一种装载具有干扰素诱导活性的聚肌胞苷酸，并加入壳寡糖作为佐剂的鸭疫里默氏菌菌影疫苗。该方案首先构建温控表达载体，电转化入鸭疫里默氏菌原生质体，筛选阳性克隆后28°C增菌培养，然后42°C诱导裂解基因的表达，待OD

摘要： 本发明公开了血清1型、2型和11型鸭疫里默氏菌的PCR鉴定引物、试剂盒及多重PCR鉴定方法，属于生物技术领域，PCR鉴定引物分别具有如SEQ ID NO：1‑SEQ ID NO：8所示核苷酸序列；采用分子生物学方法检测并鉴定鸭疫里默氏菌主要流行血清型，实现鸭疫里默氏菌血清1型、2型和11型的准确、快速、稳定和特异性检测，在分子流行病及疫苗研发上有较大的使用价值。

摘要： 本发明属于生物技术与诊断检测技术领域，公开了一种鸭疫里默氏菌烈性噬菌体的PCR检测引物及其试剂盒，所述引物如SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示，仅需将待检样品使用一对特异性引物进行PCR扩增后再进行电泳即可快速鉴定鸭疫里默氏菌烈性噬菌体，简单实用、无需进行病原分离培养和电镜观察。当前尚未见基于分子生物学方法鉴定鸭疫里默氏菌烈性噬菌体的方法报道，本研究可填补相关研究领域空白。

摘要： 本发明公开了一种鸭疫里默氏菌感染鸭的酶联免疫检疫方法，该方法包括用鸭疫里默氏菌肽酶S8(peptidase？S8)蛋白包板、洗板、封板、加样、加入酶标二抗及底物液后加入终止液，测定吸光度等程序步骤，对鸭血清中抗鸭疫里默氏菌肽酶S8蛋白的抗体水平(利用吸光度表示)进行测定，利用抗体水平的测定值与参考值进行比较，测定值大于参考值就表示被检测的血清来源于鸭疫里默氏菌感染鸭。

摘要： 本发明的目的在于提供了一种装载具有干扰素诱导活性的聚肌胞苷酸，并加入壳寡糖作为佐剂的鸭疫里默氏菌菌影疫苗。该方案首先构建温控表达载体，电转化入鸭疫里默氏菌原生质体，筛选阳性克隆后28°C增菌培养，然后42°C诱导裂解基因的表达，待OD

摘要： 本发明公开了一种以壳寡糖为佐剂负载大肠杆菌菌毛黏附素的鸭疫里默氏菌菌影疫苗的制备方法及应用。通过将从鸭源大肠杆菌克隆得到的编码fimA黏附素亚单位的pilA基因与噬菌体PhiX174的E基因，通过编码柔性连接臂(GLy4Ser)3的Linker连接，获得pilA、E的串联基因pilA-E，将该串联基因pilA-E与温控表达载体pBV220连接，构建温控表达载体pBV-pilA-E，将所述pBV-pilA-E电转化为鸭疫里默氏菌感受态细胞，并筛选阳性克隆体从而得到鸭疫里默氏菌工程菌，离心分离菌体，得到鸭疫里默氏菌菌影，将壳寡糖配的水溶液加入到菌检无活菌的鸭疫里默氏菌菌泥中，得到鸭疫里默氏菌菌影壳寡糖佐剂疫苗。本发明所提供的鸭疫里默氏菌菌影疫苗，可以通过饮水免疫，应用方便，适应规模化养殖。

摘要： 本发明涉及一种利用噬菌体PhiX174的E基因和葡萄球菌核酸酶A基因转化制备鸭疫里默氏菌前菌影疫苗的方法与应用方法。该方案首先将噬菌体PhiX174的E基因和葡萄球菌核酸酶A基因通过柔性连接臂(Gly

摘要： 本发明属于微生物发酵培养技术领域，公开了一种批发酵提升鸭疫里默氏菌RA1明胶液化酶产量的方法，对血清1型鸭疫里默氏菌进行批发酵法发酵培养，得到发酵液；对发酵液进行离心、沉淀、透析，将回收目标产物采用PBS缓冲液反复冲洗作为明胶酶纯品，明胶酶纯品经明胶液化酶液化实验证明呈阳性，即得明胶液化酶终产物；采用SDS‑PAGE方法对明胶液化酶终产物进行分子量测定。发酵液培养具体包括：菌种复苏：将冰箱保存的血清1型鸭疫里默氏菌RA1融化后，无菌操作法用接种环取菌泥涂布新鲜制备的血平板，并划线培养出单菌落；RA1扩大培养：取RA1单菌落涂布血平板，在平板上长出大量菌丛后，过夜培养；批发酵法培养RA1。