钩端螺旋体

摘要： 钩端螺旋体病是一种人畜共患的传染性疾病,对多种动物易感,在我国多地区均有发病和流行,尤其是随着养猪业不断规模化和集约化,该病的发病率呈现出上升趋势,发病后对养猪场造成的影响非常大,因此,在养殖过程中要注重该病的防控,避免发病造成经济损失。一、病原简介钩端螺旋体又称细螺旋体,是螺旋体科螺旋体属的成员。

摘要： 钩端螺旋体病(Leptospirosis)为致病性钩端螺旋体引起的人畜共患传染病,在世界范围内分布(Levett, 2001),可感染鼠科、猴科和犬科等多种动物(Desvars et al., 2012)。人或动物通过接触带菌动物的粪便、尿液污染的水和土壤而感染(娄银莹等,2019),可造成黄疸、急性肾功能衰竭、出血性素质和严重肺部疾病等,因血清型或地域不同,呈现不同的临床表现(McBride et al., 2005;Goldstein et al., 2006)。

摘要： 1病原学钩端螺旋体在显微镜下常呈“C”“S”等形状,一端或两端带钩,为革兰氏阴性菌,镀银法染色呈棕黑色,姬姆萨液染色呈淡紫红色。该菌对外部环境耐受力较强,在低温湿润环境下数月仍能保持感染性,但其理化性质较弱,在酸、碱、热、紫外线环境下能较快被灭活,市场上常见的消毒剂均能将其杀灭。2流行病学被感染的猪为钩端螺旋体病的主要传染源,其带菌期约为半年。钩端螺旋体可随被感染猪的尿液、乳汁和唾液等排出体外,造成周围环境污染。

摘要： 目的了解福建省鼠感染钩端螺旋体(钩体)现状及分离株基因种的特征,为钩体病防控提供科学依据。方法2015-2019年根据疫情选取14个调查点,采用笼夜法捕鼠并采集心血或肾脏标本进行钩体培养,测定血清抗体;对鼠中分离保存的23株钩体菌株提取DNA,PCR扩增16S rRNA基因、PCR产物纯化测序,与GenBank数据库收录的钩体17种基因型进行比对确定基因种,并用Mega 6.0软件构建系统进化树并进行序列分析。结果福建省鼠种以黄毛鼠为主要优势鼠种,占40.87%(499/1221)、其次依次是黄胸鼠19.57%(239/1221)、针毛鼠16.79%(205/1221)和褐家鼠8.85%(108/1221),钩体血清抗体阳性率为29.32%(207/706),以黄毛鼠最高,为42.16%(121/287),不同地区鼠种构成及鼠钩体感染率不同。23株菌株均扩增出16S rRNA基因的目标条带1484 bp,测序及序列分析属于致病性的基因种有13株,其中L.borgpetersenii(伯氏)占8株,L.interrogans(问号)占5株,属于非致病的基因种10株。钩体菌株分离自福建省的优势鼠种(黄毛鼠、黄胸鼠、针毛鼠)及不同地区(闽东、闽南、闽西和闽北)。结论福建省鼠类感染钩体普遍,以致病性基因种(L.borgpetersenii和L.interrogans)为主,也携带非致病性基因种,需加强钩体病传染源啮齿动物的监测工作。

摘要： 不同血清群钩端螺旋体(简称钩体)代表性菌株是钩体病主要流行菌群监测和疫苗及储备生产最重要的物质基础之一。由于钩体的培养和生长特性,目前仍没有成功解决钩体冻干保存方法,导致一直面临如何长期、有效保存钩体菌种的问题。为更好了解钩体的长期保存钩体方法研究进展,本文就钩体在不同环境的存活能力、各种不同保存钩体方法的优缺点以及面临的问题与挑战进行综述,以期助力钩体保存方法的标准化。

摘要： 目的对一不明原因发热伴呼吸困难患者进行实验室诊断,探讨钩端螺旋体实验室确诊的检测方法。方法利用宏基因二代测序技术(mNGS)对一不明原因发热伴呼吸困难患者的肺泡灌洗液进行病原体分析,利用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)、显微镜凝集试验(MAT)和传统培养方法对患者进行实验室确诊。结果mNGS对不明原因发热伴呼吸困难患者的肺泡灌洗液进行病原体分析提示患者可能被问号钩端螺旋体感染,Real-time PCR和传统培养方法对患者的肺泡灌洗液、血液和尿液检测均为阴性,血清抗体检测(MAT法)致病性钩端螺旋体澳洲型滴度为1∶800。结论该患者确诊为致病性钩端螺旋体澳洲型感染,mNGS与实验室传统方法的有机结合有助于对不明原因发热伴呼吸困难患者实验室诊断,特别是对钩端螺旋体的实验室诊断具有重要意义。

摘要： 猪钩端螺旋体病由钩端螺旋体感染引起的,一年四季都可发生,夏秋季节发病较为集中,呈全世界流行,主要通过消化道、受损的皮肤黏膜及媒介性寄生虫传播;成年猪感染后症状较轻,仔猪表现为急性发病,以短暂发热、贫血、黄疸等为特征,妊娠母猪感染后会流产;预防本病需加强猪场的生物安全管理,减少应激对本病的影响,定期使用微生态制剂,必要时采取药物预防的措施;本病治疗分为对因治疗和对症治疗两个方面,钩端螺旋体敏感的抗生素是治疗本病的首选,同时配合补水、补血、补维生素类的药物以减缓病情。

摘要： 目的调查广州市鼠类动物中钩端螺旋体病的流行情况和遗传特征。方法笼捕法捕捉鼠类动物,采集脾组织提取总DNA,通过PCR技术检测钩端螺旋体16S rRNA和LipL32基因,测序后进行系统进化分析。结果采集褐家鼠170只、板齿鼠4只、黄胸鼠3只、黄毛鼠1只和臭鼩鼱22只,共200只鼠类动物,在褐家鼠中检测到钩端螺旋体阳性样本3个,总阳性率1.5%,系统发育分析显示,3份阳性样本序列与致病性问号钩端螺旋体位于进化树上的同一个分支。结论广州地区鼠类动物中存在致病性问号钩端螺旋体,本地人群存在一定的感染风险。

摘要： 钩端螺旋体病是一种由钩端螺旋体的细菌感染引起的人畜共患疾病。钩端螺旋体病每年有超过100万例病例,是全世界发病率和死亡率最高的人畜共患疾病[1]。尽管进行了积极的治疗和精心的护理,严重钩端螺旋体病的死亡率超过10%[2]。钩端螺旋体病的诊断依赖于血清学检查,早期钩端螺旋体病的临床表现是非特异性的。我们报告一例由黄疸出血型钩端螺旋体引起的休克和严重呼吸衰竭的病例,经气管插管、有创机械通气、抗感染等治疗后,病情好转出院。最终,经湖南省疾病预防控制中心应用显微凝集试验检测,患者确诊为黄疸出血型钩端螺旋体病。

摘要： 钩端螺旋体(简称钩体)病是一种由不同血清群致病性钩体所引起的急性感染性疾病,属自然疫源性疾病。大多数哺乳动物均可为致病性钩体的携带宿主,钩体通过动物尿液排出后可以在水或土壤中存活数月,成为重要的传染源。尽管钩体病发病率总体呈现下降趋势,但是随着全球气候变暖、洪水灾害频发,钩体病疫情在全球范围内仍时有发生,尤其是对发展中和不发达国家造成较大威胁,我国近年也有死亡病例报道。人们对此类传染病放松警惕以及非特异性临床症状表现等因素导致诊断难度加大,存在着钩体病暴发或大流行的潜在危险。

摘要： 目的：建立有效的钩端螺旋体PCR检测方法,并对树鼩、长爪沙鼠和灰仓鼠等三种新型实验动物进行感染情况调查.rn 方法：针对NCBI公布的钩端螺旋体序列,设计并筛选特异性引物,优化PCR体系,进行特异性和敏感性测试;并运用优化PCR方法对树鼩、长爪沙鼠和灰仓鼠样品进行检测.rn 结果：成功建立钩端螺旋体PCR检测方法,序列测定验证了该方法的特异性.普通级树鼩钩端螺旋体的阳性率为8.33％,普通级长爪沙鼠钩端螺旋体为100％,清洁级长爪沙鼠和清洁级灰仓鼠钩端螺旋体的阳性率为0％.rn 结论：本研究建立了钩端螺旋体PCR检测方法,调查了树鼩、长爪沙鼠和灰仓鼠三种新型实验动物的感染情况,为这三种实验动物的研究和使用奠定基础.

摘要： 钩端螺旋体的感染是通过其表面被称为粘附素的外膜蛋白与宿主细胞外膜基质(ECM)的结合来启动的。钩体表面的各种粘附素中,Lig蛋白和Lipl32的量最大,在各种血清型中较保守,其特性研究较透彻。基于外膜蛋白(OMP)构建的亚单位疫苗是全细胞灭活疫苗的有利替代品,因为它们在各种血清型之间具有抗原的保守性,并且可以把高通量的技术用于疫苗生产。目前,钩端螺旋体外膜蛋白,例如,OmpL1,LipL41,LigA,LigB,Lp0607,Lp1118和Lp1454都已证明可以作为钩端螺旋体病的亚单位候选疫苗。

摘要： 本文针对犬的钩端螺旋体感染，主要从病原学、病理生理学、临床症状、鉴别诊断、治疗方法、预防及公共卫生等方面进行了阐述。

摘要： 目的了解健康人群钩端螺旋体感染状况。方法用ELIsA法测定276名在校大学生血清钩端螺旋体抗体。结果被检学生血清钩端螺旋体抗体总阳性率10.51％，南方与北方籍学生间、城市与农村源学生间及不同性别间均有显著差异。结论被检学生中存在钩端螺旋体感染或隐性感染。

摘要： 目的研制一种具有免疫原性的基因疫苗。方法:通过PCR方法,以犬型钩端螺旋体的DNA为模板,扩增目的基因VP1,克隆至真核表达质粒PIRESl上,经序列测定后在犬肾传代细胞中进行表达。结果:获得了长红2.2kb的片段;序列分析表明与文献报道的VPl基因序列有很高的同源性(99﹪)。转在犬肾传代细胞后,可检测到其表达。结论:构建的免疫质粒可在真核细胞中表达,可用于基因免疫研究。

摘要： 目的探讨钩端螺旋体外膜蛋白基因在钩体遗传分类中的作用。方法对我国的两株问号钩体赖型56601株和爪哇型56602株的外膜蛋白基因Ompl1进行PCR扩增得到外膜蛋白基因并进行了全基因序列测定。测序的两株钩体与流感伤寒型RH52株进行了核苷酸序列比较和推导的氨基酸序列比较。结果赖型56601株和爪哇型56602株钩体Ompl1基因核苷酸序列与流感伤寒型RH52株的同源性分别为89﹪和80﹪,推导的外膜蛋白氨基酸序列的同源性分别为92﹪和88﹪。由此可以看出56601株、56602株与RH52株分别属于不同的血清群,这与Yasuda的遗传分类相一致。结论我国的赖型56601株和爪哇型56602株及流感伤寒型RH52株Ompl1基因的核苷酸序列存在一定差别,利用Ompl1基因可对钩端螺旋体进行分类和鉴定。

摘要： 目的:对疑为钩端螺旋体病的军犬病料进行致病性钩端螺旋体分离和鉴定,为钩端螺旋体病的诊断提供理论依据。方法:对病犬进行解剖观察,用犬尿液接种柯索夫培养基进行钩体的分离,然后对分离到的钩体进行菌型鉴定并用钩体外膜蛋白基因引物进行了PCR检测。结果:从尿液中分离到了一株钩体,经鉴定为犬群犬型,PCR扩增结果为阳性。结论:从病犬中分离到了一株犬型致病钩体。

摘要： 本文对猪钩端螺旋体病的诊治进行了研究。文章围绕发病情况、临床症状、病理变化、实验室检查、诊断防治等进行了论述。

摘要： 脉冲场凝胶电泳用于钩端螺旋体(钩体)分型检定已有报导,其分型结果与血清学分型具有很高的一致性,当然也有少数结果存在差异.中国疾病预防控制中心传染病预防控制所(传染病控制所)用该方法检定我国地方钩体菌株时,发现为一些疑似新型菌株.为此,本文选择了其中3株钩体采用经典的血清学分类方法予以比较.

摘要： 本文通过对钩端螺旋体基因组的研究,识别了钩端螺旋体全部基因组的4700多个基因,初步揭示了钩端螺旋体在代谢、进化和致病等方面的特殊性,验证了一些以钩端螺旋体为代表的进化地位古老的细菌的特有代谢途径。结合蛋白质组和比较基因组学等平台技术展开功能基因组研究,鉴定了30多个致病相关基因和30多个潜在的、可发展疫苗的新靶点。

摘要： 一种钩端螺旋体黏附蛋白rvWFA3‑1的制备方法和应用，属于分子生物学和免疫学技术领域。本发明通过PCR扩增含有超家族结构域480 bp LA_0697（601～1080），T‑A克隆、亚克隆建立原核表达系统，IPTG诱导表达、Ni‑NTA亲和层析纯化获得重组蛋白rvWFA3‑1，并试验证明了rvWFA3‑1在疫苗研发、钩端螺旋体感染抗体检测试剂盒研发。通过本发明方法可获得钩端螺旋体黏附重组蛋白rvWFA3‑1，印证了该重组蛋白rvWFA3‑1黏附特征，对致病问号钩端螺旋体菌株攻击有保护作用、产生高效价保护性抗体且产生的抗体具有交叉保护作用。

摘要： 一种钩端螺旋体黏附蛋白rvWFA3‑2的制备方法和应用，属于分子生物学和免疫学技术领域。其通过基因工程手段构建了vWFA3‑2蛋白编码基因的原核表达系统，诱导纯化获得重组蛋白rvWFA3‑2，其可用于疫苗研发、钩端螺旋体感染抗体检测试剂盒研发。本发明采用生物信息学分析证实了LA_4207基因产物N端有信号肽分泌型蛋白，LA_4207基因产物含有超家族结构域（34‑200aa）。提供了一种新方法用于体外制备重组蛋白rvWFA3‑2。并证明了制备得到的黏附蛋白rvWFA3‑2对致病问号钩端螺旋体菌株的攻击起到保护作用，产生高效价保护性抗体，且具有交叉保护作用。

摘要： 本发明公开了一种多交叉恒温扩增结合高分子纳米生物传感器检测钩端螺旋体的方法，所述方法使用独特设计的多交叉置换扩增引物，同时提供在多交叉置换扩增中的扩增引物C1的5’端标记生物素的引物，以及在扩增引物D1的5’端标记半抗原的引物。所述方法针对致病性钩端螺旋体LipL41基因的扩增产物能被高分子纳米生物传感器可视化检测。所述方法便捷、快速、敏感、特异，适宜于致病性钩端螺旋体的特异检测。

摘要： 本发明公开了一种犬型钩端螺旋体、黄疸出血型钩端螺旋体、犬冠状病毒三联灭活疫苗。本发明采用我国分离的犬型钩端螺旋体、黄疸出血型钩端螺旋体和犬冠状病毒流行株经灭活后加入佐剂研制而成。本发明涉及病原体的分离培养、鉴定、灭活方法、生产工艺、疫苗保存和免疫方法。犬三联灭活疫苗用于预防犬型钩端螺旋体病、黄疸出血型钩端螺旋体病和犬冠状病毒病，免疫犬后可产生较高的抗体，对强毒攻击具有很好的保护作用。钩端螺旋体为人畜共患传染病，犬为人类的伴侣动物，宠物犬与人类密切接触，因此，该三联灭活疫苗具有较好的社会效益和重要的公共卫生意义。

摘要： 本发明公开了一种抗钩端螺旋体的单克隆抗体及钩端螺旋体的检测方法。56601－MAb对钩体黄疸出血群赖型有特异性免疫反应，56602－MAb对钩体爪哇型有特异性免疫反应，56606－MAb对钩体秋季型有特异性免疫反应，56609－MAb对钩体流感伤寒群临6型有特异性免疫反应，56610－MAb对钩体七日热型有特异性免疫反应，而5种单克隆抗体均与其他血清型的钩体没有免疫反应。本发明提供的抗5种致病血清型钩体的5种单克隆抗体，对准确、快速分型、抗原的纯化及用于临床病人与动物钩体病的诊断均具有重要意义。本发明提供的以单抗为基础的TAS－ELISA检测诊断方法具有快速、方便、灵敏正确、特异性好、结果可肉眼观察等优点，有利于其的推广应用。

摘要： 提供四种抗原性制备物,每种均包含一种不同的钩端螺旋体蛋白,所述蛋白可免疫学性用于钩端螺旋体所致钩端螺旋体病的疫苗中。本发明还提供编码这四种蛋白质的多核苷酸以及可与这四种蛋白质结合的抗体以及用于诊断钩端螺旋体病。

摘要： 本发明属于基因工程技术领域，具体提供了用于检测钩端螺旋体的引物探针组合物、试剂盒及方法。本发明提供的以用于检测钩端螺旋体的引物探针组合物作为主要成分的试剂盒，耗时短、特异性高、重复性好、灵敏度高，为诊断钩端螺旋体提供可靠的实验依据。

摘要： 本发明公开一种抗钩端螺旋体卵黄抗体及其制备方法，同时还提供了其应用，选择灭活的致病型钩体56601作为抗原，免疫经产蛋鸡，用PEG6000方法提取纯化卵黄抗体，MAT法检测抗体滴度高达256，可用于钩端螺旋体病的治疗，试验结果表明，使用本发明方法制备得到的抗钩端螺旋体56601治疗同种钩体感染的金黄地鼠，能有效的降低金黄地鼠脏器内的钩体载量，显著提高金黄地鼠的存活率。

摘要： 本实用新型公开了钩端螺旋体检测技术领域的一种检测钩端螺旋体的快速检测装置，包括检测箱、箱盖和握持机构，所述箱盖通过合页转动连接在所述检测箱的顶部后侧，所述握持机构固定连接在所述检测箱的左右两侧，该检测钩端螺旋体的快速检测装置，检测人员在准备阶段只需将试管放置在试管放置槽内，关上箱盖并通过控制面板启动紫外线杀菌灯和高温灭菌器，对检测箱内部和试管内部进行杀菌操作，操作完成后检测人员只需将钩端螺旋体倒入至试管内再将试管放入至检测器即可完成检测，实现本装置一机两用的效果，大大减少了检测人员的操作复杂程度，从而提高检测人员的工作效率，使得检测人员达到对钩端螺旋体进行快速检测的效果。

摘要： 本实用新型属于药物混合装置技术领域，尤其为一种治疗猪钩端螺旋体病的药物混合装置，包括支撑台、支撑架、搅拌桶和支架，所述支撑架固定连接在支撑台上表面，所述搅拌桶固定连接在支撑架内部，所述支架固定连接在搅拌桶上表面，所述支架内部固定连接有电机，所述搅拌桶表面穿设有轴承；本实用新型，通过设置储药杯、限位块和卡槽，当人们需要对中药进行混合搅拌时，人们只需要通过限位通管中注入适量的水，然后将制药所需要的中药放置在储药杯中，然后将储药杯放置在限位通管中，同时将限位块与卡槽进行卡接，然后通过控制开关控制电机运作，从而带动载有搅拌桨的转轴转动，从而实现对中药进行混合搅拌的目的，方便了人们对中药进行混合搅拌。