PCR

摘要： 非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染家猪和野猪而引起的一种急性烈性、高度接触性传染病,到目前为止仍未研制出有效疫苗,因此病原的早发现对ASF防控尤为重要.ASFV的病原学检测主要包括活病毒检测、核酸检测和抗原检测.活病毒检测中,病毒分离和红细胞吸附试验均耗时较长,且对实验室要求较高,通常只有被参考实验室采用.病毒核酸检测中,普通PCR和实时荧光定量PCR(qPCR)是OIE推荐的首选诊断方法,其特异性和灵敏度均较高,但操作复杂、成本高;等温扩增技术操作简单、成本低,不需要特殊仪器,检测时间短、携带方便、灵敏度高,适用于屠宰场、养殖场现场检测,但因特异性不高,需要不断更新和改进;微流控芯片法具有样品消耗少、检测速度快、操作简便、便于携带等优点,但检测成本高,需要特定的设备,尚未被广泛使用.抗原检测技术中,荧光抗体检测(FAT)对实验室要求较高,不适合现场检测;夹心ELISA和胶体金免疫试纸条检测快速,操作简单,检测成本低,但敏感性和特异性还需改进.ASF病原学检测技术虽很成熟,但各有不足,所以应根据实际情况结合使用.

摘要： 为了探究二氯异氰尿酸钠溶液对伪狂犬病病毒的杀灭效果,研究使用了终浓度为0.3%的二氯异氰尿酸钠溶液在低温(-8~-9°C)和高有机物(血清和粪便)的条件下与伪狂犬病活疫苗分别混匀作用20 min、10 min、5 min和1 min后,通过病毒核酸PCR来检测消毒药的消毒效果。结果表明,在低温和高有机物(20%血清和1 g粪便)条件下,终浓度为0.3%的二氯异氰尿酸钠溶液与伪狂犬病活疫苗作用10 min后,核酸PCR的CT值为0。说明0.3%二氯异氰尿酸钠溶液对伪狂犬病病毒核酸具有显著破坏效果。

摘要： 目的比较免疫组织化学法(Immunohistochemistry,IHC)与聚合酶链反应法(Polymerase chain reaction,PCR)检测梅毒患者皮损组织蜡块中梅毒螺旋体(Treponema pallidum,TP)的敏感性。方法对广西医科大学第一附属医院皮肤科26名诊断为梅毒的患者皮损组织蜡块分别进行IHC和PCR检测。结果26份样本均显示IHC阳性,阳性率为100%;有7例Tp47-PCR阳性,9例poIA-PCR阳性,阳性率分别为27%和35%,其中poIA-PCR阳性样品中包含了Tp47-PCR阳性样品。结论IHC对梅毒患者皮损组织蜡块中TP的检测敏感性高于PCR,对于临床出现多样化皮疹,高度怀疑梅毒却出现诊断困难时,IHC可作为一种针对皮损组织蜡块的准确、敏感的特异性检测方式,帮助临床诊断。

摘要： 为了解吉林省牛瑟氏泰勒虫病感染情况,本试验根据牛瑟氏泰勒虫18S rRNA基因序列设计引物,应用聚合酶链式反应(PCR)方法对吉林省珲春、通化、安图、舒兰、龙井、辽源、白山共7个县市采集的247份血液样本进行了牛瑟氏泰勒虫病分子流行病学调查,并进行不同地区、不同饲养方式、不同性别及不同年龄之间的比较。结果显示,牛瑟氏泰勒虫总体阳性率为39.68%(98/247),其中通化阳性率最高为70.00%(14/20),龙井阳性率最低为20.00%(8/40),地区之间除安图和白山差异不显著(P>0.05)外,其他各地区之间均差异显著(P0.05);1岁以内牛阳性率为56.67%(34/60),1~3岁牛阳性率为42.22%(38/90),3岁以上牛阳性率为26.80%(26/97),不同年龄间差异显著(P<0.05)。结果表明,吉林省牛瑟氏泰勒虫感染的情况普遍存在。本次调查为吉林省牛瑟氏泰勒虫病的有效防控提供了科学依据。

摘要： Background: Different studies have demonstrated high prevalence of HPV infection and dysplastic lesions of the cervix in immunocompromised patient such as women living with HIV. Is this high prevalence due to a greater susceptibility to HPV infection, which is known to be frequent in its latent form in women? Objective: This study aims to identify HPV genotypes in HIV+ and HIV? women to understand HPV molecular epidemiology in Senegal. Material and Method: Endocervical samples from 331 HIV+ and HIV? women, sexually active, were collected. The molecular identification of the 28 genotypes studied (19 HPV-HR and 9 HPV-LR) was carried out after DNA extraction, by multiplex PCR with the Anyplex? II HPV28 detection kit from Seegene on CFX96? Bio-Rad machine. The comparisons were made by calculating the p-value and odds ratio with R Studio software (version 4.1.0). The results were considered significant if p ? women. Conclusion: Our results showed that the prevalence of HPV, HPV-HR and HPV-BR was significantly higher in HIV+ women. Non-vaccine genotypes were among the most found genotypes. Groups of HIV+ women aged between 35 and 50, married and using contraception were significantly more infected with HPV than the same groups of HIV-women.

摘要： 目的:研究湖北省健康人群血管紧张素转换酶2(Angiotensin Converting Enzyme 2,ACE2)与SARS-CoV-2互相作用位点处对应基因的单核苷酸多态性,以期揭示其与SARS-CoV-2易感性之间的联系。方法:选取湖北文理学院医学院临床专业学生16名,提取其口腔粘膜DNA,使用PCR技术检测本实验研究人群ACE2蛋白与SARS-CoV-2相互作用的八个氨基酸对应基因位点的多态性。结果:ACE2与SARS-CoV-2的关键结合位点具有保守性,未发现多态性。在这些关键结合位点中,包括两个单核苷酸多态性位点,分别为rs766996587和rs368655410,其变异频率在亚洲人群中极低,本次实验也未发现存在多态性。结论:在湖北人群中ACE2基因与SARS-CoV-2相互作用位点处未发现多态性,暗示湖北人群对SARS-CoV-2的易感性从分子层面来看不存在差异。

摘要： 通过Beacon Designer v.8和Primers Blast软件设计引物,使用PCR扩增技术和琼脂糖凝胶电泳检测来筛选出目的基因片段,对目的片段序列进行Blast比对,筛选出适合于鸭茅(L.)RPB1引物序列。试验结果显示:设计的10对引物中有2对引物扩增条带唯一且清晰,扩增产物经比对后验证其为目的基因。筛选出的RPB1引物对鸭茅物种起源进化及种质资源利用的研究具有重要的意义。

摘要： 尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)作为生物体内的DNA修复酶系,能有效水解单链或双链DNA上的尿嘧啶,可用于PCR过程中残留污染物的清除.本研究以PCR预混液试剂盒作为检测工具,以鲤浮肿病和罗非鱼湖病的阳性核酸片段检测为例,探讨了巢式和荧光定量PCR检测时,UDG的抗污染效果.研究结果表明:(1)向PCR反应体系中添加200μmol/L的dUTP,可保证扩增产物中有足够的尿嘧啶掺入,且对扩增效率影响较小.(2)使用0.2 U/10μL的UDG浓度,可清除常规PCR中99.9%以上(多数大于99.95%)的阳性污染物,或清除荧光定量PCR(探针法)中96.5%以上的阳性污染物.继续增加UDG用量,则污染物清除效率的提高有限.本研究为特定条件下UDG对污染性模板的清除效果做了定量统计,能为该技术的具体应用与进一步优化提供实验依据.

摘要： 为筛选适用于鸭茅物种的基因引物序列,开展相关系统发育学研究,通过搜集鸭茅近缘物种叶绿体基因引物,使用PCR扩增技术和琼脂糖凝胶电泳检测来筛选出目的基因片段,对目的基因进行BLAST序列比对。结果表明:试验搜集的35对引物中共能筛选出trnL-F 1、trnL-F 5、rpL162、rpL164、matK 6、matK 7、rbcL 1共7对引物,扩增条带唯一且清晰,扩增产物经测序及比对结果后验证均为目的基因。本研究筛选的7对叶绿体基因引物扩增效果较好,适用于鸭茅的系统发育分析。

摘要： 钩端螺旋体病(Leptospirosis)为致病性钩端螺旋体引起的人畜共患传染病,在世界范围内分布(Levett, 2001),可感染鼠科、猴科和犬科等多种动物(Desvars et al., 2012)。人或动物通过接触带菌动物的粪便、尿液污染的水和土壤而感染(娄银莹等,2019),可造成黄疸、急性肾功能衰竭、出血性素质和严重肺部疾病等,因血清型或地域不同,呈现不同的临床表现(McBride et al., 2005;Goldstein et al., 2006)。

摘要： 本文设计并开发一种集成化的PCR微流控芯片仪器控制系统。采用PID算法进行温度控制;通过PC机串口指令控制微泵、徽阀及微混合器协同工作以驱样品和试剂;采用分时段控制策略，控制微泵、微阀、混合器、高压模块的运行状态及PCR反应温度，利用Labview作为软件开发平台，实现人机交换;从而以实现整个PCR反应从DNA的提取，纯化，扩增到检测连续在线完成，为复杂的微流控芯片和仪器控制的耦合提供一条有效的设计思路。

摘要： 本文设计并开发一种集成化的PCR微流控芯片仪器控制系统。采用PID算法进行温度控制;通过PC机串口指令控制微泵、徽阀及微混合器协同工作以驱样品和试剂;采用分时段控制策略，控制微泵、微阀、混合器、高压模块的运行状态及PCR反应温度，利用Labview作为软件开发平台，实现人机交换;从而以实现整个PCR反应从DNA的提取，纯化，扩增到检测连续在线完成，为复杂的微流控芯片和仪器控制的耦合提供一条有效的设计思路。

摘要： 本文设计并开发一种集成化的PCR微流控芯片仪器控制系统。采用PID算法进行温度控制;通过PC机串口指令控制微泵、徽阀及微混合器协同工作以驱样品和试剂;采用分时段控制策略，控制微泵、微阀、混合器、高压模块的运行状态及PCR反应温度，利用Labview作为软件开发平台，实现人机交换;从而以实现整个PCR反应从DNA的提取，纯化，扩增到检测连续在线完成，为复杂的微流控芯片和仪器控制的耦合提供一条有效的设计思路。

摘要： 本文设计并开发一种集成化的PCR微流控芯片仪器控制系统。采用PID算法进行温度控制;通过PC机串口指令控制微泵、徽阀及微混合器协同工作以驱样品和试剂;采用分时段控制策略，控制微泵、微阀、混合器、高压模块的运行状态及PCR反应温度，利用Labview作为软件开发平台，实现人机交换;从而以实现整个PCR反应从DNA的提取，纯化，扩增到检测连续在线完成，为复杂的微流控芯片和仪器控制的耦合提供一条有效的设计思路。

摘要： 重点介绍了目前周内外各种MEMS聚合酶链式反应仪的研究现状和不同系统的特点，阐述了基于MEMS技术的两类聚合酶链式反应仪的基本特征，并分析了此方身的发展趋势。

摘要： 重点介绍了目前周内外各种MEMS聚合酶链式反应仪的研究现状和不同系统的特点，阐述了基于MEMS技术的两类聚合酶链式反应仪的基本特征，并分析了此方身的发展趋势。

摘要： 重点介绍了目前周内外各种MEMS聚合酶链式反应仪的研究现状和不同系统的特点，阐述了基于MEMS技术的两类聚合酶链式反应仪的基本特征，并分析了此方身的发展趋势。

摘要： 实验室条件下提取BAC滤池应急处理乙醛、丙烯醛等小分子醛类污染物前(SC)后(SY)活性炭表面微生物总DNA,构建16SrDNA克隆文库,并通过16SrDNA序列的系统发育分析,对样品中细菌种群多样性及群落结构的前后变化进行分析。结果表明BAC滤池处理乙醛和丙烯醛前后细菌种群和菌落结构发生了显著变化。SC样品文库中阳性克隆的16SrDNA序列分属13个细菌类群,分别为Alphaproteobacteria(25%)、Betaproteobacteria(11%)、Gammaproteobacteria(4%)、Deltaproteobaeteria(2%)、unclassifiedproteobacteria(3%)、Acidobacteria(15%)、Verrucomicrobia(4%)、Planctomycetes(12%)、unclassifiedbacteria(11%)、Nitrospim(6%)、Gemmatimonadetes(2%)、Bacteroidetes(3%)、Aetinobacteria(2%),HPC量为1.18×107CFU/g;而SY样品阳性克隆的16SrDNA序列分属6个细菌类群,分别为Alphaproteobacteria(10%)、Betaproteobaeteria(78%)、Gammaproteobacteria(5%)、Deltaproteobacteria(5%)、Acidobacteria(1%)、Unidentifiedbacteria(1%),SY样品的HPC量比样品SC高了一个数量级,达到1.28×100CFU/g。SY样品文库中与已培养种或克隆相似度较高的种群数为33种,远低于SC样品的81种,且菌群丰度增高显著。SY文库中属于Betaproteobacteria类群的SY-10、SY-41、SY-1、SY-75、SY-14、SY-107超过总基因库频率的50%,其相似菌群均可以以小分子有机物为营养源,证明其对对乙醛和丙烯醛等小分子醛类的降解起决定性作用。

摘要： 实验室条件下提取BAC滤池应急处理乙醛、丙烯醛等小分子醛类污染物前(SC)后(SY)活性炭表面微生物总DNA,构建16SrDNA克隆文库,并通过16SrDNA序列的系统发育分析,对样品中细菌种群多样性及群落结构的前后变化进行分析。结果表明BAC滤池处理乙醛和丙烯醛前后细菌种群和菌落结构发生了显著变化。SC样品文库中阳性克隆的16SrDNA序列分属13个细菌类群,分别为Alphaproteobacteria(25%)、Betaproteobacteria(11%)、Gammaproteobacteria(4%)、Deltaproteobaeteria(2%)、unclassifiedproteobacteria(3%)、Acidobacteria(15%)、Verrucomicrobia(4%)、Planctomycetes(12%)、unclassifiedbacteria(11%)、Nitrospim(6%)、Gemmatimonadetes(2%)、Bacteroidetes(3%)、Aetinobacteria(2%),HPC量为1.18×107CFU/g;而SY样品阳性克隆的16SrDNA序列分属6个细菌类群,分别为Alphaproteobacteria(10%)、Betaproteobaeteria(78%)、Gammaproteobacteria(5%)、Deltaproteobacteria(5%)、Acidobacteria(1%)、Unidentifiedbacteria(1%),SY样品的HPC量比样品SC高了一个数量级,达到1.28×100CFU/g。SY样品文库中与已培养种或克隆相似度较高的种群数为33种,远低于SC样品的81种,且菌群丰度增高显著。SY文库中属于Betaproteobacteria类群的SY-10、SY-41、SY-1、SY-75、SY-14、SY-107超过总基因库频率的50%,其相似菌群均可以以小分子有机物为营养源,证明其对对乙醛和丙烯醛等小分子醛类的降解起决定性作用。

摘要： 实验室条件下提取BAC滤池应急处理乙醛、丙烯醛等小分子醛类污染物前(SC)后(SY)活性炭表面微生物总DNA,构建16SrDNA克隆文库,并通过16SrDNA序列的系统发育分析,对样品中细菌种群多样性及群落结构的前后变化进行分析。结果表明BAC滤池处理乙醛和丙烯醛前后细菌种群和菌落结构发生了显著变化。SC样品文库中阳性克隆的16SrDNA序列分属13个细菌类群,分别为Alphaproteobacteria(25%)、Betaproteobacteria(11%)、Gammaproteobacteria(4%)、Deltaproteobaeteria(2%)、unclassifiedproteobacteria(3%)、Acidobacteria(15%)、Verrucomicrobia(4%)、Planctomycetes(12%)、unclassifiedbacteria(11%)、Nitrospim(6%)、Gemmatimonadetes(2%)、Bacteroidetes(3%)、Aetinobacteria(2%),HPC量为1.18×107CFU/g;而SY样品阳性克隆的16SrDNA序列分属6个细菌类群,分别为Alphaproteobacteria(10%)、Betaproteobaeteria(78%)、Gammaproteobacteria(5%)、Deltaproteobacteria(5%)、Acidobacteria(1%)、Unidentifiedbacteria(1%),SY样品的HPC量比样品SC高了一个数量级,达到1.28×100CFU/g。SY样品文库中与已培养种或克隆相似度较高的种群数为33种,远低于SC样品的81种,且菌群丰度增高显著。SY文库中属于Betaproteobacteria类群的SY-10、SY-41、SY-1、SY-75、SY-14、SY-107超过总基因库频率的50%,其相似菌群均可以以小分子有机物为营养源,证明其对对乙醛和丙烯醛等小分子醛类的降解起决定性作用。

摘要： PCR反应容器(10)包括：基板(14)；流道(12)，形成于基板(14)；一对第1过滤器(28)、第2过滤器(30)，设于流道(12)的两端；一对第1空气连通口(24)、第2空气连通口(26)，通过第1过滤器(28)、第2过滤器(30)而与流道(12)相连通；热循环区域(12e)，形成于流道(12)中的第1过滤器(28)与第2过滤器(30)之间；分岔点(112c)，形成于流道(12)中的第1过滤器(28)与第2过滤器(30)之间；分岔流道(131)，其一端连接于分岔点(112c)；以及样品导入口(133)，形成于分岔流道(131)的另一端。

摘要： 本发明提供一种植物免提取直接实时荧光快速PCR扩增稳定剂、PCR扩增组合物和PCR扩增方法，具体公开了一种植物免提取PCR反应的稳定剂，所述稳定剂包括MgCl

摘要： 本发明提供PCR反应容器、PCR装置、PCR方法。PCR反应容器(10)包括：基板(14)；流道(12)，形成于基板(14)；一对第1过滤器(28)、第2过滤器(30)，设于流道(12)的两端；一对第1空气连通口(24)、第2空气连通口(26)，通过第1过滤器(28)、第2过滤器(30)而与流道(12)相连通；热循环区域(12e)，形成于流道(12)中的第1过滤器(28)与第2过滤器(30)之间；分岔点(112c)，形成于流道(12)中的第1过滤器(28)与第2过滤器(30)之间；分岔流道(131)，其一端连接于分岔点(112c)；以及样品导入口(133)，形成于分岔流道(131)的另一端。

摘要： 本发明涉及一种PCR热循环装置、PCR热循环方法及PCR仪。该PCR热循环装置包括壳体，其形成一负压空间；设置于负压空间内的基板，其上开设若干反应腔，基板包括包裹于反应腔外的温控腔；加热模块；冷却模块；及对基板配合的密封件。加热模块采用导热油作为加热源，冷却模块为采用二氧化碳作为冷却源。加热模块和冷却模块均为提供循环式流体流经温控腔，进而控制反应腔的温度。该PCR热循环装置具有温度均匀、质轻、升降温速度快、功率要求低等特性，大大的改善了仪器整体的基因扩增效果和检测性能的精准度及稳定性。

摘要： 联合多重PCR巢式PCR和降落PCR用于致病性结核分枝杆菌检测的试剂盒。本试剂盒采用多重PCR、巢式PCR和降落PCR联合技术，通过IS6110、IS1081和MPB64三组引物，多重、高效、特异的检测三个分子标志物IS6110、IS1081和MPB64；从而快速诊断致病性结核分枝杆菌，可使测定更为精确。本试剂盒不仅对致病性结核分枝杆菌保守的IS6110、IS1081分子标志物进行检测。同时，对致病结核分枝杆菌野生株中的MPB64分子标志物进行检测，更具有对致病结核分枝杆菌准确的判定意义，可大幅提高对致病性结核分枝杆菌的检出正确率。

摘要： 本发明提供一种PCR模组可移动式荧光定量PCR仪、PCR仪集组及方法，荧光定量PCR仪包括框体、检测模组、PCR模组和平移驱动机构；PCR模组包括控温组件、托块和热盖组件，平移驱动机构驱动PCR模组水平移动，从而使托块的多个内凹孔位依次移动到检测模组的正下方进行检测。检测模组采用固定式，有助于检测模组内部光路结构和检测器件保持在可靠稳定状态，相比检测模组移动式，寿命更长，能保持良好的检测精确度；采用PCR模组移动式，直接借助平移驱动机构实现PCR模组从框体内移出，方便操作人员取样和放样；采用PCR模组侧向移出式，方便多台荧光定量PCR仪的上下堆叠，大大节约了占用空间，也方便应用到到实验室全自动检测流水系统中。

摘要： PCR反应容器(10)包括：基板(14)；流道(12)，形成于基板(14)；一对第1过滤器(28)、第2过滤器(30)，设于流道(12)的两端；一对第1空气连通口(24)、第2空气连通口(26)，通过第1过滤器(28)、第2过滤器(30)而与流道(12)相连通；热循环区域(12e)，形成于流道(12)中的第1过滤器(28)与第2过滤器(30)之间；分岔点(112c)，形成于流道(12)中的第1过滤器(28)与第2过滤器(30)之间；分岔流道(131)，其一端连接于分岔点(112c)；以及样品导入口(133)，形成于分岔流道(131)的另一端。

摘要： 本实用新型提供一种PCR模组可移动式荧光定量PCR仪及PCR仪集组，荧光定量PCR仪包括框体、检测模组、PCR模组和平移驱动机构；PCR模组包括控温组件、托块和热盖组件，平移驱动机构驱动PCR模组水平移动，从而使托块的多个内凹孔位依次移动到检测模组的正下方进行检测。检测模组采用固定式，有助于检测模组内部光路结构和检测器件保持在可靠稳定状态，相比检测模组移动式，寿命更长，能保持良好的检测精确度；采用PCR模组移动式，直接借助平移驱动机构实现PCR模组从框体内移出，方便操作人员取样和放样；采用PCR模组侧向移出式，方便多台荧光定量PCR仪的上下堆叠，大大节约了占用空间，也方便应用到到实验室全自动检测流水系统中。

摘要： 本实用新型公开了一种用于植物病原细菌PCR检测的PCR管和PCR板，PCR管包括底部封闭顶部开口的管体、插设在管体的管口处的管盖，管盖包括盖合时伸入管体内部的连接部和位于管体外部的盖帽部，连接部靠近盖帽部的外表面设有外螺纹，管体靠近管口的内表面设有内螺纹，管体的内表面位于内螺纹下方周向设有软胶层，软胶层环绕管体一周形成套筒状结构，盖合管盖时，连接部延伸到软胶层。由于PCR管的管盖和管体采用螺纹连接和软胶层密封，双重密封可以防止管盖脱离，密封更稳固，避免在扩增反应结束后会出现膨胀，管盖松弛等现象，避免假阳性的出现。同时只需要拧动管盖，使用比较小的力就能打开和闭合管盖，操作比较省力。

摘要： 本实用新型涉及PCR工具技术领域，尤其涉及PCR管、PCR管条及PCR管板的密封结构，本实用新型提供的PCR管、PCR管条、PCR管板的密封结构都包括有管体、管盖，管盖靠近底部的周向外表面上分别向外凸设有环形防脱安全凸扣、位于防脱安全凸扣下方的环形密封保险凸扣，防脱安全凸扣和密封保险凸扣分别紧密顶压在管体的管口内侧面上形成密封结构，本实用新型的管盖利用密封保险凸扣实现与管体之间的密封，同时利用防脱安全凸扣与管体配合能够实现双重密封并能防止管盖脱离，提高密封效果，密封更可靠。