配子体

摘要： 目的 建立一种疟原虫雌性配子体的分子检测法.方法 根据疟原虫雌性配子体特异性mRNA靶标(待测靶序列)即动合子表面蛋白(s25)的转录产物,设计特异性的捕获探针和连接探针.血液样品经裂解释放的mRNAs,无需核酸提取,通过"三明治"杂交被捕获到96孔板表面.洗去未结合探针后,将结合在mRNA靶标上的连接探针进行连接,得到两端为特殊设计序列的单链扩增模板.再用通用引物进行染料法qPCR扩增,或在端部设计TaqMan探针序列,用通用引物和通用TaqMan探针进行探针法qPCR扩增.评价这一基于捕获和连接扩增的方法(CLIP-PCR)的灵敏度、特异性和重复性并与普通的RT-qPCR方法进行比较,将其应用于临床样品的检测.结果 该CLIP-PCR具有较高的灵敏度和特异性.与普通的RT-qPCR一样,均可检测低至11拷贝数的s25 mRNA靶标;而且该CLIP-PCR操作更简便.该CLIP-PCR可准确检测到疟疾患者血液中的雌性配子体.可将96个样品的检测时间缩短至3 h.结论 建立了灵敏高效的染料法和通用TaqMan探针法CLIP-PCR检测疟原虫雌性配子体,为疟疾传播的控制、配子体大规模筛查奠定了基础.

摘要： 为了解珍稀濒危植物中华双扇蕨(Dipteris chinensis)濒危原因,研究了温度和湿度对其孢子萌发的影响。结果表明,中华双扇蕨孢子萌发能力较强,萌发方式为Vittaria型,配子体萌发为Marattia型。中华双扇蕨孢子繁殖不受温度影响,而湿度显著影响孢子繁殖过程,湿润环境中孢子正常萌发,并形成心形配子体,顺利长出幼孢子体;而干旱环境下孢子难以萌发,配子体形态不规则发育,褶皱增加。中华双扇蕨在不适环境下孢子繁殖存在障碍,可能是导致其野生种群及数量下降的原因之一,对这类珍稀濒危植物的就地和迁地保护需要注意营造湿润的生境。

摘要： 研究海带(Saccharina japonica)配子体预发育的适宜光照强度、培育密度和发育程度,为配子体预发育技术应用于海带配子体育苗提供技术支撑。以雌配子体发育率、排卵率、精囊形成率为考察指标,确定海带配子体预发育的适宜光照强度和培育密度;以出苗率和出苗时间为考察指标,确定海带配子体预发育的适宜发育程度。结果发现,在温度(13±1)°C、培育密度10.0 g·L^(-1)时,海带配子体在37.5~62.5μmol·m^(-2)s^(-1)光照条件下预发育速度显著快于25.0μmol·m^(-2)s^(-1);在(13±1)°C、光照强度37.5μmol·m^(-2)s^(-1)时,海带配子体在5.0~10.0 g·L^(-1)密度下发育速度显著快于15.0~20.0 g·L^(-1)密度条件;在培育密度达到15.0 g·L^(-1)及以上时,海带配子体只有部分发育,其余部分进行丝状体生长。海带配子体在温度(13±1)°C、光照强度37.5μmol·m^(-2)s^(-1)、培育密度10.0 g·L^(-1)条件下,预发育11~12 d后,进行出苗测试,培育5 d的出苗率达到96.0%以上,未进行预发育的配子体出苗测试9 d的出苗率为90.7%,预发育配子体比未预发育配子体提前4 d达到90.0%以上出苗率。试验结果表明,海带配子体预发育的适宜光照强度为37.5μmol·m^(-2)s^(-1)、适宜培育密度为10.0 g·L^(-1)、适宜预发育时间为11~12 d。

摘要： 通过设置培养液的不同盐度,在实验室条件下检验了笼目海带(Saccharina sculpera)在不同盐度的培养液中配子体生长发育情况。结果显示,在盐度20~30的条件下,笼目海带配子体大部分(60%~80%)进入了生殖生长状态,且其中50%以上为多细胞孢子体;在盐度35的条件下,大部分(80%~90%)笼目海带配子体维持在营养生长状态,虽然有小部分(7.30%)配子体进入了生殖生长状态,但生殖生长明显滞后于盐度20~30处理组。在盐度为40和45的培养条件下,所有海带配子体维持在营养生长状态。根据试验结果,建议将笼目海带配子体育苗的盐度保持在20~30。

摘要： 通过设置不同的光照强度和光照周期,在实验室条件下检测了笼目海带(Kjellmaniella crassifolia Miyabe)配子体的发育情况。结果显示:光照强度及光照周期均对笼目海带配子体的发育率有显著的影响(P<0.05)。结果表明:1)在光照强度条件不同、其他培养条件相同的情况下,经过4周的发育,5~80μmol·m^(-2)s^(-1)条件下大部分配子体进入了生殖生长状态,发育率为60%~80%,其中20~40μmol·m^(-2)s^(-1)光照强度条件下生殖生长明显快于其他组。2)在光周期不同、其他培养条件相同的情况下,培养第12~25天时,20L∶4D条件下发育率为6.68%~69.87%,发育率与16L∶8D实验组差异不显著,但显著大于其余组。培养第32天,光照时间最长的处理组即20L∶4D的发育率(74.54%)最高,且孢子体细胞列数最多。本研究为笼目海带配子体规模化扩增及育苗提供了数据参考。

摘要： 生殖方式对揭示植物界个体发育、种族延续以及探究植物界各大类群演化过程具有重要意义.本文以常规条件下培养的槲蕨(Drynaria roosii)配子体为材料,在体视显微镜下发现了配子体表面着生有可发育为新植株的绿色瘤状体,利用扫描电镜观察其表面及剖面,结果表明:绿色瘤状体着生于配子体中肋处,背腹面均有分布且大小不均;形状不规则,表面密布毛状体和鳞片;绿色瘤状体结构简单、不具维管束,细胞内部具有直径3～10μm的光滑圆球;已形成的瘤状体可以继续分裂产生新的小瘤状体.通过与有性生殖等方式比较,本文认为该结构的形成很可能是一种新的生殖方式,并将此结构命名为绿色瘤状体(green tuberculate body,GTB).

摘要： 染色体数目分析是现代系统与进化植物学研究十分重要和不可缺少的环节.在蕨类植物中,使用根尖或孢子母细胞作为实验材料的经典方法在取样时往往存在困难.该文以3种桫椤科桫椤属植物为例,探寻适合蕨类植物染色体数目研究的材料.由于取样时没有时间、季节和数量上的限制,我们推荐配子体作为蕨类植物染色体数目研究的实验材料.

摘要： 在我们的地球上,苔藓植物在陆地生物多样性的演化过程中可以算得上是先锋。大概在4亿多年前,苔藓植物从水生环境登陆。如今,苔藓依然与我们相伴,在某些生境还占尽优势,在维持生态系统水分平衡、减少土壤侵蚀、减缓温室效应等方面默默奉献。苔藓在漫长的演化中都碰到过什么样的问题,并以什么样的方式来克服,它们如何发展出独特且多样的生存和繁衍方式,其中的奥秘非常值得我们去探索。立碗藓插画,自上而下的结构分别是由孢蒴和蒴柄构成的孢子体以及由拟叶和假根构成的配子体。(上图)(绘图徐丽莉)苔藓植物喜欢抱团生长,巴掌大的空间就可以生长成千上万个植株。

摘要： 通过设置不同的光照强度和光照周期,在实验室条件下检测了笼目海带(Kjell-maniella crassifolia Miyabe)配子体的发育情况.结果显示:光照强度及光照周期均对笼目海带配子体的发育率有显著的影响(P＜0.05).结果表明:1)在光照强度条件不同、其他培养条件相同的情况下,经过4周的发育,5～80 μmol·m-2s-1条件下大部分配子体进入了生殖生长状态,发育率为60％～80％,其中20～40 μmol·m-2ss-1光照强度条件下生殖生长明显快于其他组.2)在光周期不同、其他培养条件相同的情况下,培养第12～25天时,20L:4D条件下发育率为6.68％～69.87％,发育率与16L:8D实验组差异不显著,但显著大于其余组.培养第32天,光照时间最长的处理组即20L∶4D的发育率(74.54％)最高,且孢子体细胞列数最多.本研究为笼目海带配子体规模化扩增及育苗提供了数据参考.

摘要： 为确定海带(Saccharina j aponica)配子体紫外线辐射的适合剂量范围,利用紫外线对东方海洋种质库保存的2个海带配子体克隆系进行辐射试验.通过三次预试验,辐射条件设置为:辐射距离12 cm,辐射时间分别为10、20、30、40、50、60、90、120 s.结果显示:辐射时间10、20 s配子体细胞未发生明显变化,但受辐射影响,克隆约2个月的时间不生长;辐射时间30 s细胞存活率约为50％ ～55％;随着辐射时间的增加,细胞死亡增多;辐射时间120 s下,两个克隆系只有极个别细胞存活.在辐射距离12 cm时,辐射时间10～120 s作用范围内,雄配子体耐受力明显高于雌配子体.

摘要： 海带属(Laminaria)的生活史包括二倍性孢子体世代和单倍性配子体世代。目前的海带种质保存技术主要以保存配子体为主，方法主要是通过人工擦洗孢子囊去除附着的污物和其他生物，然后在无菌海水中放散得到配子体。而这种方法得到的海带配子体在保存过程中，仍存有许多细菌并大量繁殖，附着在配子体克隆体表，阻碍了配子体的正常生长。本研究用琼脂平板分离法从10株配子体克隆系样品中共分离得到104株细菌。本研究结果表明，种质保存过程中的污染菌主要来自于海带孢子体体表。对出现频率较高的污染菌菌株的抗生素抑制实验结果表明，抑制效果和敏感率最高的抗生素依次是多粘菌素、利福平、阿奇霉素和庆大霉素。

摘要： 在裙带菜(Undaria pinnatifida)配子体培养和种质保存过程中，杂藻污染是十分棘手的问题。硅藻是最常见、最难处理的杂藻污染之一。由于硅藻与配子体的生长条件较为一致，采用限制光照、降低温度等处理方法难以达到去除污染硅藻的效果。因此，需要添加某些对硅藻生长有抑制作用的化合物抑制污染硅藻的生长，二氧化锗(GeO2)是广为采用的、有效的硅藻生长抑制剂。本文实验中选用裙带菜配子体、受硅藻污染的配子体和硅藻为实验材料，在培养基中分别添加0、1、 5、 10、 50、 100 mg/L的GeD2，以叶绿素a和可溶性蛋白含量、配子体质量(鲜重)为生理指标，检测在不同浓度GeO2处理条件下，随时间变化裙带菜配子体的生长和代谢变化情况，以及受硅藻污染的配子体所用培养基中硅藻的数目及生长状态；在硅藻培养基中添加0、1、 5、10、15mg/L的GeO2,测定并绘制硅藻在胁迫条件下的生长曲线，观察GeO2对硅藻的抑制作用以及硅藻细胞结构的变化。以期筛选出对裙带菜配子体生长影响最小而又能达到抑制污染硅藻的最佳GeO2使用浓度。

摘要： 自我所重新引进日本真海带以来,为我国各地的海带养殖提供了一个新的品种.随着海带人工育苗的不断创新,尤其是以海带配子体克隆育苗技术的出现,使育苗技术达到了一个新的水平.但是随着该技术的应用,产生了一些新的问题,比如敌害生物的问题也成了一个影响保种及海带配子体克隆育苗成败的关键因素之一.传统的处理方法(如限制光照、降低温度等)由于底栖硅藻与配子体的生长条件较为一致而得不到较好的效果,采取人工洗刷的方法由于配子体较为脆弱易断得不到较好的应用.我们所采用的方法为化学处理方法,即采用不同浓度的二氧化锗来进行处理.

摘要： 日本真海带是北太平洋西部的特有地方种类,尤以日本北海道沿海地区分布最多.我国自上世纪三十年代引进以来,经过几十年的人工养殖及育种,已在我国形成了不同的地区亚种和不同的品系,形成了一个相当规模的养殖品种,但随着养殖年限的增加,原有的海带出现了遗传性状退化,产品质量下降,产量降低,易病害等问题.自1996年以来,我们每年都在进行日本真海带配子体(克隆)保种及培育技术研究,保证了日本真海带遗传性状的稳定.

摘要： 花粉管的引导是指雌蕊组织帮助花粉管通过柱头并最终到达胚囊的程。花粉管的引导分为孢子体引导和配子体引导两个阶段,孢子体引导涉及一系列信号分子的浓度梯度,配子体的引导则主要和来自助细胞和中央细胞发出的信号有关,同时而精细胞也可能在花粉管引导中有一定作用。本文以十字花科模式植物拟南芥为例,阐述授粉受精过程中花粉管的引导过程的研究现状。

摘要： 通过室内人工培养中华缩叶藓的孢子,在光学显微镜下详细观察了其孢子萌发、原丝体发育及配子体发生的全过程.结果表明:中华缩叶藓的孢子在壁内萌发,随后分裂产生块状原丝体;块状原丝体上可产生两种丝状体,一种是具疣的棒状原丝体,另一种是由长圆柱状细胞组成的轴丝体;配子体原始细胞只产生于块状原丝体上.根据中华缩叶藓的孢子萌发和原丝体发育特征,并参照Nishida对藓类植物孢子萌发类型的划分,确定中华缩叶藓的萌发孢子型应属于缩叶藓型(Ptychomitrium-type)。

摘要： 本文通过介绍谷胱甘肽在保护哺乳动物配子和胚胎体内和体外的发育过程中所具有的重要作用，深入的了解了它在配子和胚胎的作用机理，对我们进一步研究动物生殖生理起到推动作用。未来，我们很可能利用谷胱甘肽开发新的药物，或是开辟新的治疗途径，帮助减少不孕率和提高胚胎成活率。

摘要： 本文通过介绍谷胱甘肽在保护哺乳动物配子和胚胎体内和体外的发育过程中所具有的重要作用，深入的了解了它在配子和胚胎的作用机理，对我们进一步研究动物生殖生理起到推动作用。未来，我们很可能利用谷胱甘肽开发新的药物，或是开辟新的治疗途径，帮助减少不孕率和提高胚胎成活率。

摘要： 本文通过介绍谷胱甘肽在保护哺乳动物配子和胚胎体内和体外的发育过程中所具有的重要作用，深入的了解了它在配子和胚胎的作用机理，对我们进一步研究动物生殖生理起到推动作用。未来，我们很可能利用谷胱甘肽开发新的药物，或是开辟新的治疗途径，帮助减少不孕率和提高胚胎成活率。

摘要： 本发明公开了一种离体快繁短月藓配子体的方法，包括以下步骤：1)将生长于自然环境中的短月藓孢蒴表面消毒后，接种到无任何激素的改良Knop′s培养基上培养10天后，孢子萌发形成原丝体，再培养30天后，经初生原丝体生长获得较多原丝体；2)将步骤1)得到的原丝体转接到诱导配子体产生的培养基上培养30天，获得配子体分枝；3)将步骤2)诱导培养得到的配子体单枝接种到配子体继代增殖的培养基上，培养30天，每个配子体可新生数量众多的新生配子体。本发明可以在短时间内实现人工大量扩繁短月藓配子体，为利用苔藓植物指示和监测大气污染提供大量理想试验材料，为应用苔藓植物进行园林造景提供丰富的种苗。

摘要： 提供了基于诱导多倍体配子体的海带育种方法，其包括，利用有丝分裂阻碍剂处理单倍体海带配子体细胞，以使该细胞内的染色体数量加倍，由此诱导出多倍体配子体细胞；并通过体细胞杂交技术培育该多倍体配子细胞以产生多倍体海带叶状体。该方法能用于产生同源多倍体或异源多倍体。该方法获得的多倍体海带具有加倍的基因，导致增强由数量性状基因座位造成的生理活动，由此改善海带的经济性状。

摘要： 本发明涉及一个海带雌配子体特异性分子标记FSML-1488的染色体定位方法，包括以下步骤：（1）带有目标片段FSML-1488质粒DNA的制备；（2）海带配子体染色体的制备；（3）探针的制备；（4）荧光原位杂交。本发明优点在于：本发明利用各种工具酶，如离析酶、鲍鱼酶、纤维素酶、果胶酶等的优化配合以获得海带孢子体和配子体原生质体的基础上，制备高质量的染色体，突破FISH技术在藻类学研究中的技术“瓶颈”，成功地将一个长为1488bp的海带雌配子体特异性FSML-1488分子标记定位在染色体上。

摘要： 本发明公开了一种匐枝青藓配子体离体快繁的方法，包括以下步骤：将生长于自然环境中的匐枝青藓配子体新生分枝表面消毒，接种到无任何激素的培养基上培养10天，获得无菌配子体；将无菌配子体转接到新生配子体培养基上培养30天，获得新生配子体分枝；将新生配子体分枝切割成0.3-0.5cm长的切段，接种到配子体增殖扩繁培养基上，培养30天，每个配子体切段可新生数量众多的配子体分枝。本发明的优点是：方法简单，匐枝青藓繁殖速度快；便于集约化和工产化生产；有利于保护人类环境；为环境科学研究提供理想的试验材料。

摘要： 本发明是一种从污染霉菌的海带配子体克隆中获取无菌配子体的方法，霉菌污染的海带配子体克隆粉碎、过滤后置于培养皿中，弱光环境下培养，使配子体丝状体附着于培养皿底部；采用微吸管分离法，在显微镜下将细胞状态好且无菌丝附着的单个细胞段，用微吸管吸取分离至灭菌的盖玻片上，然后进行一次镜检以确保盖玻片上所分离的细胞段无菌丝污染；经过二次培养后将克隆粒转移到灭菌培养皿中，进行二次镜检得到无菌配子体。采用本发明的方法，只要得到一个无污染的细胞段，分离即成功，就是一个配子体克隆系的保存成功。

摘要： 本发明涉及一种配子体自交不亲合性的调节性化合物,它包含硫酸盐,尤其是CuSO

摘要： 本发明公开了一种明叶藓原丝体和配子体的快速繁殖方法。明叶藓孢蒴消毒后，制成孢子悬浮液，取孢子悬浮液接种于LQ培养基中培养，孢子萌发产生原丝体，原丝体进行继代和扩大培养，获得数量众多的新生配子体，采用匀浆仪打磨粉碎明叶藓原丝体或/和配子体，将粉碎后的苔藓悬浮液接种到LQ培养基上培养。本发明首次建立了明叶藓的组培体系，能在短时间内获得大量明叶藓原丝体和配子体，为明叶藓的遗传改良提供大量的实验材料和技术支持，也能为应用明叶藓进行园艺组景、园林绿化等提供丰富种源。

摘要： 本发明公开了一种离体快繁短月藓配子体的方法，包括以下步骤：1)将生长于自然环境中的短月藓孢蒴表面消毒后，接种到无任何激素的改良Knop′s培养基上培养10天后，孢子萌发形成原丝体，再培养30天后，经初生原丝体生长获得较多原丝体；2)将步骤1)得到的原丝体转接到诱导配子体产生的培养基上培养30天，获得配子体分枝；3)将步骤2)诱导培养得到的配子体单枝接种到配子体继代增殖的培养基上，培养30天，每个配子体可新生数量众多的新生配子体。本发明可以在短时间内实现人工大量扩繁短月藓配子体，为利用苔藓植物指示和监测大气污染提供大量理想试验材料，为应用苔藓植物进行园林造景提供丰富的种苗。

摘要： 本发明公开了一种离体快繁中华蓑藓配子体的方法，其包括以下顺序步骤：1)将生长于自然环境中的中华蓑藓成熟孢蒴表面消毒后，接种到无任何激素的改良Knop′s培养基上培养获得原丝体，再进行培养30天后获得配子体；2)将配子体单枝接种到用于配子体继代增殖的培养基上，培养获得新生配子体。本发明首次建立了离体快繁中华蓑藓配子体的方法，使用本发明的离体快繁方法，可以在短时间内实现人工大量扩繁中华蓑藓配子体。该项发明科研意义和实际利用价值明显，可以为利用苔藓植物指示和监测大气污染提供大量生长均一的理想试验材料。同时，也可以源源不断地为应用苔藓植物进行园林造景提供丰富的种苗，如建立苔藓园。

摘要： 提供了基于诱导多倍体配子体的海带育种方法，其包括，利用有丝分裂阻碍剂处理单倍体海带配子体细胞，以使该细胞内的染色体数量加倍，由此诱导出多倍体配子体细胞；并通过体细胞杂交技术培育该多倍体配子细胞以产生多倍体海带叶状体。该方法能用于产生同源多倍体或异源多倍体。该方法获得的多倍体海带具有加倍的基因，导致增强由数量性状基因座位造成的生理活动，由此改善海带的经济性状。