肿瘤侵润

摘要： 目的探究长链非编码RNA(LncRNA)小核仁RNA宿主基因4(SNHG4)在胃癌中的表达以及与预后的关系。方法选取2015年1月至2016年10月于河南大学第一附属医院肿瘤科行手术根治术切除的113例胃癌组织及82例癌旁正常胃黏膜组织为研究对象,利用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测LncRNASNHG4表达水平。对所有病人术后进行电话或门诊随访,统计胃癌病人生存时间,绘制Kaplan-Meier生存曲线,组间生存曲线差异用log-rank检验;多因素Cox回归分析影响胃癌病人预后不良的危险因素分析。结果癌症基因组图谱(TCGA)数据库显示,SNHG4基因在415例胃癌组织中的表达水平为(1.95±0.62),明显高于其在34例正常胃黏膜组织中的表达水平(0.43±0.12)(t=14.26,P<0.001);LncRNASNHG4在113例胃癌组织中的表达水平(1.67±0.64)明显高于其在82例癌旁正常胃黏膜组织中的表达水平(0.98±0.12)(t=9.63,P<0.001);LncRNASNHG4水平高低与胃癌病人临床分期、肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结是否转移有关(P<0.05);单因素分析显示,临床分期、肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移与终点事件发生有关(P<0.05);生存分析结果显示,LncRNASNHG4高表达组胃癌病人5年累积生存率为28.85%,中位生存时间16.0个月;LncRNASNHG4低表达组胃癌病人5年累积生存率为42.62%,中位生存时间27.0个月,log-rank检验差异有统计学意义(χ2=11.05,P<0.001);多因素Cox回归分析结果显示,临床分期Ⅲ~Ⅳ期、分化程度低、浸润深度T3~T4、淋巴结转移、LncRNASNHG4高表达是影响胃癌病人预后不良的独立预测因素(P<0.05)。结论LncRNASNHG4在胃癌组织中高表达,是影响胃癌病人预后不良的独立预测因素。

摘要： 目的研究6-姜酮酚(6-Paradol)对人肝内胆管癌细胞增殖、迁移、侵袭的作用及机制。方法人肝内胆管癌细胞系HCCC 9810和HUCCT1以不同浓度的6-Paradol及等体积的DMSO(对照组)处理后,采用CCK-8、平板克隆、划痕愈合及Transwell实验检测其增殖、迁移及侵袭能力。应用生物信息学软件Swiss Target Prediction预测6-Paradol作用的蛋白靶点,采用Western blot检测胆管癌细胞中STAT3、p-STAT3、SRC、p-mTOR、p21、Bcl-2以及p53的蛋白表达水平;采用药物亲和反应实验(DARTS)探究6-Paradol与STAT3的相互作用;胆管癌HCCC 9810和HUCCT1细胞分别转染STAT3过表达质粒或sh-p21质粒后,qRT-PCR检测各组细胞中STAT3和p21的mRNA水平,Western blot检测STAT3和p21的蛋白表达量;CCK-8、划痕愈合及Transwell实验检测各组细胞增殖及迁移侵袭能力。计量资料两组间比较采用t检验;多组间比较采用方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果与对照组相比,6-Paradol处理组中各组细胞的增殖、迁移、侵袭能力明显减弱(P值均0.05)。6-Paradol处理组中STAT3被蛋白酶水解的比例分别减少了48.66%、45.33%(t值分别为16.64、8.76,P值均<0.05);分别转染STAT3过表达质粒及沉默p21质粒后,胆管癌细胞中STAT3 mRNA水平均显著增加(t_(HCCC 9810)=2.82,t_(HUCCT1)=5.60,P值均<0.05),p21 mRNA水平均显著降低(t_(HCCC 9810)=6.84,t_(HUCCT1)=3.91,P值均<0.05)。CCK-8结果提示6-Paradol作用48 h及72 h后HCCC 9810细胞和HUCCT1细胞中STAT3过表达组的增殖率较单独给药组显著提高,p21沉默组增殖率较单独给药组也明显提高(P值均<0.05)。划痕愈合实验结果提示在过表达STAT3或沉默p21的HCCC 9810及HUCCT1细胞中,与单独给药组相比划痕愈合率明显提升(P值均<0.05)。Transwell实验结果表明,在过表达STAT3或者沉默p21表达的HCCC 9810及HUCCT1细胞中,与单独给药组相比迁移率均明显提升(P值均<0.05);在过表达STAT3或沉默p21表达的HCCC 9810及HUCCT1细胞中,与单独给药组相比侵袭率均显著提升(P值均<0.05)。结论6-Paradol通过靶向作用于STAT3-p21通路抑制胆管癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

摘要： 目的探讨LncRNA TUG1通过miR-133a对口腔鳞癌Cal27细胞的影响及其潜在的作用机制。方法选择2020年10月—2021年5月确诊的口腔鳞癌组织50例及癌旁正常组织40例。通过实时荧光定量PCR检测LncRNA TUG1和miR-133a在口腔鳞癌组织、癌旁正常组织、口腔鳞癌Cal27细胞和口腔上皮HIOEC细胞中的差异表达;检测下调TUG1对Cal27细胞活力、侵袭及上皮间质转化(EMT)的影响。生物信息学软件miRanda预测LncRNA TUG1和miR-133a间的靶向关系,双荧光素酶报告基因实验检测TUG1和miR-133a的相关性。下调miR-133a表达,检测Cal27细胞增殖、侵袭和EMT能力。pcDNA-TUG1和miR-133a mimics共转染Cal27细胞,检测LncRNA TUG1通过miR-133a对Cal27细胞增殖、侵袭和EMT的影响。过表达或下调TUG1表达后,蛋白免疫印迹试验检测β-catenin、Cyclin D1和c-myc蛋白表达量,XAV939作用Cal27细胞,检测过表达TUG1对Cal27细胞增殖、侵袭和EMT的影响。结果与癌旁正常组织比较,口腔鳞癌组织中LncRNA TUG1的表达上调,miR-133a表达下调(P<0.01)。与HIOEC细胞比较,Cal27细胞中LncRNA TUG1的表达上调,miR-133a表达下调(P<0.01)。下调LncRNA TUG1表达明显抑制了Cal27细胞增殖、侵袭与EMT;LncRNA TUG1靶向且负调控miR-133a;下调miR-133a促进Cal27细胞增殖、侵袭与EMT;上调LncRNA TUG1通过miR-133a促进Cal27细胞增殖、侵袭与EMT。上调LncRNA TUG1激活了Cal27细胞内Wnt/β-catenin信号通路,并通过此通路促进Cal27细胞增殖、侵袭与EMT。结论上调LncRNA TUG1通过miR-133a和激活Wnt/β-catenin信号通路促进口腔鳞癌的发展。

摘要： 目的探究miR-1250-3p对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞侵袭和迁移能力的影响及其作用机制。方法采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测miR-1250-3p在正常肝细胞L02和HCC细胞系QGY-7703、PLC/PRF/5、HccL-M3中的表达情况;将QGY-7703细胞分为A、B、C、D、E、F 6组,各组分别转染mimics NC、mimics miR-1250-3p、inhibitor NC、inhibitor miR-1250-3p、Myc-EVA1A+mimics miR-1250-3p、Myc-EVA1A,采用Western blot方法检测自噬相关蛋白EVA1A的表达,采用细胞划痕法检测miR-1250-3p表达对QGY-7703细胞迁移能力的影响,采用Transwell实验检测miR-1250-3p对QGY-7703细胞侵袭能力的影响。将293T细胞按实验需求分为G、H、I、J组,各组分别转染EVA1A-3′UTR-wt+mimics NC、EVA1A-3′UTR-wt+miR-1250-3p mimics、EVA1A-3′UTR-mu+mimics NC、EVA1A-3′UTR-mu+miR-1250-3p mimics,检测每组荧光素酶的活性以分析miR-1250-3p对EVA1A的靶向调控作用。结果RT-qPCR结果显示,HCC各细胞系中miR-1250-3p的表达均高于正常肝细胞L02,组间比较差异有差异性(F=155.50,P<0.05)。Western blot检测结果显示,组间EVA1A蛋白表达水平比较差异具有显著性(F=44.91,P<0.05);B组细胞EVA1A蛋白表达水平明显低于A组(P<0.05),D组细胞EVA1A蛋白表达水平明显高于C组(P<0.05)。双荧光素酶报告基因结果显示,组间细胞荧光素酶活性比较差异有显著性(F=168.28,P<0.05),H组细胞荧光素酶活性显著低于G组(P<0.05)。划痕实验结果显示,时间、组别及其交互作用均对细胞迁移率有明显的影响(F_(组别)=335.14,F_(时间)=287.53,F_(时间*组别)=135.26,P<0.05),B组在第24、48小时的迁移率均高于A组(P<0.05),E组高于F组(P<0.05),D组低于C组(P<0.05),E组低于B组(P<0.05)。Transwell实验结果显示,A、B、E组细胞侵袭能力比较差异具有显著性(F=44.48,P<0.05),其中B组细胞侵袭能力明显高于其他两组(P<0.05)。结论miR-1250-3p可能通过抑制EVA1A的表达促进HCC细胞系QGY-7703的侵袭和迁移。

摘要： 目的:探讨甲状腺素转运蛋白(transthyretin,TTR)对卵巢癌细胞株SKOV-3及OVCAR-3迁移和侵袭的影响及其机制。方法:用Lipofectamine 2000搭载转染TTR小干扰RNA(siRNA)或non-target siRNA(对照组)入细胞,采用划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell法检测细胞侵袭能力,蛋白质印迹法(Western blotting)检测TTR下游蛋白表达。结果:划痕实验显示,TTR siRNA组和对照组SKOV-3细胞伤口愈合率分为(57.00±5.03)%和(87.33±1.20)%(P=0.004)。TTR siRNA组和对照组OVCAR-3细胞伤口愈合率分为(64.67±5.55)%和(84.33±1.45)%(P=0.027)。Transwell实验显示,TTR siRNA组SKOV-3及OVCAR-3细胞小室穿透的细胞数分别是对照组的(61.00±4.16)%(P=0.013)及(46.33±8.37)%(P=0.003)。Western blotting实验结果显示,在卵巢癌SKOV-3及OVCAR-3细胞,TTR siRNA组Wnt1、β连环素(β-catenin)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9的表达都低于对照组(均P<0.05)。结论:TTR可能通过抑制Wnt1/β-catenin通路及其下游关键分子MMP-2和MMP-9的表达,抑制卵巢癌细胞侵袭和迁移。

摘要： 目的探讨肿瘤蛋白53靶基因1(TP53TG1)对胶质瘤细胞增殖、凋亡及迁移侵袭的影响和机制。方法本研究起止时间为2019年1—6月,人正常神经胶质细胞(HA)和神经胶质瘤细胞U251购于上海斯信生物科技有限公司。实时定量PCR(qRT-PCR)检测HA和U251细胞中TP53TG1的表达水平。构建过表达TP53TG1的U251细胞株,噻唑蓝(MTT)法用于评估细胞增殖能力,流式细胞术分析细胞凋亡,Transwell法测定迁移和侵袭数,Western blotting检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、细胞周期蛋白激酶抑制剂(P21)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl相关x蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、E钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平。双荧光素酶报告基因实验和Western blotting验证TP53TG1和微小RNA-33a(miR-33a)的靶向关系。结果与人正常神经胶质细胞HA比较,神经胶质瘤细胞U251中TP53TG1的表达水平[(1.03±0.10)比(0.28±0.03)]显著降低。过表达TP53TG1能够显著抑制U251细胞活力,下调Cyclin D1、Bcl-2和MMP-2蛋白水平,减少细胞迁移数[(138±14.01)个比(72±7.26)个]和侵袭数[(126±12.54)个比(65±6.63)个],上调P21、Bax和E-cadherin蛋白表达,促进细胞凋亡[(8.16±0.86)%比(22.57±2.65)%]。TP53TG1能够靶向负性调控miR-33a的表达。过表达miR-33a能够逆转miR-33a对U251细胞增殖、凋亡[(22.68±2.69)%比(11.36±1.20)%]、迁移[(70±7.05)个比(108±11.37)个]和侵袭[(70±7.05)个比(108±11.37)个]的影响。结论TP53TG1通过靶向miR-33a抑制胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡。

摘要： 胰腺癌是一种恶性程度极高的消化道肿瘤,由于其高度侵袭转移特性,使得目前胰腺癌患者的总体生存率仍非常低。长链非编码RNA(lncRNA)可通过表观遗传调控、转录调控或转录后调控等多种方式参与胰腺癌的发生发展及侵袭转移过程。lncRNA在胰腺癌中表达失调,并通过特定调控方式使其发生上皮间充质转化,进而引起肿瘤细胞生物学行为发生改变。本文就研究lncRNA在胰腺癌中促使其发生上皮间充质转化,作为ceRNA调控肿瘤的生物学功能,并通过调控肿瘤细胞铁死亡、自噬及外泌体等多途径影响胰腺癌发生侵袭转移进行简要综述,为胰腺癌的早期诊断及治疗提供理论依据和新的靶点。

摘要： 目的探讨纳布啡对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法本研究时间为2019年1—7月。肝癌细胞株Huh7购自美国ATCC,将Huh7细胞分为对照组、不同浓度纳布啡(50μmol、100μmol、200μmol)组、微小RNA-4301(miR-4301)组、miR-4301模拟物阴性对照(miR-NC)组、纳布啡+miR-4301抑制表达载体(anti-miR-4301)组、纳布啡+miR-4301抑制表达载体阴性对照(anti-miR-NC)组。四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测Huh7细胞的增殖抑制率;Transwell检测Huh7细胞的迁移和侵袭数;蛋白质印迹检测细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(p21)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和溴结构域蛋白4(BRD4)蛋白表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测miR-4301和BRD4 mRNA表达水平;荧光素酶报告实验检测miR-4301和BRD4的靶向关系。结果与对照组相比,不同浓度纳布啡组Huh7细胞抑制率升高[(11.25±1.12)%、(22.63±2.25)%、(37.65±3.74)%比(0.00±0.01)%],迁移数减少[(79.32±7.38)个、(61.36±5.48)个、(45.69±5.37)个比(98.63±9.54)个],侵袭数减少[(67.53±6.65)个、(53.41±5.22)个、(37.64±3.87)个比(81.36±8.13)个],p21表达水平升高,Cyclin D1、MMP-2、MMP-9表达水平降低,miR-4301表达水平升高,BRD4mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05),且呈浓度依赖性。与miR-NC组相比,miR-4301组Huh7细胞抑制率升高[(31.25±3.15)%比(6.32±0.63)%],迁移数减少[(52.33±5.26)个比(96.32±9.54)个],侵袭数减少[(41.69±4.32)个比(83.15±8.33)个],p21表达水平升高,Cyclin D1、MMP-2、MMP-9表达水平降低(均P<0.05)。miR-4301靶向调控BRD4的表达,抑制miR-4301表达逆转了纳布啡对Huh7细胞的作用。结论纳布啡可抑制肝癌Huh7细胞增殖、迁移和侵袭,其机制可能与miR-4301和BRD4有关。

摘要： 卵巢癌是妇科较为常见的恶性肿瘤之一,发病率较高,仅次于宫颈癌和子宫内膜癌。大多数卵巢癌患者确诊时已是中晚期。研究显示,长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)在调控卵巢癌的进展尤其是增殖侵袭中发挥着重要作用。多种lncRNA在卵巢癌组织和细胞中高表达或低表达,通过调控下游信号通路、分子海绵作用激活下游靶向分子、调控蛋白的表达等方式促进或抑制卵巢癌的增殖侵袭。敲除或沉默高表达的lncRNA能抑制卵巢癌的增殖侵袭,这些都可能是卵巢癌诊断和治疗的靶点。有些lncRNA还与卵巢癌的分期、淋巴结转移、生存期等预后因素相关,其也可能是预测预后和结局的标志物。综述lncRNA在卵巢癌增殖侵袭中的作用机制,以期为卵巢癌的诊断和靶向治疗提供依据。

摘要： 目的通过实验探讨慢病毒转染调控FoxM1表达对人肝内胆管细胞癌(ICC)增殖、侵袭能力及基质金属蛋白酶(MMP)-9和MMP-2表达的影响。方法Western blot检测ICC细胞株HCCC-9810、RBE及SSP-25的FoxM1蛋白表达水平,选取表达量较低者作为上调FoxM1细胞株,较高者作为下调细胞株;将分别携带FoxM1质粒和shRNA的慢病毒载体转染目标上调和下调ICC细胞株,建立稳定上下调FoxM1的细胞株(Western blot验证);MTT法检测转染后细胞增殖力,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力;qPCR检测各组稳定转染细胞株MMP-9及MMP-2 mRNA表达水平。结果SSP-25的FoxM1蛋白表达最高,HCCC-9810最低,由此选取SSP-25作为下调FoxM1表达目标细胞株,HCCC-9810作为上调FoxM1表达目标细胞株。慢病毒转染成功构建稳定上调(HCCC-9810-FoxM1组)及下调FoxM1细胞株(SSP-25-shFoxM1组);HCCC-9810-FoxM1组增殖及侵袭能力明显高于HCCC-9810-Control组(均P<0.05),而SSP-25-shFoxM1组增殖及侵袭能力较SSP-25-Control组明显下降(均P<0.05);HCCC-9810-FoxM1组中MMP-9及MMP-2 mRNA表达较HCCC-9810-Control组明显升高,而SSP-25-shFoxM1组中MMP-9及MMP-2 mRNA表达较SSP-25-Control组明显降低(均P<0.01)。结论FoxM1促进ICC细胞增殖及侵袭,可能调控MMP-9及MMP-2表达,也有可能作为ICC潜在的生物标志物。

摘要： 本发明涉及对HPV特异性E6和E7癌蛋白具有特异性的新的CD4

摘要： 本发明涉及对HPV特异性E6和E7癌蛋白具有特异性的新的CD4

摘要： 本发明的一种电解液侵润装备及均匀侵润方法，包括电池旋转机，所述电池旋转机包括中心具有通孔的固定板，该固定板上部设置轴承座；所述固定板下部安装有电机一，该电机一具有的转轴通过联轴器连接有轴承；所述转轴通过通孔；所述轴承上套接有自转治具，所述自转治具内安装电池；还包括用于旋转电池旋转机的旋转总成；所述旋转总成包括环形电极架，该环形电极架与地面固定；还包括电池旋转机夹具；本发明因为采用了一组双运动模式同时对电池电解液进行侵润可以既保持在一个圆周方向旋转力作用下的侵润也可达到在另一个旋转力下对电池电解液上下方向侵润，解决了传统电池电解液侵润慢和不均匀的问题，具有快速和均匀侵润电池电解液的技术效果。

摘要： 本发明涉及对HPV特异性E6和E7癌蛋白具有特异性的新的CD4+和CD8+T细胞表位，涉及包含这些新的T细胞表位的肽，以及涉及包含这些肽、用于预防和/或治疗HPV相关疾病的(疫苗)组合物。优选的表位由侵润宫颈瘤病变的T细胞或由来自引流淋巴结的T细胞识别，并由HLA‑DQ或HLA‑DP分子或HLA‑B呈递。

摘要： 本发明涉及对HPV特异性E6和E7癌蛋白具有特异性的新的CD4

摘要： 本发明涉及对HPV特异性E6和E7癌蛋白具有特异性的新的CD4

摘要： 本发明涉及靶向极性分子Par3抑制前列腺癌侵润及转移。本发明通过构建稳定敲降Par3的前列腺癌细胞亚克隆细胞系，并建立相应的裸小鼠前列腺原位植瘤动物模型，在体外及体内验证了稳定敲降Par3抑制前列腺癌侵润及转移的作用。本发明发现稳定敲降Par3后，通过破坏Par3-aPKC-KIBRA三元复合物的形成，增强了Hippo通路中重要成员MST1/2及Lats1的磷酸化，从而激活了Hippo通路并磷酸化其下游的原癌基因YAP，导致YAP蛋白的细胞质滞留并减少非磷酸化YAP蛋白的入核，最终削弱了YAP在细胞核内与TEAD转录因子的互作并抑制一系列促侵润/转移基因的转录。本发明在体内体外、表型及分子机制上均验证了稳定敲降极性分子Par3具有抑制前列腺癌细胞侵润及转移的作用。

摘要： 本实用新型涉及中药材的浸润和清洗技术领域，具体是一种中药材的侵润清洗一体化设备，用于解决现有中药材清洗设备只能对中药材进行清洗不能对中药材进行浸润的问题，本实用新型包括底座、支撑座和支撑板，所述支撑板的底面安装有竖直伸缩机构，所述竖直伸缩机构上连接有连接板，所述连接板的底面安装有旋转机构，所述旋转机构上可拆卸的连接有带清洗门的清洗筒，所述连接板上可拆卸的连接有浸润箱，所述浸润箱上开有多个浸润孔，所述底座上在浸润箱的下方安装有盛水箱。本实用新型通过在旋转机构上安装清洗筒可以对中药材进行清洗，通过在连接板上安装浸润箱可以对中药材进行浸润，如此同一个设备就可以对中药材进行清洗和浸润。

摘要： 本实用新型公开了一种耐侵润性池壁砖砂型，包括砂型本体和冒口，砂型本体由外至里包括隔热层和碳化硅浇铸层，砂型本体内侧底部设置有耐浇铸料液冲击作用的碳化硅耐火层，同材质的碳化硅耐火层的气体孔隙率为碳化硅浇铸层气体孔隙率的1.1至2.5倍。其通过结构优化，具备良好的耐侵润性，减少析晶导致的砂型爆裂现象，延长砂型的使用寿命，提高耐火砖的生产质量。

摘要： 本实用新型公开了一种耐侵润性流钢砖，砖本体由内置外依次设置有镁铝尖晶石耐火层、镁铝尖晶石浇注层、镁碳质耐火浇注层、不定形耐火材料层和镁碳质隔热层，镁铝尖晶石耐火层的内侧面设有氧化硅烧结膜。其具有多层耐火材料层，有效的提高了耐侵润性和耐久使用性，大大减少了热应力造成的龟裂现象，延缓使用寿命。