STAT3转录因子

摘要： 慢性乙型肝炎持续感染的免疫机制与T淋巴细胞密切相关,T淋巴细胞的发育需要多种细胞因子的协调作用,而信号转导及转录激活因子家族蛋白主要参与细胞因子的信号转导,尤其是STAT5a/b和STAT3在调节性T淋巴细胞(Treg)和辅助性T淋巴细胞17(Th17)的分化、发育过程中有着重要作用。本文主要就在慢性乙型肝炎中,对信号转导及转录激活因子3、5与Treg/Th17平衡的关系进行分析,研究HBV感染的慢性化及其引起的肝脏炎症调控机制。

摘要： 目的研究6-姜酮酚(6-Paradol)对人肝内胆管癌细胞增殖、迁移、侵袭的作用及机制。方法人肝内胆管癌细胞系HCCC 9810和HUCCT1以不同浓度的6-Paradol及等体积的DMSO(对照组)处理后,采用CCK-8、平板克隆、划痕愈合及Transwell实验检测其增殖、迁移及侵袭能力。应用生物信息学软件Swiss Target Prediction预测6-Paradol作用的蛋白靶点,采用Western blot检测胆管癌细胞中STAT3、p-STAT3、SRC、p-mTOR、p21、Bcl-2以及p53的蛋白表达水平;采用药物亲和反应实验(DARTS)探究6-Paradol与STAT3的相互作用;胆管癌HCCC 9810和HUCCT1细胞分别转染STAT3过表达质粒或sh-p21质粒后,qRT-PCR检测各组细胞中STAT3和p21的mRNA水平,Western blot检测STAT3和p21的蛋白表达量;CCK-8、划痕愈合及Transwell实验检测各组细胞增殖及迁移侵袭能力。计量资料两组间比较采用t检验;多组间比较采用方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果与对照组相比,6-Paradol处理组中各组细胞的增殖、迁移、侵袭能力明显减弱(P值均0.05)。6-Paradol处理组中STAT3被蛋白酶水解的比例分别减少了48.66%、45.33%(t值分别为16.64、8.76,P值均<0.05);分别转染STAT3过表达质粒及沉默p21质粒后,胆管癌细胞中STAT3 mRNA水平均显著增加(t_(HCCC 9810)=2.82,t_(HUCCT1)=5.60,P值均<0.05),p21 mRNA水平均显著降低(t_(HCCC 9810)=6.84,t_(HUCCT1)=3.91,P值均<0.05)。CCK-8结果提示6-Paradol作用48 h及72 h后HCCC 9810细胞和HUCCT1细胞中STAT3过表达组的增殖率较单独给药组显著提高,p21沉默组增殖率较单独给药组也明显提高(P值均<0.05)。划痕愈合实验结果提示在过表达STAT3或沉默p21的HCCC 9810及HUCCT1细胞中,与单独给药组相比划痕愈合率明显提升(P值均<0.05)。Transwell实验结果表明,在过表达STAT3或者沉默p21表达的HCCC 9810及HUCCT1细胞中,与单独给药组相比迁移率均明显提升(P值均<0.05);在过表达STAT3或沉默p21表达的HCCC 9810及HUCCT1细胞中,与单独给药组相比侵袭率均显著提升(P值均<0.05)。结论6-Paradol通过靶向作用于STAT3-p21通路抑制胆管癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

摘要： 目的观察木犀草素减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的作用并探讨其潜在机制。方法SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、大脑中动脉栓塞(MCAO)组、木犀草素低剂量组(50 mg/kg)、木犀草素高剂量组(100 mg/kg)及尼莫地平组(15 mg/kg),灌胃给药,共7 d。采用线栓法建立MCAO大鼠模型,比较神经功能损伤评分、脑组织含水量、脑梗死体积,测定各组肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)含量及磷酸化Janus蛋白酪氨酸激酶2(p-JAK2)、磷酸化信号转导及转录激活蛋白3(p-STAT3)蛋白表达等变化情况。结果与假手术组比较,MCAO组大鼠神经功能损伤评分、脑组织含水量、脑梗死体积、脑组织TNF-α、IL-6、IL-1β、Bax、Caspase-3含量及JAK2、STAT3蛋白磷酸化水平均明显增加(P<0.05),而脑组织Bcl-2含量明显降低(P<0.05);与MCAO组比较,木犀草素低、高剂量组及尼莫地平组大鼠神经功能损伤评分、脑组织含水量、脑梗死体积、脑组织TNF-α、IL-6、IL-1β、Bax、Caspase-3含量及JAK2、STAT3蛋白磷酸化水平均明显降低(P<0.05),而脑组织Bcl-2含量明显增加(P<0.05)。结论木犀草素具有减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的作用,该作用与抑制JAK2/STAT3信号通路活化,进而减弱炎症反应及减少细胞凋亡有关。

摘要： 目的探讨信号转导和转录激活因子3(STAT3)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的大鼠心肌细胞肥大及缺氧诱导丝裂原因子(HIMF)表达的影响。方法体外分离SD大鼠心肌细胞并进行培养,将大鼠心肌细胞分为对照组、AngⅡ组、AngⅡ+干扰RNA(siRNA)-阴性对照(NC)组、AngⅡ+siRNA-STAT3组、AngⅡ+siRNA-HIMF组(n=6),检测各组心肌细胞表面积、心房钠尿肽(ANP)、β肌球蛋白重链(β-MHC)、HIMF、STAT3蛋白表达水平。结果与对照组比较,AngⅡ组ANP、β-MHC、HIMF、磷酸化STAT3(p-STAT3)/STAT3蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。AngⅡ+siRNA-STAT3组ANP、β-MHC、HIMF及p-STAT3/STAT3蛋白表达水平明显低于AngⅡ组和AngⅡ+siRNA-NC组(P<0.05)。AngⅡ组心肌细胞表面积明显高于对照组[(1024.33±85.46)μm;vs(451.76±50.35)μm^(2),P<0.05],AngⅡ+siRNA-STAT3组心肌细胞表面积明显低于AngⅡ+siRNA-NC组[(615.47±61.63)μm;vs(984.54±90.23)μm^(2),P<0.05]。AngⅡ+siRNA-HIMF组心肌细胞ANP、β-MHC、HIMF蛋白表达水平和心肌细胞表面积明显低于AngⅡ+siRNA-NC组(P<0.01)。结论抑制STAT3表达可通过调控HIMF表达进而抑制AngⅡ诱导的大鼠心肌细胞肥大。

摘要： 目的探究STAT3抑制剂(Stattic和S3I-201)以及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)前体烟酰胺联合用药对肝癌HepG_(2)细胞增殖的影响及机制。方法以肝癌细胞株HepG_(2)为模型,使用STAT3抑制剂、烟酰胺以及两者联合处理细胞,通过细胞计数、Western blot和qPCR等检测药物对细胞增殖、STAT3表达、STAT3下游靶基因[锌指转录因子1(SNAIL1)、血管内皮生长因子A(VEGFA)、锌指结合蛋白1(ZEB1)]表达和与细胞增殖[微小染色体维持蛋白7(MCM7)、增殖标志物Ki-67(MKI67)、Myc原癌基因蛋白(MYC)]、细胞凋亡[B淋巴细胞瘤2相关X蛋白(BAX)、B淋巴细胞瘤-2(BCL-2)、髓样细胞白血病蛋白1(MCL-1)]、上皮-间充质转化[紧密连接蛋白-1(TJP1)、母亲DPP同源物3(SMAD3)]以及糖代谢[己糖激酶2(HK2)、磷酸果糖激酶(PFKL)、M型丙酮酸激酶(PKM)、葡萄糖转运蛋白1(GLUT_(1))、乳酸脱氢酶A(LDHA)]相关基因的mRNA表达水平的影响。结果STAT3抑制剂和烟酰胺处理均能降低STAT3磷酸化水平,抑制细胞增殖,降低细胞增殖、抗凋亡、上皮-间充质转化以及糖代谢相关基因表达水平,上调促凋亡相关基因表达水平。并且,联合用药对STAT3磷酸化水平、细胞增殖以及上述生物过程相关基因的表达水平影响更显著。结论STAT3抑制剂和烟酰胺可抑制肝癌细胞增殖,并且联合用药效果更显著。这种抑制作用可能与促进凋亡和抑制上皮-间充质转化及糖酵解有关。

摘要： 目的探讨JSH-23联合Stattic靶向抑制核因子-κB(NF-κB)和信号转导与转录激活因子3(STAT3)双信号转导通路对间质型胶质母细胞瘤细胞增殖和迁移能力以及NF-κB通路和STAT3通路相关蛋白表达的影响。方法自肿瘤基因组学图谱计划官网下载529例胶质瘤患者转录组测序结果,生物信息学分析RelA/P65和STAT3与间质型胶质母细胞瘤标志物的相关性,以及NF-κB通路和STAT3通路相关蛋白在间质型、经典型和前神经型胶质母细胞瘤中的表达。体外培养的人胶质瘤细胞系U87MG和U251MG分别经JSH-23、Stattic、JSH-23和Stattic联合处理,细胞毒性实验计算两种药物的半数抑制浓度(IC_(50)),药物协同实验评估两种药物的协同作用;CCK-8法和平板克隆实验检测肿瘤细胞增殖能力,细胞划痕实验和Transwell实验检测肿瘤细胞迁移能力,Western blotting法检测NF-κB通路和STAT3通路相关蛋白P65、磷酸化P65(p-P65)、STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)以及CD44的相对表达量。结果(1)生物信息学分析显示,RelA/P65 mRNA和STAT3 mRNA与间质型胶质母细胞瘤标志物CD44、CXCR4、CHI3L1、IL-4R、TRADD呈正相关(r=0.206~0.605,均P<0.01),且间质型胶质母细胞瘤NF-κB通路和STAT3通路相关蛋白表达水平最高、经典型其次、前神经型最低。(2)细胞毒性实验显示,JSH-23对U87MG和U251MG细胞的IC_(50)为59.39和56.21μmol/L,Stattic为0.96和1.08μmol/L。药物协同实验显示,JSH-23为40~80μmol/L以及Stattic为0.50~1μmol/L时对U87MG细胞的协同效应最高,JSH-23为40μmol/L以及Stattic为1μmol/L时对U251MG细胞的协同效应最高,并且最终确定JSH-23的终浓度为60μmol/L,Stattic为1μmol/L。(3)经JSH-23、Stattic、JSH-23和Stattic联合处理后,U87MG和U251MG细胞增殖活性降低(均P=0.000),集落形成率减少(均P=0.000),细胞迁移率降低(均P<0.05),结晶紫染色阳性细胞数目减少(均P=0.000),以及P65(均P=0.000)、p-P65(均P=0.000)、STAT3(均P=0.000)、p-STAT3(均P=0.000)和CD44(均P=0.000)相对表达量降低,尤以JSH-23和Stattic联合处理后降低最显著(均P<0.01)。结论JSH-23联合Stattic靶向抑制NF-κB和STAT3双通路可以有效抑制间质型胶质母细胞瘤细胞的增殖和迁移能力,并下调NF-κB通路和STAT3通路相关蛋白的表达。

摘要： 帕金森病(PD)是一种慢性进行性神经退行性疾病。信号传导与转录激活因子3(STAT3)在氧化应激、神经炎性反应、α-突触核蛋白异常聚集、线粒体功能障碍和铁死亡中参与PD的发生和发展,有望成为新的治疗靶点,为PD的治疗提供新的研究思路。

摘要： 目的 探讨膜联蛋白A2(Anxa2)在乳腺癌细胞侵袭转移中的作用机制及对转导因子和转录活化因子(STAT3)信号通路的影响.方法 乳腺癌细胞株MCF-7作为研究对象,分为对照组和转染组.对照组细胞中加入细胞培养基进行培养;转染组细胞分为两组,均常规构建Anxa2野生型表达载体,一组为未转染组;另一组将其转染到Anxa2降表达的细胞进行拯救,并完成细胞转染,设为转染组;采用细胞划痕试验和Transwell小室完成两组细胞划痕试验、侵袭和迁移试验;采用实时荧光PCR技术测定两组细胞STAT3信号通路水平.采用SPSS18.0软件处理,STAT3信号通路水平、细胞划痕试验采用((x)±s)表示,三组数据比较采用F检验,P0.05);转染组细胞培养后迁移、侵袭能力均低于对照组与未转染组(P<0.05);转染组STAT3 mRNA水平明显低于对照组与未转染组(P<0.05).结论 Anxa2降表达在乳腺癌细胞中能抑制细胞的侵袭与转移,可能与抑制STAT3信号通路有关,可能成为乳腺癌治疗提供新的靶点.

摘要： 目的 探讨钙激活的氯离子通道A4(CLCA4)对食管癌细胞增殖、迁移、侵袭及JAK激酶2/信号转导及转录激活蛋白3(JAK2/STAT3)信号通路的影响.方法 实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)与蛋白质印迹法(Western blotting)分别检测正常人食管鳞状上皮细胞与人食管癌细胞中CLCA4的表达;将合成的CLCA4过表达载体及其对照分别转染至食管癌细胞Eca109,分别记作CLCA4过表达(pcDNA-CLCA4)组、CLCA4阴性对照(pcDNA-NC)组,并将未转染的细胞作为阴性对照(NC)组.四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测细胞增殖能力;细胞迁移实验(Transwell)检测细胞迁移及侵袭能力.JAK2/STAT3信号通路激活剂p-JAK2多肽对细胞增殖、迁移及侵袭的影响.Western blotting检测细胞周期蛋白D1(Cy-clinD1)、依赖性激酶抑制因子(P21)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、JAK2、STAT3、磷酸化JAK激酶2(p-JAK2)、磷酸化信号转导及转录激活蛋白3(p-STAT3)的表达水平.结果 与Het-1A相比,人食管癌细胞KYSE170、Eca109、TE10中CLCA4 mRNA及蛋白表达水平降低(P<0.05);与pcDNA-NC组比较,pcDNA-CLCA4组细胞存活率显著降低[(52.16±11.41)％比(99.57±13.49)％,P<0.05],迁移细胞数[(56.47±10.03)％比(112.49±13.52)％]与侵袭细胞数[(63.43±9.87)％比(123.47±16.58)％]减少(P<0.05),CyclinD1、MMP-2、MMP-9、p-JAK2、p-STAT3的表达水平降低(P<0.05),P21的表达水平升高(P<0.05);激活JAK2/STAT3信号通路可逆转CLCA4过表达对Eca109细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用.结论 CL-CA4过表达可抑制食管癌细胞增殖、迁移及侵袭,其作用机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路活化有关.

摘要： 目的 研究皮肤黑素瘤细胞与血管内皮细胞间VEGF-IL-6-STAT3信号交互作用机制.方法 将血管内皮细胞EC-304分成3组:对照组,常规培养;血管内皮生长因子(VEGF)组,在含VEGF165(50 μg/L)的内皮细胞培养基中培养;A375共培养组,与黑素瘤细胞A375共培养.24 h、48 h、72h后收集培养液,酶联免疫吸附实验检测白细胞介素6(IL-6)的分泌量.将A375细胞分为4组:对照组,常规培养;A375+EC-304组,与EC-304共培养;A375+EC-304+IL-6组:与EC-304细胞在含STAT3通路激动剂IL-6(50 μg/L)的DMEM 中共培养;A375+EC-304+JSI-124组:与EC-304在含STAT3 通路抑制剂JSI-124(1 μmol/L)的DMEM 中共培养.分别在24 h、48 h、72 h后收集细胞,用Western印迹、CCK-8、Transwell侵袭实验分别检测STAT3、p-STAT3蛋白表达、细胞增殖活性及侵袭活性.采用双因素方差分析及t检验统计分析数据.结果 与对照组比较,VEGF组、A375共培养组EC-304培养基中IL-6分泌量均升高(FVEGF = 29.63,P＜0.001;FA375 = 11.09,P = 0.020).与对照组比较,A375+EC-304组A375细胞p-STAT3蛋白表达升高(P＜0.001),细胞活性增强(P＜0.001),侵袭细胞数从(86.13±7.24)个增加到(152.66±16.04)个(t = 4.43,P＜0.001);与A375+EC-304组比较,A375+EC-304+IL-6组细胞p-STAT3蛋白表达升高(P＜0.001),细胞活性增强(P＜0.001),侵袭细胞数量增加至(187.34±14.38)个(t= 2.17,P＜0.001);与A375+EC-304组比较,A375+EC-304+JSI-124组细胞的p-STAT3 蛋白表达降低(P＜0.001),细胞活性减弱(P＜0.001),侵袭细胞数减少至(124.92±8.72)个(t =-1.86,P＜0.001).结论 皮肤黑素瘤A375 细胞与血管内皮细胞之间存在VEGF-IL-6-STAT3信号交互作用机制,这种机制可促进A375细胞的增殖和侵袭.

摘要： 本发明公开了大豆MYB32转录因子编码基因GmMYB32的应用。大豆MYB32转录因子编码基因GmMYB32，其核苷酸序列为：SEQ ID NO.1。将构建的植物过量表达载体pMDC83‑GmMYB32在拟南芥的野生型中进行异源表达，发现过表达的植株在低磷条件下长势增强，生物量增加，主根长与地上部鲜重较野生型对照显著增加，表明该基因可以作为目的基因导入植物，通过增强植物长势，逆转植株的缺磷症状，提高转基因植物的耐低磷能力。可见，本发明所述的大豆MYB32转录因子编码基因GmMYB32可在通过基因工程增强植物长势，逆转植株的缺磷症状，进而提高转基因植物的耐低磷能力方面应用。

摘要： 本发明涉及分子生物学领域和基因工程领域，具体涉及玉米维生素C合成相关的玉米ZmbHLH55转录因子及其应用。玉米ZmbHLH55转录因子通过与玉米GDP‑甘露糖‑3’,5’‑异构酶ZmGMEI的启动子结合，启动基因的表达。在玉米中，下调ZmbHLH55转录因子的表达，ZmGMEI基因表达下降，维生素C含量下降，玉米对盐胁迫的敏感性增加；在拟南芥中，过量表达ZmbHLH55，维生素C含量上升，拟南芥对盐胁迫的抗性增加。本发明不仅揭示了植物中一种调控维生素C合成的分子机制，为提高植物(尤其是作物)维生素C的含量和植物的盐胁迫能力提供一种基因资源。

摘要： 本发明公开了一个同时改良棉花纤维长度、强度、伸长率的B3转录因子基因。该转录因子基因GHFLS在四倍体陆地棉TM‑1中的cDNA序列为：SEQ ID NO.1，基因组序列为：SEQ ID NO.2；基因GHFLS包含一个非同义突变的SNP位点，位于编码区序列的1391bp位置处，该SNP位点碱基从A变为G，对应的氨基酸从Lys变为Arg。在模式植物拟南芥中过表达GHFLS基因，发现过表达该基因造成T2代拟南芥根长的显著缩短，证明该基因在细胞伸长机制中的重要作用。单倍型AA的棉花品种(系)的纤维品质显著优于单倍型GG的棉花材料。该基因在高效鉴定优质纤维陆地棉品种、改良棉花纤维品质性状和培育棉花优质纤维新品种中具有重要的研究价值和应用前景。

摘要： 本申请属于烟草基因组解析技术领域，具体涉及烟草NtDREB类转录因子及其应用专利申请事宜。烟草NtDREB类转录因子，包括NtDREB‑1BL1、NtDREB‑1BL2、NtDREB‑1BL3三个，相应CDS碱基序列如SEQ ID No.1~3所示。对于现有其他作物中DREB类转录因子功能研究认为，这类转录因子与植物抗逆性紧密关联。而本申请中，发明人通过对烟草中三个NtDREB转录因子功能研究，发现烟草中NtDREB类基因与烟草中色素类物质含量紧密相关，通过调节NtPSY基因表达来实现烟叶中色素类物质含量的同步调整，基于此结果，可为烟草遗传定向改良和烟叶品质提升奠定良好的理论基础和技术基础。

摘要： 本申请属于烟草基因组解析技术领域，具体涉及烟草NtDREB类转录因子及其应用专利申请事宜。烟草NtDREB类转录因子，包括NtDREB‑1BL1、NtDREB‑1BL2、NtDREB‑1BL3三个，相应CDS碱基序列如SEQ ID No.1~3所示。对于现有其他作物中DREB类转录因子功能研究认为，这类转录因子与植物抗逆性紧密关联。而本申请中，发明人通过对烟草中三个NtDREB转录因子功能研究，发现烟草中NtDREB类基因与烟草中色素类物质含量紧密相关，通过调节NtPSY基因表达来实现烟叶中色素类物质含量的同步调整，基于此结果，可为烟草遗传定向改良和烟叶品质提升奠定良好的理论基础和技术基础。

摘要： 本发明涉及抑制HIF‑1α和STAT5转录因子的合成诱骗寡核苷酸及含有它的药物组合物。确认了HIF‑1α诱骗寡核苷酸、STAT5诱骗寡核苷酸、以及它们连接而成的HIF‑1α/STAT5诱骗寡核苷酸在特应性皮炎动物模型中的HIF‑1α和STAT5的作用抑制、表皮和真皮的厚度减少、免疫细胞的浸润抑制、肥大细胞的活化和脱颗粒抑制、肥大细胞的颗粒物质和炎性细胞因子的表达抑制等效果，因此可以以特应性皮炎治疗用途使用。

摘要： 本发明公开了一种能够提高蒜氨酸含量的大蒜AsNAC1转录因子基因及其应用，所述大蒜AsNAC1转录因子基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。与现有技术相比，本发明发现AsNAC1转录因子基因可以提高大蒜愈伤细胞的蒜氨酸含量。本发明提出一种能够提高大蒜蒜氨酸含量的新型转录因子基因，通过转基因方法可以提高大蒜愈伤组织细胞的蒜氨酸合成能力，进而为提高大蒜品质提供有效途径。

摘要： 本发明公开了桃PpOFP1转录因子的应用，属于植物生物技术领域。桃PpOFP1转录因子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其具有调节植物抗盐性或抗旱性的作用。通过该转录因子进行植物抗盐性或抗旱性研究，可为耐盐或耐干旱植物品种的选育提供基础。

摘要： 本发明提出了一种矮牵牛PhSPL2、rPhSPL2转录因子及其应用，属于基因工程技术领域，所述矮牵牛PhSPL2转录因子核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。所述矮牵牛PhSPL2转录因子对应的miR156/157靶位点进行点突变后获得rPhSPL2转录因子核苷酸序列如SEQ IDNO.3所示，编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明得到转基因植株PhSPL2、rPhSPL2和amiRNA‑PhSPL2，对转基因植株进行分子鉴定和表型观察，以评估该基因在调控植物开花和花器官大小的应用前景。

摘要： 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及草莓FaBBX21转录因子及其编码蛋白与应用。本发明所述转录因子FaBBX21来源于草莓，属于B‑box类转录因子。本发明基于所述转录因子FaBBX21构建过表达载体，并将其转化到草莓中，可进行稳定表达，有助于促进草莓花青素苷积累。