类胰蛋白酶

摘要： 肥大细胞活化综合征(mast cell activation syndrome,MCAS)是由多种病因引起的一组谱性疾病,表现为由于肥大细胞介质释放而引起的发作性的多系统症状,可累及皮肤、胃肠道、心血管、呼吸系统和神经系统。严重的全身反应期间,基础血清类胰蛋白酶水平显著高于个体基线水平,也伴有其他肥大细胞相关介质水平升高,如尿前列腺素D2及其代谢物、尿组胺代谢物、尿中白三烯代谢物(白三烯E4)、肝素等升高。MCAS的诊断标准:(1)与肥大细胞活化相关的发作性症状影响两个或更多器官系统;(2)使用抗肥大细胞介质药物治疗可以降低症状发作的频率、严重程度或缓解症状;(3)在症状发生后4 h内,血清类胰蛋白酶水平≥120%基线水平+2 ng mL,和或其他肥大细胞相关生化指标升高。除避免诱因外,MCAS治疗多采用抗肥大细胞介质为主的综合治疗。

摘要： 目的:研究资木瓜总苷(TSCS)通过MC-Tryptase-PAR-2-FLS途径对K/B×N小鼠血清转移性关节炎的治疗作用.方法:小鼠随机分为6组:C57BL/6小鼠分别注射C57BL/6小鼠血清、K/B×N小鼠血清作为正常对照组和模型组,KitW-4Bao小鼠注射K/B×N小鼠血清作为阴性对照组,移植肥大细胞(MC)的KitW-4Bao小鼠随机分为3组:阳性药物(色甘酸钠)组、TSCS低、高剂量组,均注射K/B×N小鼠血清.游标卡尺测量小鼠关节肿胀度,HE染色观察关节形态学变化,甲苯胺蓝染色观察MC脱颗粒变化,免疫组化和qRT-PCR检测关节组织中类胰蛋白酶(Tryptase)、蛋白酶激活受体2(PAR-2)表达情况,ELISA检测血清IgG及关节中炎症因子含量变化.结果:KitW-4Bao小鼠对血清转移性关节炎抵抗,移植MC后,对K/B×N小鼠血清恢复敏感,引发关节炎.与模型组相比,TSCS高剂量组小鼠关节肿胀度、关节炎评分、病理学评分、MC脱颗粒率、Tryptase和PAR-2表达、血清IgG和炎症因子水平显著降低.结论:MC在K/B×N小鼠血清转移性关节炎模型中发挥重要作用;TSCS通过抑制MC脱颗粒释放类胰蛋白酶,影响MC-Tryptase-PAR-2-FLS通路,治疗K/B×N小鼠血清转移性关节炎.

摘要： 目的 初步探讨促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)对功能性消化不良(FD)大鼠体重、进食量及十二指肠局部微炎症的影响.方法 SD雄性大鼠18只随机分为对照组、模型组及促肾上腺皮质激素释放激素受体1(CRHR1)拮抗剂组,模型组及CRHR1拮抗剂组采用夹尾应激方法建立FD大鼠模型,同时CRHR1拮抗剂组每日造模前予CRHR1拮抗剂CP-154526腹腔注射造模及干预期间,测量各组每只大鼠的每日体重及每笼大鼠的每日进食量.干预结束后,取各组大鼠十二指肠组织,使用免疫荧光测定局部类胰蛋白酶(tryptase)表达情况.结果 从造模第3天开始至实验结束,模型组大鼠体重增长及单笼进食量显著低于对照组;同时模型组大鼠十二指肠局部tryptase荧光强于模型组而造模前提前予CRHR1拮抗剂腹腔注射,则可显著增加造模大鼠的体重、单笼进食量,同时下调十二指肠局部tryptase的荧光强度.结论 CRH在FD发病中可能具有一定作用,对模型大鼠的体重、进食量及十二指肠局部微炎症具有重要的作用.

摘要： 目的 通过RBL-2H3肥大细胞脱颗粒模型考察注射用丹参多酚酸及丹参多酚酸B、D的致敏性.方法 RBL-2H3肥大细胞分为对照(PBS)组、C48/80(阳性对照,4 mg/mL)组和梯度浓度(0.025、0.050、0.100、0.200、0.400、0.800 mg/mL)的注射用丹参多酚酸、丹参多酚酸B、丹参多酚酸D组,孵育30 min后,通过中性红染色试验观察脱颗粒现象,化学荧光法测定组胺释放率,酶联免疫吸附(ELISA)法测定β-氨基己糖苷酶释放率、类胰蛋白酶释放量.结果 与对照组比较,阳性药C48/80组、质量浓度≥0.2 mg/mL的丹参多酚酸B组、质量浓度≥0.4 mg/mL的丹参多酚酸D组、质量浓度为0.8 mg/mL的注射用丹参多酚酸组的细胞脱颗粒度显著升高(P＜0.01、0.05);注射用丹参多酚酸没有引起RBL-2H3细胞组胺释放率增加,C48/80组、质量浓度≥0.025 mg/mL的丹参多酚酸D组、0.8 mg/mL的丹参多酚酸B组组胺释放率即显著升高(P＜0.001、0.05);注射用丹参多酚酸和丹参多酚酸B组类胰蛋白酶释放量无显著性差异,质量浓度≥0.025 mg/mL的丹参多酚酸D组类胰蛋白酶释放量显著增加(P＜0.001);注射用丹参多酚酸没有引起β-氨基己糖苷酶释放率增加,0.8 mg/mL的丹参多酚酸D组、质量浓度≥0.1 mg/mL的丹参多酚酸B组的β-氨基己糖苷酶释放率显著增加(P＜ 0.001).结论 注射用丹参多酚酸在致敏性方面有较好的安全性.

摘要： 目的探讨在大鼠深度创面愈合过程中,使用肥大细胞膜稳定剂色甘酸钠干预肥大细胞的功能是否可影响增生性瘢痕的形成。方法建立大鼠背部深度损伤模型后将实验对象随机分为A、B、C、D四组,前三组为实验组,D组为对照组。分别记录原始创面面积及创面愈合时间。对术后第3天及第60天创面组织取材进行切片染色(HE染色、甲苯胺蓝染色、免疫组化染色),进行镜下形态观察及肥大细胞、胰蛋白酶计数。结果术后3天组织切片镜下进行肥大细胞计数,实验组与对照组脱颗粒肥大细胞数存在统计学差异。实验组类胰蛋白酶阳性肥大细胞数量与对照组存在统计学差异。术后第60天全部实验对象背部创面均出现瘢痕愈合,实验组瘢痕表皮细胞层数、成纤维细胞数、胶原纤维数减少,胶原纤维排列整齐。对照组瘢痕内成纤维细胞数量多,胶原纤维分布无条理性。结论色甘酸钠通过影响肥大细胞脱颗粒过程,抑制创面早期炎症反应,同时影响类胰蛋白酶的释放,使成纤维细胞活化受阻,进而抑制瘢痕增生。

摘要： 目的 探讨老年急性非ST段抬高型心肌梗死(NSTEMI)患者PCI术前后血清半乳糖凝集素-3(Galectin-3)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、类胰蛋白酶(Tryptase)水平的表达及其临床意义.方法 回顾性分析2017年3月至2019年2月空军军医大学第二附属医院收治的188例老年NSTEMI患者(观察组)的临床资料,根据患者的住院及6个月随访期间的急性心血管事件发生情况,将患者分为急性心血管事件组26例和无急性心血管事件组162例,比较两组患者PCI术前后的血清Galectin-3、MMP-9、Tryptase水平.另收集同期体检健康者100例作为对照组.应用ROC曲线分析Galectin-3、MMP-9、Tryptase水平对老年急性NSTEMI患者预后的预测价值,并以多因素Logistic回归分析影响患者预后的因素.结果 观察组患者术前、术后3 d、术后7 d的血清Galectin-3、MMP-9、Tryptase水平明显高于对照组,且观察组患者术后3 d、术后7 d的血清水平明显低于术前,差异均有统计学意义(P0.05);急性心血管事件组患者术后3 d、7 d的血清Galectin-3、MMP-9、Tryptase水平明显高于无急性心血管事件组,差异均有统计学意义(P36.93时,敏感度为75.00％,特异度为82.72％;术后7 d,MMP-9 AUC为0.958,大于Galectin-3的0.881和Tryptase的0.782,当截断值为>216.24时,敏感度为88.46％,特异度为95.68％;多因素Logistic回归分析结果显示,血清Galectin-3、MMP-9、Tryptase水平为影响老年急性NSTEMI患者预后的重要危险因素(P<0.05).结论 血清Galectin-3、MMP-9、Tryptase水平在老年急性NSTEMI患者中呈异常升高表达,PCI术后呈降低趋势,均为影响预后的重要危险因素,在预测预后方面具有较高应用价值.

摘要： 肥大细胞(MCs)在先天免疫和获得性免疫中都具有重要作用,其特点是细胞内存在颗粒,颗粒内含有预先形成的组胺、肝素等生物效应物,经激活后,这些物质能够迅速脱颗粒并释放从而参与机体反应.类风湿关节炎(RA)是一种慢性的自身免疫性疾病,其特点是炎症、滑膜增生以及细胞和体液免疫反应异常,作为一种多因素作用的疾病,RA的具体发病机制仍未阐明.近年的临床和动物实验均表明肥大细胞在RA中发挥重要作用,越来越多研究表明MCs能够分泌促炎因子,诱导炎症细胞的浸润等,加重RA症状.深入研究MCs在RA发展中的作用,将有助于进一步理解RA的病理机制,并为其新药开发提供依据.

摘要： 目的 通过比较不同浓度聚山梨酯80溶液对RBL-2H3、P815、Ku812细胞脱颗粒的影响,探究聚山梨酯80的量与过敏反应的关系,进而筛选出一套灵敏、稳定的体外肥大细胞脱颗粒模型.方法 体外培养RBL-2H3、P815和Ku812细胞,测定3株细胞的生长曲线,在细胞生长对数期,以不同浓度(0.04、0.20、1.00、5.00、10.00、20.00、40.00、80.00 mg/mL)聚山梨酯80分别刺激3株细胞,采用中性红染色法显微镜下观察不同浓度聚山梨酯80溶液对3株细胞脱颗粒的影响,并计算脱颗粒百分率,同时以化学发光法分别检测组胺和β-氨基己糖苷酶释放率,以酶联免疫吸附法测定类胰蛋白酶的释放量;并进一步检测聚山梨酯80对人的肥大细胞IgE释放的影响.结果 3株肥大细胞脱颗粒模型中,各细胞的脱颗粒指标均随聚山梨酯80浓度的升高而升高.相同浓度聚山梨酯80对人源、大鼠、小鼠肥大细胞的类胰蛋白酶释放量无较大统计学差异;与RBL-2H3细胞系比较,P815细胞和组胺释放率显著降低(P＜0.05、0.01),Ku812细胞组胺释放率和β-氨基己糖苷酶释放率显著升高(P＜0.05、0.01),Ku812细胞脱颗粒最灵敏.但在实验过程中发现Ku812细胞模型稳定性、可重复性较差,而RBL-2H3细胞稳定性、可重复性均优于Ku812和P815细胞.0.04～80.00 mg/mL的聚山梨酯80溶液作用于Ku812细胞产生的IgE均低于检测限.结论 聚山梨酯80诱导的过敏反应可能是不经过IgE介导的类过敏反应,随着聚山梨酯80浓度的增大,3个细胞模型脱颗粒现象显著,相比于Ku812和P815细胞,RBL-2H3细胞更适合作为体外肥大细胞脱颗粒检测模型.

摘要： 采用小鼠抗人类肥大细胞类胰蛋白酶单克隆抗体AA1通过间接免疫过氧化物酶技术,对牛蛙的舌、肠和脾以及人食道癌组织石蜡切片中的肥大细胞进行染色,首次证实了牛蛙肥大细胞胞浆中类胰蛋白酶的存在,且单克隆抗体AA1与牛蛙肥大细胞中的类胰蛋白酶可获得良好的交叉反应.类胰蛋白酶阳性细胞多位于牛蛙肠黏膜固有层,少量见于肠绒毛基底部及舌黏膜下腺体周围.人食道癌间质中可见多量类胰蛋白酶阳性细胞.

摘要： 目的：类胰蛋白酶(tryptase)是一种丝氨酸蛋白酶,研究发现急性髓系白血病(acute myeloidleukemia,AML)中能检测到tryptase的高表达,高水平的tryptase可促进血管新生影响AML 预后.本实验目的在于探讨tryptase在AML中的表达调节机制,寻找AML新的治疗靶点.rn 方法：收集AML患者骨髓单个核细胞，检测c-kit,MITF与tryptase mRNA的表达水平及相关性。培养白血病细胞系U937细胞，用Erkl/2及p38MAPK信号通路抑制剂处理细胞后再与SCF共培养，real-time PCR,western blot及ELISA检测tryptase表达。rn 结果：AML患者tryptase及c-kit mRNA水平均高于正常对照组，且两者存在显著正相关。体外实验发现重组人干细胞因了(rhSCF)可促进U937细胞表达tryptase,c-kit mRNA和CD117。rhSCF作用U937细胞后，磷酸化Erkl/2和p38MAPK蛋白明显增多。当加入Erkl/2和p38MAPK特异性抑制剂预处理U937细胞后，rhSCF作用上调U937细胞表达tryptase作用可被明显抑制。rn 结论：SCF/c-kit信号系统的活化是AML细胞表达tryptase的机制之一。Erkl/2和p38MAPK通路参与了SCF/c-kit信号通路上调tryptase的表达。

摘要： 目的：探讨在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)中c-kit与类胰蛋白酶(tryptase)的关系,为寻找AML新的治疗靶点提供分子学依据.rn 方法：收集AML患者骨髓单个核细胞,real-time RT-PCR检测c-kit和tryptase mRNA的表达水平.重组人干细胞因子(rhSCF)作用U937细胞后,流式细胞术检测CD117表达,real-time RT-PCR、ELISA及western blot检测tryptase表达.rn 结果：AML患者tryptase及c-kit mRNA水平均高于正常对照组,且两者存在显著正相关(r=0.554).体外实验发现rhSCF可促进U937细胞表达CD117,SCF/c-kit活化后可促进U937细胞tryptase mRNA及蛋白的表达,同时促进U937细胞分泌tryptase.rn 结论：SCF/c-kit信号系统的活化是AML细胞表达tryptase的机制之一,tryptase可能是伴c-kit高表达的AML新的治疗靶点.

摘要： 目的：探索建立类过敏反应大鼠模型和检测指标。rn 方法：雄性SD大鼠分为空白对照组、C48/80组、天花粉组、眼镜蛇毒组和内毒素组。尾静脉注射相应的药物,30min后测量给药前后的血压和心率,取血清检测补体总活性、补体C3a、C4a、类胰蛋白酶、白三烯B4等指标,取腹腔肥大细胞甲苯胺蓝染色观察并计数肥大细胞脱颗粒率,取肺组织做切片观察并计数肥大细胞脱颗粒率。rn 结果：给药后C48/80出现血压下降,腹腔和肺组织中肥大细胞脱颗粒率以及血清类胰蛋白酶和白三烯B4均有显著的增高。眼镜蛇毒、内毒素、天花粉在给药后30min,补体总活性、C3a、C4a以及类胰蛋白酶和白三烯B4含量均没有显著的变化,而天花粉和眼镜蛇毒在腹腔肥大细胞脱颗粒中有显著增高。rn 结论：C48/80给药后可直接激活肥大细胞使其脱颗粒释放类胰蛋白酶和白三烯B4等活性介质,引起血压下降,在类过敏反应模型中可作为阳性对照品。

摘要： 头孢曲松钠属于半合成的第三代头孢菌素，由于在使用时没有明确做皮试的要求，并且引起过敏性休克的情况相对较少发生，所以成为临床抗感染的一线药物之一。但笔者却曾遇见两例由于使用头孢曲松钠而发生过敏性休克导致死亡的案例。最新研究表明：类胰蛋白酶在法医病理学鉴定过敏性休克方面有着独特的意义，并且有着一定的应用前景。现作为案例分析报道，供广大法医同道及临床医师的参考。同时，希望能够引起有关方面注意。

摘要： 目的：本实验目的在于探讨tryptase在AML中的表达调节机制,寻找AML新的治疗靶点.rn 方法：收集AML患者骨髓单个核细胞,检测c-kit、MITF与tryptasemRNA的表达水平及相关性.培养白血病细胞系U937细胞,用Erk1/2及p38MAPK信号通路抑制剂处理细胞后再与SCF共培养,real-time PCR、western blot及ELISA检测tryptase表达.rn 结果：AML患者tryptase及c-kit mRNA水平均高于正常对照组，且两者存在显著正相关。体外实验发现重组人干细胞因子(rhSCF)可促进U937细胞表达tryptase,c-kit mRNA和CD117.rhSCF作用U937细胞后，磷酸化Erkl/2和p38MAPK蛋白明显增多。当加入Erkl/2和p38MAPK特异性抑制剂预处理U937细胞后，rhSCF作用上调U937细胞表达tryptase作用可被明显抑制。rn 结论：SCF/c-kit信号系统的活化是AML细胞表达tryptase的机制之一。Erkl/2和p38MAPK通路参与了SCF/c-kit信号通路上调的表达。

摘要： 目的：本实验目的在于探讨tryptase在AML中的表达调节机制,寻找AML新的治疗靶点.rn 方法：收集AML患者骨髓单个核细胞,检测c-kit、MITF与tryptasemRNA的表达水平及相关性.培养白血病细胞系U937细胞,用Erk1/2及p38MAPK信号通路抑制剂处理细胞后再与SCF共培养,real-time PCR、western blot及ELISA检测tryptase表达.rn 结果：AML患者tryptase及c-kit mRNA水平均高于正常对照组，且两者存在显著正相关。体外实验发现重组人干细胞因子(rhSCF)可促进U937细胞表达tryptase,c-kit mRNA和CD117.rhSCF作用U937细胞后，磷酸化Erkl/2和p38MAPK蛋白明显增多。当加入Erkl/2和p38MAPK特异性抑制剂预处理U937细胞后，rhSCF作用上调U937细胞表达tryptase作用可被明显抑制。rn 结论：SCF/c-kit信号系统的活化是AML细胞表达tryptase的机制之一。Erkl/2和p38MAPK通路参与了SCF/c-kit信号通路上调的表达。

摘要： 目的：本实验目的在于探讨tryptase在AML中的表达调节机制,寻找AML新的治疗靶点.rn 方法：收集AML患者骨髓单个核细胞,检测c-kit、MITF与tryptasemRNA的表达水平及相关性.培养白血病细胞系U937细胞,用Erk1/2及p38MAPK信号通路抑制剂处理细胞后再与SCF共培养,real-time PCR、western blot及ELISA检测tryptase表达.rn 结果：AML患者tryptase及c-kit mRNA水平均高于正常对照组，且两者存在显著正相关。体外实验发现重组人干细胞因子(rhSCF)可促进U937细胞表达tryptase,c-kit mRNA和CD117.rhSCF作用U937细胞后，磷酸化Erkl/2和p38MAPK蛋白明显增多。当加入Erkl/2和p38MAPK特异性抑制剂预处理U937细胞后，rhSCF作用上调U937细胞表达tryptase作用可被明显抑制。rn 结论：SCF/c-kit信号系统的活化是AML细胞表达tryptase的机制之一。Erkl/2和p38MAPK通路参与了SCF/c-kit信号通路上调的表达。

摘要： 目的：本实验目的在于探讨tryptase在AML中的表达调节机制,寻找AML新的治疗靶点.rn 方法：收集AML患者骨髓单个核细胞,检测c-kit、MITF与tryptasemRNA的表达水平及相关性.培养白血病细胞系U937细胞,用Erk1/2及p38MAPK信号通路抑制剂处理细胞后再与SCF共培养,real-time PCR、western blot及ELISA检测tryptase表达.rn 结果：AML患者tryptase及c-kit mRNA水平均高于正常对照组，且两者存在显著正相关。体外实验发现重组人干细胞因子(rhSCF)可促进U937细胞表达tryptase,c-kit mRNA和CD117.rhSCF作用U937细胞后，磷酸化Erkl/2和p38MAPK蛋白明显增多。当加入Erkl/2和p38MAPK特异性抑制剂预处理U937细胞后，rhSCF作用上调U937细胞表达tryptase作用可被明显抑制。rn 结论：SCF/c-kit信号系统的活化是AML细胞表达tryptase的机制之一。Erkl/2和p38MAPK通路参与了SCF/c-kit信号通路上调的表达。

摘要： 目的：本实验目的在于探讨tryptase在AML中的表达调节机制,寻找AML新的治疗靶点.rn 方法：收集AML患者骨髓单个核细胞,检测c-kit、MITF与tryptasemRNA的表达水平及相关性.培养白血病细胞系U937细胞,用Erk1/2及p38MAPK信号通路抑制剂处理细胞后再与SCF共培养,real-time PCR、western blot及ELISA检测tryptase表达.rn 结果：AML患者tryptase及c-kit mRNA水平均高于正常对照组，且两者存在显著正相关。体外实验发现重组人干细胞因子(rhSCF)可促进U937细胞表达tryptase,c-kit mRNA和CD117.rhSCF作用U937细胞后，磷酸化Erkl/2和p38MAPK蛋白明显增多。当加入Erkl/2和p38MAPK特异性抑制剂预处理U937细胞后，rhSCF作用上调U937细胞表达tryptase作用可被明显抑制。rn 结论：SCF/c-kit信号系统的活化是AML细胞表达tryptase的机制之一。Erkl/2和p38MAPK通路参与了SCF/c-kit信号通路上调的表达。

摘要： 本发明公开了一种重组型荞麦胰蛋白酶抑制剂BTI突变体，命名为e‑BTI，其特征在于，根据BTI的基因序列，设计突变引物，对BTI的S41T以及P44T位点进行突变得到。本发明制得的e‑BTI热稳定性明显高于BTI，而且显示出优异的和胰蛋白酶的特异亲和性。可以采用所述e‑BTI制备胰蛋白酶亲和材料用于分离、提纯和鉴定胰蛋白酶。本发明采用简单的方法制得重组型荞麦胰蛋白酶抑制剂突变体e‑BTI，并且采用其突变体得到的胰蛋白酶亲和材料对胰蛋白酶的选择性吸附高、非选择性吸附低，利用不同洗脱液对胰蛋白酶吸附和分离，经过一步纯化便可得到高纯度的目的胰蛋白酶，最终纯化得到的胰蛋白酶具有高的催化活性。

摘要： 本发明公开了一种测定糜蛋白酶或胰蛋白酶或弹性蛋白酶或胃蛋白酶活力的方法，本发明以酪蛋白为底物，分别加入各酶催化，用三氯乙酸终止酶催化反应并与剩余底物相互作用形成缔合微粒使得共振散射强度急剧加强，据此建立了一个测定糜蛋白酶或胰蛋白酶或弹性蛋白酶或胃蛋白酶活力的方法，酶活力浓度——共振散射校正值曲线算出。本发明的优点在于：与现有的方法相比，本方法将酶催化反应与共振散射光谱结合起来，分析灵敏度高，选择性好，检测限低，操作简便，并且所用试剂无毒安全。

摘要： 检测神经胰蛋白酶体内活性的方法，其中样品中集聚蛋白22kDa片段所测得的含量用于计算神经胰蛋白酶的活性；该方法在诊断和监测神经胰蛋白酶相关失调的用途和集聚蛋白22kDa片段作为神经胰蛋白酶相关失调的生物标志物的用途。

摘要： 本发明提供了一种胰蛋白酶检测薄膜及其制备方法、应用和胰蛋白酶检测试剂盒，涉及胰蛋白酶检测技术领域。该胰蛋白酶检测薄膜的制备方法，包括以下步骤：提供聚合物薄膜基材；将所述聚合物薄膜基材浸没于染料中，使染料附着于聚合物薄膜基材，得到胰蛋白酶检测薄膜。本发明的制备方法操作简单，成本低，技术门槛低，对检测和操作人员要求低，本发明能够缓解现有技术中胰蛋白酶检测存在的技术难度大、测试复杂、高成本等问题。

摘要： 本发明公开了一种重组型荞麦胰蛋白酶抑制剂BTI突变体，命名为e‑BTI，其特征在于，根据BTI的基因序列，设计突变引物，对BTI的S41T以及P44T位点进行突变得到。本发明制得的e‑BTI热稳定性明显高于BTI，而且显示出优异的和胰蛋白酶的特异亲和性。可以采用所述e‑BTI制备胰蛋白酶亲和材料用于分离、提纯和鉴定胰蛋白酶。本发明采用简单的方法制得重组型荞麦胰蛋白酶抑制剂突变体e‑BTI，并且采用其突变体得到的胰蛋白酶亲和材料对胰蛋白酶的选择性吸附高、非选择性吸附低，利用不同洗脱液对胰蛋白酶吸附和分离，经过一步纯化便可得到高纯度的目的胰蛋白酶，最终纯化得到的胰蛋白酶具有高的催化活性。

摘要： 本发明公开了一种胰蛋白酶的提取方法及含有胰蛋白酶的原料药，解决了由于杂蛋白过多，胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶很难分开，导致胰蛋白酶提取的纯度一直不高的问题，其技术方案要点包括有如下步骤：将动物胰脏切块搅碎加入到提取罐中提取；离心分层，压滤得到胰脏提取液；超滤浓缩后，加入（NH

摘要： 本发明公开了一种分离纯化胰蛋白酶的方法及提高胰蛋白酶复溶性的药物组合物，技术方案是将胰蛋白酶粗品溶解后，经盐溶、盐析，再用活性胰蛋白酶激活，使其酶原转变为有活性的胰蛋白酶，被激活的酶溶液再经结晶透析、冻干，获得较高纯度的胰蛋白酶。胰蛋白酶精品收率在6%以上，活性效价在2500iu/mg以上。

摘要： 本发明阐述一种胰蛋白酶的制备方法及提高胰蛋白酶复溶性的药物组合物。该制备方法包括以下工艺步骤：（1）原料绞碎，抽提酶原；（2）分级盐溶、盐析，得胰蛋白酶粗品；（3）粗品投料，多重结晶；（4）活化；（5）结晶；（6）透析；（7）冻干。本发明建立起一套规模化的生产工艺，具有简单、低成本等优点，制备的胰蛋白酶精品效价达2500单位/毫克以上，符合《中国药典》（2010版）要求，具有极大的市场竞争力。

摘要： 本发明公开了一种分离纯化胰蛋白酶的方法及含有胰蛋白酶的药物组合物，技术方案是将胰蛋白酶粗品溶解后，经盐溶、盐析，再用活性胰蛋白酶激活，使其酶原转变为有活性的胰蛋白酶，被激活的酶溶液再经结晶透析、冻干，获得较高纯度的胰蛋白酶。胰蛋白酶精品收率在6%以上，活性效价在2500iu/mg以上。

摘要： 这里描述了有效防止和治疗肥大细胞介导的炎症紊乱的新型化合物、组合物和方法。本发明的优选方面是式Ⅱ的化合物;其中虚线独立地表示可有可无的键;各R2独立地是(C1-6)烷基、(C1-6)烷氧基、卤素或羟基;各R3独立地是(C1-6)烷基、(C1-6)烷氧基、卤素或羟基;X3是－C(O)－或－CR7R8－,X8是－CH(R1)n1－或－C(R1)n1=,其中R1是氨基(N1-4)吡咯烷基、氨基(N1-4)吡咯基、(N1-4)吡咯烷基、(N1-4)吡咯基、－NHC(NH)NR9R9、－C(NR9)R9、－C(NH)NHR10、－C(NH)NR10R10或－(CR11R11)yNH2,或X8是－N=或－NH(R1)n1－,其中R1是－C(NR9)R9、－C(NH)NHR10或－C(NH)NR10R10,其中各R9独立地是氢或(C1-6)烷基和各R10独立地是(C1-10)烷基;和X9是－CH(R4)或－C(R4)=,其中R4是－R12。－OR12、－(R13)R12、－SR12、－S(O)R12、－S(O)2R12、S(O)2OR12、S(O)2N(R13)R12、－N(R13)S(O)2R12、－C(O)R12、－C(O)OR12、C(O)N(R13)R12、－N(R13)C(O)R12、－OC(O)N(R13)R12、－N(R13)C(O)OR12。－(CH2)n4N(R13)C(O)N(R13)R12、－OP(O)(OR13)OR12或－C(O)N(R14)CH(COOH)R12,或X9是－N=或－N(R4)－,其中R4是－C(O)R12、－C(O)OR12。－C(O)N(R13)R12、－OC(O)N(R13)R12或－C(O)N(R14)CH(COOH)R12,其中R12、R13和R14与本发明的概述中的定义相同;R5是氢或(C1-4)烷基,R6是氢或(C1-6)烷基,该烷基任意性地被一个或两个独立地选自(C1-4)烷氧基、羟基和磺基的取代基所取代,R7是氢或甲基和R8是氢、甲基或羟基。该化合物,组合物和方法可有效地防止和治疗与呼吸道有关的炎症,如哮喘和变应性鼻炎,以及其它类型的炎症,如类风湿性关节炎、结膜炎和肠内炎症,各种皮肤病,以及某些病毒引起的症状。该化合物包括肥大细胞蛋白酶类胰蛋白酶的潜在和选择性抑制剂。治疗这些疾病的组合物包括口服、吸入、局部应用和肠胃应用制剂,以及包括该制剂的装置。