海马脑片

摘要： 目的：应用全细胞膜片钳技术检测化学损伤致痫大鼠海马脑片神经元基本电生理特性。方法将成年SD大鼠建立氯化锂-匹罗卡品模型后，急性分离获得海马脑片，应用全细胞膜片钳电流钳技术实时观察化学损伤致痫大鼠海马脑片CA1区锥体神经元膜电位及其单位时间内动作电位频率的变化情况；通过全细胞膜片钳电压钳技术，检测化学损伤后大鼠海马脑片CA1区锥体神经元的诱发兴奋性突触后电流的变化情况。结果急性分离所得海马脑片CA1区锥体神经元的胞体饱满并可见突起。可在大鼠海马脑片 CA1区锥体神经元记录到自发的动作电位及刺激诱发兴奋性突触后电流，且化学损伤后神经元膜电位绝对值降低，动作电位频率加快，诱发的兴奋性突触后电流幅值升高。结论全细胞膜片钳技术可以用于癫痫大鼠急性分离所得海马脑片的电生理研究，化学损伤后神经元兴奋性明显升高，为开展癫痫相关的功能研究提供了新的途径。%Objective To observe the electrophysiological properties in the epileptic rat hippocampal brain slices by whole -cell patch clamp technique .Methods After epileptic rat model was successfully established ,the hippocampal brain slices were acutely dissocia-ted,whose basic electrophysiological properties were detected by whole-cell patch clamp technique .After chemical injury , the changing of membrane potential and action potential were recorded by the current clamp technique , and the changing of evoked excitatory postsynaptic current(eEPSC)was recorded by the potential clamp technique .Results On acutely dissociated hippocampal brain slices of epileptic rats , good physical shape and obvious neurite of pyramidal neurons in CA 1 region could be observed .Spontaneous action potential and evoked ex-citatory postsynaptic current could be detected on pyramidal neurons in CA 1 region by whole-cell patch clamp technique .After chemical inju-ry,the neuronal membrane potential absolute value became lower and action potential frequency became faster .In addition,the eEPSC ampli-tude became higher .Conclusions The physiological activities of pyramidal neurons in CA 1 region are high enough for sealing .In addition, the whole-cell patch clamp technique is suitable for detecting the electrophysiological properties .It is found that neuronal excitability in-creased significantly after chemical injury ,which could provide a new pathway for the functional research of epilepsy .

摘要： Aim To explore how MCP-1 induces neu-rodisorder by determing the effects of MCP-1 on excita-tory postsynaptic current(EPSCs) in the CA1 region of rat hippocampal brain slices .Methods EPSCs, the AMPA receptor-mediated EPSC (EPSCAMPAR ), NMDA receptor mediated EPSCs(EPSCNMDAR) and NR2BR re-ceptor-mediated EPSC ( EPSCNR2BR ) were recorded u-sing whole-cell patch recording techniques to observe the effects of 2.3 nmol· L-1 MCP-1 on pyramidal neu-rons in hippocampal CA1 region.Microtubule-associat-ed protein-2 ( MAP-2 ) staining was used to study whether MCP-1 induced dendritic injuries in hippocam-pal CA1 region and whether NMDAR , AMPAR or CCR2 receptor antagonists had protective effects a-gainst dendritic damage caused by MCP-1.Results ① Bath application of MCP-1 produced a significant enhancement of the amplitudes of EPSCs , EPSCAMPAR and EPSCNMDAR .②Further studies revealed that MCP-1 potentiated EPSC NR2BR; ③ The MCP-1-associated dendritic injuries were blocked by NMDAR , AMPAR and CCR2R antagonists respectively .Conclusions Our results suggest a potential role of MCP-1 which may play in neuroexcitotoxicity and neural injury via NMDA receptor(especially NMDAR subtype NR2BR) and CCR2 receptor .The antagonists of these receptors may have potential therapeutic effect for neurodegener-ation.%目的：研究趋化因子MCP-1对大鼠海马CA1区NM-DA受体介导的兴奋性突触后电流的影响。方法采用全细胞膜片钳技术，记录2.3 nmol · L－1 MCP-1对大鼠海马脑片CA1区NMDA受体尤其是其重要受体亚型NR2BR介导的兴奋性突触后电流的影响，观察MCP-1是否对海马CA1区神经元有易化兴奋性作用；应用微管相关蛋白-2（ MAP-2）抗体染色的方法，观察海马CA1区神经元轴突结构的完整性，研究在NMDAR、AMPAR、CCR2受体拮抗剂分别存在的情况下，MCP-1引发海马脑片神经元结构损害的差异，观察上述各种拮抗剂是否对MCP-1导致的神经细胞结构损害有保护作用。结果灌流液内加入MCP-1能明显增加EPSCs、EPSCAMPAR、EPSCNMDAR电流幅度（P＜0.05），MCP-1能增加EPSCNR2BR的电流幅度，冲洗掉MCP-1后上述电流可恢复到接近给药前基础值，说明MCP-1对EPSCNR2BR的易化和促进作用是可逆的。在海马脑片上所做的MAP-2免疫组化染色的实验结果显示MCP-1对神经元轴突结构有损害作用，该作用可被NMDA和AMPA受体拮抗剂或CCR2受体拮抗剂逆转。结论 MCP-1对大脑海马CA1区NMDA受体，尤其是NR2B受体介导的突触后神经元的兴奋性有明显易化作用，神经元过度兴奋引发兴奋性神经毒性而导致神经损伤。NMDA和AMPA受体拮抗剂或CCR2受体拮抗剂对MCP-1诱导的神经元轴突结构损伤起到明显保护作用，这些拮抗剂的神经保护效应可为寻找神经退行性疾病的潜在治疗方法提供非常有价值的线索。

摘要： 目的 观察不同时长的氧糖剥夺对SD乳鼠器官型海马脑片的影响,探讨制备氧糖剥夺(OGD)模型的最佳时长. 方法 对海马脑片进行碘化丙啶染色,用微量酶标法检测培养液上清中LDH的释放量. 结果 培养13d后的脑片逐渐变薄,海马结构逐渐清晰,生长情况逐渐稳定,无特异性荧光信号,LDH释放各组无明显差异性;与造模前24 h相比,随着缺氧缺糖时间的增加,海马脑片碘化丙啶染色的荧光信号强度与LDH释放量增加,以45、60 min时长最为明显(P＜0.05或P＜0.01),但氧糖剥夺60 min脑片的损伤更为严重,表现出无法恢复的趋势. 结论 制备SD乳鼠海马脑片氧糖剥夺模型的最佳时长为45min.

摘要： 目的 通过新生大鼠氧糖剥夺(OGD)海马脑片模型,观察芍药苷对OGD损伤后的海马脑片中NLRP3炎症小体组成蛋白及其所介导的细胞凋亡的影响. 方法 将培养14d的海马脑片随机分为5组:空白对照组、OGD组、芍药苷低剂量组(1μM)、芍药苷中剂量组(10μM)、芍药苷高剂量组(100 μM).除空白对照组外,其他各组海马脑片均吸弃脑片培养液后,加入1 mL PBS,并置于三气培养箱中孵育45 min后,给予相应的药物干预.24 h后取各组海马脑片分别采用TUNEL法检测细胞凋亡率;RT-qPCR法检测NLRP3炎症小体组成蛋白mRNA的表达情况. 结果 OGD组较空白对照组NLRP3炎症小体组成蛋白mRNA的表达量和细胞凋亡率均明显增高(P＜0.01),芍药苷干预后NLRP3炎症小体组成蛋白的mRNA表达量和细胞凋亡率均明显低于OGD组(P＜0.01). 结论 芍药苷可通过下调OGD海马脑片中NLRP3炎症小体组成蛋白的表达,从而产生抗细胞凋亡的作用.

摘要： 目的:建立利用Fluoro-Jade B(FJ-B)染色检测乙醇诱导PC12细胞及小鼠海马脑片上神经细胞凋亡的方法并与TUNEL比较.方法:利用不同浓度的乙醇分别诱导PC12细胞和小鼠海马脑片上神经细胞凋亡,用FJ-B染色检测神经细胞凋亡,同时用TUNEL检测进行比较,从凋亡率、单位面积阳性细胞数的统计结果分析、实验过程等方面评价2种方法的优缺点.结果:2种方法检测结果显示乙醇处理组与对照组相比差异有统计学意义,2种方法相同组间对比分析差异无统计学意义.结论:FJ-B染色与TUNEL在检测乙醇对神经细胞凋亡影响的结果无差异;且FJ-B染色更适合在脑片上检测神经细胞的凋亡.

摘要： Objective In order to explore the Mg 2+-free artificial cerebrospinal fluid ( ACSF ) induced different epileptiform discharge patterns in adult mouse hippocampal slices and combined entorhinal cortex -hippocampal slices in vitro.Methods Two brain slice models were prepared , and Mg2+-free-ACSF was used to induce epileptiform discharges , which were recorded by micro-electrode array ( MEA ) .The spatiotemporal characteristics of the discharge patterns were studied following successful induction of epileptiform discharges in the two slice models .Results Mg2+-free-ACSF induced interictal discharges in the hippocampal slice ,with frequency of (11.6 ±2.4)times/min,and lasted 149.0-202.6 ms.While in the combined entorhinal cortex-hippocampal slice,the discharge pattern was alternated between interictal and ictal discharges .The frequency of interictal discharges was (12.9 ±3.3) times/min,with duration of 181.3-223.7 ms.The frequency of ictal discharges was (0.26 ±0.07 ) times/min,with duration of 14.3-14.5 s.Conclusion Interictal as well as ictal discharges could be recorded in the combined entorhinal cortex-hippocampal slice network level .So the combined entorhinal cortex-hippocampal slice is an ideal model for epilepsy research .%目的探索离体条件下无镁人工脑脊液（ ACSF ）诱导的成年小鼠海马脑片和海马-内嗅皮层联合脑片的不同癫痫样放电模式。方法分别制备两种脑片模型，使用无镁ACSF诱导脑片产生癫痫样放电，并用多电极阵列记录脑片不同区域神经元的放电情况。在两种脑片模型上诱导出稳定的癫痫样放电后，分析不同类型癫痫样放电模式的时空特性。结果无镁ACSF诱导海马脑片产生间期放电，间期放电频率为（11.6±2.4）次/min，平均放电持续时间为149.0～202.6 ms。无镁ACSF诱导海马-内嗅皮层联合脑片产生间期和发作期放电交替出现的模式，间期放电的频率为（12.9±3.3）次/min，平均放电持续时间为181.3～223.7 ms。发作期放电的频率为（0.26±0.07）次/min，平均放电持续时间为14.3～14.5 s。结论在海马-内嗅皮层联合脑片的网络水平研究癫痫问题，不仅能诱导产生稳定的间期放电，而且可以观察到发作期放电，因此海马-内嗅皮层联合脑片是一种研究癫痫的理想模型。

摘要： Objective To investigate the protective effects of sevoflurane postconditioning on oxygen-glucose deprivation injury in rat hippocampal slices. Methods Forty hippocampal slices were randomly divided into 4 groups (n=10 each): group OGD; group 2% Sev; group 4% Sev; group 6% Sev. The technique of electrophysiology was used, and the amplitude of orthodromic population spike (OPS) in the stratum pyramidale of the CA1 region was measured. And TTC staining was used to calculate the percentage of tissue injury. Results OPS recovery amplitude was (3.14±2. 56) %, OPS recovery rate was 10%, and the degree of tissue injury was 0. 63+0. 05 in group OGD. OPS recovery amplitude was (46. 24±29. 34)%,OPS recovery rate was 40%, and the degree of tissue injury was 0. 51+0. 06 in group 2% Sev. OPS recovery amplitude was (62. 40±34. 93)%,OPS recovery rate was 60%, and the degree of tissue injury was 0. 41±0. 07 in group 4% Sev. OPS recovery amplitude was (75. 92±45. 31) % ,OPS recovery rate was 70%, and the degree of tissue injury was 0. 37±0. 06 in group 6% Sev. The degree and rate of recovery of OPS were increased but the tissue injury was deceased in group 2% Sev, group 4% Sev and group 6% Sev as compared with OGD group. Conclusion Sevoflurane postconditioning can protect neurons from oxygen-glucose deprivation injury in rat hippocampal slices.%目的 观察七氟醚后处理对大鼠海马脑片氧糖剥夺损伤(OGD)的保护作用.方法 将符合标准的40片海马脑片随机均分为四组:2％七氟醚后处理组(2％Sev组)、4％七氟醚后处理组(4％Sev组)、6％七氟醚后处理组(6％Sev组)和氧糖剥夺损伤对照组(OGD组).采用脑片灌注及电生理技术细胞外记录海马CA1区的顺向群锋电位(OPS).利用2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色定量比色方法分析脑片损伤程度.结果 OGD组OPS恢复程度为(3.14±2.56)％,恢复率为10％,组织损伤率为0.63±0.05;2％Sev组OPS恢复程度为(46.24±29.34)％,OPS恢复率为40％,组织损伤率为0.51±0.06;4％Sev组OPS恢复程度为(62.40±34.93)％,OPS恢复率为60％,组织损伤率为0.41±0.07;6％Sev组OPS恢复程度为(75.92±45.31)％,OPS恢复率为70％,组织损伤率为0.37±0.06.与OGD组比较,2％Sev组、4％Sev组、6％Sev组的OPS恢复程度和OPS恢复率均明显升高,组织损伤率明显降低(P＜0.01).结论 七氟醚后处理对大鼠海马脑片氧糖剥夺损伤具有一定的保护作用.

摘要： Objective Microelectrode recording technology was used on hippocampal slices to study the effect of preconditioning with isoflurane on orthodromic population spikes (OPS) and hypoxic injury potential ( HIP) during and after hypoxia Methods Sixty SD rats were randomly divided into control group ( group C), experiment control group (group EC), isoflurane preconditioning group(group IP), iNOS inhibitor group(group AG) and iNOS inhibitor + Isoflurane preconditioning group(group IPAG). Both group IP and IPAG was given 3 hours isoflurane inhaling preconditioning. A minoguanidine was intraperitoneally injected in group IPAG and group AG. The hippocampal slices were exposed to 14 minutes hypoxia. Then, the distinct reactions of hippocampal slices OPS and HIP was observed. Results The OPS recovery degree of group IP were significantly better than other groups(P<0. 05); The duration of HIP in the IP group was much longer than that in other groups (P<0. 05). But onset time of HIP produced no statistically difference between each group. Conclusion Preconditioning with isoflurane can attenuate the injury of rat hippocampal slice during and after hypoxia, which could be blocked by iNOS inhibitors. Thus, iNOS might play important effects in the protective effect of isoflurane.%目的 以大鼠海马脑片为研究对象,采用微电极记录技术,观察异氟醚预处理对海马脑片缺氧损伤后顺向群锋电位(OPS)以及缺氧损伤电位(HIP)的影响.方法 SD大鼠60只,随机均分为五组:空白对照组(C组)；实验对照组(EC组)；异氟醚预处理组(IP组)；iNOS阻断剂氨基胍(AG)组(AG组)；异氟醚预处理+iNOS阻断剂组(IPAG组).IP组给予3h异氟醚预处理,AG组给予iNOS阻断剂处理,IPAG组给予3h异氟醚预处理,同时给予iNOS阻断剂,取脑片后分别给予14 min的缺氧处理,观察不同处理对海马脑片OPS恢复以及HIP的不同效应.结果 IP组的OPS的恢复程度、恢复率明显高于C组、EC组、AG组和IPAG组(P＜0.05),IP组HIP持续时间明显长于C组、EC组、AG组和IPAG组(P＜0.05),HIP的出现时间五组差异无统计学意义.结论 异氟醚预处理可明显减轻海马脑片缺氧损伤；用iNOS阻断剂可去除这种保护作用,证明这种预处理作用与异氟醚预处理产生的iNOS有关.

摘要： Objective-. To observe the electric activity of large neuron populations in acutely cultured hippocampal slices. Methods; Sprague Dawley rats at postnatal 7 days were deeply anesthetized by hypothermia and decapitated. The brains were removed and horizontally cut into slices which were cultured on 6-well plates. Male C57-BL/6J mice at postnatal 3-5 weeks were decapitated with deep ether anesthesia. The brains were quickly isolated and horizontally cut into slices which were transferred to oxygenated modified artificial cerebrospinal fluid ( pre-warmed at 37 °C ) and stored for more than 60 min. The hippocampal slices were loaded with calcium-sensitive fluorescence indicator and monitored by functional multineuron calcium imaging (fMCI). Results: Action potentials-evoked calcium transients were simultaneously imaged from large neuron populations. Conclusion; fMCI provides a kind of powerful tool to morphologically and functionally reveal hippocampal network activity and evaluate new central nervous system drugs.%目的:观察海马脑片中锥体细胞层群体神经元的电活动.方法:取出生后7d的Sprague Dawley大鼠全脑,无菌条件下水平方向切片,转至6孔板中培养；另取出生后3～5周的C57-BL/6J小鼠全脑,无菌条件下水平方向切片,转至37°C氧饱和的人工脑脊液中稳定至少60 min备用.大鼠培养脑片及小鼠急性脑片负载钙离子荧光指示剂,采用功能性多神经元钙成像技术检测海马锥体细胞层中大规模神经元与动作电位相关的钙瞬变.结果:大鼠培养脑片及小鼠急性脑片中记录到大量单个神经元的与动作电位相关的钙瞬变.结论:功能性多神经元钙成像技术是揭示海马神经网络活动及中枢神经系统有关创新药物评价的全新且有效的研究方法.

摘要： 本论文的目的是利用微电极阵列技术研究大鼠海马脑片在电刺激作用下的响应特性.首先选用14天的SD大鼠制备厚度为500μm的脑切片,孵育后从切片中分离海马区域,固定于玻璃基微电极阵列的电极区,联入神经信号探测系统中进行神经电生理实验.实验发现,电刺激信号幅值由低到高逐渐增加至约30mV时可探测到响应信号,即大鼠海马脑片的电压阈值为30mV.通过Matlab软件对记录结果进行进一步分析,发现在电刺激作用下响应信号从海马切片某位置处爆发并向周围“辐射式”传递,传递速率约为61.62m/s,符合神经纤维信号传递的速度范围.

摘要： 目的：探讨刺五加皂甙对大鼠海马脑片LTP的影响。rn 方法：高频电刺激离体海马脑片诱导长时程增强效应(Long-term pententiation,LTP),通过顺向群峰电位(orthodromic population spikes,OPS)波幅相对增长率、峰潜伏期相对缩短率二项指标,观察刺五加皂甙对LTP的影响。rn 结果：1.25 mg/100ml～5mg/100ml的刺五加皂甙对大鼠海马脑片LTP均有明显易化作用,研究组OPS的波幅相对增长率和峰潜伏期的相对缩短率均比对照组明显增高。rn 结论：刺五加茎叶皂甙对大鼠海马脑片LTP有明显促进作用。

摘要： 在体和离体实验都表明吗啡预处理能够诱导脑缺血／低氧耐受，减轻神经元缺血再灌注损伤。大量研究发现，蛋白激酶C(PKC)是参与阿片受体诱导心肌或脑缺血／低氧预适应(I／HPC)的一种关键酶，同时是一个具有四大类至少13种不间亚型的超家族，PKC各亚型在其中的作用尚不清楚。本研究先前应用非选择性PKC及选择性PKCε的阻断剂干预吗啡在海马脑片的预处理，结果提示PKC，尤其是PKCε，可能参与吗啡预处理神经保护作用。PKCε膜转位的变化参与临床相关浓度的吗啡预处理诱导的小鼠海马脑片早期氧糖剥夺耐受。

摘要： 目的：通过观察无糖低氧(OGD)刺激对小鼠海马脑片内蛋白激酶C(PKC)特定亚型膜转位水平(激活程度)的影响,来进一步证实我们在整体低氧预适应小鼠模型上所获实验结果,并为离体海马脑片缺血／低氧预适应(I／HPC)模型建立及后续药物干预实验打下基础。rn 方法：急性分离小鼠海马组织、制备400μm厚度的脑片,并用无糖低氧(OGD)人工脑脊液(ACSF)模拟缺血／低氧刺激；应用SDS—PAGE和Western bolt等生化技术,并结合Gel Doc凝胶成像系统,半定量检测OGD刺激2、5、10、15和30min后海马脑片内cPKCβII和nPKCε的膜转位水平。rn 结果：OGD刺激可增高海马脑片内cPKCβII和nPKCε的膜转位水平,且这种增高从刺激5min开始持续至30min均有显著差异(p<0.001,n=6)。rn 结论：本实验结果进一步证实cPKCβII和nPKCε可能参与脑缺血／低氧性预适应的形成过程,并提示OGD10min作为制备离体海马脑片I／HPC模型的预处理刺激较为合理。

摘要： 目的:探讨祛痰活血开窍法组方脑脉Ⅱ号对急性脑缺血性损伤的保护作用及其机制.方法:采用大鼠海马脑片灌流并引导CA区诱发电位技术、放射性核素示踪法和生化检测等技术,从离体和整体以及功能方面进行研究.结果:(1)脑脉Ⅱ号可增大大鼠海马脑片诱发群锋电位(PS)的幅值;延长缺氧海马脑片PS幅值开始减小时间和消失时间;降低缺氧损伤电位(HIP)出现率和增加复氧后PS恢复率.(2)提高缺血脑组织SOD、GSH-Px活性,并减少LPO含量;(3)增加脑组织的H-脱氧葡萄糖含量.结论:脑脉Ⅱ号能提高脑组织的耐缺氧能力,并减小缺血缺氧对脑细胞的损伤,从而起保护作用,其作用机制可能与拮抗谷氨酸毒性、对抗自由基攻击和减少能量消耗等有关.

摘要： 本发明公开一种海马酒母的分离制备工艺，其中包括如下工艺步骤：①制备海马微粉、②浸泡、③过滤分离、④浓缩。得到海马酒母。通过气流超微粉碎机对海马进行打粉再对海马粉末进行筛分得到目数大于500目的海马微粉，其粒径小于等于25μm，海马微粉粒径越小，其与白酒的接触面积越大，越有利于海马微粉中的有效成分进入至白酒中。过滤分离步骤中将海马微粉与熟地、川芎、白芍和当归分离，由于海马微粉的粒径小，融入至海马酒原液中；浓缩步骤中减少海马酒原液中的酒精和水分含量，进一步提高海马酒母中干物质含量。与现有技术相比，本发明具有海马有效成分利用率高的特点。

摘要： 一种灰海马亲鱼配对方法，本发明的技术方案：在配备养殖系统和养殖环境的条件下进行，其特征是雌雄海马分开养殖一段时间后配对以保证孵化的同步性，并且在低密度条件下、不同体长亲海马混在一起以提高海马的配对率；亲海马配对前，雌雄分开养殖至少15天至雌海马性腺成熟，密度为0.3-0.4尾/升；待雌海马性腺成熟后，与体长比其大1厘米的雄海马配对，视养殖缸大小，每个缸最多放3对，3对的规格应有大、中、小梯度。

摘要： 本发明提供一种去神经支配海马外泌体研究海马神经再生微环境的方法，包括如下步骤：(1)应用立体定位技术切割大鼠穹窿海马伞，阻断隔区胆碱能神经纤维向海马的投射，制备去神经支配海马模型；(12)选取与全转录组测序相一致的miRNA、circRNA、LncRNA或mRNA进一步实验；(13)通过体外细胞培养实验，证实所选miRNA、circRNA、LncRNA及mRNA对海马神经干细胞增殖和向神经元或胆碱能神经元分化的作用。本发明涉及中枢神经海马结构中的神经再生研究方法，精准地明确海马神经再生微环境中所含物质，为促进海马结构中神经干细胞更多地向神经元和胆碱能神经元分化，改善神经退行性疾病患者的认知功能奠定基础。

摘要： 本发明公开一种海马酒母的分离制备工艺，其中包括如下工艺步骤：①制备海马微粉、②浸泡、③过滤分离、④浓缩。得到海马酒母。通过气流超微粉碎机对海马进行打粉再对海马粉末进行筛分得到目数大于500目的海马微粉，其粒径小于等于25μm，海马微粉粒径越小，其与白酒的接触面积越大，越有利于海马微粉中的有效成分进入至白酒中。过滤分离步骤中将海马微粉与熟地、川芎、白芍和当归分离，由于海马微粉的粒径小，融入至海马酒原液中；浓缩步骤中减少海马酒原液中的酒精和水分含量，进一步提高海马酒母中干物质含量。与现有技术相比，本发明具有海马有效成分利用率高的特点。

摘要： 本发明涉及养殖技术领域，具体是一种大规模灰海马亲海马配对方法。本发明方法的突出特点先在小环境、低密度、少干扰条件下配对，配对成功后再移入大池养殖。本发明的方法可提高配对成功率40％以上，保证大池中的亲海马配对成功率达到100％，同时提高了亲本利用率和孵化同步性，大大减少小桶的用量，并降低小桶养殖亲海马带来的高运行成本，有助于幼海马规模化养殖中并池养殖。

摘要： 本发明为线纹海马种海马在北方地区的越冬培育提供方法，通过对越冬种海马的挑选、种海马越冬RAS系统的构建、种海马越冬密度的控制、种海马越冬饵料的强化四个方面，来满足线纹海马对各种越冬条件的要求，减少线纹海马在越冬期间因发病或环境不适造成的死亡，使种海马在北方地区成功越冬，最终为翌年线纹海马的人工育苗和养殖提供健康优质的种海马。此方法能有效解决目前北方地区线纹海马种海马越冬难题，为线纹海马在北方地区形成规模化养殖提供优质种海马。

摘要： 本发明公开了一种线纹海马和三斑海马杂交育种的方法，包括以下步骤：S1.线纹海马和三斑海马亲本选择；S2.对步骤S1中的线纹海马和三斑海马亲本进行强化培育；S3.将步骤S2的海马亲本进行正交和反交；S4.将步骤S3怀孕亲本进行精心培育和产幼管理；S5.对步骤S4中生产的鱼苗按照相同的饲养方式在相似的环境下饲养；S6.对步骤S5中的鱼苗分别在1、2和4月龄时进行体重和成活率对比，得到成活率高、遗传稳定的优质杂交海马种质品系。本发明获得的杂交子代的成活率比自交子代有很大程度的提高，可为培育海马抗病品系提供基础，促进海马养殖产业发展。

摘要： 本实用新型公开了一种脑片实验系统中的排液结构及脑片实验系统，其中排液结构包括排液管和高度调节结构，脑片系统至少包括排液结构和实验槽。本实用新型有效地解决了脑片实验效率很低的情况，使得液路不会断裂，即使在液面升降时也能很好保持液面稳定。故本实用新型具有结构简单、操作方便快捷、稳定性强、实用价值高等优点，具有较好的市场前景。

摘要： 本发明公开了一种基于离体海马脑片的磁耦合谐振无源微磁刺激器，属于生物医学工程领域，将发射线圈的能量耦合到微线圈中，实现了细胞级微磁刺激，系统的传输效率达到39.58％。步骤为：搭建无源微磁刺激器的装置，建立了微磁刺激器的磁耦合谐振式无线能量传输理论和有限元分析模型，研究了海马脑片区域磁场强度的信噪比和系统的传输效率，确定了微磁刺激器的工作参数，实验验证了该微磁刺激器的有效性。

摘要： 本公开提供一种微电极阵列芯片，用于海马脑片的神经电生理信号的检测，包括：绝缘基底(1)，其上形成有微电极阵列(2)，其中，微电极阵列(2)包括多个以海马脑片的胞体层轮廓排布的微电极；微电极阵列(2)表面修饰有用于神经电生理信号检测的纳米复合材料(7)；参比电极(3)，其分布在微电极阵列(2)的外围；触点(5)，其分布在绝缘基底(1)的四周，微电极阵列(2)及参比电极(3)均通过引线(4)连接至触点(5)；其中，所有引线(4)表面均覆盖有绝缘层(6)。该芯片能够实现对海马脑片各主要亚区微弱神经电生理信号的高精度高质量检测，从而实现对不同病理条件下，大鼠海马脑片神经电生理信号传导机制的研究。