无糖低氧刺激增加小鼠海马脑片nPKCε和cPKCβ的膜转位

摘要

目的：通过观察无糖低氧(OGD)刺激对小鼠海马脑片内蛋白激酶C(PKC)特定亚型膜转位水平(激活程度)的影响,来进一步证实我们在整体低氧预适应小鼠模型上所获实验结果,并为离体海马脑片缺血／低氧预适应(I／HPC)模型建立及后续药物干预实验打下基础。rn 方法：急性分离小鼠海马组织、制备400μm厚度的脑片,并用无糖低氧(OGD)人工脑脊液(ACSF)模拟缺血／低氧刺激；应用SDS—PAGE和Western bolt等生化技术,并结合Gel Doc凝胶成像系统,半定量检测OGD刺激2、5、10、15和30min后海马脑片内cPKCβII和nPKCε的膜转位水平。rn 结果：OGD刺激可增高海马脑片内cPKCβII和nPKCε的膜转位水平,且这种增高从刺激5min开始持续至30min均有显著差异(p<0.001,n=6)。rn 结论：本实验结果进一步证实cPKCβII和nPKCε可能参与脑缺血／低氧性预适应的形成过程,并提示OGD10min作为制备离体海马脑片I／HPC模型的预处理刺激较为合理。