摘要:
目的:建立HPLC-DAD法同时测定生药款冬花和蜜炙款冬花中绿原酸、反式咖啡酸、芦丁、金丝桃苷、反式阿魏酸、4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、2,2-二甲基-6-乙酰基苯并二氢吡喃酮、款冬酮和甲基丁酰-3,14-去氢-Z-款冬素酯9个主要成分的含量.方法:采用正交设计优化提取方法,以提取时间、方法、溶剂、溶剂用量为主要影响因素,以9个分析物的总量为评价指标.分析物的色谱分离用Dikma DiamonsilTM C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)、Dikma Easy Guard C18保护柱(20mm×4.6mm,5μm);以乙腈(A)-0.03%三氟乙酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速为1.0mL·min-1;检测波长为240nm;柱温为25°C.结果:确定最佳提取方法为1.00g生药样品用20mL95%乙醇超声提取1h.绿原酸、反式咖啡酸、芦丁、金丝桃苷、反式阿魏酸、4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、2,2-二甲基-6-乙酰基苯并二氢吡喃酮、款冬酮和甲基丁酰-3,14-去氢-Z-款冬素酯9个分析物的线性范围分别为62.5~2000μg·mL-1(r=0.9999),2.5~80μg·mL-(r=0.9994),15.62~500μg·mL-1(r=0.9995),25~800μg·mL-1(r=0.9995),50 ~1600μg·mL-1(r=0.9992),37.5~1200μg·mL-1(r=0.9994),0.195~12.5μg·mL-1(r=0.9991),15.62~500μg·mL-1(r=0.9991),125~4000μg·mL-1(r=0.9995);平均加样回收率均在95.42%~105.0%范围内,RSD均在0.45%~4.5%范围内.结论:该方法准确,灵敏度高,重复性好,成本低,可用于款冬花中9个主要有效成分的含量测定.