微小RNAs
微小RNAs的相关文献在2006年到2023年内共计516篇,主要集中在肿瘤学、内科学、基础医学
等领域,其中期刊论文234篇、会议论文5篇、专利文献13741篇;相关期刊143种,包括遗传、国际生殖健康/计划生育杂志、国际检验医学杂志等;
相关会议5种,包括2014华东胸部肿瘤论坛暨第七届浙江省胸部肿瘤论坛、第二十三届全国中西医结合消化系统疾病学术会议、第十次中国中西医结合学会心血管病暨第五次江西省中西医结合学会心血管病学术大会等;微小RNAs的相关文献由1540位作者贡献,包括C·M·克罗斯、汪维鹏、朱健洁等。
微小RNAs—发文量
专利文献>
论文:13741篇
占比:98.29%
总计:13980篇
微小RNAs
-研究学者
- C·M·克罗斯
- 汪维鹏
- 朱健洁
- 李培峰
- C·C·哈里斯
- G·A·卡林
- 埃里克·奥尔森
- 张学光
- 伊娃·范鲁伊杰
- 刘敏
- 矢内原望
- 陈静
- 龙波
- S·沃林尼亚
- J·W·莱加
- M·塔可夫斯基
- M·斯托夫
- P·R·库塞尔
- U·三沙那姆
- 丁素玲
- 任进
- 俞作仁
- 凌志强
- 周露玙
- 夏晓莉
- 夏涵
- 大木忠明
- 孙怀昌
- 宋宏涛
- 府伟灵
- 张佩琢
- 张宏伟
- 张璇
- 张鑫宇
- 徐丛剑
- 戚新明
- 李倩
- 李凤岚
- 李燕云
- 杨承刚
- 林琳
- 段春晓
- 水谷隆之
- 滨崎智洋
- 爱德华·E·维因格
- 王健
- 田红青
- 白水久男
- 简·L·里德
- 蔡青青
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李志超;
谭国庆;
苏辉;
徐展望;
薛海鹏
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摘要:
背景:尽管目前针对脊髓损伤复杂生理病理机制开展了众多研究,但仍缺乏令人满意的治疗方法。研究表明,在脊髓损伤后与氧化应激、炎症、细胞自噬和凋亡等继发性损伤相关的非编码RNAs均有差异表达。因此,非编码RNAs具有作为脊髓损伤后治疗靶点的潜力。目的:综述非编码RNAs在脊髓损伤后的差异表达、功能作用和调控机制,以期为脊髓损伤的临床治疗提供新思路。方法:以“spinal cord injury”AND“non-coding RNA”OR“microRNA”OR“long non-coding RNA”OR“circRNA”AND“oxidative stress”OR“inflammation”OR“autophagy”OR“apoptosis”为关键词,检索PubMed、Web of Science数据库;以“脊髓损伤”和“非编码RNA”或“微小RNA”或“长链非编码RNA”或“环状RNA”和“氧化应激”或“炎症”或“自噬”或“凋亡”为关键词检索CNKI、万方数据库。依照纳入和排除标准进行筛选,最终对75篇文献进行综述。结果与结论:脊髓损伤后,与氧化应激、炎症、自噬和细胞凋亡等继发性损伤相关的非编码RNAs出现显著差异表达,导致靶基因表达差异和细胞功能发生变化。通过调节非编码RNAs拮抗氧化应激,干预小胶质细胞活化、极化和炎症通路以减轻炎症反应,维持适度水平细胞自噬和保持自噬通量通畅,以及抑制细胞凋亡,可能成为促进脊髓损伤修复的突破点。
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李勇;
郭敏;
康英英
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摘要:
微小RNAs(MicroRNAs,miRNAs)是一类短的广泛存在于生物体内,可以调控多种病理及生理过程的单链非编码RNA。研究发现其在组织以外的血液、尿液、外泌体等中也存在差异表达。随着检测技术的飞速发展、研究方法的不断改进以及研究人员操作技能的不断提升,miRNA因其稳定的分子结构以及丰富的生物学功能而进入人们的视线,其在炎症发生、免疫调节、氧化应激、纤维化、信息传递、病毒播散及肿瘤恶性进展等生命进程中的差异表达以及具体的调控机制正在不断被发掘及证实,尤其在甲状腺癌的发生、侵袭、转移及耐药中发挥着重要的调控作用,提示其有望成为甲状腺癌精准诊疗及预后评估的新指标。且对于未知功能的miRNAs以及其在不同类型的甲状腺癌中的特异性表达的研究不仅对于甲状腺癌不同病理类型的诊断、鉴别以及治疗具有重要意义,还有助于动态观察甲状腺癌患者的病情演变。而对于不同甲状腺癌类型相关的特异性miRNA在前者进展中具体调控机制有待进一步的研究。本文对miRNA的研究进程、生物学功能以及其在不同类型的甲状腺癌中的近期研究进行汇总,旨在为甲状腺癌的诊治提供参考,丰富甲状腺癌患者的诊疗策略以及进一步提高甲状腺癌患者的生存质量。
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宋鹏;
张猛;
姜淑娟;
杨栋梁
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摘要:
目的通过特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)的微小RNA(microRNA,miRNA)-mRNA相互作用网络识别微阵列鉴定基因和miRNA。方法使用从基因表达综合(gene expression omnibus,GEO)数据库(GSE27430和GSE135065)下载的IPF患者数据选择差异表达的miRNA和mRNA。使用转录因子富集分析选择miRNA,并使用miRDB、miRTarBase和TargetScan过滤miRNA的靶mRNA。使用Cytoscape软件可视化miRNA和mRNA之间的网络并计算Hub基因。使用GO和KEGG途径分析调节网络中的mRNA。结果共选择21个miRNA和119个mRNA,重建由3个miRNA和3个mRNA组成的miRNA-mRNA网络。hsa-miR-199a-5p、hsa-miR-299-5p、hsa-miR-338-3p、NTNG1、SCN2A、TM6SF1被确定为关键的调节因子。结论发现了IPF发病机制中涉及的几个重要的Hub基因和miRNA,其中hsa-miR-199a-5p/NTNG1和hsa-miRV299-5p/SCN2A途径可能在IPF中起重要作用,可以帮助识别病因,并提供潜在的治疗靶点。
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张波涛;
袁雯;
刘晓艳;
钟久昌;
陈牧雷;
王红石;
王华光;
池洪杰
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摘要:
目的明确循环外泌体对高血压的影响,筛选出其中发挥关键作用的miRNA,探索其功能。方法提取自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)血浆外泌体注射入正常血压大鼠体内检测大鼠血压的变化;提取高血压患者及SHR血浆外泌体及外泌体RNA,RT-PCR验证挑选的8个miRNAs的表达变化;Western blot的方法检测人脐静结果SHR血浆外泌体可使SD大鼠的血压显著升高。miR-17-5p与miR-218-5p在高血压患者及SHR血浆外泌体(SHR-exos)中的表达明显升高。miR-17-5p抑制剂可以明显减弱SHR-exos升高血压的作用。在体外培养的HUVEC中,miR-17-5p可以下调LKB1和PTEN的表达。结论SHR血浆外泌体可使正常大鼠血压显著升高,miR-17-5p可能是其中发挥关键作用的miRNA。exo-miR-17-5p可能是通过对LKB1/PTEN信号的调控实现促进高血压发生发展作用的。
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王路;
王魁;
银花;
叶莎;
王娜
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摘要:
目的评估血清外泌体中miR-125b、miR-21、miR-122及miR-375诊断肝细胞癌(HCC)的效能,预测miR-125b潜在调控的靶基因。方法以体检健康者(健康人对照组)50例、HCC患者组46例和慢性乙型肝炎(CHB)患者组11例为研究对象。收集各研究对象的临床资料,包括年龄、性别、甲胎蛋白(AFP)、α-L-岩藻糖苷酶(AFU)等指标。采集各组血液标本,分离纯化血清外泌体并鉴定,应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测各组血清外泌体miR-125b、miR-21、miR-122及miR-375的表达水平。ROC曲线评估各指标单独及联合检测对肝癌的诊断效能。基于miRTarBase.V8、TarBase.V8、miRecords数据库预测miR-125b潜在靶基因,通过clusterProfiler软件分析,间接推测其可能参与的信号转导通路。结果提取纯化的血清样本中含有大量外泌体颗粒。RT-qPCR检测结果表明,与健康人对照组及CHB组相比,HCC组miR-125b、miR-21和miR-122的表达水平显著上调(P<0.05)。ROC曲线分析结果表明,miR-125b、miR-21、miR-122、miR-375、AFP和AFU筛查HCC的AUC_(ROC)分别为0.900、0.857、0.827、0.597、0.881和0.733,而miR-125b+AFP,miR-125b+miR-21,miR-125b+miR-21+AFP联合检测可将诊断效能分别提高至0.927、0.919和0.941。经上述数据库预测出9个与miR-125b具有潜在调控的靶基因,分别为TP53INP1、BAK1、CEBPG、E2F3、ERBB2、ERBB3、NTRK3、SMO和SGPL1。其中,clusterProfiler软件推测结果表明,miR-125b直接或间接参与p53信号通路、癌症中的miRNA、细胞衰老及转化生长因子(TGF)-β信号通路等。结论miR-125b、miR-21和miR-122在HCC患者血清外泌体中的表达水平升高,且与AFP联合检测可提高筛查效能,有望成为HCC诊断的候选标志物。
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李鑫;
孙茂苍;
崔山龙
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摘要:
目的探讨微小RNA-195(miR-195)对寡聚态β样淀粉蛋白(Aβ)1-42诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞(PC12细胞)炎症反应和凋亡的作用机制。方法本研究起止时间为2018年3—11月。PC12细胞购自美国模式培养物保藏中心。运用25μmol/mL的Aβ1-42处理PC12细胞建立神经细胞损伤模型;将PC12细胞分为Aβ1-42+miR-con组、Aβ1-42+miR-195组、Aβ1-42+si-con组、Aβ1-42+ATP酶阳离子转运13A2小干扰RNA(si-ATP13A2)组、miR-con组、miR-195组、Aβ1-42+miR-195+pcDNA组、Aβ1-42+miR-195+ATP13A2过表达质粒(pcDNA-ATP13A2)组。实时定量PCR检测细胞中miR-195、ATP13A2的mRNA的表达;Western blotting检测细胞中ATP13A2的蛋白表达;酶联免疫吸附实验检测细胞中白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量;噻唑蓝法、流式细胞术检测细胞的增殖和凋亡;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞中miR-195与ATP13A2的结合力。结果与对照组相比,Aβ1-42可显著下调PC12细胞中miR-195的表达[(0.22±0.04)比(1.01±0.06)],上调ATP13A2的表达[(0.78±0.08)比(0.41±0.05)];过表达miR-195可促进PC12细胞的增殖[(76.59±8.44)%比(52.73±5.82)%],抑制凋亡[(17.76±1.87)%比(26.56±2.12)%],抑制IL-1β[(875.28±118.47)pg/mL比(1753.84±215.92)pg/mL]、TNF-α[(185.32±23.27)pg/mL比(268.75±27.67)pg/mL]的表达;沉默ATP13A2可促进PC12细胞的增殖[(78.59±9.76)%比(53.59±6.46)%],抑制凋亡[(18.03±1.82)%比(24.73±2.55)%],抑制IL-1β[(953.64±105.28)pg/mL比(1880.77±238.49)pg/mL]、TNF-α[(152.81±22.46)pg/mL比(258.40±28.16)pg/mL]的表达。miR-195可抑制野生型ATP13A2细胞的荧光活性,且可负向调控ATP13A2的表达;过表达ATP13A2可逆转miR-195对Aβ1-42处理的PC12细胞的抗炎、增殖促进和凋亡抑制作用。结论miR-195可抑制寡聚态Aβ1-42诱导PC12细胞的炎症反应和凋亡,其机制与靶向ATP13A2有关,将可为阿尔茨海默病的治疗提供新靶点。
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徐峥;
谢松松;
阿孜古丽·阿布来提;
谭风雷;
张跃新
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摘要:
目的探讨急、慢性期布鲁菌病(简称布病)患者miRNA-155、miRNA-21及Th1、Th2、Th17相关细胞因子的表达差异,了解布病的免疫特点。方法收集急、慢性布病患者73例以及健康对照者30例血标本,采用CBA法测定其Th1类细胞因子(IFN-γ、TNF-α、IL-18)、Th2类细胞因子(IL-10、IL-33)以及Th17类细胞因子(IL-17)表达水平,同时对其中30例急、慢性布病患者以及15例健康对照者采用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)法检测其血标本miRNA-155和miRNA-21的表达情况。采集上述研究对象实验室检查(ESR、CRP)结果,对以上各结果进行统计学分析。结果急、慢性组Th1类细胞因子(IFN-γ、TNF-α、IL-18)、Th2类细胞因子(IL-10、IL-33)和Th17细胞因子(IL-17)表达水平均升高(P均<0.05);其中,Th1和Th17类细胞因子在急性期升高显著,Th2类细胞因子在慢性期增高显著(P均<0.05);急、慢性组miRNA-155和miRNA-21表达均上升(P均<0.05);miRNA-155在急性组升高显著;IL-18的表达与IFN-γ、TNF-α表达呈正相关,IL-33的表达与IL-10表达呈正相关;miRNA-155表达与Th1、Th17类细胞因子以及CRP、ESR均呈正相关。结论患者感染布鲁菌后,机体免疫应答在急、慢性期存在差异,急性期以miRNA-155、Th1和Th17类细胞因子表达为主,慢性期以Th2类细胞因子表达为主;miRNA155与Th1、Th17类细胞因子表达以及布病炎症水平(CRP、ESR)密切关联,推测miRNAs可能影响Th细胞的分化,进而参与布病的发生和发展。
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何豆豆;
孙晓彤(审校);
张慧芳;
张春阳
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摘要:
子痫前期(pre-eclampsia,PE)的发病机制至今尚未明确,而外泌体为PE发病机制的研究提供了新的方向。有研究表明外泌体在人体中广泛存在,红细胞、上皮细胞、间充质干细胞和胎盘细胞等细胞均可分泌外泌体。而这些不同来源外泌体中的微小RNA(microRNA,miRNA)被证明可以在PE的发生及预防、治疗中发挥一定的作用,例如胎盘来源外泌体中的miRNA可能与PE的发生息息相关,脐带血来源外泌体中的miRNA可能与胚胎发育有一定关系,而间充质干细胞来源外泌体中的miRNA则可能在PE的治疗中发挥重要作用。因此,探索这些miRNA及其外泌体来源对于明确PE的发病机制及靶向治疗具有重要意义。
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卢旺;
白丽;
陈煜
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摘要:
巨噬细胞作为一种重要的先天性免疫细胞,广泛参与多种肝病的炎症反应、免疫调节、免疫耐受等过程。外泌体(exosomes,Exos)作为具有双层膜结构的天然载体,可富集多种生物活性物质,实现维持稳态、细胞间物质及信号传递、抗原提呈等功能。其中,Exos携带的微小RNAs(miRNAs)通过调控下游信号通路在多种肝病中发挥关键作用,已逐渐成为新兴的重要非侵入性肝病检测手段和治疗靶点。本文就巨噬细胞及其来源Exos携带的miRNAs在肝病中的作用进行综述,希望为肝病的临床诊断及治疗提供新靶点和新思路。
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安甜;
姜广建
- 《2016全国中医药生物化学与分子生物学年会》
| 2016年
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摘要:
本文就微小RNAs在2型糖尿病及其并发症中的研究进展进行综述.糖尿病及其并发症己经成为威胁人民健康的重要非传染疾病之一,在中国尤其以2型糖尿病为主.它们的发生可能涉及到多重复杂因素,然而,具体的发病机制尚不明确.微小RNAs(miRNA)是一组长约22个核苷酸,非编码的小RNA,他们参与调节细胞的生长发育、分化、增殖和凋亡等.最近,越来越多研究表明,微小RNA在2型糖尿病及其并发症的发病机制中起着重要作用。
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安甜;
姜广建
- 《2016全国中医药生物化学与分子生物学年会》
| 2016年
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摘要:
本文就微小RNAs在2型糖尿病及其并发症中的研究进展进行综述.糖尿病及其并发症己经成为威胁人民健康的重要非传染疾病之一,在中国尤其以2型糖尿病为主.它们的发生可能涉及到多重复杂因素,然而,具体的发病机制尚不明确.微小RNAs(miRNA)是一组长约22个核苷酸,非编码的小RNA,他们参与调节细胞的生长发育、分化、增殖和凋亡等.最近,越来越多研究表明,微小RNA在2型糖尿病及其并发症的发病机制中起着重要作用。
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安甜;
姜广建
- 《2016全国中医药生物化学与分子生物学年会》
| 2016年
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摘要:
本文就微小RNAs在2型糖尿病及其并发症中的研究进展进行综述.糖尿病及其并发症己经成为威胁人民健康的重要非传染疾病之一,在中国尤其以2型糖尿病为主.它们的发生可能涉及到多重复杂因素,然而,具体的发病机制尚不明确.微小RNAs(miRNA)是一组长约22个核苷酸,非编码的小RNA,他们参与调节细胞的生长发育、分化、增殖和凋亡等.最近,越来越多研究表明,微小RNA在2型糖尿病及其并发症的发病机制中起着重要作用。
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安甜;
姜广建
- 《2016全国中医药生物化学与分子生物学年会》
| 2016年
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摘要:
本文就微小RNAs在2型糖尿病及其并发症中的研究进展进行综述.糖尿病及其并发症己经成为威胁人民健康的重要非传染疾病之一,在中国尤其以2型糖尿病为主.它们的发生可能涉及到多重复杂因素,然而,具体的发病机制尚不明确.微小RNAs(miRNA)是一组长约22个核苷酸,非编码的小RNA,他们参与调节细胞的生长发育、分化、增殖和凋亡等.最近,越来越多研究表明,微小RNA在2型糖尿病及其并发症的发病机制中起着重要作用。
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安甜;
姜广建
- 《2016全国中医药生物化学与分子生物学年会》
| 2016年
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摘要:
本文就微小RNAs在2型糖尿病及其并发症中的研究进展进行综述.糖尿病及其并发症己经成为威胁人民健康的重要非传染疾病之一,在中国尤其以2型糖尿病为主.它们的发生可能涉及到多重复杂因素,然而,具体的发病机制尚不明确.微小RNAs(miRNA)是一组长约22个核苷酸,非编码的小RNA,他们参与调节细胞的生长发育、分化、增殖和凋亡等.最近,越来越多研究表明,微小RNA在2型糖尿病及其并发症的发病机制中起着重要作用。
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Wei-xian Chen;
陈伟贤;
Meng-meng Lv;
吕萌萌;
Lin Chen;
陈琳;
Shan-liang Zhong;
钟山亮;
Jian-hua Zhao;
赵建华;
Jin-hai Tang;
唐金海
- 《2014华东胸部肿瘤论坛暨第七届浙江省胸部肿瘤论坛》
| 2014年
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摘要:
目的:多西紫杉醇是目前乳腺癌临床治疗的一线药物.由于耐药问题不可避免地发生,患者常常对化疗不敏感,进而导致乳腺癌复发转移.近期研究表明微泡能作为一种新通讯媒介在不同亚群的肿瘤细胞之间交换遗传物质,参与耐药性传递而促进肿瘤发展恶化,并且可能与包裹的生物活性物质如microRNAs(miRNAs)有关.本实验旨在探讨耐药乳腺癌细胞来源的微泡是否携带选择性的miRNAs,能否传递miRNAs改变敏感细胞的化疗耐受性.rn 方法:通过超速离心法从乳腺癌细胞敏感株(MCF-7/S)和多西紫杉醇耐药株(MCF-7/Doc)的培养上清中分离微泡(S/exo和D/exo),并由透射电镜鉴定形态.提取细胞和对应微泡的总RNA后,行微阵列和聚合酶链式反应检测miRNAs表达谱.利用重组慢病毒载体构建稳定表达绿色荧光蛋白的敏感株(GFP-MCF-7/S),与PKH26红色染料标记的微泡共育后,流式细胞仪和共聚焦显微镜观察摄取速度,同时比较不同微泡处理后引起的受体细胞内miRNAs改变.靶基因预测和通路富集工具评估两种微泡内miRNAs的生物学功能.微泡共育实验和miRNA模拟物转染实验分析D/exo对GFP-MCF-7/S耐药性和胞内基因的影响.rn 结果:与S/exo类似,D/exo也是圆形或椭圆形的膜性囊泡,大小在30~100nm之间.层次聚类和相似性分析提示两种微泡与其来源的细胞有共同表达的miRNAs;一些miRNAs在微泡内积累而无法在细胞中检测到,部分miRNAs保留在细胞内而不分泌至微泡中.共聚焦显微镜观察发现PKH26红染的微泡不仅黏附至GFP-MCF-7/S表面,还能被后者吞没和内在化;流式细胞检测呈现动态的吸收过程.此外,随着微泡的不断摄取,miRNAs表达在GFP-MCF-7/S中逐渐上调;微泡内高水平的miRNAs传递效率较高,相对低含量的miRNAs在受体细胞内则积累较慢.靶基因预测和通路分析显示D/exo内最高表达的20个miRNAs参与了肿瘤发病、细胞周期调控、MAPK和TGF-1β信号通路等与耐药相关的生物学进程.微泡共育实验证实D/exo较S/exo能够显著降低多西紫杉醇诱导的GFP-MCF-7/S凋亡并同时增加存活率.最后,miRNA模拟物转染实验表明富含miR-222和miR-23a的D/exo可以调节GFP-MCF-7/S内的基因表达.rn 结论:耐药乳腺癌细胞能够通过释放微泡传递耐药性至敏感细胞,并且该效应可能与细胞间横向传递的特异性miRNAs有关.
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Wei-xian Chen;
陈伟贤;
Meng-meng Lv;
吕萌萌;
Lin Chen;
陈琳;
Shan-liang Zhong;
钟山亮;
Jian-hua Zhao;
赵建华;
Jin-hai Tang;
唐金海
- 《2014华东胸部肿瘤论坛暨第七届浙江省胸部肿瘤论坛》
| 2014年
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摘要:
目的:多西紫杉醇是目前乳腺癌临床治疗的一线药物.由于耐药问题不可避免地发生,患者常常对化疗不敏感,进而导致乳腺癌复发转移.近期研究表明微泡能作为一种新通讯媒介在不同亚群的肿瘤细胞之间交换遗传物质,参与耐药性传递而促进肿瘤发展恶化,并且可能与包裹的生物活性物质如microRNAs(miRNAs)有关.本实验旨在探讨耐药乳腺癌细胞来源的微泡是否携带选择性的miRNAs,能否传递miRNAs改变敏感细胞的化疗耐受性.rn 方法:通过超速离心法从乳腺癌细胞敏感株(MCF-7/S)和多西紫杉醇耐药株(MCF-7/Doc)的培养上清中分离微泡(S/exo和D/exo),并由透射电镜鉴定形态.提取细胞和对应微泡的总RNA后,行微阵列和聚合酶链式反应检测miRNAs表达谱.利用重组慢病毒载体构建稳定表达绿色荧光蛋白的敏感株(GFP-MCF-7/S),与PKH26红色染料标记的微泡共育后,流式细胞仪和共聚焦显微镜观察摄取速度,同时比较不同微泡处理后引起的受体细胞内miRNAs改变.靶基因预测和通路富集工具评估两种微泡内miRNAs的生物学功能.微泡共育实验和miRNA模拟物转染实验分析D/exo对GFP-MCF-7/S耐药性和胞内基因的影响.rn 结果:与S/exo类似,D/exo也是圆形或椭圆形的膜性囊泡,大小在30~100nm之间.层次聚类和相似性分析提示两种微泡与其来源的细胞有共同表达的miRNAs;一些miRNAs在微泡内积累而无法在细胞中检测到,部分miRNAs保留在细胞内而不分泌至微泡中.共聚焦显微镜观察发现PKH26红染的微泡不仅黏附至GFP-MCF-7/S表面,还能被后者吞没和内在化;流式细胞检测呈现动态的吸收过程.此外,随着微泡的不断摄取,miRNAs表达在GFP-MCF-7/S中逐渐上调;微泡内高水平的miRNAs传递效率较高,相对低含量的miRNAs在受体细胞内则积累较慢.靶基因预测和通路分析显示D/exo内最高表达的20个miRNAs参与了肿瘤发病、细胞周期调控、MAPK和TGF-1β信号通路等与耐药相关的生物学进程.微泡共育实验证实D/exo较S/exo能够显著降低多西紫杉醇诱导的GFP-MCF-7/S凋亡并同时增加存活率.最后,miRNA模拟物转染实验表明富含miR-222和miR-23a的D/exo可以调节GFP-MCF-7/S内的基因表达.rn 结论:耐药乳腺癌细胞能够通过释放微泡传递耐药性至敏感细胞,并且该效应可能与细胞间横向传递的特异性miRNAs有关.
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Wei-xian Chen;
陈伟贤;
Meng-meng Lv;
吕萌萌;
Lin Chen;
陈琳;
Shan-liang Zhong;
钟山亮;
Jian-hua Zhao;
赵建华;
Jin-hai Tang;
唐金海
- 《2014华东胸部肿瘤论坛暨第七届浙江省胸部肿瘤论坛》
| 2014年
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摘要:
目的:多西紫杉醇是目前乳腺癌临床治疗的一线药物.由于耐药问题不可避免地发生,患者常常对化疗不敏感,进而导致乳腺癌复发转移.近期研究表明微泡能作为一种新通讯媒介在不同亚群的肿瘤细胞之间交换遗传物质,参与耐药性传递而促进肿瘤发展恶化,并且可能与包裹的生物活性物质如microRNAs(miRNAs)有关.本实验旨在探讨耐药乳腺癌细胞来源的微泡是否携带选择性的miRNAs,能否传递miRNAs改变敏感细胞的化疗耐受性.rn 方法:通过超速离心法从乳腺癌细胞敏感株(MCF-7/S)和多西紫杉醇耐药株(MCF-7/Doc)的培养上清中分离微泡(S/exo和D/exo),并由透射电镜鉴定形态.提取细胞和对应微泡的总RNA后,行微阵列和聚合酶链式反应检测miRNAs表达谱.利用重组慢病毒载体构建稳定表达绿色荧光蛋白的敏感株(GFP-MCF-7/S),与PKH26红色染料标记的微泡共育后,流式细胞仪和共聚焦显微镜观察摄取速度,同时比较不同微泡处理后引起的受体细胞内miRNAs改变.靶基因预测和通路富集工具评估两种微泡内miRNAs的生物学功能.微泡共育实验和miRNA模拟物转染实验分析D/exo对GFP-MCF-7/S耐药性和胞内基因的影响.rn 结果:与S/exo类似,D/exo也是圆形或椭圆形的膜性囊泡,大小在30~100nm之间.层次聚类和相似性分析提示两种微泡与其来源的细胞有共同表达的miRNAs;一些miRNAs在微泡内积累而无法在细胞中检测到,部分miRNAs保留在细胞内而不分泌至微泡中.共聚焦显微镜观察发现PKH26红染的微泡不仅黏附至GFP-MCF-7/S表面,还能被后者吞没和内在化;流式细胞检测呈现动态的吸收过程.此外,随着微泡的不断摄取,miRNAs表达在GFP-MCF-7/S中逐渐上调;微泡内高水平的miRNAs传递效率较高,相对低含量的miRNAs在受体细胞内则积累较慢.靶基因预测和通路分析显示D/exo内最高表达的20个miRNAs参与了肿瘤发病、细胞周期调控、MAPK和TGF-1β信号通路等与耐药相关的生物学进程.微泡共育实验证实D/exo较S/exo能够显著降低多西紫杉醇诱导的GFP-MCF-7/S凋亡并同时增加存活率.最后,miRNA模拟物转染实验表明富含miR-222和miR-23a的D/exo可以调节GFP-MCF-7/S内的基因表达.rn 结论:耐药乳腺癌细胞能够通过释放微泡传递耐药性至敏感细胞,并且该效应可能与细胞间横向传递的特异性miRNAs有关.
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Wei-xian Chen;
陈伟贤;
Meng-meng Lv;
吕萌萌;
Lin Chen;
陈琳;
Shan-liang Zhong;
钟山亮;
Jian-hua Zhao;
赵建华;
Jin-hai Tang;
唐金海
- 《2014华东胸部肿瘤论坛暨第七届浙江省胸部肿瘤论坛》
| 2014年
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摘要:
目的:多西紫杉醇是目前乳腺癌临床治疗的一线药物.由于耐药问题不可避免地发生,患者常常对化疗不敏感,进而导致乳腺癌复发转移.近期研究表明微泡能作为一种新通讯媒介在不同亚群的肿瘤细胞之间交换遗传物质,参与耐药性传递而促进肿瘤发展恶化,并且可能与包裹的生物活性物质如microRNAs(miRNAs)有关.本实验旨在探讨耐药乳腺癌细胞来源的微泡是否携带选择性的miRNAs,能否传递miRNAs改变敏感细胞的化疗耐受性.rn 方法:通过超速离心法从乳腺癌细胞敏感株(MCF-7/S)和多西紫杉醇耐药株(MCF-7/Doc)的培养上清中分离微泡(S/exo和D/exo),并由透射电镜鉴定形态.提取细胞和对应微泡的总RNA后,行微阵列和聚合酶链式反应检测miRNAs表达谱.利用重组慢病毒载体构建稳定表达绿色荧光蛋白的敏感株(GFP-MCF-7/S),与PKH26红色染料标记的微泡共育后,流式细胞仪和共聚焦显微镜观察摄取速度,同时比较不同微泡处理后引起的受体细胞内miRNAs改变.靶基因预测和通路富集工具评估两种微泡内miRNAs的生物学功能.微泡共育实验和miRNA模拟物转染实验分析D/exo对GFP-MCF-7/S耐药性和胞内基因的影响.rn 结果:与S/exo类似,D/exo也是圆形或椭圆形的膜性囊泡,大小在30~100nm之间.层次聚类和相似性分析提示两种微泡与其来源的细胞有共同表达的miRNAs;一些miRNAs在微泡内积累而无法在细胞中检测到,部分miRNAs保留在细胞内而不分泌至微泡中.共聚焦显微镜观察发现PKH26红染的微泡不仅黏附至GFP-MCF-7/S表面,还能被后者吞没和内在化;流式细胞检测呈现动态的吸收过程.此外,随着微泡的不断摄取,miRNAs表达在GFP-MCF-7/S中逐渐上调;微泡内高水平的miRNAs传递效率较高,相对低含量的miRNAs在受体细胞内则积累较慢.靶基因预测和通路分析显示D/exo内最高表达的20个miRNAs参与了肿瘤发病、细胞周期调控、MAPK和TGF-1β信号通路等与耐药相关的生物学进程.微泡共育实验证实D/exo较S/exo能够显著降低多西紫杉醇诱导的GFP-MCF-7/S凋亡并同时增加存活率.最后,miRNA模拟物转染实验表明富含miR-222和miR-23a的D/exo可以调节GFP-MCF-7/S内的基因表达.rn 结论:耐药乳腺癌细胞能够通过释放微泡传递耐药性至敏感细胞,并且该效应可能与细胞间横向传递的特异性miRNAs有关.
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