PCR诊断

摘要： 猫泛白细胞减少症是猫的一种急性高度接触性传染病,发病率与死亡率均较高,且对病猫多器官多系统都造成不可逆的巨大伤害,严重危害猫的健康。本论文对一例典型猫泛白细胞减少症的诊断与治疗进行了详述,即患病幼猫出现精神萎靡、呕吐拉稀和体温升高等症状,经过血常规、生化检查及胶体金和PCR鉴定,确诊感染猫细小病毒,经过6 d的对症治疗及特异性治疗后,呕吐拉稀症状消失,体温与精神恢复正常,愈后良好,为今后猫泛白细胞减少症的诊断和治疗提供临床依据。

摘要： 黑龙江省大兴安岭市周边某牛场发生了肉牛突然死亡情况,为了确定是何种病因,对病死牛只进行病理剖检和无菌采集病料。对采集的病料进行细离培养,通过革兰氏染色、PCR检测及动物试验进行鉴定。为了给临床用药提供依据,对该病原菌进行药敏筛选。结果表明该致病菌对头孢唑林和环丙沙星敏感,对庆大霉素中敏,对多西环素低敏。经环丙沙星和头孢唑林治疗后,病情得到了控制。

摘要： 2021年6月,海南一猪场发生疑似猪细小病毒(PPV)感染的疾病。经临床观察,结合病理剖检,同时用病毒PCR方法诊断和分离培养进行病原鉴定。发现PK-15细胞进行PPV分离培养后可见典型的细胞病变;PCR扩增取得PPV VP2基因片段,通过PCR进一步鉴定及基因测序,使用BLAST分析后,最终确诊为PPV。该猪场对症采取了综合防治措施,取得了较好的临床效果。

摘要： 鸡的安卡拉病是由I群腺病毒引起的急性高度致死性传染病,死亡迅速,流行面广,给养禽业造成巨大的经济损失,严重影响养禽业的健康发展。本病例从流行情况、病理变化、实验室检测确诊为肉鸡安卡拉病,通过增强机体免疫力治疗方案,最终治愈,降低了养殖户的经济损失。

摘要： 病原PCR(Polymerase Chain Reaction)诊断具有快速、灵敏、高修改灵活性等优势,在传染病控制、农业病害防治和食品安全等领域发挥着重要作用.核酸分离作为分子诊断技术的关键步骤,影响着PCR诊断的整体效率、检测灵敏度和准确性,是PCR诊断局限于实验室使用的关键制约因素之一.核酸固相分离可以避免传统液相分离中相分离不完全、污染严重、样品需求量高、繁琐等弊端,一直是高通量核酸提取过程研究的热点.通过综述近年来核酸固相分离方法的研究进展,通过总结目前具有核酸结合功能的材料开发及与核酸相互作用的机制,概述磁力分离与非磁力固相分离发展现状及在病原PCR诊断应用中的进展,阐述现有核酸固相分离技术存在的局限性,进而探讨核酸固相分离今后的研究方向.

摘要： 为了确诊齐齐哈尔某鹅场52日龄鹅的发病原因,本实验根据临床症状和病理解剖情况,采集发病鹅的法氏囊、脾脏和胸腺制备模板,根据发表的鹅圆环病毒(GoCV)基因组序列,利用PCR技术进行了GoCV诊断,扩增到了大小为552bp目的条带。结果表明:该鹅场GoCV检测为阳性。

摘要： 为了确诊齐齐哈尔某鹅场52日龄鹅的发病原因,本实验根据临床症状和病理解剖情况,采集发病鹅的法氏囊、脾脏和胸腺制备模板,根据发表的鹅圆环病毒(GoCV)基因组序列,利用PCR技术进行了GoCV诊断,扩增到了大小为552 bp目的条带.结果 表明:该鹅场GoCV检测为阳性.

摘要： 为了给东北虎细小病毒感染病例的临床诊断和治疗提供借鉴,本试验通过临床诊断、血常规检查、病原PCR检测、影像学检查、组织器官剖检、病理组织切片观察等方法,分析1例东北虎细小病毒群发感染病例,并采用抗病毒、调节免疫、止血止吐对症治疗、控制继发感染、营养支持和调节电解质平衡等疗法对该东北虎及其他患病东北虎大群实施治疗.结果 表明,通过及时确诊、综合治疗、细心护理,能促进感染细小病毒的东北虎群尽早恢复正常,病情得到有效控制.

摘要： 根据GenBank已发表的鼻气管鸟杆菌(Ornithobacterium rhinotracheale，ORT)16S rRNA基因序列，设计一对可扩增671bp目的片段的引物，建立了检测ORT的PcR方法。该方法能在ORT参考菌株中扩增到特异性片段，而鸡大肠杆菌、副鸡嗜血杆菌、鸡白痢沙门氏菌、禽多杀性巴氏杆菌的扩增结果均为阴性；敏感性试验表明该方法最低检出限量为90pg DNA。表明所建立的PCR方法具有敏感性高、特异性强的特点。利用建立的方法对分离菌株进行检测，结果2株为阳性。该研究为鼻气管鸟杆菌的诊断提供了一种良好的方法。

摘要： 根据GenBank已发表的鼻气管鸟杆菌(Ornithobacterium rhinotracheale，ORT)16S rRNA基因序列，设计一对可扩增671bp目的片段的引物，建立了检测ORT的PcR方法。该方法能在ORT参考菌株中扩增到特异性片段，而鸡大肠杆菌、副鸡嗜血杆菌、鸡白痢沙门氏菌、禽多杀性巴氏杆菌的扩增结果均为阴性；敏感性试验表明该方法最低检出限量为90pg DNA。表明所建立的PCR方法具有敏感性高、特异性强的特点。利用建立的方法对分离菌株进行检测，结果2株为阳性。该研究为鼻气管鸟杆菌的诊断提供了一种良好的方法。

摘要： 根据GenBank已发表的鼻气管鸟杆菌(Ornithobacterium rhinotracheale，ORT)16S rRNA基因序列，设计一对可扩增671bp目的片段的引物，建立了检测ORT的PcR方法。该方法能在ORT参考菌株中扩增到特异性片段，而鸡大肠杆菌、副鸡嗜血杆菌、鸡白痢沙门氏菌、禽多杀性巴氏杆菌的扩增结果均为阴性；敏感性试验表明该方法最低检出限量为90pg DNA。表明所建立的PCR方法具有敏感性高、特异性强的特点。利用建立的方法对分离菌株进行检测，结果2株为阳性。该研究为鼻气管鸟杆菌的诊断提供了一种良好的方法。

摘要： 根据GenBank已发表的鼻气管鸟杆菌(Ornithobacterium rhinotracheale，ORT)16S rRNA基因序列，设计一对可扩增671bp目的片段的引物，建立了检测ORT的PcR方法。该方法能在ORT参考菌株中扩增到特异性片段，而鸡大肠杆菌、副鸡嗜血杆菌、鸡白痢沙门氏菌、禽多杀性巴氏杆菌的扩增结果均为阴性；敏感性试验表明该方法最低检出限量为90pg DNA。表明所建立的PCR方法具有敏感性高、特异性强的特点。利用建立的方法对分离菌株进行检测，结果2株为阳性。该研究为鼻气管鸟杆菌的诊断提供了一种良好的方法。

摘要： 根据GenBank登录的传染性喉气管炎病毒(ILTV)的TK基因序列设计并合成l对特异性引物,以ILTV疫苗株DNA为模板,建立了检测ILTV TK基因的PCR方法。应用该方法能从临床分离毒株和疫苗株中扩增到长为427 bp的目的片段;但不能从新城疫病毒(NDV)、传染性法氏囊病毒(1BDV)、禽呼肠孤病毒(ARV)、减蛋综合征病毒(EDSV)、}19亚型禽流感病毒(H9-AIV)、传染性支气管炎病毒(IBV)、大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌等病原中扩增出阳性条带;敏感性试验表明其DNA最小检出量为4．9 ng;应用该方法和病毒分离法对2份临床病例和人工感染鸡的检测,两者符合率为100％。上述结果表明该PCR方法具有良好的特异性和敏感性,可用于传染性喉气管炎病毒鉴定和临床诊断。

摘要： 根据GenBank登录的传染性喉气管炎病毒(ILTV)的TK基因序列设计并合成l对特异性引物,以ILTV疫苗株DNA为模板,建立了检测ILTV TK基因的PCR方法。应用该方法能从临床分离毒株和疫苗株中扩增到长为427 bp的目的片段;但不能从新城疫病毒(NDV)、传染性法氏囊病毒(1BDV)、禽呼肠孤病毒(ARV)、减蛋综合征病毒(EDSV)、}19亚型禽流感病毒(H9-AIV)、传染性支气管炎病毒(IBV)、大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌等病原中扩增出阳性条带;敏感性试验表明其DNA最小检出量为4．9 ng;应用该方法和病毒分离法对2份临床病例和人工感染鸡的检测,两者符合率为100％。上述结果表明该PCR方法具有良好的特异性和敏感性,可用于传染性喉气管炎病毒鉴定和临床诊断。

摘要： 根据GenBank登录的传染性喉气管炎病毒(ILTV)的TK基因序列设计并合成l对特异性引物,以ILTV疫苗株DNA为模板,建立了检测ILTV TK基因的PCR方法。应用该方法能从临床分离毒株和疫苗株中扩增到长为427 bp的目的片段;但不能从新城疫病毒(NDV)、传染性法氏囊病毒(1BDV)、禽呼肠孤病毒(ARV)、减蛋综合征病毒(EDSV)、}19亚型禽流感病毒(H9-AIV)、传染性支气管炎病毒(IBV)、大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌等病原中扩增出阳性条带;敏感性试验表明其DNA最小检出量为4．9 ng;应用该方法和病毒分离法对2份临床病例和人工感染鸡的检测,两者符合率为100％。上述结果表明该PCR方法具有良好的特异性和敏感性,可用于传染性喉气管炎病毒鉴定和临床诊断。

摘要： 根据GenBank登录的传染性喉气管炎病毒(ILTV)的TK基因序列设计并合成l对特异性引物,以ILTV疫苗株DNA为模板,建立了检测ILTV TK基因的PCR方法。应用该方法能从临床分离毒株和疫苗株中扩增到长为427 bp的目的片段;但不能从新城疫病毒(NDV)、传染性法氏囊病毒(1BDV)、禽呼肠孤病毒(ARV)、减蛋综合征病毒(EDSV)、}19亚型禽流感病毒(H9-AIV)、传染性支气管炎病毒(IBV)、大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌等病原中扩增出阳性条带;敏感性试验表明其DNA最小检出量为4．9 ng;应用该方法和病毒分离法对2份临床病例和人工感染鸡的检测,两者符合率为100％。上述结果表明该PCR方法具有良好的特异性和敏感性,可用于传染性喉气管炎病毒鉴定和临床诊断。

摘要： 根据GenBank登录的传染性喉气管炎病毒(ILTV)的TK基因序列设计并合成l对特异性引物,以ILTV疫苗株DNA为模板,建立了检测ILTV TK基因的PCR方法。应用该方法能从临床分离毒株和疫苗株中扩增到长为427 bp的目的片段;但不能从新城疫病毒(NDV)、传染性法氏囊病毒(1BDV)、禽呼肠孤病毒(ARV)、减蛋综合征病毒(EDSV)、}19亚型禽流感病毒(H9-AIV)、传染性支气管炎病毒(IBV)、大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌等病原中扩增出阳性条带;敏感性试验表明其DNA最小检出量为4．9 ng;应用该方法和病毒分离法对2份临床病例和人工感染鸡的检测,两者符合率为100％。上述结果表明该PCR方法具有良好的特异性和敏感性,可用于传染性喉气管炎病毒鉴定和临床诊断。

摘要： 根据GenBank登录的传染性喉气管炎病毒(ILTV)的TK基因序列设计并合成l对特异性引物,以ILTV疫苗株DNA为模板,建立了检测ILTV TK基因的PCR方法。应用该方法能从临床分离毒株和疫苗株中扩增到长为427 bp的目的片段;但不能从新城疫病毒(NDV)、传染性法氏囊病毒(1BDV)、禽呼肠孤病毒(ARV)、减蛋综合征病毒(EDSV)、}19亚型禽流感病毒(H9-AIV)、传染性支气管炎病毒(IBV)、大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌等病原中扩增出阳性条带;敏感性试验表明其DNA最小检出量为4．9 ng;应用该方法和病毒分离法对2份临床病例和人工感染鸡的检测,两者符合率为100％。上述结果表明该PCR方法具有良好的特异性和敏感性,可用于传染性喉气管炎病毒鉴定和临床诊断。

摘要： 本发明提供一种猪急性腹泻综合征冠状病毒与德尔塔冠状病毒RT‑PCR诊断试剂盒及其检测方法，包括：反转录混合液：SADSCoV‑1R下游引物、PDCoV‑1R下游引物、AMV反转录酶和酶抑制剂；一扩混合液：SADSCoV‑1F上游引物、SADSCoV‑1R下游引物、PDCoV‑1F上游引物、PDCoV‑1R下游引物和DNA聚合酶；二扩混合液：SADSCoV‑2F上游引物、SADSCoV‑2R下游引物、PDCoV‑2F上游引物、PDCoV‑2R下游引物和DNA聚合酶；阴、阳性对照。该试剂盒灵敏度高、特异性好、稳定性高，能快速确诊并区分SADS‑CoV与PDCoV感染，其检测方法易于操作、方便快捷。

摘要： 本发明公开了一种猪星状病毒检测和分型富集多重PCR快速诊断试剂盒，包括5对猪星状病毒基因型特异性组合引物(CP)和1条通用引物(UP)；还包括PCR反应液、PCR标准品、阳性对照品、阴性对照品；PCR标准品由PAstV1标准品、PAstV2标准品、PAstV2标准品、PAstV3标准品、PAstV4标准品、PAstV5标准品组成。本发明还同时提供了试剂盒在富集多重PCR检测5种猪星状病毒基因型快速诊断中的应用。

摘要： 本发明公开了一种用于辅助诊断结核性胸膜炎的实时荧光定量PCR试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有用检测结核杆菌特异性小RNA片段(包括Mtb‑ms‑1和Mtb‑ms‑2)的引物和探针，其中Mtb‑ms‑1的序列如SEQ ID NO.1所示，Mtb‑ms‑2的序列如SEQ ID NO.2所示。本发明通过提取胸膜炎患者少量胸水的总RNA，将其中结核杆菌特异性小RNA片段逆转录为互补的cDNA，应用特异引物探针进行实时荧光定量聚合酶链反应检测，其诊断的敏感性、特异性均较高，能够显著地区分结核性胸膜炎和对照组，优于结核杆菌培养、抗酸涂片染色、DNA检测等诊断方法。

摘要： 本发明属于临床检测领域，公开了一种辅助诊断神经母细胞瘤的PCR检测试剂盒及检测has‑miR‑199a‑3p(以下简称miR‑199a‑3p)表达量的方法。本发明的试剂盒包括外泌体冲洗液及外泌体RNA提取试剂、miR‑199a‑3p特异性引物、miR‑199a‑3p反转录试剂、以及实时荧光定量PCR检测试剂。本发明的PCR检测试剂盒可以很好地检测神经母细胞瘤疑似患者血浆外泌体内miR‑199a‑3p表达量，并与正常进行对照，以判断miR‑199a‑3p表达的上调与否来辅助判断是否患有该肿瘤疾病。

摘要： 本发明涉及一种使用数字PCR进行产前诊断的方法，更具体地，涉及一种为诊断胎儿染色体非整倍性提供信息的方法，包括步骤：(a)从孕妇血液中提取DNA；(b)根据大小分级DNA，以获得具有1,000bp或更小的DNA；(c)使用步骤(b)获得的DNA、位于染色体上与染色体非整倍性无关的对照基因、位于染色体上与染色体非整倍性相关的靶基因进行数字PCR；(d)计算靶基因的定量数字PCR值与对照基因的定量数字PCR值的比率；和(e)当步骤(d)中计算的比例为0.70‑1.14时，确定胎儿的染色体数目是正常的。

摘要： 本发明提供了一种基于互补介导完成的荧光PCR技术的非诊断目的的多重核酸检测方法，所述的检测方法采用以下引物和探针组合：（1）一条5’端标记有报告荧光基团的单标报告探针；（2）一条3’端标记有淬灭荧光基团的单标淬灭探针；（3）一条与目的序列匹配的无修饰普通引物。本发明具有如下技术效果：本发明提供了一种互补介导完成的荧光PCR技术，在传统Taqman荧光PCR技术基础上进行了改良，对于突变点密集的基因检测分型具有重要意义，具有成本低廉，准确度高，极大降低了假阴性率的优点，具有广泛的应用前景。

摘要： 本发明公开了一种禽副黏病毒PCR通用检测引物、诊断试剂及试剂盒，所述引物的序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。本发明可检测家禽和野鸟出现的所有血清型禽副黏病毒感染，电泳产生条带单一且明亮，结果易于观察。

摘要： 本实用新型公开一种用于分子诊断实验耗材的PCR反应管，涉及PCR反应管领域。该一种用于分子诊断实验耗材的PCR反应管，所述管架的上表面开设有多个管孔，所述反应管主体的上表面安装有两个第一插板，所述插接机构包括两个固定板，两个所述固定板均安装在反应管主体的外表面，分别安装在两个第一插板和两个固定板内，所述连接机构包括第二插板，所述第二插板安装在管盖的外表面，且连接机构通过第二插板安装在管盖的上。该一种用于分子诊断实验耗材的PCR反应管，便于拆卸组装，且管盖也可以拆卸组装，并且组装之后还可以单独使用。

摘要： 本实用新型涉及PCR仪技术领域，特别涉及一种快速荧光PCR诊断装置，包括检测仪本体，检测仪本体顶部的两侧分别固定连接有第一固定板和第二固定板，第一固定板与第二固定板相对的一侧之间转动连接有丝杆，丝杆的外表面螺纹连接有连接块，连接块的正面和背面均固定连接有固定柱，检测仪本体的顶部固定连接有两个立板，两个固定柱的一端分别与两个立板相对的一侧固定连接，两个立板相对的一侧均固定连接有固定杆，两个固定杆的一端均转动连接有顶杆，通过转把、丝杆、连接块、固定柱以及两个立板带动两个顶杆将安装盒顶起，安装盒带动显示屏根据不同光线及情况调节使用角度，提高设备使用灵活性，便于使用。

摘要： 本实用新型涉及扩增诊断技术领域，尤其涉及一种用于核酸提取扩增诊断一体机的PCR模块，包括升降门组件、升降温组件、电源组件、扫描组件和过滤组件；所述扫描组件设置于PCR模块的底部；所述扫描组件的左侧设置所述升降门组件，所述扫描组件右侧设置所述过滤组件；所述电源组件设置于所述扫描组件上方，所述电源组件左侧连接升降门组件，所述电源组件右侧连接过滤组件；所述升降温组件设置于升降门组件与扫描组件之间，并固定于扫描组件上；将PCR模块组成一个密闭的腔室。本实用新型可以防止核酸提取与PCR检测之间的交叉污染，实现PCR模块的自动化，提高工作效率。