病原分离

摘要： 为了解广西梧州市飞天奶牛场奶牛乳房炎的发病情况及病因,本试验采用快速诊断法(简称BMT)对该奶牛场180头奶牛共702个乳区进行了一次检测鉴定,并采集患临床型乳房炎奶牛乳样进行细菌分离鉴定及药敏试验。结果显示180头奶牛有85头患有乳房炎,其中8头为临床型乳房炎,77头为隐性型乳房炎,奶牛乳房炎的发病率占47.2%,其中临床型的乳房炎发病率为4.4%,隐性型乳房炎的阳性率达42.8%;702个乳区有251个为阳性乳区,乳区阳性率为35.8%;临床型乳房炎奶样检出细菌主要是葡萄球菌和链球菌,经过药敏试验发现葡萄球菌对氨苄青霉素不敏感;链球菌对链霉素不敏感,但庆大霉素和红霉素对两者均有较好的抑制作用。结果表明飞天奶牛场奶牛乳房炎发病率较高,主要的感染菌包括葡萄球菌和链球菌。结合该奶牛场的实际情况可以使用庆大霉素和红霉素对患乳房炎奶牛进行治疗。

摘要： 2021年6月,我县半城镇一名养殖户塘口的河蟹和小龙虾出现了死亡,塘口面积60亩,水草部分发黑腐烂,河蟹放养密度1400只/亩,塘口自带小龙虾,河蟹每天死亡50-60只,吃食明显减少,病蟹活力较差,小龙虾也有少量死亡。笔者对病蟹、病虾的肝胰腺进行了病原分离、16SrDNA序列分析鉴定,并开展药敏试验;对病虾、病蟹的鳃进行白斑综合病毒的提取及PCR法分子检测技术进行鉴定,采用对症施药、调水等方法成功处理病情。

摘要： 对湖北省利川市的黄连样品上的病原进行分离、纯化培养,采用生物学、分子学等方法对病原进行鉴定。结果表明,样品上的病害为黄连根腐病,引起病害的病原为镰刀菌,为当地黄连病害的防治提供了理论依据。

摘要： 对湖北省荆州市江陵县普济镇采集的花菜样品上的病原进行分离、纯化培养,采用生物学方法对病原进行分子鉴定。结果表明,样品上的病害为花菜菌核病,引起病害的病原为核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum),为当地花菜病害的防治提供了理论依据。

摘要： 以大理州"红阳"猕猴桃枝干为试材,采用田间调查法调查病原菌对其危害状况,对采集的10份病样采用常规组织分离法分离病原,单孢纯化法获得病原菌,采用形态和分子法鉴定病原种类,以期明确大理州"红阳"猕猴桃枝干病害的发生状况及危害病原.结果表明:大理州"红阳"猕猴桃枝干病害发生严重,病株率高达69.6％,5个采样点共分离得到15个菌株,其中以链格孢菌(Alternariaalternata)、厚坦镰刀菌(Fusarium chlamydos-porum)、小新壳梭孢菌(Neofusicoccum parvum)和间座壳属中一种(Diaporthe bohemiae)共4类病原菌出现频率最高,是优势种,分离率分别为55.6％、52.4％、49.8％和50.1％.利用柯赫氏法则对分离所得的所有菌株进行致病性测定,证实了优势菌株对猕猴桃茎杆的致病性,进一步明确了引起大理州猕猴桃茎杆的病原真菌.

摘要： 牦牛出血性败血症又被称为多杀性巴氏杆菌病,是由多杀性巴氏杆菌感染引发的一种急性热性传染性疾病。临床上患病牛主要表现为体温升高,采食欲望下降,咽喉、颈部、胸部、皮肤组织出现炎性水肿,随着病情进一步加重发展,患病人的呼吸频率加快,在时间内窒息死亡。在疾病防控前需要进行认真细致的病原检测,在明确具体病原的基础上筛选出敏感药物,然后采取对症措施进行治疗,只有这样才能短时间内控制病情,避免病原的进一步扩散蔓延。

摘要： 牦牛出血性败血症是发病率较高的一类细菌性传染性疾病,病原为多杀性巴氏杆菌.临床上主要表现为典型的败血症和组织器官出现出血性炎症.发病严重后,在患病牛的头部、颈部、咽喉、胸部等部位会出现局部性的炎性水肿,影响到牛群的正常采食,使得淘汰率和死亡率显著升高.养殖户在疾病治疗过程中,由于存在不科学的用药行为,使得病原的耐药性显著增强,多药物的防护效果逐渐变差.要想提高出血性败血症的治疗针对性,就需要在做好病原分离鉴定工作的基础上进行有效的药敏实验,筛选出敏感抗生素,然后做到对症治疗,缩短患病牛的发病周期,尽量降低死亡率.

摘要： 分离到一个杭州地区葡萄炭疽菌菌株,并研究了不同营养类型培养基、pH值、光照对其菌丝生长及分生孢子数量的影响.结果表明,葡萄糖比蔗糖更利于病原菌生长和产孢,该病菌最适在马铃薯葡萄糖培养基上生长,适宜pH是5.0～9.0,菌丝生长最适pH为7.0,pH 8.0最适合产孢.光照能促进菌丝的生长和分生孢子的产生.

摘要： 研究应用传统的实验室检验方法,在辽宁省抚顺地区发生猪链球菌病的31个乡镇,进行了分离培养、血清型鉴定、药敏实验、毒力测定实验.分离培养得到9株细菌株,均为2型,小鼠致病性试验的死亡率为100％.药敏试验中,抚顺地区分离的猪链球菌对氟甲砜霉素最为敏感,可以作为治疗猪链球菌病的药物.

摘要： 目的:大肠杆菌病和巴氏杆菌病是危害养鸡业的常见病,2种病混合感染病情会更加严重,导致的经济损失会更加巨大,及时正确地诊断该病是防治该病的前提,并且分离到的病原菌能为药敏试验、地方灭活疫苗、病原学研究提供菌株,为该病的正确治疗提供保障.方法:该试验通过流行病学调查、临床症状检查、剖检变化观察、病原分离及鉴定、分离菌的致病性试验等,对规模化养鸡场的5起自然发病病例进行了诊断,结果:5起自然发病病例均为大肠杆菌和巴氏杆菌混合感染.取分离的病原菌进行小白鼠、雏鸡致病性试验.结论:结果表明,该致病性大肠杆菌和巴氏杆菌均为强毒性菌株.

摘要： 为查明4份疑为犬细小病毒病的军犬幼犬的病原及其特性,为进一步的诊断、治疗及免疫奠定基础.将4份送检的犬肠道内容物过滤后分别接种猫肾细胞(F81),培养5天后,出现典型的细小病毒样细胞病变.同时提取病料的总DNA,用犬细小病毒的VP2特异性引物进行PCR扩增,PCR阳性产物克隆至pMD18-T载体测序,并与已知参考毒株序列进行比对及系统发育分析.结果分离到4株细小病毒,经VP2基因比对分型表明,4株细小病毒毒株均属CPV-2a型.

摘要： 布鲁氏菌病人畜共患传染病:乙类传染病,由布鲁氏菌属的细菌引起,广泛分布于世界各地.人临床表现:波浪热、多汗、关节炎、睾丸炎、肝脾肿大等，感染机制复杂。流行病学接触史:密切接触家畜、野生动物、畜产品、布鲁氏菌培养物等疫区居民。临床表现应排除其他疑似疾病。实验室检查应进行病原分离试管凝集试验、补体结合试验、抗人球蛋白试验。

摘要： 仔猪白痢是由致病性溶血性大肠杆菌引起的1周龄以内初生仔猪的一种急性、高度致死性疾病.仔猪白痢潜伏期短、发病率高,尤其黄痢的死亡率高,给畜牧业超成重大损失.仔猪白痢多见于10～20日龄的仔猪,发病率较高,但致死率较低,病原亦为大肠杆菌,以腹泻、排出腥臭白色水样粪便为特征.进行了病原分离及药物敏感试验,以便对未发病仔猪及发病仔猪给予及时有效的预防和治疗.

摘要： 袋鼠传染性腹泻病在我园先后发生过5次,平均发病率为34％,致死率为71.4％,给我园造成了巨大损失.通过总结了每次发病的每次流行病学调查结果、临床诊查特征、病理剖检情况、实验室分离鉴定以及动物实验,确诊为引起本病的病原为大肠埃希氏菌(Escherichia coli),并根据菌体0抗原鉴定为09菌株和079菌株.由于此大肠杆菌对许多抗菌药不敏感,或对暂时敏感的抗生素也很快产生耐药性,治疗效果极差.因此通过此次病原的分离确诊,得以用制作自家菌的免疫方法,预防了袋鼠传染性腹泻病的再次发生.

摘要： 世界动物卫生组织(OIE)将牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)列为法定报告性动物疫病，我国也将其列为进出口牛的检疫疫病之一。常采用的诊断方法主要有:临床检查、病原分离鉴定和血清学试验。由于IBRV导致的持续性感染，防制该病最重要的措施是必须实行严格检疫，防止引入传染源和带入病毒(如带毒精液)。疫苗的接种和免疫成为多数国家控制和预防该病的主要方法。通过进行疫苗的接种免疫先使流行率降低到可控的水平，然后通过反复检测逐步控制和淘汰阳性动物，从而达到完全清除感染。

摘要： 对1起外调疑似肉牛牛传染性支原体肺炎进行诊治。采集肉牛肺脏和鼻腔棉拭子,采用病原分离鉴定和RT-PCR法进行诊断。结果表明,肉牛经贩运后,可迅速发病,咳嗽、关节肿大、肺脏酱紫色。保守治疗效果不明显,病原在同群之间可迅速传播,阳性率可达100％,死亡率较高。对疫区发病牛全群扑杀,勿从疫区引进牛,引进牛头头检疫是预防和控制本病的最佳方法。

摘要： 本试验通过鸡胚尿囊腔接种，对山东省滨州地区采集的死于疑似鸭病毒性肝炎(DVH)的病鸭肝组织进行病原分离，获得1株病毒。动物试验结果表明，该病毒分离株的致死率高达80%。经过临床症状观察、剖检病理变化、理化特性试验、中和试验、RT-PCR鉴定、动物致病性试验等鉴定为I型鸭肝炎病毒(DHV)，命名为BZ-I株。该研究为有效预防DVH提供了较为有用的实验数据。

摘要： 山东阳谷县某养鹅场饲养的4000只肉鹅,10日龄发病,症状主要表现呼吸困难,伸颈张口呼吸,剖检变化表现为肺脏、气囊上有针尖大到米粒大小的黄白色结节.取病变组织及垫料分别进行触片镜检,同时进行病原菌的分离培养、PCR鉴定等,结果从病变组织及垫料中均分离到烟曲霉.

摘要： 山东阳谷县某养鹅场饲养的4000只肉鹅,10日龄发病,症状主要表现呼吸困难,伸颈张口呼吸,剖检变化表现为肺脏、气囊上有针尖大到米粒大小的黄白色结节.取病变组织及垫料分别进行触片镜检,同时进行病原菌的分离培养、PCR鉴定等,结果从病变组织及垫料中均分离到烟曲霉.

摘要： 昆虫病原线虫的分离与检测装置以及土壤中昆虫病原线虫的分离方法及种群密度测量方法，解决了现有技术中存在的需时较长和破坏作物等问题。该装置由采集管和捕捉管组成，采集管由采集管上盖、采集管壁和网罩组成，捕捉管由捕捉管壁和无纺布条组成。分离方法：将大蜡螟装入采集管的网罩内然后将采集管放入土壤，两天后取回培养1天，再利用WhiteTrap法培养七到十天可分离线虫。种群密度测量方法：将盛有清水的捕捉管与装有大蜡螟的采集管安装后放入土壤，48小时后取回，观察记录水里线虫个数，计算得土壤线虫种群密度。本发明可用于昆虫病原线虫的野外采集及应用该线虫作生物防治因子对田间土壤线虫种群密度的跟踪和测定。

摘要： 本公开涉及一种从感染病原菌的植物组织中分离质外体汁液的方法，所述质外体汁液中含有所述病原菌分泌的效应蛋白，该方法包括：a、将感染病原菌的植物组织置于缓冲液中进行真空下浸润处理，得到浸润处理后的植物组织；b、将所述浸润处理后的植物组织进行第一次离心，得第一离心液；取所述第一离心液进行第二次离心，收集第二离心液；其中，所述感染病原菌的植物组织中，病原菌为禾谷镰孢菌、轮枝镰孢菌、尖孢镰孢菌、大丽轮枝菌、禾谷炭疽菌、稻瘟菌、灰葡萄孢菌中的至少一种。该方法可以最大程度地分离出病原菌分泌并进入质外体汁液中的效应蛋白，便于更好地分析感病植物组织中病原菌分泌的质外体效应蛋白的组分和特性。

摘要： 昆虫病原线虫的分离与检测装置以及土壤中昆虫病原线虫的分离方法及种群密度测量方法，解决了现有技术中存在的需时较长和破坏作物等问题。该装置由采集管和捕捉管组成，采集管由采集管上盖、采集管壁和网罩组成，捕捉管由捕捉管壁和无纺布条组成。分离方法：将大蜡螟装入采集管的网罩内然后将采集管放入土壤，两天后取回培养1天，再利用WhiteTrap法培养七到十天可分离线虫。种群密度测量方法：将盛有清水的捕捉管与装有大蜡螟的采集管安装后放入土壤，48小时后取回，观察记录水里线虫个数，计算得土壤线虫种群密度。本发明可用于昆虫病原线虫的野外采集及应用该线虫作生物防治因子对田间土壤线虫种群密度的跟踪和测定。

摘要： 本公开涉及一种从感染病原菌的植物组织中分离质外体汁液的方法，所述质外体汁液中含有所述病原菌分泌的效应蛋白，该方法包括：a、将感染病原菌的植物组织置于缓冲液中进行真空下浸润处理，得到浸润处理后的植物组织；b、将所述浸润处理后的植物组织进行第一次离心，得第一离心液；取所述第一离心液进行第二次离心，收集第二离心液；其中，所述感染病原菌的植物组织中，病原菌为禾谷镰孢菌、轮枝镰孢菌、尖孢镰孢菌、大丽轮枝菌、禾谷炭疽菌、稻瘟菌、灰葡萄孢菌中的至少一种。该方法可以最大程度地分离出病原菌分泌并进入质外体汁液中的效应蛋白，便于更好地分析感病植物组织中病原菌分泌的质外体效应蛋白的组分和特性。

摘要： 本发明公开了败血症患者血液中革兰氏阳性病原菌的分离方法，该方法为治疗败血症患者后续用药提供基础，涉及生物技术领域。方法包括磁性纳米粒子与聚乙二醇(PEG‑2000)的偶联、万古霉素偶联聚乙二醇包被的磁性纳米粒子、聚乙二醇和万古霉素共修饰的磁性纳米粒子复合物捕获血液中的革兰氏阳性病原菌，在外加磁场的作用下，将捕获的革兰氏阳性病原菌与血液进行分离，并进行重悬等步骤。磁分离捕获到的革兰氏阳性病原菌可以直接进行后续分析，与传统的血平板培养方法相比，该方法可以对血液中的革兰氏阳性病原菌进行磁分离，不仅提高了败血症患者血液中革兰氏阳性病原菌的分离效率，同时也节约了鉴别时间。

摘要： 本发明提供了一种用于阳性血培养样本中选择性裂解和细菌分离的试剂，利用所述试剂可以从阳性血培养样本中快速分离细菌，同时其对于患有慢性疾病病人的阳性血液也具有很好的细菌分离效果，所述试剂包括用于溶解血液中血细胞的裂解液A以及用作清洗剂的清洗液I和清洗液II，所述试剂A为皂素溶液，所述清洗液I为尿素溶液。除此之外，本发明还提供一种从阳性血培养样本中分离细菌的方法及细菌鉴定方法，按照所述方法采用上述试剂进行试验，可实现从阳性血培养样本中快速分离细菌，同时最大程度地清除对鉴定结果可能产生干扰的血细胞碎片以及蛋白杂质，极大地提高了检测的准确率。

摘要： 本发明涉及一种仙客来枯萎病病原菌的分离、纯化方法，所述仙客来枯萎病病原菌的分离、纯化方法包括以下步骤：选取一株发病仙客来的叶柄并剪为多个长5mm的叶柄段；对所述叶柄段进行杀菌消毒；将杀菌消毒后的所述叶柄剪为3‑5mm的组织块放入PDA培养基上培养，直至长出无杂菌；挑取所述无杂菌的边缘白色菌丝，接入加入了细菌抑制剂羧苄青霉素的PDA液体培养基中进行培养；吸取培养后的菌液到进行稀释10‑5倍，吸取稀释后的菌液涂布到PDA固体培养基上得到纯化的病原菌的单一菌落。本发明提供的方法对病原菌分离的组织消毒彻底，对内生细菌的抑制效果极好，分离纯化率高，降低了目标病原菌与其它微生物的混合机率，大大减少了纯化的次数。

摘要： 本发明公开了一种生物医药工程病原微生物分离提取装置及其提取方法，包括提取罐，所述提取罐的顶端设置有顶盖，所述提取罐的顶端设置有操作箱；搅拌组件，所述搅拌组件设置在提取罐的内部，所述搅拌组件包括第一搅拌齿轮、第二搅拌齿轮和第一转动板；驱动组件，所述驱动组件设置在操作箱的内部，所述驱动组件包括第一驱动齿轮、第二驱动齿轮、第一转动杆、第二转动杆和升降机构；升降机构，所述升降机构包括第一转动齿轮、第二转动齿轮和连接杆，本发明的有益效果是：通过第一转动齿轮、第二转动齿轮和连接杆之间的配合，使得第二转动杆带动搅拌杆在罐内移动，对顶部及底部的微生物样品充分搅拌，提高稀释效果。

摘要： 本发明公开了一种烟草细菌性黑斑病病原菌的分离和鉴定方法，该方法包括以下步骤：S1：病样采集；S2：病原菌分离；S3：病原菌培养和筛选；S4：菌落PCR菌悬液制备；S5：PCR扩增与鉴定；S6：16S rRNA基因扩增与验证。本发明能快速而准确地获得烟草黑斑病病原菌，有效排除其他杂菌，提高分离纯化效率，分离纯化率在87％以上；通过采用细菌性黑斑病病原菌的特异引物对灰色菌落进行PCR扩增确认，增强了目标菌株的选择性，可以快速鉴别病原菌。

摘要： 本实用新型公开了一种鱼类病原感染试验用病原保存分离培养操作箱，包括箱体和对称安装在箱体左右两侧的两个把手，所述箱体的底部四角均安装有支腿，所述箱体的上方盖设有箱盖，所述箱盖的上表面依次安装有两个拎把，所述箱体内设置有基座，所述基座的外缘通过四个缓冲机构分别与箱体的内侧壁相连。本实用新型中基座外缘设置的四个分别与箱体内侧壁相连的缓冲机构可以起到对基座的缓冲维稳效用，可以保证基座上呈矩形阵列分布的多个培养皿的平稳性，保证培养基内病原的完好性，确保后续技术人员试验的顺利推进，另外通过开启两个制冷压缩机可以对箱体内进行降温处理使得培养基中的病原可以完好地保存更长的时间。