华蟾酥毒基

摘要： 目的:建立测定抗栓胶囊中华蟾酥毒基与脂蟾毒配基含量的LC-MS/MS方法。方法:收集29批抗栓胶囊,选用Agilent Zorbax 300SB-C_(18)(100 mm×2.1 mm,3.5μm)色谱柱,柱温为40°C,以0.1%甲酸水溶液(流动相A)和0.1%甲酸-乙腈(流动相B)进行梯度洗脱,流速为0.2 mL·min^(-1),离子源为电喷雾离子源,正离子模式监测,采用多反应监测模式。结果:华蟾酥毒基与脂蟾毒配基线性关系良好,相关系数r2≥0.99,精密度、重复性试验的RSD<6%(n=6),平均回收率为91.17%~93.18%,RSD<8.0%(n=6)。29批样品中华蟾酥毒基的含量为0.1~5.3μg·粒^(-1),脂蟾毒配基的含量为0.0~2.8μg·粒^(-1)。结论:该方法简单、快速、重复性好,可用于抗栓胶囊中华蟾酥毒基与脂蟾毒配基的含量测定,对更好地控制抗栓胶囊的质量有指导意义。

摘要： 目的 研究蟾酥Bufonis Venenum在不同贮藏条件下化学成分的变化规律。方法 对蟾酥药材采用不同贮藏温度进行密封保存,科学规范定时采样24个月,观察其外观;HPLC法测定蟾毒灵、华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量,以各成分的相对峰面积表征其变化规律。结果 随着贮藏时间的延长,-18°C、4°C环境下的蟾酥色泽未见明显变化,质地较硬;而25°C环境下的蟾酥色泽加深,质地变软。-18°C环境下蟾酥中蟾毒灵、华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量基本不变;4°C、25°C环境下华蟾酥毒基含量明显下降,6个月以上蟾酥中3个指标成分含量总和低于2020年版《中国药典》规定的7.0%,主要为华蟾酥毒基转变成去乙酰华蟾酥毒基。结论 中药蟾酥应在冷冻、避光的环境下贮藏。

摘要： 目的 通过比较不同年限干蟾中蟾毒配基类成分含量,研究其动态变化规律。方法 对干蟾性状进行归纳总结,HPLC法测定不同年限干蟾样品中华蟾酥毒基、脂蟾毒配基、蟾毒灵、蟾毒它灵的含量。结果 干蟾随年限增加,颜色加深,体型变大,质量增加,痱磊变充盈,4种蟾毒配基类成分在3年生干蟾样品中含量最高,分别为华蟾酥毒基0.174 mg/g、脂蟾毒配基0.104 mg/g、蟾毒灵0.395 mg/g、蟾毒它灵0.278 mg/g, 4种成分含量在不同年限的干蟾中比例无差异。结论 蟾蜍经刮浆处理后,4种蟾毒配基类成分含量为3年生>5年生>8年生>10年生,综合考虑市场供需、蟾酥采收、成分含量、规格、加工方式等因素,干蟾适宜的采收期为8~10年。

摘要： 目的:测定干蟾皮饮片(生品)和制干蟾皮饮片(砂炒)中2种主要毒性成分含量,分析炮制对毒性成分的影响.方法:收集10批干蟾皮饮片,8批制干蟾皮饮片,采用HPLC-DAD法测定样品中华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量.结果:在干蟾皮中华蟾酥毒基的含量均值为0.51(0.14～1.74)mg·g-1;脂蟾毒配基的含量均值为0.75 (0.02～3.16)mg·g-1;在制干蟾皮中华蟾酥毒基的含量均值为0.17(0.02～0.41)mg·g-1;脂蟾毒配基的含量均值为0.22(0.004～0.87)mg·g-1.结论:炮制品中2种毒性成分的含量低于干蟾皮药材;华蟾酥毒基和脂蟾毒配基成分的含量下降是经炮制而减毒的.

摘要： 目的:建立麝香保心丸中苯甲酸苄酯、胆酸、蟾毒他灵、蟾毒灵、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、华蟾酥毒基和酯蟾毒配基8种成分的含量测定方法,为麝香保心丸的质量评价提供实验参考。方法:采用HPLC-DADELSD串联法同时测定麝香保心丸中苯甲酸苄酯、胆酸、蟾毒他灵、蟾毒灵、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、华蟾酥毒基和酯蟾毒配基8种化学成分的含量,色谱柱为Waters XBridgeTMC18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.5%甲酸水溶液,梯度洗脱;检测波长为280 nm,柱温为30°C;蒸发光散射检测器(ELSD)漂移管温度为40°C;载气流量1.5 L/min。结果:苯甲酸苄酯、胆酸、蟾毒他灵、蟾毒灵、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、华蟾酥毒基、酯蟾毒配基分离度良好,分别在2.769~55.370μg/mL(r=0.9998)、2.285~45.700μg/mL(r=0.9999)、2.251~45.021μg/mL(r=0.9997)、2.445~48.902μg/mL(r=0.9998)、1.912~38.230μg/mL(r=0.9999)、2.350~46.990μg/mL(r=0.9998)、2.275~45.500μg/mL(r=0.9999)、2.335~46.700μg/mL(r=0.9998)的范围内线性关系良好;平均回收率分别为99.98%(RSD=0.86%)、100.09%(RSD=0.65%)、99.98%(RSD=0.66%)、101.95%(RSD=0.92%)、99.50%(RSD=0.40%)、100.09%(RSD=0.69%)、99.89%(RSD=0.66%)、99.99%(RSD=0.62%)。结论:该法操作方便、准确、重复性好,可客观、全面地对麝香保心丸的内在质量进行有效评价。

摘要： 目的研究不同蟾皮提取物中蟾毒灵、华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的血浆蛋白结合率。方法采用平衡透析法,以高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定,比较两种蟾皮提取物及不同浓度的蟾毒灵、华蟾酥毒基和脂蟾毒配基对照品溶液的血浆蛋白结合率。结果建立的LC-MS/MS法线性良好,精密度、准确度、回收率以及稳定性均符合生物样品分析要求。3种不同浓度蟾毒灵的血浆蛋白结合率分别为(75.03±1.97)%、(72.33±2.51)%、(71.80±1.53)%;蟾皮药材提取物1中的为(-16.67±1.58)%,蟾皮药材提取物2中的为(71.93±1.48)%。3种不同浓度的华蟾酥毒基血浆蛋白结合率分别为(52.33±4.13)%、(52.47±3.84)%、(47.60±2.46)%;蟾皮药材提取物1中的为(-51.23±3.53)%,蟾皮药材提取物2中的为(40.93±1.29)%。3种不同浓度的脂蟾毒配基血浆蛋白结合率分别为(91.27±1.09)%、(93.60±0.85)%、(88.13±0.76)%;蟾皮药材提取物1中的为(52.67±3.58)%,蟾皮药材提取物2中的为(80.13±2.38)%。结论蟾毒灵、华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的血浆蛋白结合率跟药物浓度不呈依赖性,蟾皮药材提取物1中蟾毒灵、华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的血浆蛋白结合率显著低于对照品蟾毒灵、华蟾酥毒基和脂蟾毒配基,而蟾皮药材提取物2的血浆蛋白结合率基本与对照品一致;提示蟾皮药材提取物1中混合物体系导致蟾毒灵、华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的血浆蛋白结合率的改变。

摘要： 目的观察华蟾酥毒基对人骨肉瘤(HOS)细胞迁移与侵袭的影响,并探讨其可能的作用机制。方法应用慢病毒载体LV-vector、LV-over/PLOD2转染HOS细胞并建立稳定转染株HOS/NC、HOS/PLOD2;划痕和细胞侵袭实验检测华蟾酥毒基对肿瘤细胞迁移和侵袭能力的影响;实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测华蟾酥毒基对PLOD2 mRNA表达的影响;Western blot法检测华蟾酥毒基对PLOD2及FAK-JAK/STAT3信号通路相关蛋白(PLOD2、FAK、p-FAK、JAK、p-JAK、STAT3、p-STAT3)表达的影响。结果划痕和细胞侵袭实验结果显示,华蟾酥毒基可降低HOS细胞的迁移和侵袭能力,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01),但过表达PLOD2后,华蟾酥毒基抑制HOS/PLOD2细胞迁移和侵袭的能力减弱,与HOS/NC细胞相比,差异有统计学意义(P<0.01);qRT-PCR结果显示,不同浓度的华蟾酥毒基均可下调HOS细胞PLOD2 mRNA表达水平;Western blot结果显示,华蟾酥毒基可下调HOS/NC细胞中PLOD2及FAK-JAK/STAT3通路相关蛋白p-FAK、p-JAK、p-STAT3等的表达,但对HOS/PLOD2细胞中PLOD2及FAK-JAK/STAT3信号通路相关蛋白的作用明显减弱。结论华蟾酥毒基抑制骨肉瘤迁移与侵袭的机制可能与下调PLOD2,进而阻断FAK-JAK/STAT3信号通路有关。

摘要： 目的 建立心益好胶囊中华蟾酥毒基、脂蟾毒配基含量的测定方法.方法 高效液相色谱法,色谱柱为Agilent ZORBAX C18(5μm,4.6 min×150 mm);流动相:0.5％磷酸二氢钾溶液-乙腈(50:50)(用磷酸调pH值为3.2);紫外检测器,检测波长:296 nm;柱温:40°C;流速为0.8 mL·min-1.结果 华蟾酥毒基在5.27～105.4μg·mL-1范围内与峰面积呈良好的线性关系(相关系数r=1);脂蟾毒配基在5.26～105.2μg·mL-1范围内呈良好的线性关系(相关系数r=1).华蟾酥毒基、脂蟾毒配基平均回收率分别为98.9％,99.0％;RSD分别为1.32％,1.03％,结论 本方法精密度、稳定性和重复性良好,简便快速,分离良好,结果准确可靠,可作为心益好胶囊中华蟾酥毒基、脂蟾毒配基含量的测定方法.

摘要： 目的:研究不同质量浓度的氮酮对蟾酥凝胶贴膏体外透皮效果的影响及蟾酥有效成分的透皮吸收特性。方法:采用改良Franz装置,以雄性昆明种小鼠腹部皮肤作为供试皮肤,用高效液相色谱法(HPLC)测定不同质量浓度(0%,1%,3%,5%)的氮酮对蟾酥有效成分渗透量、吸收速度的影响。结果:氮酮能够显著增加蟾酥有效成分的累积渗透量和渗透速率,且效果与氮酮含量呈正比;经透皮后华蟾酥毒基与脂蟾毒配基在皮肤中均有一定的蓄积。结论:氮酮质量浓度为5%时华蟾酥毒基与脂蟾毒配基体外透皮效果最好。

摘要： 目的：研究华蟾酥毒基对多种骨肉瘤细胞系的增殖抑制和诱导凋亡的作用及相关作用机制.方法：四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察华蟾酥毒基对骨肉瘤细胞增殖活性的影响;流式细胞仪检测细胞周期,细胞核荧光染色及Annexin V/PI染色检测细胞凋亡;Western blot检测凋亡蛋白的表达.结果：华蟾酥毒基可明显抑制U2OS,MG63和SaO2骨肉瘤细胞的增殖,呈剂量和时间依赖性;华蟾酥毒基可诱导骨肉瘤细胞阻滞于G2/M期,并诱导细胞产生典型凋亡小体,Annexin V/PI亦检测到细胞凋亡.研究其作用机制是通过上调Bax,cleaved-PARP,下调xIAP、cIAP-1、survivin及p65蛋白来实现.结论：华蟾酥毒基可显著抑制骨肉瘤细胞株U2OS,MG63和SaO2增殖并诱导其凋亡,其作用机制为调节IAPs和Bcl-2凋亡相关蛋白活性.

摘要： 作者对中药制剂活心丸中蟾酥有效成分华蟾酥毒基、脂蟾毒配基用HPLC法进行了较系统地研究,并以两者之和为定量指标,测定了3批活心丸样品的含量.

摘要： 本发明一种从蟾酥中提取华蟾酥毒基和蟾毒灵混合物的制备方法，其特征是，蟾酥粉碎成中粗粉后，加入70～95%乙醇提取，提取液经过硅胶柱层析分离，得到高纯度的华蟾酥毒基和蟾毒灵混合物，华蟾酥毒基和蟾毒灵混合物的含量达到80%以上。用本发明的制备方法提取的华蟾酥毒基和蟾毒灵混合物的总含量达80%以上。

摘要： 本发明涉及医药技术领域，是一种华蟾酥毒基(cinobufagin)的新剂型—华蟾酥毒基白蛋白纳米粒制剂及其制备方法。华蟾酥毒基(cinobufagin)具有良好的抗肿瘤作用，但其毒性大，体内半衰期短。本发明华蟾酥毒基白蛋白纳米制剂，纳米颗粒形态较为圆整，粒径分布在50～250纳米范围内，平均粒径125.9纳米，粒度分布较窄，具有肝靶向和缓释性的特点，从而提高药物疗效，降低毒性。可用于制备治疗肝癌的药物。

摘要： 本发明涉及干粉吸入剂，具体的说是一种华蟾酥毒基制成的干粉吸入剂、所述干粉吸入剂的制备方法和在制备治疗肺部肿瘤药物中的应用。一种华蟾酥毒基干粉吸入剂，其特征在于它是由华蟾酥毒基与医学上可接受的辅料组成，华蟾酥毒基与所述的辅料的质量比为1∶0.03-1∶110。将华蟾酥毒基制成干粉吸入剂，可直接作用于肺部病灶，降低毒副反应的发生，提高药物的生物利用度，既可克服口服制剂起效慢，具有肝脏首过效应及全身性毒副作用，制剂生物利用度较低等缺点，同时也可以解决针剂的使用不便，病人顺应性差等问题。

摘要： 本发明一种从蟾酥中提取华蟾酥毒基和蟾毒灵混合物的制备方法，其特征是，蟾酥粉碎成中粗粉后，加入70～95%乙醇提取，提取液经过硅胶柱层析分离，得到高纯度的华蟾酥毒基和蟾毒灵混合物，华蟾酥毒基和蟾毒灵混合物的含量达到80%以上。用本发明的制备方法提取的华蟾酥毒基和蟾毒灵混合物的总含量达80%以上。

摘要： 本发明公开了一种鲜蟾酥中脂蟾毒配基和华蟾酥毒基的提纯技术，其提纯方法是：将鲜蟾酥研磨后，加入有机溶剂并搅拌，得到蟾酥溶液，然后静止放置，最后将经过静止放置的蟾酥溶液进行过滤，并把得到的过滤液浓缩、干燥，就可制得含脂蟾毒配基和华蟾酥毒基量较高的蟾酥粉产品。通过本发明能从鲜蟾酥中提纯得到含脂蟾毒配基和华蟾酥毒基量较高的蟾酥粉产品。

摘要： 本发明公开了一种HPLC法检测心宝丸中酯蟾毒配基和华蟾酥毒基的方法，包括如下步骤：制备对照品溶液的步骤：取酯蟾毒配基对照品和华蟾酥毒基对照品适量，加甲醇稀释；制备供试品溶液的步骤：称取一定量的心宝丸供试品，加甲醇稀释，称重，加热回流0.5‑3h，再次称重，用甲醇补足减失的重量，过滤；确定色谱条件的步骤：色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以水、乙腈和甲醇为流动相；流速：0.5‑3ml/min，柱温15‑30°C，检测波长280‑300nm；检测的步骤：采用HPLC法对供试品溶液和对照品溶液进行检测。该方法能够完全分离心宝丸中华蟾酥毒基和酯蟾毒配基，能够分别计算华蟾酥毒基和酯蟾毒配基的含量。

摘要： 本申请涉及华蟾酥毒基和酯蟾毒配基的新用途，具体地，涉及华蟾酥毒基和酯蟾毒配基用于制备用于预防和治疗手足口病的药物的用途，尤其是用于制备抗肠道病毒71型药物的用途。

摘要： 本发明公开了一种脂蟾毒配基和华蟾酥毒基单体的分离方法，属于药品技术领域。其制备方法为：中药蟾酥粉碎，乙醇加热提取，提取液减压干燥，得提取物，提取物水中分散，加入乙酸乙酯萃取，收集上部萃取液，减压干燥得萃取物，运用硅胶柱色谱技术，可以获得脂蟾毒配基和华蟾酥毒基高纯度混合物，也可以获得两者单体，单体纯度均大于98％。本发明可以同时分离提取脂蟾毒配基和华蟾酥毒基单体，可以提高治疗的精确性，对不良反应的成分源及时定位，本方法生成的单体纯度高，无有机溶剂残留，操作简便，能耗低，产品质量易于控制，适合工业化生产。

摘要： 本发明公开华蟾酥毒基在治疗急性髓系白血病药物中的应用，利用华蟾酥毒基诱导AML细胞系HL60和THP‑1细胞胀大死亡，同时造成炎性因子IL1β和IL18的大量分泌，预示着华蟾酥毒基可能靶向诱导AML细胞发生经典焦亡形式的炎性死亡，也说明华蟾酥毒基对AML具有潜在的治疗作用。

摘要： 本发明涉及医药技术领域，是一种华蟾酥毒基(cinobufagin)的新剂型—华蟾酥毒基白蛋白纳米粒制剂及其制备方法。华蟾酥毒基(cinobufagin)具有良好的抗肿瘤作用，但其毒性大，体内半衰期短。本发明华蟾酥毒基白蛋白纳米制剂，纳米颗粒形态较为圆整，粒径分布在50～250纳米范围内，平均粒径125.9纳米，粒度分布较窄，具有肝靶向和缓释性的特点，从而提高药物疗效，降低毒性。可用于制备治疗肝癌的药物。