千层塔

摘要： 清代《植物名实图考》中记载的传统草药千层塔,之前被考证为石松科(Lycopodiaceae)石杉属(Huperzia Bernh)植物蛇足石杉(Huperzia serrata).目前药学研究从中分离出的石杉碱甲,能够高效、高选择、可逆地抑制乙酰胆碱酯酶,减少乙酰胆碱分解,已广泛应用于改善记忆和治疗阿尔茨海默病,引起了世界的广泛关注.该文综述了国内外近40年来有关"蛇足石杉"在系统与分类学、遗传多样性、组学研究、内生真菌、化学成分、资源调查、栽培繁殖和资源保护等方面的研究进展,并从植物分类学研究角度出发,厘清原中国境内分布的蛇足石杉,实应为我国东北地区分布的Huperzia serrata和我国南方分布较广的H.javanica两个物种;该研究结果显示,《植物名实图考》千层塔的基原,应是我国南方广布的石杉属植物H.javanica.考虑到药用植物和药材名称的稳定,将H.javanica的中文名沿用《植物名实图考》中的"千层塔",H.serrata的中文名处理为"蛇足石杉".

摘要： 掌握响应面法的使用并对千层塔黄酮提取条件进行优化。探究提取时间、提取温度和提取料液比三个主要影响因素,应用design expert软件设计响应面实验,吸光度值表现为千层塔黄酮得率,千层塔黄酮得率为响应面值而得出最合适的提取条件,并作验证。实验表明:提取温度70°C,提取液料比为41∶1,提取时间为1h。在此条件下,响应面软件的预测吸光度值为0.161,五组验证实验的平均吸光度为0.158,相对误差仅为1.89%,R^2为0.989 4,显示该回归模型可靠,可用于千层塔黄酮的提取。

摘要： 掌握响应面法的使用并对千层塔黄酮提取条件进行优化.探究提取时间、提取温度和提取料液比三个主要影响因素,应用design expert软件设计响应面实验,吸光度值表现为千层塔黄酮得率,千层塔黄酮得率为响应面值而得出最合适的提取条件,并作验证.实验表明:提取温度70°C,提取液料比为41∶1,提取时间为1h.在此条件下,响应面软件的预测吸光度值为0.161,五组验证实验的平均吸光度为0.158,相对误差仅为1.89％,R2为0.989 4,显示该回归模型可靠,可用于千层塔黄酮的提取.

摘要： 建立了高效液相色谱(HPLC)测定蛇足石杉(Huperzia serrate)内生真菌胶胞炭疽发酵液中石杉碱甲(Huperzina A)和石杉碱乙(Huperzine B)含量的方法,并以此方法检测胶胞炭疽发酵液中石杉碱甲和石杉碱乙含量的积累.内生真菌发酵液经氯仿萃取、甲醇溶解、过滤后进行高效液相检测分析,选用Agilent Eclipse plus-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以0.015 mol/L乙酸铵(pH 6.8)和甲醇溶液(70:30)为流动相进行等度洗脱,流速1 mL/min,检测波长为308 nm,连续检测内生真菌胶胞炭疽发酵液中第6-15天石杉碱甲和石杉碱乙的含量积累.结果表明,发酵提取液中的石杉碱甲和石杉碱乙可在25 min内进行很好的分离和分析,石杉碱甲在1.50-48.00 μg/mL范围内线性关系良好(相关系数r为0.999 5),石杉碱乙在0.25-7.50 μg/mL范围内线性关系良好(相关系数r为0.999 7),石杉碱甲和石杉碱乙的平均加标回收率分别为106.83％、108.06％,相对标准偏差(RSD)分别为3.34％、3.60％.该方法简便、快速、精密度高、结果准确,适用于内生真菌发酵液中石杉碱甲和石杉碱乙含量检测.在发酵过程中,内生真菌发酵液中石杉碱甲和石杉碱乙的含量呈现先增后减,随后有所增加继而又减少的趋势.石杉碱甲和石杉碱乙的含量分别在内生真菌发酵第14天、第8天达到最高,分别为12.417 0 μg/mL、4.660 3 μg/mL.该方法学的建立为内生真菌胶胞炭疽合成石杉碱甲与石杉碱乙的机制研究提供了检测手段,从而有利于药物新资源的开发.

摘要： [目的]研究氮肥对罗勒变种千层塔腺毛和挥发油组分的影响.[方法]应用扫描电镜技术对千层塔的腺毛进行观察;同时,采用GC-MS技术对施加氮肥与未施氮肥的千层塔的挥发油组分进行测定与分析.[结果]施加氮肥的千层塔植株相比未添加氮肥的健壮,节间距小,叶片色泽偏暗绿,挥发油组分和混合物的比例也有很大差别:施加氮肥,挥发油中主要成分醇类的比例由36.78％增加到50.03％,而酯类的比例由38.7％下降到35.52％;在醇类和酯类化合物中,占比例最高的芳樟醇由22.22％上升为28.68％,肉桂酸甲酯由33.83％下降到27.78％.[结论]施加适量的氮肥,利于千层塔植株的生长,同时改变了千层塔中挥发油的组分,尤其是提高了挥发油中按油精和芳樟醇的比例.

摘要： 千层塔是药食兼用植物,营养及药用价值很高,其中分离出的石杉碱甲具有强生物活性,是一种高效可逆的乙酰胆酯酶抑制剂,对于老年痴呆症疗效显著,市场需求量很大.但是全草中的石杉碱甲含量低,千层塔又生长缓慢,资源濒于枯竭.为了保护和充分利用千层塔,本文综述了千层塔的扦插繁殖、芽胞繁殖、组织培养技术等方面的最新研究成果,为千层塔资源保护、人工繁殖提供参考.

摘要： ＂熊童子＂形似刚出生的小熊掌,披着一层白色绒毛;＂山地玫瑰＂像绿色玫瑰花球,别致清新,文艺范十足;＂玉露叶片＂晶莹剔透,犹如工艺品般精致;＂茜之塔＂像千层塔一样玲珑堆叠……当你走进江苏省句容市锦鸿家庭农场,就会被这些种类繁多、外形别致的多肉植物所吸引。

摘要： 以不同分叉和同一分叉不同高度的千层塔原植物为材料,测定不同生长年龄和不同高度的千层塔中石杉碱甲的含量,为千层塔的采集提供依据.对千层塔按照不同分叉和大小进行分类,然后采用微波辅助提取、高效液相色谱法对不同类别的千层塔中石杉碱甲含量进行快速测定.石杉碱甲的含量依次为叶片大于茎大于根部;植株分叉越多(3分叉以下),生长越高则石杉碱甲含量越高.3分叉以上的相对比较高的千层塔植株石杉碱甲含量较高,是野外千层塔原药材采收的最佳类型.

摘要： 本文综述了近年来国内外对千层塔的资源植物、分布与生境、生物学特性、化学成分、质量标准、采收与产地加工、保护与更新等方面的研究现状,指出资源缺乏等问题,并提出利用基因组学和蛋白质组学等技术进行开发利用，利用现代植物分类学技术，寻找和筛选千层塔更多的基源植物或发现新的含石杉碱甲的物种资源。

摘要： 目的：对千层塔内生真菌XW12发酵液的化学成分进行研究。方法：用多种柱色谱技术对化合物进行分离纯化，通过核磁共振波谱和高分辨质谱分析进行结构鉴定。结果：从千层塔内生真菌XW12（Aspergillus sp.）发酵液乙酸乙酯部分分离并鉴定了6个5-甲氧基-3(2氢)-呋喃酮系列衍生物，分别是：huaspenone A(1)、huaspenone B (2)、aspertetronin A(3)、aspertetronin B (4)、gregatin E (5)、和penicilliol A(6)。结论：(1)和(2)是新化合物。

摘要： 利用高速逆流色谱技术,在6个小时内从千层塔植物提取物中获得8个成分部位。其中一个部位经高效液相色谱分析测定,确定为石杉碱甲且其单体的纯度高于98％。工艺所用的高速逆流色谱两相溶剂体系为n-Hexane-BuOH/H2O(4∶1∶5,V/V/V)；分离管柱的转速为正向洗脱700RPM；分离温度为45°C且流动相流速为2.0ml/min.

摘要： 本发明涉及一种从千层塔总生物碱中分离多种高含量生物碱单体的方法，包括以下步骤：先将千层塔总生物碱用流动相溶解、稀释，再注入高压制备液相色谱柱，最后用流动相洗脱，流动相为乙腈‑水混合溶剂；收集不同时间段的洗脱液馏分，分别浓缩、干燥，得高纯度6β‑羟基石杉碱甲、石杉碱甲和石杉碱乙产品。本发明通过筛选出合适的洗脱剂和洗脱条件，特别是采用了梯度洗脱的方式，以及在洗脱机II中加入少量醋酸，最终以高收率和高纯度得到了三种生物碱单体：6β‑羟基石杉碱甲、石杉碱甲和石杉碱乙产品。

摘要： 本发明涉及一种从千层塔提取物中分离总生物碱的方法，包括以下步骤：(1)溶解；(2)反萃取；(3)脱色、过滤、浓缩；(4)萃取；(5)硅胶层析。在步骤(2)的反萃取中，是将步骤(1)所得提取液用含有表面活性剂的酸水进行反萃取，本发明通过对各个步骤的条件和操作进行了优化和筛选，最终以较为简单的方法，高收率地制备得到了来自于千层塔的生物碱，并继续分离得到了高纯度的6β‑羟基石杉碱甲、石杉碱甲和石杉碱乙。本发明方法原料处理量小，溶剂用量少，萃取过程不易发生乳化，生产周期短，工艺连贯、简单，可操作性强，生产成本低，安全环保，适合工业化生产。

摘要： 本发明涉及一种千层塔及其无土栽培的方法，其方法包括建设大棚、选择植株、水苔基质准备、制作腐叶浸汁、温湿度、光照及通风管理。本发明千层塔无土栽培方法，植株存活率高达90％以上，经对比得出，千层塔生长速度是同期仿野生种植千层塔的2倍，同时石杉碱甲有效成分是同期仿野生千层塔种植的2.5倍。本发明方法简便易行，效率高，提高了千层塔的生长速度和石杉碱甲的含量，大规模利用该方法，可有效解决千层塔野生资源枯竭问题。

摘要： 本发明公开一种千层塔多糖的提取方法，涉及食品医药加工技术领域。所述千层塔多糖的提取方法包括以下步骤：将千层塔干燥后粉碎过筛，得千层塔粉末；将所述千层塔粉末与水混合后进行提取，得千层塔提取液；将所述千层塔提取液通过大孔树脂脱色、去蛋白质处理，得纯化液；对所述纯化液醇沉处理，得沉淀物并进行干燥，得千层塔多糖。本发明提出的千层塔多塔多糖的提取方法，流程简单、成本低，得到的千层塔多糖能够有效清除自由基，对增强机体的免疫力起到积极作用。

摘要： 本发明公开一种经修饰的千层塔多糖的制备方法及其应用，涉及高分子多糖技术领域。所述经修饰的千层塔多糖的制备方法包括以下步骤：将千层塔多糖溶于氢氧化钠溶液中，得千层塔多糖溶液；向所述千层塔多糖溶液中加入修饰剂，搅拌反应得反应液；调节所述反应液至中性后，透析得浓缩液；将所述浓缩液醇沉处理后使固液分离，收集沉淀并干燥，得经修饰的千层塔多糖；其中所述修饰剂为磷酸化试剂或羧甲基化试剂。通过对千层塔多糖进行修饰，制备的所述经修饰的千层塔多糖水溶性较好，提高了作为抗肿瘤药物的千层塔多糖的市场竞争力。

摘要： 本发明涉及一种提高千层塔丛生苗繁殖系数的方法。该方法包括野生千层塔孢子体表面灭菌、制备外植体、外植体适应性培养、外植体内生菌灭菌、丛生苗诱导增殖培养、丛生苗生长培养等操作步骤。本发明无菌外植体丛生苗诱导增殖成功率在90％以上，丛生苗平均繁殖系数可以达到60以上，培养获得的无菌丛生苗可以直接用于制备无菌外植体，进行丛生苗的循环诱导增殖。本发明不仅提高了千层塔丛生苗的诱导增殖成功率和丛生苗繁殖系数，而且一次灭菌处理就可获得大量无菌外植体，无需重复灭菌操作，降低染菌风险，提高工作效率，简化工艺流程，适用于千层塔的规模化生产。

摘要： 本发明公开了一种千层塔叶片原生质体的制备方法，该方法通过将叶片进行在含有Vc和甘露醇的培养基上预处理之后，再在低压环境中进行酶液处理，从而获得较高的原生质体得率，并且明显提高了原生质体的活力，可用于千层塔原生质体的制备和细胞融合。

摘要： 本发明公开了一种分离中药总生物碱的方法，尤其是一种从中药千层塔提取液中分离总生物碱的方法，属中药领域。该方法包括如下技术方案：取千层塔提取液，调整pH值1至7，滤过，取滤液加于阳离子交换树脂柱上，先以水洗脱除杂，再用0.5％～15％酸液洗脱，收集洗脱液，加碱中和，经脱盐处理，即得千层塔总生物碱。该方法克服了现有技术提取率低、有机溶剂用量大、工艺复杂、无法大生产等不足，可以高效率地从千层塔提取液中分离高纯度的千层塔总生物碱。

摘要： 本发明公开了一种具有乙酰胆碱酯酶抑制作用的千层塔提取物及其制备方法与应用。所述的制备方法包含如下步骤：(1)取中药千层塔用有机溶剂进行提取，将提取液浓缩去除有机溶剂后得千层塔有机溶剂提取物；(2)将千层塔有机溶剂提取物上大孔树脂柱，先用体积分数为30～40％的乙醇水溶液进行洗脱除杂；再用体积分数为60～80％的乙醇水溶液进行洗脱，收集体积分数为60～80％的乙醇水溶液洗脱下来的洗脱液，浓缩干燥后得千层塔大孔树脂洗脱部位；(3)将千层塔大孔树脂洗脱部位上硅胶柱富集有效成分，即得所述的千层塔提取物。本发明千层塔提取物具有优异的乙酰胆碱酯酶抑制作用；因此，将该千层塔提取物用于开发治疗老年痴呆症的药物具有广阔的应用前景。

摘要： 本发明公开了一种千层塔有效部位及其制备方法与在制备具有预防或治疗老年痴呆作用的药物中的应用。所述的制备方法，包含如下步骤：(1)取中药千层塔，用乙醇提取，将提取液浓缩去除乙醇后得千层塔总浸膏；(2)将千层塔总浸膏加水混悬，然后加入酸调节整个混悬体系的pH值至2～3，静置后加入有机溶剂A进行萃取得有机溶剂A层和酸水层；(3)取酸水层，向酸水层中加入碱，调节酸水层的pH值至9～10，静置后加入有机溶剂B进行萃取得有机溶剂B层和碱水层；取有机溶剂B层浓缩干燥后得千层塔有效部位。由该方法制备得到的千层塔有效部位具有优异的乙酰胆碱酯酶抑制作用；因此，将其用于开发预防和治疗老年痴呆的药物具有广阔的应用前景。