全脑缺血再灌注

摘要： 目的 探讨多黏菌素B(PMB)对全脑缺血再灌注模型大鼠脂多糖(LPS)所致损伤的保护作用及其机制.方法 144只健康雄性SD大鼠均分为对照组(SH组)、模型组(IR组)、脂多糖组(LPS组)及多黏菌素B组(PMB+LPS组),后3组大鼠采用四血管阻断法建立大鼠全脑缺血再灌注模型,LPS组再灌注后即刻尾静脉注射脂多糖(500μg/kg),PMB+LPS组再灌注后即刻尾静脉注射LPS再注射PMB(0.5 mg/kg),SH组及IR组再灌注后即刻注射等量生理盐水;4组大鼠根据再灌注时间再均分为2、6、12、24、48及72 h六个亚组,比较各组大鼠不同时间点海马细胞凋亡率、LPS含量、神经行为学评分及Toll样受体4(TLR4)表达水平.结果 不同再灌注时间点,SH组及IR组大鼠海马组织均检测到少量LPS,LPS组LPS含量于再灌注2 h时开始增多、24 h达高峰、72 h含量有所下降(PIR组>LPS+PMB组>SH组(P<0.05);与LPS组相比,其他3组大鼠神经行为学评分均升高,凋亡细胞数减少(P<0.05);与SH组比较,IR组各亚组海马CA1区椎体细胞受损严重,LPS组再灌注24 h时受损最严重,LPS+PMB组改变介于LPS组与IR组之间;SH组及IR组大鼠海马CA1区各时点TLR4表达较少,LPS组TLR4的表达于再灌注2 h时开始增多、24 h达高峰、随后开始下降(P<0.05),LPS+PMB组各时点与LPS组相比、TLR4表达均下降,差异有统计学意义(P<0.05).结论 全脑缺血再灌注模型大鼠脑组织内LPS含量随再灌注时间变化并造成大脑损伤,PMB对该种损伤有保护作用,其机制可能与抑制TLR4的表达有关.

摘要： 目的探讨多黏菌素B(PMB)对全脑缺血再灌注模型大鼠脂多糖(LPS)所致损伤的保护作用及其机制。方法144只健康雄性SD大鼠均分为对照组(SH组)、模型组(IR组)、脂多糖组(LPS组)及多黏菌素B组(PMB+LPS组),后3组大鼠采用四血管阻断法建立大鼠全脑缺血再灌注模型,LPS组再灌注后即刻尾静脉注射脂多糖(500μg/kg),PMB+LPS组再灌注后即刻尾静脉注射LPS再注射PMB(0.5 mg/kg),SH组及IR组再灌注后即刻注射等量生理盐水;4组大鼠根据再灌注时间再均分为2、6、12、24、48及72 h六个亚组,比较各组大鼠不同时间点海马细胞凋亡率、LPS含量、神经行为学评分及Toll样受体4(TLR4)表达水平。结果不同再灌注时间点,SH组及IR组大鼠海马组织均检测到少量LPS,LPS组LPS含量于再灌注2 h时开始增多、24 h达高峰、72 h含量有所下降(PIR组>LPS+PMB组>SH组(P<0.05);与LPS组相比,其他3组大鼠神经行为学评分均升高,凋亡细胞数减少(P<0.05);与SH组比较,IR组各亚组海马CA1区椎体细胞受损严重,LPS组再灌注24 h时受损最严重,LPS+PMB组改变介于LPS组与IR组之间;SH组及IR组大鼠海马CA1区各时点TLR4表达较少,LPS组TLR4的表达于再灌注2 h时开始增多、24 h达高峰、随后开始下降(P<0.05),LPS+PMB组各时点与LPS组相比、TLR4表达均下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论全脑缺血再灌注模型大鼠脑组织内LPS含量随再灌注时间变化并造成大脑损伤,PMB对该种损伤有保护作用,其机制可能与抑制TLR4的表达有关。

摘要： 目的 建立快速、准确检测大鼠脑组织中[d-丙氨酸2,d-亮氨酸5]脑啡肽(DADLE)的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)定量检测方法.方法 SD大鼠脑组织样品匀浆,乙腈沉淀蛋白,C18反相色谱柱(2.0 mm×50 mm,5 μm)以水-甲醇(0.1％甲酸)体系为流动相,室温下,流速0.4 mL ? min-1,经LC-MS/MS系统进行定量分析.全脑缺血-再灌注模型大鼠分别单次颈静脉注射DADLE 2,5,10 mg · kg-1后,于10,20 min测定脑组织中DADLE浓度.结果 SD大鼠脑组织匀浆液质量浓度在0.1～1000ng · mL-1线性关系良好,定量下限为0.1 ng · mL-1,批内、批间精密度RSD＜ 11.6％,准确度范围95.81％～99.19％.缺血-再灌注大鼠给药后10 min脑组织DADLE浓度差异不显著,不同剂量给药后20 min脑组织浓度分别为(1.3±0.45),(2.2±1.1),(2.9±1.4) ng·mL-1.结论 该分析方法快速、简单,成功应用于DADLE脑组织样品检测.

摘要： 目的 观察山楂叶与三七叶有效部位 (SS) 组合物对兔全脑缺血再灌注损伤的保护作用.方法 采用六动脉结扎加股动脉放血法制备家兔全脑缺血再灌注损伤模型, 缺血30 min, 再灌注2 h.40只家兔随机分为假手术组、模型组、血塞通21. 0 mg/kg组、SS组合物高、低剂量组 (6. 370、3. 185 mg/kg) .于再灌2 h后使用南京建成生物工程研究所测定试剂盒检测脑组织中超氧化物歧化酶 (SOD) 活性、丙二醛 (MDA) 、谷氨酸含量及血清中谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH-PX) 活力, 并进行病理学检查.结果 SS组合物高、低剂量组均能明显增加脑组织SOD活性 (P<0. 01; P<0. 05) , 降低脑组织中MDA含量 (P<0. 01) 及脑组织中谷氨酸含量 (P<0. 01; P<0. 05) , 同时还可明显增加血清GSH-PX活力 (P<0. 05) , 病理检查结果显示, SS组合物能减少家兔全脑缺血再灌注损伤的脑组织范围, 并能保护神经细胞.结论 SS组合物对兔脑缺血再灌注损伤有一定的保护及改善作用, 其机制可能与其抗氧化和抑制兴奋性氨基酸释放或拮抗兴奋氨基酸毒性有关.%Objective To observe the protective effects of the effective part (SS) compositions of Hawthorn leaves and Panaxnotoginseng leaves on global cerebral ischemia-reperfusion injury in rabbits. Methods The rabbit model of global cerebral ischemia-reperfusion injury was established by six-artery ligation and femoral artery bleeding. The model was ischemia for 30 min and reperfusionfor 2 h. Forty rabbits were randomly divided into sham-operation, model, Xuesaitong, SS composition high and low dose groups. Theactivity of SOD, content of MDA and glutamic acid in brain tissue and activity of GSH-PX in serum were detected after 2 h reperfusion, and the pathological examination was conducted.Results Both doses of SS composition significantly increased SOD activity in brain tis-sue (P<0.01; P<0.05) . The contents of MDA and glutamate in brain tissue (P < 0. 01; P < 0. 05) were decreased, and the activity ofGSH-PX in serum was significantly increased (P<0.05) . The results of pathological examination showed that SS composition reducedthe range of brain tissue in rabbits with ischemia-reperfusion injury and protected nerve cells. Conclusions SS composition could pro-tect and ameliorate the cerebral ischemia-reperfusion injury in rabbits, and its mechanism might be related to its antioxidation, inhibitexcitatory amino acid release.

摘要： 目的 研究探讨全脑缺血再灌注诱导大鼠海马CA1区硫氧还蛋白(Trx)巯基去亚硝基化的机制.方法 将SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、全脑缺血再灌注组(I/R组)、SNP组(腹腔注射)、GSNO组(侧脑室注射)及溶剂对照组(生理盐水组腹腔注射/侧脑室注射);采用四动脉结扎去结扎法构建大鼠全脑缺血再灌注模型,运用生物素转化法检测蛋白质的巯基亚硝基化,聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫印迹方法、焦油紫染色方法对Trx巯基去亚硝基化水平以及大鼠海马神经元的损伤进行分析研究.结果 与Sham组和其他I/R组相比,I/R 6 h组Trx巯基亚硝基化水平明显降低(P<0.05);与I/R组相比,外源性NO供体GSNO与SNP组的Trx巯基亚硝基化水平显著增多(P<0.05),但生理盐水组差异无统计学意义.结论 在全脑缺血再灌注作用时间为6 h时,全脑缺血再灌注诱导大鼠海马CA1区Trx巯基去亚硝基化程度最强;外源性NO供体能够抑制Trx巯基去亚硝基化从而对神经元起保护作用.

摘要： 目的:探讨姜黄素对高血压病大鼠全脑缺血再灌注时海马神经元损伤及血清皮质酮、海马血清和糖皮质激素诱导激酶1(serum-and glucocorticoid-inducible kinases1,SGK1)表达的影响。方法:雄性Wistar-Kyoto(WKY)大鼠和自发性高血压病(SH)大鼠,随机分为5组:假手术组(W-Sham、S-Sham)、缺血再灌注组(W-IR、S-IR)和姜黄素组(S-Cur)。各组按再灌注时间分为3 h、12 h、1 d、3 d和7 d 5个时间点。采用四血管阻断法制备全脑缺血再灌注模型(缺血10 min后恢复灌注),HE染色观察海马CA1区神经细胞形态,Nissl染色计数海马CA1区平均锥体细胞密度,ELISA法检测血清皮质酮及海马SGK1,于再灌注后7 d观察行为学。结果:与假手术组比较,缺血再灌注组学习和记忆能力下降,海马CA1区神经元损伤加重,血清皮质酮水平增加,海马SGK1表达上调( P < 0.05 );与W-IR组比较,S-IR组学习和记忆能力下降,海马CA1区神经元损伤加重,血清皮质酮水平增加( P < 0.05 ),海马SGK1蛋白表达下调( P < 0.05 );姜黄素组学习和记忆能力明显改善,海马CA1区神经元损伤减轻,血清皮质酮水平下降( P < 0.05 ),海马SGK1蛋白表达上调( P < 0.05 )。结论:姜黄素减轻高血压病大鼠全脑缺血再灌注海马神经元损伤的机制可能与抑制皮质酮、上调SGK1表达有关。

摘要： 目的:观察急性全脑缺血再灌注大鼠脑组织Bax、Bcl-2蛋白表达情况,研究δ阿片受体激动剂DADLE对急性全脑缺血再灌注脑组织凋亡途径的影响以及发挥脑保护作用的关系.方法:健康雌性SD大鼠50只(180-220g)随机分为5组:假手术组(Sham,n=10):只暴露血管而不夹闭;缺血再灌注组(I/R,n=10):采用改良的二血管阻断加低血压法建立全脑缺血再灌注模型,缺血15min后给予再灌注;DADLE处理组分为2mg/kg组(A,n=10)、DADLE 3mg/kg组(B,n=10)、DADLE5mg/kg组(C,n=10):在I/R组的基础上于再灌注前经颈外静脉注射DADLE.手术结束后脑组织采用免疫组化法检测Bax、Bcl-2蛋白表达情况.结果:Sham组Bax与Bcl-2阳性细胞数显著少于其他各组(P＜0.05),DADLE处理组较I/R组,Bax阳性细胞数明显减少(P＜0.05),而Bcl-2阳性细胞数则显著增加(P＜0.05);其中B组、C组Bax阳性细胞数减少及Bcl-2阳性细胞数增加均较A组有显著性差异(P＜0.05),B组、C组间则无明显差异(P＞0.05),Bcl-2/Bax的比值Sham组显著高于I/R组(P＜0.05),DADLE处理组较I/R组明显上升(P＜0.05).结论:在大鼠急性全脑缺血再灌注损伤中,Bax与Bcl-2蛋白的表达均出现明显上调,而DADLE可以通过影响Bax与Bcl-2表达程度达到减少细胞凋亡发挥脑保护的作用;由Bcl-2/Bax的比值可发现该作用与使用剂量在呈现"S型剂量效应曲线".

摘要： 目的：探讨大鼠全脑缺血再灌注对脑组织紧密连接蛋白occludin表达量的影响.方法：将30只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、缺血30分钟再灌注3h、12h、24h、72h组,每组6只.假手术组仅电凝双侧椎动脉,缺血再灌注组电凝双侧椎动脉,夹闭双侧颈总动脉30分钟,然后松开夹闭,在各时间点杀鼠取脑,用Western Blot从蛋白水平反应occludin的变化.结果：与假手术组相比较，缺血再灌注组Occludin的蛋白水平(P<0.05)，再灌注3h稍有降低，12h明显下降，24h降至最低，72h开始升高，但仍低于假手术组的水平。结论：大鼠全脑缺血再灌注后紧密连接蛋白occludin表达量下降，而且随再灌注时间变化而变化。

摘要： 目的探讨芳香开窍药麝香、冰片对全脑缺血再灌注大鼠脑组织氨基酸类神经递质的影响。方法Pulsinelli的4vo法建立大鼠全脑缺血再灌注模型。采用高效液相色谱法检测脑组织谷氨酸、天门冬氨酸、甘氨酸及γ-氨基丁酸。结果芳香开窍药可降低缺血区脑组织中的Asp，提高GABA、Gly的含量。结论芳香开窍药可降低脑缺血时的兴奋性神经递质Asp和升高抑制性神经递质GABA、Gly，以对抗兴奋性氨基酸的毒性，从而保护脑缺血后继发神经元的损伤，这可能是其芳香开窍机理之一。

摘要： 1.本实验拟研究在大鼠全脑缺血再灌注后，随时间变化，茶多酚是否通过影响mmp-9的表达，减轻胶原蛋白Ⅳ的分解。2.研究在大鼠全脑缺血再灌注后，茶多酚是否通过影响mmp-9和胶原蛋白Ⅳ的表达，从而保护血脑屏障，减轻脑水肿。

摘要： 麝香有芳香开窍,醒脑回苏,镇心安神,通痹和镇痉作用,目前已广泛应用于临床。但复方麝香注射液对全脑缺血再灌注损伤的保护作用及在细胞因子水平的作用机制尚未充分阐述。本研究旨在探讨复方麝香注射液干预后对全脑缺血再灌注损伤是否具有保护作用及其作用机制是否与抑制IL-1(B)表达有关。

摘要： 一种模拟脑缺血再灌注病理模型的芯片，属于微流控技术领域。主要包括四层，第一层为培养液以及接种细胞入口，第二层与二三层芯片之间的多孔膜共同模拟的是血脑屏障系统，每层芯片上都设有液体流入或流出的通道，第三层芯片与三四层芯片之间的多孔膜共同模拟脑组织功能单元，芯片上同样有液体流入或者流出的通道，第四层芯片为培养液出口，此外，二三层芯片以及三四层芯片之间设有细微孔道。本发明具备多细胞共培养能力，通过多孔膜和培养孔设计能够实现多细胞间通过培养液流动的细胞间不接触的信息交流，进而模拟人脑缺糖缺氧过程进而模拟人脑缺血过程、脑缺血后的再灌注。

摘要： 本发明属于生物技术领域，涉及miR‑328‑3p在制备脑梗死及脑缺血再灌注预后预测试剂中的应用。本发明提出血清外泌体miR‑328‑3p在脑梗死及脑缺血再灌注预后预测和治疗中的应用，并通过具体试验结果进行了验证，为脑梗死及脑缺血再灌注预后预测试剂和试剂盒以及预后药物的研发提供新思路。

摘要： 本发明属于生物技术领域，涉及miR‑328‑3p在制备脑梗死及脑缺血再灌注预后预测试剂中的应用。本发明提出血清外泌体miR‑328‑3p在脑梗死及脑缺血再灌注预后预测和治疗中的应用，并通过具体试验结果进行了验证，为脑梗死及脑缺血再灌注预后预测试剂和试剂盒以及预后药物的研发提供新思路。

摘要： 一种模拟脑缺血再灌注病理模型的芯片，属于微流控技术领域。主要包括四层，第一层为培养液以及接种细胞入口，第二层与二三层芯片之间的多孔膜共同模拟的是血脑屏障系统，每层芯片上都设有液体流入或流出的通道，第三层芯片与三四层芯片之间的多孔膜共同模拟脑组织功能单元，芯片上同样有液体流入或者流出的通道，第四层芯片为培养液出口，此外，二三层芯片以及三四层芯片之间设有细微孔道。本发明具备多细胞共培养能力，通过多孔膜和培养孔设计能够实现多细胞间通过培养液流动的细胞间不接触的信息交流，进而模拟人脑缺糖缺氧过程进而模拟人脑缺血过程、脑缺血后的再灌注。

摘要： 本发明属于小鼠脑缺血再灌注模型技术领域，公开了一种小鼠脑缺血再灌注模型的优化及败果评价方法，所述小鼠脑缺血再灌注模型的优化及败果评价系统包括：视频监控模块、时间模块、主控模块、麻醉模块、消毒模块、切割模块、插入模块、拔出模块、脑血管三维构造模块、症状监测模块、显示模块。本发明通过脑血管三维构造模块显示小鼠脑缺血再灌输术后脑血管情况，不仅能够有效分割脑血管粗大分支，而且还能精确提取脑血管细小结构；同时，通过术中生命体征(包括体温、脉搏、呼吸、血压)监测，提高小鼠生存率，通过术后症状监测模块能给出小鼠脑缺血再灌注后神经功能损伤的定量评价，对缺血性脑卒中的预防、疗效评价等均具有重要意义。

摘要： 本发明公开了一种减少并发症的脑缺血再灌注实验动物模型的制作方法，包括以下：颈动脉暴露程序；颈外动脉近心端活扣结扎，不剪断；动脉剪口在颈内动脉近心端；插入拴线致大脑中动脉缺血；到达预定缺血时间，打开颈内动脉远心端线结；拔出拴线；于切口处植入动脉管；胶水固定颈总动脉切口；1分钟内避免周围组织接触胶水，令其自然固化；2分钟后胶水逐渐干燥固化，外部不会与周围组织粘连时，内部通过插管保持颈内动脉血流再灌；收尾操作程序。本发明的操作方法不需结扎剪断颈外动脉、甲状腺上动脉等，操作比较简便，便于动物的后续饲养，尤其是可以做长期药物效果观察模型。适用于推广应用。

摘要： 本发明涉及一种在基于GC‑MS联用技术的脑缺血再灌注代谢组学(脂质组学)研究的方法。属于医药学技术领域。本发明包括如下步骤：(1)血浆样品预处理；(2)GC‑MS联用技术对血浆样品进行检测；(3)对数据进行分析：进行代谢物鉴定并找出最终的差异代谢物，通过在线分析软件对差异代谢物进行通路分析。数据分析内容主要包括：(1)利用XCMS在线数据处理软件对得到的原始数据进行处理(2)单维统计与多维统计相结合探究组别之间代谢差异(3)筛选并鉴定出对差异贡献大的变量并对其进行分析(4)利用MetaboAnalyst在线软件对代谢通路进行分析。本发明的方法简单，且减小了样本处理过程带来的误差。

摘要： 本发明涉及医药技术领域，具体涉及转录因子FoxO3在制备脑缺血再灌注保护神经损伤药物中的应用。本发明构建两种过表达FoxO3质粒并包装成腺病毒Ad‑WT‑FoxO3和Ad‑TM‑FoxO3调控FoxO3的表达，探讨在OGD/R和MCAO/R损伤中FoxO3对自噬相关蛋白LC3和Beclin‑1表达的影响。本发明经实验证明FoxO3过表达可促进自噬相关蛋白的激活，对脑缺血再灌注损伤有保护作用。本发明为脑缺血损伤防治提供新思路、新途径，为神经保护剂的研究提供新的靶点。

摘要： 本发明公开了一种治疗局灶性脑缺血再灌注炎症反应的冻干粉剂及其制备方法，该冻干粉剂由Apelin-13、人血清白蛋白、甘露醇、右旋糖酐和精氨酸组成，经过原料混合、活性炭吸附、过滤、微过滤和冻干等步骤制备得到；本发明所述的冻干粉剂及采用本发明制备方法所得的冻干粉剂能明显减少脑梗死体积，对于治疗局灶性脑缺血再灌注损伤具有良好的治疗效果；本发明所述的冻干粉剂及采用本发明制备方法所得的冻干粉剂能降低海马组织内MPO活性，上调APJ蛋白的表达水平，下降Iba1，GFAP及HMGB1蛋白表达水平；抑制中性粒细胞在脑缺血区的激活、黏附、聚集，减少细胞毒性物质的释放，减轻缺血区的炎症反应，发挥神经保护作用。

摘要： 一种大鼠颈外动脉保留置管脑缺血再灌注模型建立的方法，其方法是：游离大鼠颈外动脉血管的方向，将大鼠颈外动脉血管的方向游离到与大鼠颈内动脉血管的方向一致或平行的位置；在颈外动脉血管切开一个切口插入线栓，在大鼠颈内形成脑缺血；插入线栓形成脑缺血1-2小时之后，将线栓拔出，再置入一个可重复注射药物导管注射囊。通过颈外动脉线栓法制作大鼠缺血再灌注模型，保护了术侧颈总和颈内动脉的正常结构，同时在颈外动脉内保留了可重复注射药物的导管注射囊，实现反复不同时间点，经动脉导管向颈内动脉注射的目的。同时实现了造模后神经功能评估，合格动物才能入组接受实验干预，极大的提高了实验的科学性。