ERK

摘要： 目的 探究通过化学遗传特定药物激活受体(designer receptors exclusively activated by designer drugs,DREADDs)抑制下丘脑室旁核(hypothalamic paraventricular nucleus,PVN)谷氨酸能神经元兴奋性对小鼠心肌缺血/再灌注损伤(ische-mia reperfusion,IR)的影响.方法 建立小鼠PVN置管模型单笼饲养3 d后,PVN注射抑制病毒rAAV-CaMKⅡα-hM4D(Gi)-EGFP或对照病毒rAAV-CaMKⅡα-EGFP.病毒感染3周后,建立小鼠IR模型.通过术前1 h腹腔注射氯氮平-N氧化物,诱导PVN谷氨酸能神经元抑制.测定心肌梗死面积、血清cTnI浓度,监测小鼠心电图,检测心肌内ERK、cleaved caspase-3水平,观察PVN内EGFP、CaMKⅡ和c-Fos表达.结果 与Sham组相比,IR组IS/AAR增大,血清cTnI浓度升高,PVN内c-fos表达增加,心肌组织cleaved caspase-3表达增加,pERK水平降低.然而,hM4D(Gi)DREADD介导的PVN谷氨酸能神经元抑制可明显减少IS/AAR,降低cTnI浓度,抑制PVN内c-fos表达,并降低心肌cleaved caspase-3表达,升高pERK水平.结论 通过化学遗传术DREADD抑制PVN谷氨酸能神经元兴奋性可减轻小鼠IR损伤.

摘要： 目的 基于网络药理学探讨艾柱燃烧产物保护视网膜损伤的机制。方法 从前期研究中得到艾柱燃烧产物的化学成分,并借助PubChem数据库进行作用靶点的检索和筛选,从而建立艾柱燃烧产物-活性成分-靶点网络。通过OMIM数据库检索和筛选后获得视网膜损伤相关靶点,Cytoscape 3.8.0软件构建艾柱燃烧产物活性成分与视网膜损伤疾病靶点网络模型,String数据库构建蛋白与蛋白相互作用网络(PPI),Metascape数据库进行GO与KEGG通路富集分析,Autodock_vina软件进行分子对接。最后,通过蓝光诱导成人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)损伤模型对网络药理学的分析结果进行初步验证。结果 共得到16种活性成分、619个潜在靶点、524个视网膜损伤疾病靶点、17个艾柱燃烧产物-视网膜损伤共同作用靶点,涉及CASP7、RORC、GBA、ATF6等,生物过程主要涉及衰老、对糖皮质激素的反应、对皮质类固醇的反应、去磷酸化、对维生素D的反应等;核心靶点涉及Th17细胞分化、IL-17信号通路、NF-κB信号通路等,核心蛋白为JUN、PTGS2;细胞实验显示,艾柱燃烧产物能降低JUN上游ERK1/2和p38 MAPK磷酸化蛋白的表达。结论 艾柱燃烧产物保护蓝光诱导视网膜损伤的主要生物学机制可能与调控JUN上游ERK1/2、p38 MAPK信号通路有关。

摘要： Objective:To demonstrate the effect of dieckol from Eisenia bicyclis on osteoclastogenesis using RAW 264.7 cells.Methods:Murine macrophage RAW 264.7 cells were subjected to dieckol treatment,followed by treatment with receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand(RANKL)to induce osteoclastogenesis.Tartrate-resistant acid phosphatase(TRAP)activity was examined using a TRAP activity kit.Western blotting analysis was conducted to examine the level of osteoclast-related factors,including TRAP and calcitonin receptor(CTR),transcriptional factors,including c-Fos,c-Jun,and nuclear factor of activated T cells cytoplasmic 1(NFATc1),nuclear factor kappa-B(NF-κB),extracellular signal-regulated kinase(ERK),and c-Jun N-terminal kinase(JNK).Immunofluorescence staining was conducted to examine the expression of c-Fos,c-Jun,and NFATc1.Results:Among the four phlorotannin compounds present in Eisenia bicyclis,dieckol significantly hindered osteoclast differentiation and expression of RANKL-induced TRAP and CTR.In addition,dieckol downregulated the expression levels of c-Fos,c-Jun,NFATc1,ERK,and JNK,and suppressed NF-κB signaling.Conclusions:Dieckol can suppress RANKL-induced osteoclastogenesis.Therefore,it has therapeutic potential in treating osteoclastogenesis-associated diseases.

摘要： 目的探究滋肾活血方联合低分子肝素(LMWH)对人血管内皮细胞的血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)表达及血管生成的影响,探讨其治疗复发性流产的可能作用机制。方法2020年1—12月期间购置人血管内皮细胞试验样本。制备滋肾活血方含药血清和正常血清,分为3组:对照组、LMWH组、滋肾活血方+LMWH组。其对应的处理方式分别为:正常血清、正常血清+LMWH、含药血清+LMWH分别孵育人血管内皮细胞48 h后,应用蛋白质印迹法(western blot)检测各组细胞VEGF、VEGFR-2、ERK蛋白表达量变化,实时荧光定量PCR检测VEGF、VEGFR-2、ERK基因的mRNA转录水平,应用成管实验检测各组细胞的成管能力变化。结果与对照组比较,LMWH组VEGF、VEGFR-2、ERK蛋白的表达水平显著升高(P0.05);与对照组比较,滋肾活血方+LMWH组VEGF、VEGFR-2、ERK mRNA及其蛋白的表达水平显著上调(P0.05)。结论滋肾活血方联合LMWH可促进血管生成改善复发性流产患者妊娠结局,其机制可能与调节VEGF、VEGFR-2、ERK表达,促进血管内皮细胞生长有关。

摘要： 目的:探讨沉默CDC6表达对结肠癌细胞增殖的影响及可能作用的机制。方法:筛选高表达CDC6结肠癌细胞株,构建CDC6-shRNA慢病毒载体,感染结肠癌细胞,RT-qPCR、Western blotting验证。CCK8法、细胞克隆形成、流式细胞周期实验分别检测转染前后结肠癌细胞增殖及细胞周期变化。Western blotting检测各组ERK、pERK、AKT、pAKT蛋白水平。结果:CDC6在结肠癌SW620细胞中高表达,shRNA-CDC6慢病毒感染后,CDC6 mRNA及蛋白表达明显降低,敲减率达到82.2%(P<0.01)。CDC6表达沉默后,CCK8实验结果显示,结肠癌细胞增殖速率明显下降,72小时抑制率达21.0%(P<0.05);细胞克隆实验也显示,干扰组结肠癌细胞克隆形成能力显著下降,相对对照组,干扰组细胞克隆数减少52.1%(P<0.01)。流式细胞周期实验显示,相对对照组,干扰组细胞G_(0)/G_(1)期的细胞比例升高,从44.12%增加到55.03%(P<0.05)。Western blotting实验结果显示,CDC6表达下调后,干扰组结肠癌细胞pERK、AKT及pAKT蛋白表达显著减少(P<0.05)。结论:沉默CDC6基因表达能抑制结肠癌细胞的增殖能力,可能与抑制ERK及AKT信号通路活性有关。

摘要： 目的观察薄芝糖肽(GCGP)注射液联合顺铂对食管鳞状细胞癌细胞的增殖凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法取食管鳞状细胞癌Eca-109细胞株常规培养,分别加入50、100、200 mg/L GCGP溶液及100 ng/mL顺铂作用24、48、72 h,采用MTT法检测细胞增殖能力,因100 mg/L GCGP联合顺铂作用48 h时的IC50为44.1%,故选择该浓度和作用时间作为GCGP联合顺铂用药的最佳作用浓度和作用时间。另取Eca-109细胞,随机分为对照组、GCGP组、顺铂组、GCGP+顺铂组,对照组正常培养,GCGP组加入100 mg/L GCGP,顺铂组加入100 g/mL顺铂,GCGP+顺铂组加入100 mg/L GCGP和100 g/mL顺铂。采用细胞克隆技术观察各组细胞增殖能力,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,Western blotting法检测细胞中MAPK/ERK信号通路调控蛋白胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)、妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)、细胞外信号调节激酶(ERK)及PI3K/Akt信号通路调控蛋白尿激酶纤溶酶原激活物(uPA)、蛋白激酶B(Akt)蛋白的表达水平。结果与对照组比较,GCGP组、顺铂组和GCGP+顺铂组细胞集落形成率均降低,且GCGP+顺铂组细胞集落形成率低于GCGP组和顺铂组(P均<0.01)。与对照组比较,GCGP组、顺铂组、GCGP+顺铂组细胞凋亡率均升高,且GCGP+顺铂组细胞凋亡率显著高于GCGP组和顺铂组(P <0.05或<0.01)。与对照组比较,GCGP组、顺铂组和GCGP+顺铂组PAPP-A、uPA蛋白表达均下降,IGFBP-4、ERK、Akt蛋白表达均升高;与GCGP组和顺铂组比较,GCGP+顺铂组PAPP-A、uPA蛋白表达降低,IGFBP-4、ERK、Akt蛋白表达升高(P均<0.05)。结论 GCGP与顺铂联合用药相对于单独用药能够有效抑制ECA-109细胞增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与MAPK/ERK和PI3K/Akt信号通路激活有关。

摘要： 目的构建Apobec-1互补因子(A1CF)真核表达质粒,转染肺癌细胞A549和H1299并检测其表达。方法提取肾癌细胞786-o中总RNA,经RT-PCR扩增人A1CF基因,通过酶切法插入pcDNA3.1(+)载体,构建pcDNA3.1(+)-A1CF真核表达质粒,经BamHI和XbaI双酶切及DNA序列测序鉴定。Lipofectamine 2000脂质体转染肺癌细胞,Western blot法检测A1CF在肺癌细胞中的表达情况。划痕和Transwell小室实验观察A1CF对肺癌迁移侵袭能力的影响。结果酶切及测序结果显示pcDNA3.1(+)-A1CF中插入的片段序列测定结果与人A1CF序列一致,重组质粒转染两种肺癌细胞后,转染组的目的蛋白表达量明显增高,且E-cadherin和P-ERK表达水平也明显增高(P<0.05)。结论成功克隆人A1CF基因cDNA,并构建真核表达质粒。A1CF促进肺癌细胞迁移侵袭可能与ERK的磷酸化有关。

摘要： 目的探讨S1P对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠caspase-3、ERK及肺动脉平滑肌细胞的影响。方法建立COPD大鼠模型,12周的清洁级健康雄性SD大鼠60只平均分为对照组、COPD组和S1P组。比较3组大鼠右心室收缩压(PVSP)和右心室肥大指数(RVMI),HE染色比较大鼠肺组织病理改变,TUNEL检测肺动脉平滑肌细胞的凋亡情况,蛋白质印记检测COPD大鼠caspase-3蛋白和ERK蛋白的表达。结果COPD组大鼠肺功能FEV0.3/FVC、Cdyn值明显低于对照组,RI值高于对照组(均P<0.05),干预后的S1P组FEV0.3/FVC、Cdyn值显著升高,RI值明显降低(均P<0.05)。与对照组相比,COPD组大鼠RVSP值和RVMI显著升高(均P<0.05);干预后的S1P组大鼠RVSP值和RVMI明显低于COPD组(均P<0.05)。与对照组相比,COPD组大鼠肺组织形态明显恶化,且肺动脉平滑肌细胞发生大量的凋亡;干预后的S1P组大鼠肺组织得到了明显的改善,且肺动脉平滑肌细胞凋亡指数较COPD组得到了明显抑制(P<0.05)。蛋白比较显示,与对照组大鼠相比,COPD组大鼠caspase-3蛋白表达显著升高,p-ERK蛋白表达显著降低(P<0.05);与COPD组相比,S1P组大鼠caspase-3蛋白得到了显著抑制,且p-ERK蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论S1P可抑制COPD大鼠caspase-3蛋白的表达,激活ERK蛋白的表达,并且对肺动脉平滑肌细胞的凋亡有一定的促进作用。

摘要： Objective:PD-L1 and PD-L2 expression levels determine immune evasion and the therapeutic efficacy of immune checkpoint blockade.The factors that drive inducible PD-L1 expression have been extensively studied,but mechanisms that result in constitutive PD-L1 expression in cancer cells are largely unknown.Methods:DNA elements were deleted in cells by CRISPR/Cas9-mediated knockout.Protein function was inhibited by chemical inhibitors.Protein levels were examined by Western blot,mRNA levels were examined by real-time RT-PCR,and surface protein expression was determined by cellular immunofluorescence and flow cytometry.Immune evasion was examined by in vitro T cell-mediated killing.Results:We determined the core regions(chr9:5,496,378–5,499,663)of a previously identified PD-L1L2-super-enhancer(SE).Through systematic analysis,we found that the E26 transformation-specific(ETS)variant transcription factor(ETV4)bound to this core DNA region but not to DNA surrounding PD-L1L2SE.Genetic knockout of ETV4 dramatically reduced the expressions of both PD-L1 and PD-L2.ETV4 transcription was dependent on ERK activation,and BRAF/TAK1-induced ERK activation was dependent on extracellular signaling fromαvβ3 integrin,which profoundly affected ETV4 transcription and PD-L1/L2 expression.Genetic silencing or pharmacological inhibition of components of the PD-L1L2-SE-associated pathway rendered cancer cells susceptible to T cell-mediated killing.Conclusions:We identified a pathway originating from the extracellular matrix that signaled via integrin/BRAF/TAK1/ERK/ETV4 to PD-L1L2-SE to induce PD-L1-mediated immune evasion.These results provided new insights into PD-L1L2-SE activation and pathways associated with immune checkpoint regulation in cancer.

摘要： 目的探讨lncRNA FENDRR对肺鳞癌细胞H226的增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及分子机制。方法qRT-PCR检测肺正常上皮细胞BEAS、肺腺癌细胞A549、H1299和肺鳞癌细胞H226中FENDRR的表达水平。将H226细胞分为FENDRR-siRNA组和FENDRR-siNC阴性对照组;CCK-8法检测细胞增殖活力,Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测细胞MEK、p-MEK、ERK、p-ERK蛋白表达。结果与肺正常上皮细胞相比,肺鳞癌细胞H226中FENDRR水平明显下降。下调肺鳞癌细胞H226中FENDRR的表达后,p-MEK和p-ERK蛋白表达水平显著增多,H226细胞增殖活力、迁移及侵袭能力显著增加,细胞凋亡率明显降低。加入ERK抑制剂U0126能逆转FENDRR表达下调对H226细胞的作用。结论低表达FENDRR后,可以通过ERK/MAPK信号通路,促进H226细胞的增殖、迁移和侵袭,并抑制其凋亡。

摘要： 目的:观察染矽尘大鼠肺组织中自细胞介素-18(Interleukin 18，IL-18)、细胞外调节蛋白激酶(extracellular，regulated protein kitnase，ERK)、c-Jun氨基端激酶(c-JunN-terminal kiinase，JNK)蛋白的表达，探讨IL-18、ERK、JNK在矽肺肺纤维化中的作用以及相互关系。rn 方法:将30只Wistar大鼠随机分为2组，即生理盐水(Ns)组、染矽尘组(silica-instilled,SA组)。分别于气管内灌注lml矽尘混悬液及lml灭菌生理盐水后第7d、14d、2ld、28d和60d处死。肺组织切片采用免疫组化的方法检测IL-18、ERK1/2、JNK1/2在肺组织中的表达。免疫印迹(Westernblot)蛋白定量方法分析IL-18R、ERK1/2、INK1/2在肺组织中的表达。rn 结果:与对照组比较，染矽尘组各时间点肺组织IL-18、ERK、JNK的积分光密度显著升高(P<0.05 P<0.01)，表达高峰均在7d，第28天时仍都高于NS组(P<0.05)。rn 结论:染矽尘组大鼠肺组织各时间点IL-18、ERK1/2、.INK1/2的表达增强，均有可能参与了早期的肺损伤和纤维化的形成。ERK、JNK信号转导通路可能参予了矽肺肺纤维化大鼠中IL-18的表达。

摘要： 目的:观察染矽尘大鼠肺组织中自细胞介素-18(Interleukin 18，IL-18)、细胞外调节蛋白激酶(extracellular，regulated protein kitnase，ERK)、c-Jun氨基端激酶(c-JunN-terminal kiinase，JNK)蛋白的表达，探讨IL-18、ERK、JNK在矽肺肺纤维化中的作用以及相互关系。rn 方法:将30只Wistar大鼠随机分为2组，即生理盐水(Ns)组、染矽尘组(silica-instilled,SA组)。分别于气管内灌注lml矽尘混悬液及lml灭菌生理盐水后第7d、14d、2ld、28d和60d处死。肺组织切片采用免疫组化的方法检测IL-18、ERK1/2、JNK1/2在肺组织中的表达。免疫印迹(Westernblot)蛋白定量方法分析IL-18R、ERK1/2、INK1/2在肺组织中的表达。rn 结果:与对照组比较，染矽尘组各时间点肺组织IL-18、ERK、JNK的积分光密度显著升高(P<0.05 P<0.01)，表达高峰均在7d，第28天时仍都高于NS组(P<0.05)。rn 结论:染矽尘组大鼠肺组织各时间点IL-18、ERK1/2、.INK1/2的表达增强，均有可能参与了早期的肺损伤和纤维化的形成。ERK、JNK信号转导通路可能参予了矽肺肺纤维化大鼠中IL-18的表达。

摘要： 目的:观察染矽尘大鼠肺组织中自细胞介素-18(Interleukin 18，IL-18)、细胞外调节蛋白激酶(extracellular，regulated protein kitnase，ERK)、c-Jun氨基端激酶(c-JunN-terminal kiinase，JNK)蛋白的表达，探讨IL-18、ERK、JNK在矽肺肺纤维化中的作用以及相互关系。rn 方法:将30只Wistar大鼠随机分为2组，即生理盐水(Ns)组、染矽尘组(silica-instilled,SA组)。分别于气管内灌注lml矽尘混悬液及lml灭菌生理盐水后第7d、14d、2ld、28d和60d处死。肺组织切片采用免疫组化的方法检测IL-18、ERK1/2、JNK1/2在肺组织中的表达。免疫印迹(Westernblot)蛋白定量方法分析IL-18R、ERK1/2、INK1/2在肺组织中的表达。rn 结果:与对照组比较，染矽尘组各时间点肺组织IL-18、ERK、JNK的积分光密度显著升高(P<0.05 P<0.01)，表达高峰均在7d，第28天时仍都高于NS组(P<0.05)。rn 结论:染矽尘组大鼠肺组织各时间点IL-18、ERK1/2、.INK1/2的表达增强，均有可能参与了早期的肺损伤和纤维化的形成。ERK、JNK信号转导通路可能参予了矽肺肺纤维化大鼠中IL-18的表达。

摘要： 目的:观察染矽尘大鼠肺组织中自细胞介素-18(Interleukin 18，IL-18)、细胞外调节蛋白激酶(extracellular，regulated protein kitnase，ERK)、c-Jun氨基端激酶(c-JunN-terminal kiinase，JNK)蛋白的表达，探讨IL-18、ERK、JNK在矽肺肺纤维化中的作用以及相互关系。rn 方法:将30只Wistar大鼠随机分为2组，即生理盐水(Ns)组、染矽尘组(silica-instilled,SA组)。分别于气管内灌注lml矽尘混悬液及lml灭菌生理盐水后第7d、14d、2ld、28d和60d处死。肺组织切片采用免疫组化的方法检测IL-18、ERK1/2、JNK1/2在肺组织中的表达。免疫印迹(Westernblot)蛋白定量方法分析IL-18R、ERK1/2、INK1/2在肺组织中的表达。rn 结果:与对照组比较，染矽尘组各时间点肺组织IL-18、ERK、JNK的积分光密度显著升高(P<0.05 P<0.01)，表达高峰均在7d，第28天时仍都高于NS组(P<0.05)。rn 结论:染矽尘组大鼠肺组织各时间点IL-18、ERK1/2、.INK1/2的表达增强，均有可能参与了早期的肺损伤和纤维化的形成。ERK、JNK信号转导通路可能参予了矽肺肺纤维化大鼠中IL-18的表达。

摘要： 目的:观察赶黄草浸膏对TGFβ1刺激肝星状细胞胞内外信号转导通路的影响。方法:HSC-T6常规培养后分为正常组、模型组和药物组,用含0.5﹪NBS的DMEM培养,模型组在相同培养条件下加入TGF-β1刺激,药物组分别用不同浓度药物培养液加TGF-β1刺激,采用AlamarBlue法检测细胞活力,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测药物细胞毒性;根据AlamarBlue法及MTT的结果,正常组细胞以含0.5﹪NBS的DMEM培养,模型组在相同培养条件下加TGF-β1刺激,药物组用2mg/ml含0.5﹪FBS的药物培养液加上TGF-β1刺激,用进行Western blotting法观察细胞Ⅰ型胶原,α-肌动蛋白,ERK蛋白表达及磷酸化水平。结果:不同浓度赶黄草浸膏均能抑制细胞增殖,在24h增殖抑制明显,以2mg/m1浓度最明显;MTT结果示2mg/ml药物组对细胞无明显的毒性,而10mg/ml、50mg/ml药物组对细胞有明显的毒性;赶黄草浸膏对Ⅰ型胶原及α-肌动蛋白的表达均有明显抑制,与模型组比较,P0.05,无显著性意义:但赶黄草浸膏对磷酸化ERK水平及表达均有明显的抑制,与模型组比较, P<0.01,有显著性意义。结论 不同浓度赶黄草浸膏均能抑制细胞增殖;高浓度赶黄草浸膏(10mg/ml,50mg/ml)对细胞有明显的毒性,低浓度赶黄草浸膏(2mg/ml)对细胞无明显的毒性;赶黄草浸膏能明显减少肝星状细胞分泌Ⅰ型胶原及α-肌动蛋白,减少细胞外基质沉积,同时赶黄草浸膏能明显抑制TGF-β1的胞内ERK信号转导,从而抑制活化型肝星状细胞的激化,从而达到抗肝纤维化的作用。

摘要： 目的:观察赶黄草浸膏对TGFβ1刺激肝星状细胞胞内外信号转导通路的影响。方法:HSC-T6常规培养后分为正常组、模型组和药物组,用含0.5﹪NBS的DMEM培养,模型组在相同培养条件下加入TGF-β1刺激,药物组分别用不同浓度药物培养液加TGF-β1刺激,采用AlamarBlue法检测细胞活力,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测药物细胞毒性;根据AlamarBlue法及MTT的结果,正常组细胞以含0.5﹪NBS的DMEM培养,模型组在相同培养条件下加TGF-β1刺激,药物组用2mg/ml含0.5﹪FBS的药物培养液加上TGF-β1刺激,用进行Western blotting法观察细胞Ⅰ型胶原,α-肌动蛋白,ERK蛋白表达及磷酸化水平。结果:不同浓度赶黄草浸膏均能抑制细胞增殖,在24h增殖抑制明显,以2mg/m1浓度最明显;MTT结果示2mg/ml药物组对细胞无明显的毒性,而10mg/ml、50mg/ml药物组对细胞有明显的毒性;赶黄草浸膏对Ⅰ型胶原及α-肌动蛋白的表达均有明显抑制,与模型组比较,P0.05,无显著性意义:但赶黄草浸膏对磷酸化ERK水平及表达均有明显的抑制,与模型组比较, P<0.01,有显著性意义。结论 不同浓度赶黄草浸膏均能抑制细胞增殖;高浓度赶黄草浸膏(10mg/ml,50mg/ml)对细胞有明显的毒性,低浓度赶黄草浸膏(2mg/ml)对细胞无明显的毒性;赶黄草浸膏能明显减少肝星状细胞分泌Ⅰ型胶原及α-肌动蛋白,减少细胞外基质沉积,同时赶黄草浸膏能明显抑制TGF-β1的胞内ERK信号转导,从而抑制活化型肝星状细胞的激化,从而达到抗肝纤维化的作用。

摘要： 目的:观察赶黄草浸膏对TGFβ1刺激肝星状细胞胞内外信号转导通路的影响。方法:HSC-T6常规培养后分为正常组、模型组和药物组,用含0.5﹪NBS的DMEM培养,模型组在相同培养条件下加入TGF-β1刺激,药物组分别用不同浓度药物培养液加TGF-β1刺激,采用AlamarBlue法检测细胞活力,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测药物细胞毒性;根据AlamarBlue法及MTT的结果,正常组细胞以含0.5﹪NBS的DMEM培养,模型组在相同培养条件下加TGF-β1刺激,药物组用2mg/ml含0.5﹪FBS的药物培养液加上TGF-β1刺激,用进行Western blotting法观察细胞Ⅰ型胶原,α-肌动蛋白,ERK蛋白表达及磷酸化水平。结果:不同浓度赶黄草浸膏均能抑制细胞增殖,在24h增殖抑制明显,以2mg/m1浓度最明显;MTT结果示2mg/ml药物组对细胞无明显的毒性,而10mg/ml、50mg/ml药物组对细胞有明显的毒性;赶黄草浸膏对Ⅰ型胶原及α-肌动蛋白的表达均有明显抑制,与模型组比较,P0.05,无显著性意义:但赶黄草浸膏对磷酸化ERK水平及表达均有明显的抑制,与模型组比较, P<0.01,有显著性意义。结论 不同浓度赶黄草浸膏均能抑制细胞增殖;高浓度赶黄草浸膏(10mg/ml,50mg/ml)对细胞有明显的毒性,低浓度赶黄草浸膏(2mg/ml)对细胞无明显的毒性;赶黄草浸膏能明显减少肝星状细胞分泌Ⅰ型胶原及α-肌动蛋白,减少细胞外基质沉积,同时赶黄草浸膏能明显抑制TGF-β1的胞内ERK信号转导,从而抑制活化型肝星状细胞的激化,从而达到抗肝纤维化的作用。

摘要： 目的:观察赶黄草浸膏对TGFβ1刺激肝星状细胞胞内外信号转导通路的影响。方法:HSC-T6常规培养后分为正常组、模型组和药物组,用含0.5﹪NBS的DMEM培养,模型组在相同培养条件下加入TGF-β1刺激,药物组分别用不同浓度药物培养液加TGF-β1刺激,采用AlamarBlue法检测细胞活力,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测药物细胞毒性;根据AlamarBlue法及MTT的结果,正常组细胞以含0.5﹪NBS的DMEM培养,模型组在相同培养条件下加TGF-β1刺激,药物组用2mg/ml含0.5﹪FBS的药物培养液加上TGF-β1刺激,用进行Western blotting法观察细胞Ⅰ型胶原,α-肌动蛋白,ERK蛋白表达及磷酸化水平。结果:不同浓度赶黄草浸膏均能抑制细胞增殖,在24h增殖抑制明显,以2mg/m1浓度最明显;MTT结果示2mg/ml药物组对细胞无明显的毒性,而10mg/ml、50mg/ml药物组对细胞有明显的毒性;赶黄草浸膏对Ⅰ型胶原及α-肌动蛋白的表达均有明显抑制,与模型组比较,P0.05,无显著性意义:但赶黄草浸膏对磷酸化ERK水平及表达均有明显的抑制,与模型组比较, P<0.01,有显著性意义。结论 不同浓度赶黄草浸膏均能抑制细胞增殖;高浓度赶黄草浸膏(10mg/ml,50mg/ml)对细胞有明显的毒性,低浓度赶黄草浸膏(2mg/ml)对细胞无明显的毒性;赶黄草浸膏能明显减少肝星状细胞分泌Ⅰ型胶原及α-肌动蛋白,减少细胞外基质沉积,同时赶黄草浸膏能明显抑制TGF-β1的胞内ERK信号转导,从而抑制活化型肝星状细胞的激化,从而达到抗肝纤维化的作用。

摘要： 目的:观察赶黄草浸膏对TGFβ1刺激肝星状细胞胞内外信号转导通路的影响。方法:HSC-T6常规培养后分为正常组、模型组和药物组,用含0.5﹪NBS的DMEM培养,模型组在相同培养条件下加入TGF-β1刺激,药物组分别用不同浓度药物培养液加TGF-β1刺激,采用AlamarBlue法检测细胞活力,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测药物细胞毒性;根据AlamarBlue法及MTT的结果,正常组细胞以含0.5﹪NBS的DMEM培养,模型组在相同培养条件下加TGF-β1刺激,药物组用2mg/ml含0.5﹪FBS的药物培养液加上TGF-β1刺激,用进行Western blotting法观察细胞Ⅰ型胶原,α-肌动蛋白,ERK蛋白表达及磷酸化水平。结果:不同浓度赶黄草浸膏均能抑制细胞增殖,在24h增殖抑制明显,以2mg/m1浓度最明显;MTT结果示2mg/ml药物组对细胞无明显的毒性,而10mg/ml、50mg/ml药物组对细胞有明显的毒性;赶黄草浸膏对Ⅰ型胶原及α-肌动蛋白的表达均有明显抑制,与模型组比较,P0.05,无显著性意义:但赶黄草浸膏对磷酸化ERK水平及表达均有明显的抑制,与模型组比较, P<0.01,有显著性意义。结论 不同浓度赶黄草浸膏均能抑制细胞增殖;高浓度赶黄草浸膏(10mg/ml,50mg/ml)对细胞有明显的毒性,低浓度赶黄草浸膏(2mg/ml)对细胞无明显的毒性;赶黄草浸膏能明显减少肝星状细胞分泌Ⅰ型胶原及α-肌动蛋白,减少细胞外基质沉积,同时赶黄草浸膏能明显抑制TGF-β1的胞内ERK信号转导,从而抑制活化型肝星状细胞的激化,从而达到抗肝纤维化的作用。

摘要： 目的：观察赶黄草浸膏对TGFβ1肝星状细胞胞内外信号转导通路的影响。方法：HSC-T6常规培养后分为正常组、模型组和药物组，用含0．5%NBS的DMEM培养，模型组在相同培养条件下加入TGF-β1刺激，药物组分别用不同浓度药物培养液加TGF-β1刺激，采用AlamarBlue法检测细胞活力，四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测药物细胞毒性；根据Alamar-Blue法及MTT的结果，药物组用含2mg/ml药物的0．5%FBS培养液加上TGF-β1刺激，24h后采用Western blotting法检测细胞Ⅰ型胶原，α-肌动蛋白，ERK蛋白表达及磷酸化水平。结果：不同浓度赶黄草浸膏均能抑制细胞增殖，在24h增殖抑制明显，以2mg/ml浓度最明显；MTT结果示2mg/ml药物组对细胞无明显的毒性，而10mg/ml、50mg/ml药物组对细胞有明显的毒性；赶黄草浸膏对Ⅰ型胶原及α-肌动蛋白的表达均有明显抑制，与模型组比较，P＜0.01；对ERK蛋白表达未见明显抑制，与模型组比较，P＞0.05：但赶黄草浸膏对磷酸化ERK水平及表达均有明显的抑制，与模型组比较，P＜0.01。结论：赶黄草浸膏能明显抑制肝星状细胞分泌Ⅰ型胶原及α-肌动蛋白，减少细胞外基质沉积，其部分作用机制可能与抑制TGF-β1的胞内ERK信号转导有关。

摘要： 本发明涉及一种双靶向ERK1和ERK5的抑制剂制备及其应用，属于抗肿瘤药学技术领域。本发明解决的技术问题是提供一种作为双靶向ERK1和ERK5抑制剂的化合物。该化合物包括如下所示的化合物或其药学上可接受的盐。本发明的化合物或其药学上可接受的盐，可以作为ERK1和ERK5的抑制剂，具有抗肿瘤活性，能有效的抑制肿瘤细胞的生长。本发明化合物优选为抗肿瘤化合物，所对应肿瘤类型的特点为ERK1和/或ERK5高表达。

摘要： 本申请提供了使用杂环化合物及其药学上可接受的盐、前药、溶剂化物、水合物或立体异构体的改善的组合物、方法、试剂盒和给药方案。这些组合物、方法、试剂盒和给药方案用于调节ERK1/2。通过向有需要的对象施用治疗有效量的一种或多种式(I‑III)化合物或其药学上可接受的盐、前药、溶剂化物、水合物或立体异构体或这些的组合物，其中X、Y、Z、J、M以及R

摘要： 本申请提供新的杂环化合物及其药学上可接受的盐，也提供制备所述化合物的方法。所述化合物可有效抑制ERK1/2。通过向有需要的患者施用治疗有效量的一种或多种式(I)化合物，其中，X、Y、Z、J、M与R1至R8如本文所定义，所述化合物可有效治疗与RAS/RAF/MEK/ERK通路调节异常相关的病情。多种病情可使用所述化合物进行治疗，其包括细胞增殖异常的疾病。在一个实施例中，所述疾病为癌症。

摘要： 本发明涉及一种双靶向ERK1和ERK5的抑制剂制备及其应用，属于抗肿瘤药学技术领域。本发明解决的技术问题是提供一种作为双靶向ERK1和ERK5抑制剂的化合物。该化合物包括如下所示的化合物或其药学上可接受的盐。本发明的化合物或其药学上可接受的盐，可以作为ERK1和ERK5的抑制剂，具有抗肿瘤活性，能有效的抑制肿瘤细胞的生长。本发明化合物优选为抗肿瘤化合物，所对应肿瘤类型的特点为ERK1和/或ERK5高表达。

摘要： 本申请提供新的杂环化合物及其药学上可接受的盐，也提供制备所述化合物的方法。所述化合物可有效抑制ERK1/2。通过向有需要的患者施用治疗有效量的一种或多种式（I）化合物，其中，X、Y、Z、J、M与R1至R8如本文所定义，所述化合物可有效治疗与RAS/RAF/MEK/ERK通路调节异常相关的病情。多种病情可使用所述化合物进行治疗，其包括细胞增殖异常的疾病。在一个实施例中，所述疾病为癌症。

摘要： 本发明涉及阿耳茨海默病的诊断方法以及验证受试者中是否存在阿耳茨海默病的方法。本发明还涉及鉴别适用于治疗阿耳茨海默病的先导化合物的方法，该方法包括使非－阿耳茨海默病细胞与淀粉样β肽相接触，用蛋白激酶C活化剂刺激细胞，使细胞与试验化合物相接触，以及测定阿耳茨海默病特异性分子生物标记的值。本发明还涉及在受试者中诊断阿耳茨海默病的方法，该方法包括检测用蛋白激酶C活化剂刺激后细胞中特定磷酸化MAP激酶蛋白的比率变化。本文所述阿耳茨海默病特异性分子生物标记适用于在受试者中诊断阿耳茨海默病，监测阿耳茨海默病的进程以及鉴别能够治疗或预防阿耳茨海默病的化合物的筛选方法。本发明还涉及试剂盒，其包含采用本文所述的阿耳茨海默病特异性分子生物标记来检测和诊断阿耳茨海默病存在与否的反应试剂。

摘要： 本发明涉及博落回提取物作为ERK1/2‑MAPK信号通路抑制剂及其应用，博落回提取物具有ERK1/2抑制作用，可通过抑制ERK1/2‑MAPK信号通路而下调促炎因子TNF‑α、IFN‑γ的mRNA和蛋白的表达，缓解炎症反应，减少炎症造成的损伤。博落回提取物可应用于制备防治仔猪肠炎相关药物。本发明的有益效果为，1)本发明首次证实了博落回提取物抑制了IPEC‑J2细胞ERK1/2‑MAPK信号通路。2)本发明包括利用抑制ERK1/2‑MAPK信号通路降低促炎介质表达的原理方法生产制造相关抗炎药品。3)本发明为后期开展与ERK1/2‑MAPK信号通路相关的抗炎因子、抗炎对象进行更深层次的研究奠定了坚实的理论基础。

摘要： METTL3抑制剂在制备抑制PI3K/Akt和ERK1/2信号通路的药物中的应用，本发明属于细胞内信号通路技术领域，是要解决现有PI3K/Akt和ERK1/2信号通路抑制剂存在副作用的问题。METTL3抑制剂在制备抑制PI3K/Akt和ERK1/2信号通路的药物中的应用。敲低METTL3能够抑制结肠癌细胞增殖，能够抑制结肠癌细胞侵袭、迁移和克隆形成，能够抑制EphA2和VEGFA的表达，抑制血管拟态的形成。本发明应用于结肠癌靶向药物的筛选领域。

摘要： 本发明涉及医药技术领域，具体是参芎葡萄糖注射液在激活细胞ERK通路方面的应用。本发明通过一系列的筛选和研究最终确定了参芎葡萄糖注射液在激活细胞ERK通路方面的应用，参芎葡萄糖注射液可以激活细胞ERK通路，并且通过激活细胞ERK通路来达到减少ROS产生，减少细胞氧化损伤以及减少细胞氧化损伤后凋亡等效果，并且参芎葡萄糖注射液(SGI)可通过激活ERK信号通路，增加Bcl‑2蛋白表达水平，降低Bax和cleaved‑caspase 3蛋白表达水平，增加H2O2诱导H9c2细胞存活率，降低细胞凋亡率。并且为参芎葡萄糖注射液进一步开发提供理论和实验基础并且完善基于靶蛋白的中药药效物质基础研究平台。

摘要： 本发明涉及一种海参来源长链碱类化合物及其衍生物的新用途，具体涉及海参长链碱及其衍生物在制备抑制ERK制品中的应用。所述海参长链碱包括d17:1、d18:1、d18:2、t17:0；衍生物包括海参长链碱的前体神经酰胺及葡萄糖脑苷脂。本发明通过实验证明了海参长链碱及其衍生物显著抑制了ERK2的活性，首次验证了海参长链碱及其衍生物作为ERK抑制剂的作用，为以ERK为靶点的相关疾病的治疗提供了新的途径。