角膜碱烧伤

摘要： 目的:研究多西环素对角膜瘢痕形成的影响。方法:(1)体外实验:收集人眼角膜基质分离并培养,使用免疫荧光双染鉴定所提取到的细胞为人角膜细胞。多西环素组在传代培养后加入重组人转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导人角膜细胞分化成角膜肌成纤维细胞,培养2 h后加入浓度为20 ng/mL的多西环素溶液,另设不加入任何药物的对照组和只加入TGF-β1的模型组,放入培养箱继续培养48 h。蛋白免疫印迹(Western blotting)检测CollagenⅠ和Fibronectin蛋白表达;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测CollagenⅠ和Fibronectin mRNA相对表达量。(2)体内实验:采用36只雌性SD大鼠构建角膜碱烧伤模型,随机分为对照组和多西环素组,每组18只。采用体视显微镜观察大鼠角膜恢复情况并在第3、第7、第14天进行角膜混浊度评分,角膜取材后做HE染色观察大鼠角膜组织结构变化。结果:模型组细胞Fibronectin、CollagenⅠmRNA和蛋白相对表达量均较对照组升高(均P<0.05),多西环素组细胞Fibronectin、CollagenⅠmRNA和蛋白相对表达量均较模型组降低(均P<0.05)。与对照组相比,大鼠角膜碱烧伤后第7、第14天,多西环素组大鼠角膜混浊度评分更低(P<0.05);HE染色图片,各个时间点多西环素组大鼠角膜基质结构更规整,第7天多西环素组上皮修复更佳、炎症细胞浸润更少。结论:多西环素可以抑制人角膜细胞分化为肌成纤维细胞,促进大鼠角膜碱烧伤后角膜愈合,减轻角膜瘢痕。

摘要： 目的探讨一氧化氮(NO)对角膜神经再生的影响作用。方法本研究以亚硝酸钠(NaNO_(2))作为外源性NO供体,在细胞实验中以小鼠神经母细胞瘤细胞(Neuro-2a)为研究对象。采用不同浓度的NaNO_(2)处理Neuro-2a细胞并筛选出NO的最佳神经营养浓度。在动物实验中,将30只SD大鼠随机分组,10只作为NC组,其余20只大鼠建立角膜碱烧伤模型,再随机分为PBS组和NO组,每组10只。从碱烧伤当天开始,PBS组给予PBS治疗,NO组给予10.00μmol•L^(-1) NaNO_(2)与PBS混合治疗。用荧光素钠染色后观察并记录大鼠角膜上皮愈合情况,计算角膜上皮愈合率。用CCK-8检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫荧光法检测细胞神经元标记物的表达。于大鼠角膜碱烧伤处理后7 d取大鼠角膜上皮组织,分别采用实时荧光定量PCR和Western blot法检测每组角膜上皮中神经元标志物βⅢ-微管蛋白和神经生长因子(NGF)、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、睫状神经营养因子(CNTF)的表达水平。结果10.00μmol•L^(-1) NaNO_(2)处理Neuro-2a细胞24 h后可显著提高细胞活性;使用浓度为0.00μmol•L^(-1)、10.00μmol•L^(-1)、1000.00μmol•L^(-1)的NaNO_(2)处理Neuro-2a细胞24 h后,测得细胞凋亡率分别为18.60%、13.00%、19.48%;与0.00μmol•L^(-1)组相比,10.00μmol•L^(-1)组细胞凋亡率降低(P<0.01)。与0.00μmol•L^(-1)组相比,10.00μmol•L^(-1)组Neuro-2a细胞βⅢ-微管蛋白、MAP2和SMI312三种神经元标志物相对表达量均增加(均为P<0.05)。碱烧伤后1 d、3 d、7 d,与PBS组相比,NO组大鼠角膜上皮愈合率均升高(均为P<0.05)。与NC组相比,PBS组和NO组大鼠角膜组织各神经营养因子mRNA的相对表达量均增高(均为P<0.05)。与PBS组相比,NO组大鼠角膜组织NGF、GDNF、CNTF mRNA的相对表达量均增高(均为P<0.05)。Western blot检测结果显示:碱烧伤后7 d,与NC组相比,PBS组和NO组大鼠角膜组织βⅢ-微管蛋白、NGF、GDNF、CNTF的蛋白表达水平均增高(均为P<0.05);与PBS组相比,NO组大鼠角膜组织βⅢ-微管蛋白、NGF、GDNF、CNTF蛋白的表达水平均明显增高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论气体信号分子NO能促进神经细胞的生长以及相关神经元标志物的表达;在大鼠角膜碱烧伤模型中,局部应用外源性NO进行治疗,可对角膜上皮和角膜神经产生明显的营养作用。

摘要： 目的分析分泌粒蛋白III(Scg3)抗体对兔角膜新生血管(CNV)的干预作用。方法选取健康新西兰白兔45只,未做碱烧伤的5只作为对照组,剩余40只白兔用碱烧伤法构建CNV模型,随机分为模型组(20只)和干预组(20只),自碱烧伤之日起每隔2 d结膜下分别注射0.1 mL 1×PBS溶液或0.5 mg·L^(-1)的Scg3抗体工作液。碱烧伤后14 d,Western blot检测对照组与模型组兔角膜组织中Scg3的蛋白表达。分别在碱烧伤后1 d、7 d、14 d应用眼前段分析仪测量CNV的面积和长度,应用角膜共聚焦显微镜观察眼表变化,利用蛋白芯片法检测细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、白细胞介素-10(IL^(-1)0)、转化生长因子-β1(TGF-β1)等炎症相关细胞因子的表达。结果角膜碱烧伤后14 d,模型组兔烧伤区域出现大量CNV,而干预组兔角膜无明显CNV生长。Western blot检测结果显示,与对照组相比,模型组兔角膜中Scg3蛋白表达显著升高(P<0.05)。角膜共聚焦显微镜下观察可见,模型组兔的角膜缘内出现大量活动性CNV。角膜碱烧伤后7 d和14 d,干预组兔角膜中CNV的长度和面积均显著低于模型组(均为P<0.001)。蛋白芯片法检测结果发现,碱烧伤后7 d、14 d,干预组兔眼表泪液中ICAM-1、IL^(-1)0、TGF-β1等炎症因子表达均显著低于模型组(均为P<0.05)。结论0.5 mg·L^(-1)的Scg3抗体能够降低兔角膜碱烧伤后的炎症反应,抑制CNV的生长。

摘要： 目的 探索白藜芦醇(RSV)对碱烧伤小鼠角膜纤维化反应的抑制作用.方法 选取SPF级、健康6～8周龄雄性C57BL/6J小鼠48只,按照随机数字表法分为正常对照组、模型组和RSV组,每组16只.模型组和RSV组小鼠右眼建立角膜碱烧伤模型,左眼不做任何处理.RSV组小鼠用2 g·L-1 RSV溶液滴眼,模型组小鼠用相同剂量的羟丙基-β-环糊精溶液滴眼,连续滴眼21 d.正常对照组小鼠不做碱烧伤和滴眼干预.碱烧伤后21 d,裂隙灯显微镜观察各组小鼠角膜混浊情况,对角膜混浊程度进行评分;通过HE染色观察各组小鼠角膜组织结构变化;采用免疫荧光染色观察各组小鼠角膜组织中α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅲ型胶原纤维蛋白α1链(COL3A1)的表达;利用Western blot检测各组小鼠角膜组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-SMA、COL3A1蛋白相对表达水平.结果 碱烧伤后21 d,RSV组小鼠角膜混浊评分为(2.25±0.89)分,明显低于模型组[(3.25±0.71)分],差异有统计学意义(P=0.026).HE染色结果显示,模型组小鼠角膜基质中细胞增多,给予RSV干预后细胞相对减少.免疫荧光染色结果显示,RSV组小鼠角膜组织中α-SMA和COL3A1的表达均弱于模型组.Western blot检测结果显示,RSV组小鼠角膜组织中TGF-β1(0.60±0.17)、α-SMA(0.27±0.05)、COL3A1(0.49±0.21)蛋白相对表达水平均显著低于模型组[TGF-β1(1.48±0.50)、α-SMA(0.55±0.18)、COL3A1(1.32±0.87)],差异均有统计学意义(均为P<0.05).结论 在小鼠角膜碱烧伤中,RSV可以有效抑制角膜组织中TGF-β1的表达及肌成纤维细胞的活化,减少COL3A1沉积,从而抑制角膜的纤维化反应,进而减轻角膜混浊程度.

摘要： 目的 探究负载替加环素(tigecycline,TGC)的壳聚糖(chitosan,CS)纳米粒复合物对碱烧伤角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)的影响.方法 制备TGC/CS纳米粒,检测其外形、粒径,检测并计算其包封率、载药量及体外释药情况.选取40只新西兰大白兔,随机分TGC/CS纳米粒组(A组)、TGC组(B组)、空白CS纳米粒组(C组)和生理盐水对照组(D组),每组10只,右眼制作碱烧伤模型,以右眼为实验眼,左眼为对照眼,分别使用TGC/CS纳米粒、TGC、CS纳米粒、生理盐水滴右眼,每日2次,共进行28 d.使用裂隙灯显微镜观察CNV情况并测量新生血管长度,病理切片HE染色观察其角膜结构、新生血管和细胞浸润情况等病理变化,Western blot法检测角膜组织核转录因子-κB(nuclear transcription fac-tor-κB,NF-κB)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表达.结果 TGC/CS纳米粒大部分为规则的球形,粒径为(235.84±34.59) nm,包封率为(67.17±0.29)％,载药量为(59.67±0.29)％,体系较为稳定,有缓释功能.TGC/CS纳米粒对兔角膜及结膜无损伤作用.CNV面积在碱烧伤后7d、14 d、28 d时,A组明显少于B、C、D组,B组明显小于C、D组,差异均有统计学意义(均为P ＜0.05),C组面积小于D组但其差异无统计学意义(P＞0.05).HE染色结果显示,碱烧伤后7d各组角膜上皮细胞部分损伤,基质水肿,大量炎症细胞浸润,部分新生血管生成;碱烧伤后14 d各组角膜结构部分恢复,中等量炎症细胞浸润,CNV面积达到顶峰,碱烧伤后28 d各组角膜各层结构基本复原,炎症细胞大量减少,新生血管萎缩,整个过程中C、D两组炎症程度最重,B组次之,A组炎症最轻.Western blot结果显示,A、B、C、D组的NF-κB、MMP-9相对表达均依次增加,差异均有统计学意义(均为P＜0.05);A组VEGF相对表达量小于B、C、D组,B组VEGF相对表达量小于C、D组,差异均有统计学意义(均为P＜0.05),C组与D组VEGF相对表达量基本相同.结论 TGC/CS纳米粒能够通过下调角膜组织中的NF-κB、VEGF、MMP-9的表达减少碱烧伤CNV的生成且对眼表无损害.

摘要： 目的:针对角膜碱烧伤患者采用新鲜羊膜移植治疗的临床效果进行分析。方法:选取本院2014年3月到2019年3月期间,35例41眼角膜碱烧伤患者进行回顾性研究,对患者进行新鲜羊膜移植治疗观察其眼表情况、视力改善情况和并发症的发生情况。结果:患者主观症状改善,眼表情况痊愈或好转,视力提高,并发症减少减轻。结论:角膜碱烧伤患者通过采用新鲜羊膜移植治疗后其临床治疗效果较为明显,能够促进角膜修复,有效改善患者的视力,减少减轻并发症发生,该治疗方法在治疗眼角膜碱烧伤疾病中可靠性较高。

摘要： 目的 探讨双醋瑞因减轻小鼠角膜碱烧伤炎症反应的作用.方法 将174只小鼠角膜碱烧伤造模成功的小鼠随机分为三组:双醋瑞因组、地塞米松组和生理盐水组,分别给予双醋瑞因、地塞米松、生理盐水滴眼制剂滴眼,比较造模后2d、3d、4d、5d各组小鼠的角膜混浊度、病灶面积、上皮缺损面积及炎症细胞的浸润情况.结果 双醋瑞因组造模后4d、5d角膜临床评分明显较生理盐水组低(均为P＜0.01),地塞米松组造模后3d、4d、5d角膜临床评分较生理盐水组低(均为P＜0.05).对于角膜上皮缺损而言,双醋瑞因组碱烧伤后各时间点角膜上皮缺损面积均小于生理盐水组(均为P ＜0.05),地塞米松组与生理盐水组角膜上皮缺损无明显差异.对角膜中性粒细胞进行统计发现,双醋瑞因组碱烧伤后各时间点中性粒细胞计量明显少于生理盐水组(均为P＜0.01);地塞米松组造模后3d、5d中性粒细胞浸润少于生理盐水组(均为P＜0.05).对巨噬细胞进行统计发现,双醋瑞因组造模后3d、5d巨噬细胞均较生理盐水组浸润少(均为P＜0.05);造模后5d地塞米松组浸润少于生理盐水组(P＜0.05).通过MPO活性测定发现,双醋瑞因组和地塞米松组造模后2d、3d、5dMPO活性均较生理盐水组明显降低(均为P＜0.01).结论 双醋瑞因能够减轻小鼠角膜碱烧伤的炎症反应,改善角膜碱烧伤的预后.

摘要： 目的:观察重组人角质细胞生长因子-2(Recombination human keratinocyte growth factor-2,rhKGF-2)对实验性大鼠角膜碱烧伤的治疗效果. 方法:70只雌性SD大鼠用1mol/L NaOH溶液进行角膜碱烧伤后,随机分为模型对照组、重组牛碱性成纤维细胞生长因子滴眼液组(bFGF组)、rhKGF-2低剂量组、rhKGF-2中剂量组和rhKGF-2高剂量组,14只/组,bFGF组给予4500IU/mL的bFGF,rhKGF-2各剂量组分别给予12.5,25,50μg/mL的rhKGF-2,50μL/次,3次/天,连续给药14天.于治疗第1天、第3天、第7天和第14天,进行角膜损伤程度评级和角膜内皮细胞愈合率测定,于治疗第7天和第14天,进行体重和角膜组织病理形态学观察. 结果:与模型对照组大鼠比较,各组大鼠体重未见统计学差异(P＞0.05);bFGF组大鼠治疗7天角膜损伤程度评级降低(P＜0.05),治疗14天角膜厚度降低(P＜0.05);rhKGF-2组大鼠治疗7天角膜损伤程度评级降低(P＜0.05),内皮细胞愈合率增加(P＜0.05),治疗14天角膜厚度降低(P＜0.05). 结论:rhKGF-2对大鼠角膜碱烧伤模型具有治疗作用.

摘要： 目的：研究姜黄素壳聚糖脂质体对兔角膜碱烧伤的治疗作用.rn 方法：采用薄膜分散法制备姜黄素壳聚糖脂质体,测定粒径、Zeta电位和包封率.新西兰大耳白兔随机分为生理盐水组、空白壳聚糖包衣脂质体组、地塞米松组和姜黄素壳聚糖脂质体组.建立碱烧伤模型并给予相应药物.裂隙灯观察角膜新生血管(CNV)生长情况及角膜上皮愈合情况,免疫组化法检测角膜血管内皮生长因子(VEGF)表达.rn 结果：姜黄素壳聚糖脂质体粒径为(96.6±14.7)nm,Zeta电位为(58.8±2.3)mV,包封率为(51.41±1.1)％.姜黄素壳聚糖脂质体组和地塞米松组均能有效抑制CNV生长,降低角膜VEGF表达.与地塞米松组比,姜黄素壳聚糖脂质体组能促进角膜上皮恢复.rn 结论：姜黄素壳聚糖脂质体包封率较高,抑制CNV生长,促进角膜上皮修复.姜黄素壳聚糖脂质体有望成为新型治疗角膜碱烧伤的眼用制剂.

摘要： 目的：建立兔角膜碱烧伤模型，探讨地塞米松联合羊膜匀浆上清液治疗早期角膜碱烧伤的疗效。方法：18只新西兰白兔随机分为空白组、实验组和对照组，每组6只眼，建立右眼碱烧伤模型，刮除角膜上皮，实验组予以地塞米松结膜下注射联合羊膜匀浆上清液点眼，对照组单独予以地塞米松结膜下注射。碱烧伤后不同时点角膜荧光素染色，眼前节照相，计算机图像分析，并行电镜及光镜观察。结果：碱烧伤后1d、3d、7d实验组角膜上皮修复率显著高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05);光镜检查，碱烧伤后7d，实验组角膜上皮约3～4层，细胞形态规则，对照组角膜上皮约2～3层，部分细胞排列不规则;14d实验组角膜基质胶原纤维排列较对照组整齐，较少炎性细胞浸润;透射电镜检查，碱烧伤后14天，实验组角膜上皮细胞形态大致正常，和对照组比较，细胞间桥粒数量较多，细胞内线粒体、粗面内质网、高尔基复合体较多，染色质丰富，基质层胶原纤维排列较整齐。结论：地塞米松联合羊膜匀浆上清液治疗早期角膜碱烧伤疗效优于单独应用地塞米松。

摘要： 报告32例(42眼)自家血清结膜下注射,同时合并使用大剂量维生素C治疗早期角膜碱烧伤疗效观察.紧急处理后从患者肘静脉抽取血液2mL于无菌试管中，结膜下注射血清约1mL，以后每次约0.5-0.7mL，隔日1次，5次为1疗程。根据病情使用1疗程或2疗程或者数次不等。加入维生素C就诊后即日开始使用，局部用0.25%的氯霉素眼液1支加入维生素C O.5g配制滴眼，每小时1次，全身用5%的葡萄糖250mL加入维生素C 2.0g静脉点滴，维持到创面上皮修复，角膜水肿消失、恢复透明。

摘要： 本发明提供一种羊膜滴眼液及其制备方法，是以羊膜匀浆上清液为主要活性成分，再加入海藻糖、玻璃酸或其盐、肝素或其盐、氯化钠、苯扎溴铵、维生素等物质。本发明眼科给药系统具有良好的润滑作用，可提供防粘连的表面；作为给药系统添加其它药理活性成分，可增加药液的黏度，延长药物在眼表面的存留时间，提高药物的生物利用度，减小药物的毒副作用，降低药物的刺激性，并具有缓释作用。本发明羊膜滴眼液是一个有效的眼用新药，具有良好的临床应用前景。

摘要： 本发明提供一种羊膜滴眼液及其制备方法，是以羊膜匀浆上清液为主要活性成分，再加入海藻糖、玻璃酸或其盐、肝素或其盐、氯化钠、苯扎溴铵、维生素等物质。本发明属于眼科给药系统，具有良好的润滑作用，可提供防粘连的表面；作为给药系统添加其它药理活性成分，可增加药液的黏度，延长药物在眼表面的存留时间，提高药物的生物利用度，减小药物的毒副作用，降低药物的刺激性，并具有缓释作用。本发明羊膜滴眼液是一个有效的眼用新药，具有良好的临床应用前景。

摘要： 本发明涉及一种眼角膜外用和烧伤用胶原溶液及其制备工艺，该溶液的组成成分为I型胶原蛋白的原胶原分子，浓度为3mg/ml，分子结构为[α

摘要： 本发明公开了一种基于角膜反射的投影装置、角膜照影仪、角膜地形图仪及其检测方法，属于眼科领域。本发明包括光源机构、板状的投影盘和第一运动机构，光源机构具有光线输出端，光源机构用于在光线输出端输出以预设眼轴为轴线的空心锥光束，并在投影盘的第一侧上投射出环形光，第一运动机构通过调整光线输出端和投影盘在预设眼轴方向上的相对位置来缩、放环形光；位于投影盘第二侧的角膜接收环形光后形成反射光，反射光穿过投影盘的反射部，反射部位于环形光的中心并与环形光同轴。本发明中，基于角膜反射的投影装置以更低的制造成本实现了现有的Placido模块的功能。

摘要： 本发明属于生物医用材料与医学交叉领域，具体公开一种雷公藤红素在制备抑制碱烧伤角膜新生血管及促进角膜碱烧伤愈合滴眼液制剂中的应用。称取三元嵌段共聚物PEG‑PCL‑PEI7.04~67.55 g、雷公藤红素0.68~2.11 g，共同溶解于由甲醇与乙腈以体积比1:1~3组成的混合溶剂中；然后，在超声搅拌下，将混合液滴加到溶解当量的注射用水中，真空蒸馏除去有机溶剂，超滤除去游离的雷公藤红素，得载药聚合物胶束，补加注射用水定容至100mL，即得滴眼液。本发明首次以PEG‑PCL‑PEI为载体，负载雷公藤红素，制成了滴眼液，实现眼表点眼的给药方式，具有里程碑式的意义。

摘要： Mdivi‑1在制备治疗角膜碱烧伤药物中的应用。通过动物实验证实了Mdivi‑1在治疗角膜碱烧伤的有效性。该物质通过抑制DRP1和Dnm1而抑制线粒体分裂，降低ROS产生、炎症因子IL‑1β和IL‑6以及TNF‑α表达水平，减少角膜新生血管的形成，从而改善了角膜碱烧伤引起的角膜损伤和视力损伤。

摘要： 本发明公开了FL2‑siRNA在制备治疗角膜碱烧伤药物中的应用，所述FL2‑siRNA用于角膜碱烧伤后的角膜损伤疾病的急性期或早期治疗，加速角膜损伤愈合，减少损伤后并发症的出现；FL2‑siRNA制备成注射液用于角膜碱烧伤的结膜下注射，用于促进局部上皮细胞的迁移与损伤愈合。本发明治疗角膜碱烧伤药物，其特征在于：所述治疗角膜碱烧伤药物是一种含有FL2‑siRNA的注射液，包括胆固醇、甲基化修饰的siRNA、RNase free水。本发明为角膜碱性烧伤提供精准的治疗靶点，为眼碱化学烧伤的药物治疗提供理论依据。

摘要： 本发明属于生物医用材料与医学交叉领域，具体公开一种雷公藤红素在制备抑制碱烧伤角膜新生血管及促进角膜碱烧伤愈合滴眼液制剂中的应用。称取三元嵌段共聚物PEG‑PCL‑PEI 7.04~67.55 g、雷公藤红素0.68~2.11 g，共同溶解于由甲醇与乙腈以体积比1:1~3组成的混合溶剂中；然后，在超声搅拌下，将混合液滴加到溶解当量的注射用水中，真空蒸馏除去有机溶剂，超滤除去游离的雷公藤红素，得载药聚合物胶束，补加注射用水定容至100mL，即得滴眼液。本发明首次以PEG‑PCL‑PEI为载体，负载雷公藤红素，制成了滴眼液，实现眼表点眼的给药方式，具有里程碑式的意义。

摘要： 本发明公开了双醋瑞因在II‑III度角膜碱烧伤治疗中的应用。本发明中，双醋瑞因从减轻碱烧伤角膜中性粒细胞，降低MPO活性，减轻炎症对角膜造成的损伤，加快角膜上皮修复，从而减轻碱烧伤浑浊程度，减小碱烧伤浑浊面积，实现对II‑III度角膜碱烧伤的治疗。

摘要： Mdivi‑1在制备治疗角膜碱烧伤药物中的应用。通过动物实验证实了Mdivi‑1在治疗角膜碱烧伤的有效性。该物质通过抑制DRP1和Dnm1而抑制线粒体分裂，降低ROS产生、炎症因子IL‑1β和IL‑6以及TNF‑α表达水平，减少角膜新生血管的形成，从而改善了角膜碱烧伤引起的角膜损伤和视力损伤。