蛋白体

摘要： 该研究以春性小麦品种‘扬麦15’和半冬性小麦品种‘烟农19’为实验材料,在小麦花后6~8 d进行低温处理,对花后不同发育阶段的小麦颖果进行取样,利用树脂切片技术观察了果皮、胚乳和养分运输组织的显微结构,以探明花后低温条件下小麦颖果发育的显微结构特征。结果表明:(1)花后低温延缓了两个小麦品种颖果早期和中期发育过程,推迟了‘扬麦15’灌浆期,缩短了‘烟农19’的灌浆期,最终降低了两小麦品种的粒重。(2)花后低温减缓了小麦颖果发育早期果皮细胞的凋亡以及中果皮细胞中淀粉体的降解速率。(3)花后低温明显降低了小麦胚乳发育早期和中期淀粉体和蛋白体的积累量,缩短了灌浆时期,降低了胚乳充实度。(4)花后低温条件下小麦颖果韧皮部发育缓慢,筛管分布范围缩小;同时胚乳传递细胞的发育变慢,细胞壁上壁内突数量明显减少。研究发现,花后低温使得两小麦品种颖果早期发育过程延缓,具体表现在果皮的凋亡推迟,贮藏物质积累量减少,养分运输组织变得不发达,胚乳充实度降低,单粒颖果干重下降;同时两小麦品种对低温的响应又存在差异,花后低温下春性小麦颖果灌浆期被延长,半冬性小麦灌浆期被缩短。

摘要： 为了探明春季低温(倒春寒)导致小麦减产的细胞学机理,以扬麦15为材料,在小麦幼穗处于雌雄蕊分化期至药隔期之间时,设置-3°C低温处理,通过树脂半薄切片对颖果不同发育时期的形态结构进行观察。结果表明:(1)在颖果发育早期,低温促进了颖果的长度生长,抑制了宽度生长;与对照相比,低温处理组小麦颖果发育进程缩短;(2)低温处理组颖果果皮发育早,中果皮降解速度快;(3)低温处理增加了胚乳淀粉体的积累量,降低了蛋白体的积累量,发育后期胚乳充实度显著低于对照组;(4)与对照相比,低温处理后颖果韧皮部面积和珠心突起传递细胞面积增大。以上结果表明,春季低温处理更有利于养分运输组织的发育,使得灌浆时间缩短,最终导致淀粉积累量增加及颖果早熟。

摘要： 指出了小麦胚乳贮藏蛋白以蛋白体的形式在胚乳细胞中积累,其组分和积累量直接决定小麦的加工品质.细胞质中包被蛋白复合体II的内衣被蛋白组分Sec24作为关键调控因子参与了蛋白质的运输和分选.前期研究发现小麦Sec24基因有3个亚型,分别是Sec24a、Sec24b和Sec24c,其中Sec24a受氮素影响显著,它的表达水平与蛋白含量呈正相关.研究通过半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR对扬麦158的根、幼叶、叶鞘、成熟叶、小穗和籽粒等组织中Sec24基因的3个亚型的表达量差异进行了初步分析,结果显示3个亚型均不是组织特异性表达的基因,它们在不同组织中的表达量不一致;Sec24a在各器官中的相对表达量要低于Sec24b和Sec24c;三个亚型均在根中的表达量最高,旗叶中的表达量最低.研究结果可为后续探明Sec24a基因对胚乳蛋白体发育和贮藏蛋白积累的分子调控奠定理论基础.

摘要： 为探明小麦强弱势粒发育的差异,以大穗型小麦品种宁麦13为材料,采用半薄切片、组织染色和生理生化测定等方法比较研究了小麦强弱势粒胚乳淀粉体和蛋白体的发育及物质积累过程。结果表明,在小麦颖果发育过程中,强势粒的形态大小始终大于弱势粒,在花后3～11d表现尤为明显;与弱势粒相比,强势粒的胚乳尤其是背部胚乳中淀粉体和蛋白体的相对面积较大,充实度较高,胚乳质地更致密;强势粒的B型淀粉粒多于弱势粒,强、弱势粒的淀粉粒径分布均呈单峰型,强势粒中0～2μm的淀粉粒数显著高于弱势粒,在其他粒径范围两者无显著差异;与弱势粒相比,强势粒中总淀粉、蛋白质、醇溶蛋白、谷蛋白和支链淀粉含量均较高,而直链淀粉含量较低。由此可见,小麦弱势粒发育不良与胚乳淀粉体和蛋白体发育及物质积累密切相关。

摘要： 大豆(Glycine max)种子的高水平蛋白合成和积累能力,为外源重组蛋白的高效表达提供了理想的表达宿主.为进一步提高外源蛋白在大豆种子中的表达水平,本研究基于多肽融合策略,研究玉米(Zea mays)醇溶蛋白γ-Zein对外源蛋白在大豆种子中积累水平的影响.采用农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法,分别将大豆种子特异性启动子基因β′-伴球蛋白基因启动子(β-conglycininalpha subunit promoter,BCSP)驱动的绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)编码基因和Zein-GFP基因导入栽培大豆品种,共获得Zein-GFP转基因植株41株,GFP转基因植株46株.反转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)和Western blot检测表明,外源基因Zein-GFP和GFP在转基因大豆种子中均能够正常转录和翻译.选取外源基因mRNA表达水平相近的T3代转基因大豆株系进行酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)分析表明,转基因大豆种子中融合蛋白Zein-GFP平均表达水平为1.51％ TSP (1.37％～1.60％ TSP)(可溶性蛋白总量,total soluble protein),未融合蛋白GFP平均表达水平为0.14％ TSP(0.13％～0.15％ TSP).融合蛋白Zein-GFP在转基因大豆种子中的积累水平较GFP提高10.78倍.激光共聚焦扫描分析进一步表明,融合蛋白Zein-GFP在转基因大豆种子中主要以蛋白体的形式存在,而未融合GFP蛋白则主要分布在胞质中.本研究结果表明,γ-Zein多肽融合促进了重组蛋白在细胞蛋白体中的积累,并显著提高其在大豆种子中的表达水平.本研究为加快大豆种子反应器的应用提供依据.

摘要： To explore the correlation between the oil/ protein body shapes and oil/ protein contents of seeds from Tibet Brassica rapa L. ,36 cultivars and landraces were investigated on oil body and protein body,as well as oil and protein contents. Materials were classified by oil content into high (50 - 55%),medium (40 - 49. 9%)and low (20 - 39. 9%)groups. Sizes of oil body and protein body were observed by Leica DM5000. Results showed that the oil bodies were mainly round,and protein bodies were subrotund. Seeds from high oil content group (HO) had more oil bodies with larger sizes (average of 2. 12 μm),and less protein bodies with larger sizes (average of 5. 24 μm). Seeds from low oil content group (LO)had less oil bodies with smaller sizes (average of 1. 44 μm), and more protein bodies with smaller sizes (average of 3. 81 μm). The correlation analysis showed that:1. oil body size had significant positive correlation with oil content,but had significant negetive correlation with protein con-tent;2. Protein body size had no correlation with protein content;3. Seed oil content had significant negative corre-lation with protein content. Thus for high oil breeding in Tibetan regions,the candidate materials should have great number and large size of oil body,and have fewer protein body with larger size.%通过测定36份来自西藏不同地区的白菜型油菜农家种、野生近缘种种子含油量及蛋白质含量,并根据含油量将材料分为高(含油量50%~55%)、中(含油量40%~49.9%)、低(含油量20%~39.9%)油组,利用Leica DM5000生物显微镜对高、中、低油组材料的油体及蛋白体特征进行观察和比较分析,通过相关性分析研究种子含油量、蛋白质含量、油体粒径、蛋白体粒径间的关系.结果表明,西藏白菜型油菜油体以圆形为主,蛋白体为近圆形.高油组油体数量多、粒径大,蛋白体粒径大、数量相对少,两者平均粒径分别为2.12和5.24μm;中油组油体和蛋白体数量和粒径介于高油组和低油组之间,平均粒径分别为1.82和4.58μm;低油组油体粒径小、数量相对少,蛋白体数量多但粒径小,两者平均粒径分别为1.44和3.81μm.相关分析显示,油体粒径与含油量呈显著正相关,与种子蛋白质含量呈极显著负相关;蛋白体粒径与蛋白质含量相关性小;种子含油量与蛋白质含量呈显著负相关.因此,在今后培育西藏高油白菜型油菜品种时应将油体粒径大且数量多,蛋白体数量少且粒径大作为筛选亲本的条件,将有助于高油白菜型油菜新品种选育.

摘要： 高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)是小麦籽粒贮藏蛋白的重要成分,其组成、表达和含量决定面团弹性和加工品质.本研究以Glu-B1位点上1Bx20和1By20双亚基沉默的小麦无性系变异体AS208为材料,以AS208的来源亲本轮选987作为对照,对AS208中Glu-B1位点的沉默机制和1Bx20、1By20亚基沉默对种子中蛋白体融合以及合成加工相关基因表达的影响进行了研究.Southern blot分析发现AS208比轮选987少2条特异带,染色体原位杂交(FISH)结果显示轮选987中有6条染色体出现杂交信号,而在AS208中有4条染色体出现杂交信号,表明AS208基因组中缺失Glu-B1位点.透射电镜观察发现,与轮选987相比,AS208的籽粒蛋白体形成过程,以及蛋白体大小和形状基本一致.qRT-PCR检测发现,在12个与籽粒蛋白质合成与加工相关基因中,有7个的表达模式两品种相似,有8个的表达量在AS208中高于在轮选987中,特别是Bip、PDI-1和PDI-5基因(高1.5~2.0倍).本研究结果表明,小麦Glu-B1位点的基因对种子中蛋白体的形成没有明显影响,但一定程度上刺激了多数蛋白质合成和加工相关基因的表达,保证了种子内蛋白含量、蛋白体外形和大小基本不变,表现负反馈调节效应.%High-molecular-weight-glutenin subunits (HMW-GSs) are important components of seed storage proteins in grains of wheat (Triticum aestivum L.), which determine wheat dough elasticity and processing quality. Using AS208, a wheat somatic variation line with silenced 1Bx20 and By20 at Glu-B1 locus, and its originating cultivar Lunxuan 987, we studied the present status of Glu-B1, protein body (PB) formation progress, and expression trends of four kinds of genes (BiP,Dof,PDI, and SPA) related to glutenin synthesis and accumulation at different stages of grain development. Southern blotting analysis revealed that AS208 had two specific bands less than its control parent Lunxuan 987. The fluorescencein situ hybridization (FISH) assay showed six and four chromosomes with signals in Lunxuan 987 and AS208, respectively. These results indicate that the Glu-B1 locus has been deleted from the genome of AS208. Compared to Lunxuan 987, AS208 showed similar size and shape of seed PB during PB formation under a transmission electron microscope (TEM). A total of 12 transcription-factor or molecular-chaperone genes were subjected to qRT-PCR assay. These genes were related to glutenin coding genes expression, storage proteins accumu-lation and processing, PB assembling and transportation. Seven out of 12 genes had simialr expression patterns in AS208 and Lunxuan 987, and eight geneswere expressed more in AS208 than in Lunxuan 987, especially the expression levels of Bip,PDI-1, and PDI-5 were 1.5–2.0 folds higher in AS208 than in Lunxuan 987. These results suggested that Glu-B1 silencing had no sig-nificant effect on the formation of PB during wheat grain development, but partially spurred the expression of some genes regu-lating the synthesis and processing of seed-storage proteins. As a result, via a negative feedback regulation pathway, the protein content in seed and the shape and size of PB remain in similar levels between AS208 and its originating cultivar.

摘要： 贝时璋,我国著名的细胞生物学家、教育家、科学活动家。他开创了我国放射生物学和宇宙生物学研究,创立了细胞重建学说,是我国生物物理学的奠基者……贝时璋小时候很少出自家的门,直到他3岁时,才由长辈领着到村里的祠堂看了一看。一次,阿爸带贝时璋母子俩到上海办事。贝时璋看到了许多新奇古怪的事,他坐的黄包车与乡下的独木车不同,黄包车是人在前面拉，独木车是人在后面推。

摘要： 为探明不同面筋强度的小麦胚乳不同部位蛋白体积累的差异,本研究以徐麦30(高筋)、扬麦11(中筋)、扬麦13(低筋)小麦为试验材料,从微观结构角度研究了不同筋力小麦胚乳背部和腹部蛋白体大小、面积及积累的差异.结果表明:1)小麦胚乳腹部蛋白体积累速率呈现先慢后快的积累变化,不同筋力小麦表现为徐麦30＞扬麦11＞扬麦13,且在花后8、1 1和14 d达显著差异;2)花后11、14、17d为胚乳背部蛋白体的快速积累期,不同筋力小麦蛋白体积累量表现为徐麦30＞扬麦11＞扬麦13,尤以花后11、14和17 d突出;3)同一品种胚乳腹部和背部蛋白体积累量不同,表现为腹部＞背部,且差异显著;4)花后14～17 d是小麦胚乳积聚蛋白质速率最快的时期,细胞内合有较多的大蛋白体或蛋白聚积体且分布较集中;5)成熟籽粒中不同筋力小麦蛋白体和淀粉体分布不同.高筋小麦蛋白体分布较多,与淀粉粒结合程度最高,而低筋小麦蛋白体分布最少,且淀粉体之间空隙较大.中筋小麦蛋白体和淀粉体分布介于两者之间.

摘要： 分别以同一稻穗第1天和第5天开花颖花为强势粒和弱势粒,测定了籽粒灌浆期间可溶性淀粉和粗蛋白的积累并用透射电镜观察胚乳细胞中的淀粉粒和蛋白体密度和大小的变化。结果表明:在籽粒灌浆初期,强弱势粒中都出现了少量单粒淀粉粒和极少数的蛋白体,并随着灌浆的进行,单粒淀粉粒逐渐发育形成复粒淀粉粒,淀粉粒和蛋白体的体积逐渐增大;到灌浆高峰期,强势粒中单粒淀粉粒、复粒淀粉粒和蛋白体同时大量存在,之后复粒淀粉粒逐步充实整个胚乳细胞,单粒淀粉粒和蛋白体随之减少,蛋白体的体积也有所减小;而弱势粒的表现则不同,随着籽粒灌浆的进行,复粒淀粉粒逐步增多,淀粉粒的体积也增大,但是单粒淀粉粒和蛋白体的数量一直不多。

摘要： 颈部综合征,其主要症状表现为颈肩痛、放射至头枕部或上肢；还有的一侧面部发热、出汗异常,甚至出现下肢痉挛,行走困难,以致四肢瘫痪；有的引起心脏症状,心电图改变称为"颈心综合征",表现为"假性心绞痛"；有的引起血压升高或降低,以血压增高较为多见,称为"颈性高血压"；有的可突然出现晕厥,称为"颈性晕厥",易误诊为脑动脉硬化或小脑疾患；有的引起吞咽困难又称为"颈性吞咽困难"；有的由颈枕部或(及)肩部组织的器质性或功能性病损所致的以同侧头痛为主的一组综合征称为"颈源性头痛"等。颈源性疾病属中医的"痹症"、"痿症"范畴. 近年来，国内外学者，对本病进行了深入的研究，采用了中西医结合的治疗方法，有的投以中西药物，有的配合针灸、理疗、按摩，但疗效都不是很理想。作者经过十几年的临床实践，通过2000余例颈椎病患者的循证医学考证，探索出一套完整的“穴位植人药物蛋白体治疗颈源性疾病”的辨证施治方案。

摘要： 本文对水稻胚乳核的分裂形式、细胞化过程、糊粉层的分化、淀粉体和蛋白体的发育及其品质的关系以及控制胚乳细胞分裂和分化的因素进行了研究.

摘要： 本发明的另一个目的可包括一种重组无细胞表达系统，其中，反应混合物包含生物化合物、蛋白、酶、生物仿制药体外生物合成或小分子化学修饰所需的所有无细胞反应组分。

摘要： 本发明属于蛋白体外合成技术领域，具体涉及一种多蛋白体系的共生产方法、多蛋白体系的共生产系统及应用。本发明多蛋白体系的共生产方法通过将表达溶菌蛋白的载体和多种表达蛋白的载体共转入到蛋白表达菌株中，使所得共表达菌株表达相应的蛋白及溶菌蛋白，随着共表达菌株的生长，产生的溶菌蛋白作用于共表达菌株，使其发生自主裂解，释放出其表达的蛋白，形成多蛋白体系。本发明多蛋白体系的共生产系统可以将蛋白表达和释放一体化，且无需对共表达菌株进行物理破碎或化学破碎的步骤，可用于体外合成蛋白质和/或化合物，与现有无细胞蛋白合成系统相比更加简便、快速、高效、成本更低，具有良好的应用前景和市场价值。

摘要： 本发明属于蛋白体外合成技术领域，具体涉及一种多蛋白体系的共生产方法、多蛋白体系的循环共生产系统及应用。本发明通过将共表达菌株容置于具有三维网络结构的多孔材料中，为不同种共表达菌株提供一个独立生长的环境，起到了空间隔离的作用，避免不同菌群之间的相互作用(尤其是竞争作用)和影响，再在溶菌蛋白的作用下，共表达菌株发生自主裂解释放出其表达的蛋白，形成多蛋白体系，可用于体外合成蛋白质和/或化合物，与现有无细胞蛋白合成系统制备方法相比更加简便、快速、高效、成本更低，还可以实现对所生产的多蛋白体系中各种蛋白的含量进行准确调配。

摘要： 本发明属于蛋白体外合成技术领域，具体涉及一种多蛋白体系的共生产方法、多蛋白体系的循环共生产系统及应用。本发明通过将共表达菌株容置于具有三维网络结构的多孔材料中，为不同种共表达菌株提供一个独立生长的环境，起到了空间隔离的作用，避免不同菌群之间的相互作用(尤其是竞争作用)和影响，再在溶菌蛋白的作用下，共表达菌株发生自主裂解释放出其表达的蛋白，形成多蛋白体系，可用于体外合成蛋白质和/或化合物，与现有无细胞蛋白合成系统制备方法相比更加简便、快速、高效、成本更低，还可以实现对所生产的多蛋白体系中各种蛋白的含量进行准确调配。

摘要： 本发明属于蛋白体外合成技术领域，具体涉及一种多蛋白体系的共生产方法、多蛋白体系的共生产系统及应用。本发明多蛋白体系的共生产方法通过将表达溶菌蛋白的载体和多种表达蛋白的载体共转入到蛋白表达菌株中，使所得共表达菌株表达相应的蛋白及溶菌蛋白，随着共表达菌株的生长，产生的溶菌蛋白作用于共表达菌株，使其发生自主裂解，释放出其表达的蛋白，形成多蛋白体系。本发明多蛋白体系的共生产系统可以将蛋白表达和释放一体化，且无需对共表达菌株进行物理破碎或化学破碎的步骤，可用于体外合成蛋白质和/或化合物，与现有无细胞蛋白合成系统相比更加简便、快速、高效、成本更低，具有良好的应用前景和市场价值。

摘要： 本发明提供一种猪瘟病毒囊膜蛋白寡聚蛋白体及其制备方法和应用。寡聚蛋白体包括猪瘟病毒囊膜蛋白分子和外源寡聚化结构片段，猪瘟病毒囊膜蛋白分子选自猪瘟病毒囊膜蛋白E2分子、猪瘟病毒囊膜蛋白E0分子，猪瘟病毒囊膜蛋白E2分子与外源寡聚化结构片段形成E2寡聚蛋白体，猪瘟病毒囊膜蛋白E0分子与外源寡聚化结构片段形成E0寡聚蛋白体。将E2、E0寡聚蛋白体作为疫苗抗原，不含任何猪瘟病毒的遗传物质RNA，生产和使用均安全。E2及E0寡聚蛋白体中的各囊膜蛋白保持其天然结构及生物活性，做为疫苗抗原免疫效果显著；寡聚蛋白体将抗原的多个亚单位蛋白聚合在一起，克服了亚单位蛋白疫苗的弱点，疫苗免疫原性显著提高，且抗原含量高，容易生产和纯化。

摘要： 本发明提供了一种可以提高大豆分离蛋白的体外消化率的方法。该方法通过将大豆分离蛋白粉按比例加水溶解调配，真空脱气包装、经超高压技术处理后，大豆蛋白的体外消化率大大提高，可达到75％以上。该方法具有操作简易方便，节能环保，安全高效等优点，对改善大豆蛋白体内消化率低的难题，开发中国传统的大豆蛋白资源潜力具有重要意义。本发明还提供了一种由上述方法制得的变性大豆分离蛋白。

摘要： 本发明在蛋白体外表达的生产中，将盛放反应液的反应容器连接在一旋转装置的与地面倾斜向上设置的转轴上，在进行蛋白体外表达时，所述反应容器在所述转轴的驱动下自转，使得反应液在摩擦力、表面张力和重力作用下，跟随所述反应容器的底面转动，从而在与水平面倾斜的平面上摊开，分布于所述反应容器的底面及内壁面上，强迫形成薄层。而实验表明，当体外无细胞蛋白合成体系的反应液在反应容器中的厚度控制得比较薄时，其反应活性好于较厚时的反应活性。转动还起到搅拌效果。本发明应用于工业生产中，可以使用大容器进行蛋白体外合成，一次性处理较大体积的IVTT反应液，以实现通过单次反应就获得较高产量的蛋白质，从而大大提高蛋白体外表达的效率。

摘要： 本发明通过在蛋白体外合成的生产设定中，限制体外无细胞蛋白合成体系的反应液在反应容器中的液面高度，保证了反应液可以在反应容器中尽量摊开，而实验表明，当体外无细胞蛋白合成体系的反应液在反应容器中的厚度控制的比较薄时，其反应活性好于厚度较厚时的反应活性。本发明应用于工业生产中，可以使用大容器进行蛋白体外合成，一次性处理较大体积的IVTT反应液，以实现通过单次反应就获得较高产量的蛋白质，从而大大提高蛋白体外合成的效率。

摘要： 本申请公开了一种促进低分子量蛋白体外复性和提高免疫原性的方法，主要包括如下步骤：构建含有ELP标签的载体蛋白和目的蛋白；使用修饰载体蛋白制备复性工具分子；复性工具分子和变性目的蛋白通过ELP标签在高于相变温度时形成复性复合物；完成复性的复合物，通过降低温度至相变温度之下诱发相变反应使聚合的ELP标签解聚，释放出复性完全的目的蛋白，复性工具分子回收再利用；含有ELP标签的复性完全的抗原免疫动物，由于机体温度高于相变温度，抗原于体内诱发自聚集，进而增加抗原表位，提高抗原稳定性，大幅提升低分子量蛋白的免疫效率。本发明解决了PEG修饰后蛋白免疫原性下降从而不能用于免疫及低分子量蛋白免疫原性低，体内易降解的问题。