葡萄糖-6-磷酸酶

摘要： 目的 探讨灵芝多糖对妊娠期糖尿病(GDM)大鼠肝脏损伤的保护作用及肝组织磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)、葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)表达的影响.方法 雌性大鼠经高脂高糖喂养8周后与雄鼠合笼制备孕鼠,妊娠5 d后,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导制备GDM大鼠模型,将成功建立的GDM大鼠随机分为模型组、阳性对照组及实验组,各15只;并取15只同批妊娠5 d大鼠作为空白组.实验组大鼠灌胃灵芝多糖400 mg·kg-1·d-1;阳性对照组灌胃盐酸二甲双胍200 mg·kg-1·d-1;空白组与模型组大鼠灌胃等量生理盐水,连续干预2周.用全自动生化分析仪检测血清谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)和碱性磷酸酶(ALP)活性;用蛋白质免疫印迹法检测大鼠肝组织PEPCK、G-6-Pase蛋白表达.结果 空白组、模型组、阳性对照组及实验组大鼠血清GPT活性分别为(48.23±8.17),(103.52±17.39),(62.33±12.47),(74.81±15.84)U·L-1;GOT活 性 分 别 为(106.38±25.12),(982.43±102.37),(569.33±71.24),(672.51±92.46)U·L-1;ALP活性分别为(118.66±11.97),(164.86±13.56),(129.44±6.02),(140.65±8.11)U·L-1;肝组 织PEPCK蛋 白 相 对 表 达 量 分 别 为0.14±0.06,0.81±0.13,0.26±0.07,0.49±0.11;G-6-Pase蛋白相对表达量分别为0.09±0.03,0.79±0.12,0.19±0.06,0.38±0.14.上述指标,模型组与空白组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);阳性对照组、实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 灵芝多糖可有效降低GDM大鼠血糖水平,改善胰岛素抵抗与肝功能指标水平,从而保护肝脏,其作用机制可能与下调肝组织中PEPCK、G-6-Pase蛋白表达相关.

摘要： 目的 观察利拉鲁肽对糖尿病小鼠肝糖异生关键酶葡萄糖-6-磷酸(G-6-Pase)及磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPCK)的表达影响及机制探讨.方法 动物实验设计分3组:正常对照组(雄性C57小鼠,n=5),腹腔注射生理盐水;模型对照组(雄性KK-Ay糖尿病小鼠,n=5),腹腔注射生理盐水;利拉鲁肽干预组(雄性KK-Ay糖尿病+药物干预小鼠,n=5),腹腔注射利拉鲁肽.3组小鼠均在在相同的饲养环境下饲养.干预8周,检测小鼠的血糖,采用Western blot方法检测FOXO1,隐花色素1(cryptochrome 1,CRY1),E3泛素蛋白酶DDB1,糖异生关键酶葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)及磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPCK)的表达情况.结果 与模型对照组相比,利拉鲁肽干预组血糖显著下降;利拉鲁肽干预后糖尿病小鼠肝DDB1,FOXO1,G6Pase与PEPCK的表达减少,而隐花色素1(cryptochrome 1,CRY1)的表达增加.结论 利拉鲁肽可以下调糖尿病小鼠肝糖异生关键酶G6Pase及PEPCK的表达,其作用可能与下调E3泛素蛋白酶DDB1有关.

摘要： 目的 探讨血清抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP抗体)、葡萄糖-6-磷酸酶(GPI)、人类白细胞抗原-DR4(HLA-DR4)联合检测对类风湿关节炎(RA)的诊断价值.方法 选取2015年6月至2017年5月该院收治的82例RA患者作为RA组,选取同期该院收治的82例非RA患者为非RA组,以及80例健康体检者作为对照组.比较3组研究对象血清抗CCP抗体、GPI、HLA-DR4阳性率、3项指标单独及联合检测对RA的诊断价值.结果 RA组患者血清抗CCP抗体、GPI、HLA-DR4阳性率显著高于非RA组和对照组(P<0.05).抗CCP抗体、GPI、HLA-DR4单独检测时,以GPI的灵敏度最高(78.6％),抗CCP抗体的特异度最高(97.5％),差异均有统计学意义(P<0.05).在联合检测中,以抗CCP抗体、GPI、HLA-DR4三者联合检测的灵敏度和特异度最高(90.5％,97.5％),差异有统计学意义(P<0.05).结论 血清抗CCP抗体、GPI、HLA-DR4联合检测可以提高对RA诊断的灵敏度和特异度,有效减少漏诊、误诊的发生.

摘要： 目的 比较丰产黄 、紫果 、日本紫果 、美利亚4种不同品系无花果叶提取物的降血糖作用,并初步探讨其作用机制.方法 采用一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)150 mg/kg制备1型糖尿病小鼠模型,将造模成功的小鼠随机分为模型组 、紫果组 、日本紫果组 、美利亚组及丰产黄组.采用日剂量2 g/kg不同品系的无花果叶提取物灌胃,疗程为6周.检测小鼠空腹血糖 、血清甘油三酯及胆固醇水平,考察其对肝糖原及葡萄糖-6-磷酸酶的影响.结果 4种品系无花果叶提取物均能显著降低1型糖尿病小鼠模型的血糖(P<0.01);丰产黄 、紫果 、日本紫果叶提取物能显著降低1型糖尿病小鼠模型的甘油三酯水平(P<0.01);丰产黄叶提取物能显著降低1型糖尿病小鼠模型的肝糖原水平(P<0.05).紫果 、美利亚叶提取物能显著降低STZ诱导的糖尿病小鼠肝脏葡萄糖-6-磷酸酶的水平(P<0.01).结论 4种品系无花果叶提取物的降血糖 、降血脂作用以及对肝糖异生的影响存在一定的差异.

摘要： 目的 探讨持续性低氧所致大鼠肝脏HIF-2α信号通路变化及对血糖的影响.方法 将32只雄性Wistar大鼠随机分为常氧组(16只)和低氧组(16只).常氧组大鼠在海拔200 m左右的常氧环境下饲养;低氧组大鼠在模拟海拔5000m的低压氧舱中饲养.饲养时间至1 w和4w时各取8只,禁食12 h后(不禁水),行经腹腔注射葡萄糖耐量试验,评估大鼠糖耐量状态.于次日晨麻醉处死大鼠,留取肝脏,用Western Blot法检测各组大鼠HIF-2α、Akt、P-Akt、Gsk-3β、P-Gsk-3β蛋白的表达水平,用qRT-PCR法检测PEPCK mRNA、G6PC mRNA的表达水平.结果 与常氧组相比,低氧组大鼠1 w和4 w空腹血糖降低(P＜0.05)、IPGTT血糖曲线下面积减少(P＜0.05),而且随着低氧时间的延长低氧组大鼠空腹血糖明显下降(P＜0.05)、IPGTT血糖曲线下面积明显减少(P＜0.05).Western Blot结果显示,低氧组大鼠HIF-2α蛋白表达量明显高于常氧组(P＜0.05),低氧组和常氧组大鼠P-Akt、Akt、P-Gsk-3β3、Gsk-3β蛋白表达量无明显差异(P＞0.05).qRT-PCR结果显示,与常氧组相比,低氧组大鼠1w和4 w G6PC mRNA表达量明显低于常氧组(P＜0.05),低氧组大鼠4 w PEPCK mRNA表达量明显降低(P＜0.05).结论 持续性低氧可增加大鼠肝脏HIF-2α的表达,降低血糖.降糖机制可能为通过抑制肝脏糖异生关键酶G6PC、PEPCK的表达来抑制糖异生.

摘要： 目的探讨持续性低氧所致大鼠肝脏HIF-2α信号通路变化及对血糖的影响。方法将32只雄性Wistar大鼠随机分为常氧组（16只）和低氧组（16只）。常氧组大鼠在海拔200m左右的常氧环境下饲养；低氧组大鼠在模拟海拔5000131的低压氧舱中饲养。饲养时间至1W和4W时各取8只，禁食12h后（不禁水），行经腹腔注射葡萄糖耐量试验，评估大鼠糖耐量状态。于次日晨麻醉处死大鼠，留取肝脏，用WesternBlot法检测各组大鼠HIF-2α、Akt、P-Akt、Gsk-3β、P-Gsk-3β蛋白的表达水平，用qRT-PCR法检测PEPCKmRNA、G6PCmRNA的表达水平。结果与常氧组相比，低氧组大鼠1W和4W空腹血糖降低（P〈0．05）、IPGTF血糖曲线下面积减少（P〈0．05），而且随着低氧时间的延长低氧组大鼠空腹血糖明显下降（P〈0．05）、IPGTF血糖曲线下面积明显减少（P〈0．05）。WesternBlot结果显示，低氧组大鼠HIF-2α蛋白表达量明显高于常氧组（P〈0．05），低氧组和常氧组大鼠P-Akt、Akt、P-Gsk-3β、Gsk-3β蛋白表达量无明显差异（P〉0．05）。qRT-PCR结果显示，与常氧组相比，低氧组大鼠1w和4WG6PCmRNA表达量明显低于常氧组（P〈0．05），低氧组大鼠4WPEPCKmRNA表达量明显降低（P〈0．05）。结论持续性低氧可增加大鼠肝脏HIF-2α的表达，降低血糖。降糖机制可能为通过抑制肝脏糖异生关键酶G6PC、PEPCK的表达来抑制糖异生。

摘要： Objective To investigate the diagnostic significance of combined detection of rheumatoid factor (RF),anti-cyclic cit-rullinated antibody (anti-CCP antibody),glucose-6-phosphatase (GPI)and anti-RA33 antibody in rheumatoid arthritis (RA).Meth-ods One hundred and twenty-six patients with RA,60 patients with other autoimmune diseases and 60 healthy subjects undergoing physical examination were selected as the research subjects.The singled detection of RF,anti-CCP antibody,GPI and anti-RA33 an-tibody,and their combined detection were used to analyze their roles in RA diagnosis.Results Compared with the healthy control group,the four indexes in the RA group were increased,the difference was statistically significant (P<0.05),the RF level in the autoimmune diseases group was increased compared with the control group,the difference was statistically significant(P<0.05). Compared with the the autoimmune diseases group,the four indexes in the RA group were increased,the difference was statistically significant (P<0.05).The sensitivity and specificity of RF to RA were 77.77% and 63.33%;the sensitivity and specificity of anti-CCP antibody to RA were 69.04% and 95.00%;the sensitivity and specificity of GPI antibody to RA were 25.40% and 100.00%;the sensitivity and specificity of anti-RA33 antibody were 27.77% and 99.16%,respectively.The specificity of combined 2 indica-tors was increased from 63.33% to 85.00%,which of combined 3 indicators was increased to 93.33% and which of combined 4 in-dicators even reached to 100.00%.Conclusion The combination of RF,anti-CCP antibody,GPI and anti-RA33 antibody indicators greatly increases with the sensitivity and specificity for diagnosing RA and has clinical significance.%目的：通过联合检测类风湿因子（RF）、抗环瓜氨酸（CCP）抗体、葡萄糖-6-磷酸酶（GPI）和抗RA33抗体，探讨其在类风湿关节炎（RA）中的诊断意义。方法选取确诊的RA患者126例（RA组），其他自身免疫病患者60例（自免组）及体检健康人群60例（对照组）作为研究对象。分析单独和联合检测RF、抗CCP抗体、GPI 和抗RA33抗体在RA 诊断中的作用。结果 RA组4项指标与对照组比较均升高，差异有统计学意义（P＜0．05）；自免组RF与对照组比较也升高，差异有统计学意义（P＜0．05）。RA组4项指标与自免组比较均升高，差异有统计学意义（P＜0．05）。RF 对 RA 的敏感度和特异度为77．77％和63．33％；抗CCP抗体对RA的敏感度和特异度为69．04％和95．00％；GPI对RA的敏感度和特异度为25．40％和100．00％；抗RA33抗体对RA的敏感度和特异度为27．77％和99．16％。联合检测两项，特异度由原来的63．33％增加到85．00％，联合3个指标，特异度就增加到了93．33％，联合4项指标，特异度高达100．00％。结论 RF、抗CCP抗体、GPI和抗RA33抗体4项指标联合用于RA诊断，其敏感度和特异度都有了很大的提高，具有临床意义。

摘要： 脂联素是由脂肪组织分泌的一种特异性脂肪因子，具有降低血糖、抗动脉粥样硬化、以及抗炎效应。可以作为胰岛素抵抗以及代谢病综合征的早期诊断指标。利用Gateway表达体系成功构建了人脂联素的表达载体，并且在大肠杆菌进行脂联素蛋白的表达，对蛋白纯化以及利用NDSB201进行高效复性。复性后的重组脂联素蛋白作用于体外培养的肝细胞，在无胰岛素存在的条件下，使肝糖生成的关键酶-葡萄糖-6-磷酸酶转录水平下降。

摘要： 脂联素是由脂肪组织分泌的一种特异性脂肪因子，具有降低血糖、抗动脉粥样硬化、以及抗炎效应。可以作为胰岛素抵抗以及代谢病综合征的早期诊断指标。利用Gateway表达体系成功构建了人脂联素的表达载体，并且在大肠杆菌进行脂联素蛋白的表达，对蛋白纯化以及利用NDSB201进行高效复性。复性后的重组脂联素蛋白作用于体外培养的肝细胞，在无胰岛素存在的条件下，使肝糖生成的关键酶-葡萄糖-6-磷酸酶转录水平下降。

摘要： 脂联素是由脂肪组织分泌的一种特异性脂肪因子，具有降低血糖、抗动脉粥样硬化、以及抗炎效应。可以作为胰岛素抵抗以及代谢病综合征的早期诊断指标。利用Gateway表达体系成功构建了人脂联素的表达载体，并且在大肠杆菌进行脂联素蛋白的表达，对蛋白纯化以及利用NDSB201进行高效复性。复性后的重组脂联素蛋白作用于体外培养的肝细胞，在无胰岛素存在的条件下，使肝糖生成的关键酶-葡萄糖-6-磷酸酶转录水平下降。

摘要： 脂联素是由脂肪组织分泌的一种特异性脂肪因子，具有降低血糖、抗动脉粥样硬化、以及抗炎效应。可以作为胰岛素抵抗以及代谢病综合征的早期诊断指标。利用Gateway表达体系成功构建了人脂联素的表达载体，并且在大肠杆菌进行脂联素蛋白的表达，对蛋白纯化以及利用NDSB201进行高效复性。复性后的重组脂联素蛋白作用于体外培养的肝细胞，在无胰岛素存在的条件下，使肝糖生成的关键酶-葡萄糖-6-磷酸酶转录水平下降。

摘要： 脂联素是由脂肪组织分泌的一种特异性脂肪因子，具有降低血糖、抗动脉粥样硬化、以及抗炎效应。可以作为胰岛素抵抗以及代谢病综合征的早期诊断指标。利用Gateway表达体系成功构建了人脂联素的表达载体，并且在大肠杆菌进行脂联素蛋白的表达，对蛋白纯化以及利用NDSB201进行高效复性。复性后的重组脂联素蛋白作用于体外培养的肝细胞，在无胰岛素存在的条件下，使肝糖生成的关键酶-葡萄糖-6-磷酸酶转录水平下降。

摘要： 脂联素是由脂肪组织分泌的一种特异性脂肪因子，具有降低血糖、抗动脉粥样硬化、以及抗炎效应。可以作为胰岛素抵抗以及代谢病综合征的早期诊断指标。利用Gateway表达体系成功构建了人脂联素的表达载体，并且在大肠杆菌进行脂联素蛋白的表达，对蛋白纯化以及利用NDSB201进行高效复性。复性后的重组脂联素蛋白作用于体外培养的肝细胞，在无胰岛素存在的条件下，使肝糖生成的关键酶-葡萄糖-6-磷酸酶转录水平下降。

摘要： 本发明公开了一种用于新生儿葡萄糖六磷酸脱氢酶缺乏症筛查的试剂盒及其制备方法。本发明所述用于新生儿葡萄糖六磷酸脱氢酶缺乏症筛查的试剂盒由底物试剂干粉、底物复溶试剂、铜试剂、反应板以及滤纸干血片质控品组成。本发明所述试剂盒的检测结果准确性和灵敏度高，稳定性好，兼具经济、简便、高效等优点，应用于新生儿筛查工作中时，有利于提高杂合子的检出率，增加判断的准确性。

摘要： 本发明涉及利用包含酶和电子传递物质的反应体系测定葡萄糖浓度的技术。在本发明中，提供了使用结合有细胞色素C的葡萄糖脱氢酶或源自属于伯克霍尔德氏属的微生物的葡萄糖脱氢酶作为酶、使用Ru化合物作为电子传递物质的葡萄糖浓度测定方法。在本发明中，还提供了使用结合有细胞色素C的葡萄糖脱氢酶或源自属于伯克霍尔德氏属的微生物的葡萄糖脱氢酶作为酶、使用Ru化合物作为电子传递物质的葡萄糖传感器。

摘要： 过表达磷酸葡萄糖变位酶基因和尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶基因的工程菌及构建方法，涉及基因工程及微生物发酵。公开了一株同时过表达磷酸葡萄糖变位酶基因和尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶基因的地衣芽孢杆菌及其构建方法，克隆了多糖絮凝剂合成途径的关键酶磷酸葡萄糖变位酶基因(pgcA)和尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶基因(gtaB1)，利用大肠杆菌－芽孢杆菌穿梭质粒构建重组表达载体。通过电转化的方法将重组质粒导入到地衣芽孢杆菌，构建了重组地衣芽孢杆菌HN301‑5，本发明构建的重组地衣芽孢杆菌比出发菌株的多糖絮凝剂产量提高了20.77％。可望用于多糖絮凝剂的工业化生产，提高产量，降低成本。

摘要： 本发明公开了一种6‑磷酸氨基葡萄糖磷酸酶突变体，属于基因工程和酶工程领域。本发明采用理性设计的方法，经过多轮定点突变，提供了一系列来源于多形拟杆菌的6‑磷酸氨基葡萄糖磷酸酶突变体。与野生型6‑磷酸氨基葡萄糖磷酸酶相比，突变体具有明显提高的热稳定性和催化活力。本发明所示6‑磷酸氨基葡萄糖磷酸酶将在氨基葡萄糖的工业生产中显示出巨大的潜在价值。

摘要： 本公开涉及用于治疗1a型糖原贮积病(GSD‑Ia)及相关症状如低血糖症的mRNA疗法。用于本发明的mRNA当在体内施用时编码人葡萄糖‑6‑磷酸酶(G6Pase或G6PC)及其功能片段和变体。本发明的mRNA优选包封在脂质纳米颗粒(LNP)中，以在施用时实现向受试者的细胞和/或组织有效递送。本发明的mRNA疗法增加和/或恢复受试者中的G6PC表达和/或活性的缺陷水平。本发明的mRNA疗法还增加葡萄糖产生，并减少与GSD‑Ia相关的糖原和/或6‑磷酸葡萄糖的异常积累。

摘要： 本发明公开了一种重组枯草芽孢杆菌，在重组枯草芽孢杆菌BSGNK的基础上，进一步过表达6‑磷酸氨基葡萄糖合成酶（GlmS），得到重组菌BSGNKS；所述重组枯草芽孢杆菌BSGNK，是以B. subtilis 168 Δ nagP Δ gamP Δ gamA Δ nagA Δ nagB Δ ldh Δ pta Δ glck::lox72为宿主，分别以启动子PxylA、P43控制glms、GNA1的重组表达；还公开了重组枯草芽孢杆菌过表达6‑磷酸氨基葡萄糖合成酶促进乙酰氨基葡萄糖合成的方法，得到的重组枯草芽孢杆菌可提高乙酰氨基葡萄糖在胞外积累和底物的转化效率，发酵上清液中乙酰氨基葡萄糖含量为11.4 g/L，与对照菌BSGNK相比分别提高了37.4%，为进一步代谢工程改造枯草芽孢杆菌生产氨基葡萄糖奠定了基础，且重组枯草芽孢杆菌构建方法简单，便于推广使用。

摘要： 本发明公开了一种用于新生儿葡萄糖六磷酸脱氢酶缺乏症筛查的试剂盒及其制备方法。本发明所述用于新生儿葡萄糖六磷酸脱氢酶缺乏症筛查的试剂盒由底物试剂干粉、底物复溶试剂、铜试剂、反应板以及滤纸干血片质控品组成。本发明所述试剂盒的检测结果准确性和灵敏度高，稳定性好，兼具经济、简便、高效等优点，应用于新生儿筛查工作中时，有利于提高杂合子的检出率，增加判断的准确性。

摘要： 本发明是一种葡萄糖六磷酸脱氢酶(G6PD)测定试剂的制造方法，属生物化学、检验试剂领域，本发明它直接用压积红细胞测定酶的活性，不受患者贫血程度的影响，排除患者本身的6PGD的干扰，提高G6PD杂合子的检出率。试剂液体状态在2～8°C下贮存，质量稳定。测定吸样后10分钟出结果，随到随做。它包括蒸馏水3，其特征是由试剂1和试剂2组成，试剂1包含氯化镁0.2～2.0％；乙二胺四乙酸二钠0.02～0.2％；氧化型辅酶II 0.02～0.2％；六磷酸葡萄糖酸三钠0.01～0.1％；三羟甲基氨基甲烷1.5～2.0％；盐酸0.8～2.0％；乳化剂0.2～0.5％；蒸馏水97.25～93％；试剂2不含六磷酸葡萄糖酸二钠，而含有葡萄糖六磷酸二钠0.2～0.5％。试剂均为无色透明液体，灌装成单瓶使用。

摘要： 本发明公开一种产生三叶苷的方法。所述方法包括：在允许形成三叶苷的条件下使包含与SEQ ID NO：8至少90％相同并具有4'‑O‑葡萄糖基转移酶活性的氨基酸序列的多肽与根皮素和尿苷二磷酸葡萄糖进行接触，从而产生三叶苷。并公开了一种制备产生三叶苷的一植物的方法、基因转殖植物或植物细胞以及产生基因转殖植物的方法。还公开了包含三叶苷的组合物。

摘要： 本发明公开了一种多肽——N－乙酰氨基葡萄糖－1－磷酸二酯－N－乙酰氨基葡萄糖苷酶－15.84，编码此多肽的多核苷酸和经DNA重组技术产生这种多肽的方法。本发明还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如恶性肿瘤，血液病，HIV感染和免疫性疾病和各类炎症等。本发明还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明还公开了编码这种新的N－乙酰氨基葡萄糖－1－磷酸二酯－N－乙酰氨基葡萄糖苷酶－15.84的多核苷酸的用途。