FoxO1

摘要： 背景:研究证实骨髓间充质干细胞具有增加骨保护素水平、促进骨代谢的作用。目的:探讨骨髓间充质干细胞对骨质疏松大鼠骨代谢的影响。方法:实验所用健康SD大鼠42只,随机分为假手术组、骨质疏松组、干细胞移植组,每组14只,后2组采用去卵巢法制备大鼠骨质疏松症模型,造模成功后干细胞移植组经尾静脉移植骨髓间充质干细胞,移植28 d后采用ELISA法检测各组大鼠血清骨保护素、碱性磷酸酶、抗酒石酸酸性磷酸酶、骨钙素、胰岛素样生长因子1水平;Western blot检测各组大鼠骨组织中FoxO1的表达;AG-IX生物力学万能试验机检测股骨最大载荷和断开裂载荷;苏木精-伊红染色观察大鼠骨形态学改变。结果与结论:①骨质疏松组骨保护素、碱性磷酸酶、胰岛素样生长因子1水平低于假手术组(P<0.05),抗酒石酸酸性磷酸酶、骨钙素水平高于假手术组(P<0.05);干细胞移植组骨保护素、碱性磷酸酶、胰岛素样生长因子1水平高于骨质疏松组(P<0.05),抗酒石酸酸性磷酸酶、骨钙素的表达水平低于骨质疏松组(P<0.05);②骨质疏松组最大载荷、断裂载荷值均低于假手术组(P<0.05);干细胞移植组最大载荷、断裂载荷值高于骨质疏松组(P<0.05);③干细胞移植组骨小梁明显增粗,排列较为有序,局部间隙较均匀,较骨质疏松组明显改善;④骨质疏松组大鼠骨髓组织中FoxO1蛋白表达水平低于假手术组(P<0.05);干细胞移植组大鼠骨髓组织中FoxO1蛋白表达水平高于骨质疏松组(P<0.05);⑤结果表明,骨髓间充质干细胞移植可提高骨质疏松大鼠骨代谢水平,其作用机制与促进骨保护素、碱性磷酸酶、FoxO1的表达有关。

摘要： 蛋白-蛋白相互作用(protein-protein interactions,PPIs)是细胞生命活动的基础,以BioID和APEX为代表的蛋白质邻近标记技术逐渐被应用于蛋白质相互作用研究[1,2]。由于蛋白的相互作用大多是依靠氢键、盐键和疏水相互作用力进行,它们的空间距离都非常的短,所以通常认为互作的蛋白必定相互邻近[3]。TurboID是一种比BioID或APEX具有更高催化效率的蛋白质(标记时间从18 h缩短至10 min),由于很多蛋白发挥的结合与催化作用是很短暂的,理论上利用这个技术可以找到一些比较新颖的结合蛋白[4]。大量研究表明,FOXO1调控许多靶点,如参与细胞凋亡和自噬的基因、抗氧化酶、细胞周期阻滞基因以及代谢和免疫调节因子[5-6],被认为是一种具有复杂活性的超级转录因子。因此,我们将利用TurboID的高效性来寻找FOXO1的互作蛋白。

摘要： 目的探讨miR-581对卵巢癌SKOV3细胞自噬的影响及作用机制。方法将miR-581 mimics和miR-581 NC转染到卵巢癌SKOV3细胞中,实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)检测转染效率;转染成功后,Western blot检测转染后卵巢癌SKOV3细胞中自噬相关蛋白的表达水平;TargetScanHuman数据库预测miR-581靶基因,Western blot验证miR-581与靶基因的作用。结果过表达miR-581后可显著抑制自噬相关蛋白LC3Ⅱ和Beclin1的表达(P<0.01);miR-581可负向调控FOXO1的表达(P<0.01);FOXO1促进卵巢癌SKOV3细胞自噬(P<0.05)。结论miR-581通过调控FOXO1的表达影响卵巢癌SKOV3细胞自噬。

摘要： 目的:探究丙泊酚是否通过激活SIRT1/Foxo1信号通路对脑缺血再灌注损伤诱导血脑屏障破坏发挥保护作用。方法:48只大鼠随机分为假手术组(Sham组),脑缺血再灌注组(I/R组),脑缺血再灌注+丙泊酚组(I/R+Propofol组),脑缺血再灌注+丙泊酚+SIRT1抑制剂EX527组(I/R+Propofol+EX527组),每组各12只。通过大鼠脑缺血120min,再灌注24h建立脑缺血再灌注模型。EX527(5mg/kg)于手术前通过蛛网膜下腔注射。丙泊酚(10mg/kg)于脑缺血过程中,尾静脉注射。再灌注24h后评估神经功能、检测脑梗死体积、血脑屏障通透性、炎性细胞因子含量、紧密连接蛋白和SIRT1/Foxo1信号相关蛋白表达情况,并比较各组间的差异。结果:与Sham组相比,I/R组神经功能障碍评分升高,脑梗死体积增加,脑组织中伊文思蓝透过率增加。与I/R组相比,I/R+Propofol组神经功能障碍评分降低,脑梗死体积减少,伊文思蓝透过率降低,脑脊液中IL-1β、IL-6含量明显减少,缺血区基底层组织中SIRT1表达增加,Ac-Foxo1、NLRP3表达减少,紧密连接蛋白Claudin-1,Occludin与ZO-1表达增加(均P<0.05)。而I/R+Propofol+EX527组上述丙泊酚脑保护作用均减弱(P<0.05)。结论:丙泊酚对脑缺血再灌注过程中血脑屏障的完整性具有保护作用,其机制可能是其能激活SIRT1/Foxo1信号通路,抑制炎症反应,增加紧密连接蛋白表达。

摘要： 目的探讨振动运动对2型糖尿病大鼠糖脂代谢的影响及骨骼肌叉头框转录因子O亚族1(FOXO1)、丙酮酸脱氢酶激酶4(PDK4)、葡萄糖转运子4(GLUT4)蛋白表达的影响。方法2型糖尿病大鼠模型的制备,采用高脂高糖膳食喂养大鼠,腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)的方法。采用高脂高糖饮食喂养雄性SD大鼠8 w后,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分组。运动方式:每天运动2次,每次15 min,振幅峰值为3 mm,每周运动6 d,共运动8 w。运动结束后,测定空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、血脂等生化指标;测定血清中IL-6、TNF-α含量,测定大鼠骨骼肌组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。HE染色观察骨骼肌病理变化。Western blot检测FOXO1、PDK4、GLUT4蛋白的表达情况。结果振动运动中高频率组FBG、TG、TC、LDL-C含量与模型组比较显著降低,而HDL-C含量显著升高;血清中IL-6、TNF-α含量明显降低、骨骼肌中SOD的活性升高、MAD含量降低。HE染色显示中、高频率振动组大鼠骨骼肌断裂较少,肌丝走形紊乱明显改善。FOXO1、PDK4显著降低、GLUT4蛋白表达明显升高。结论振动运动可降低糖尿病大鼠血糖、血脂,降低FOXO1、PDK4蛋白表达、提高GLUT4蛋白表达,缓解糖尿病大鼠骨骼肌的病理损伤。

摘要： 【目的】探讨微小RNA(miR)-96-5p通过靶向叉头状转录因子O1(FOXO1)基因对子宫内膜癌细胞增殖和侵袭的影响。【方法】qRT-PCR检测正常组织和子宫内膜癌组织中miR-96-5p和FOXO1 mRNA的表达,West⁃ern blot法检测FOXO1蛋白表达。分析miR-96-5p及FOXO1表达与子宫内膜癌临床病理特征的关系。转染pcD⁃NA、pcDNA-FOXO1、inhibitor NC、miR-96-5p inhibitor、miR-96-5p mimic、miR-96-5p+FOXO1到子宫内膜癌Ishi⁃kawa细胞,分别记为pcDNA组、FOXO1组、inhibitor NC组、miR-96-5p inhibitor组、miR-96-5p组、miR-96-5p+FOXO1组,对照组不进行转染。取稳定转染的各组细胞,CCK-8和Transwell小室检测细胞活力和侵袭能力,West⁃ern blot检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、活化多聚ADP核糖聚合酶(cleaved PARP)、p21及波形蛋白的表达水平。TargetScan网站预测miR-96-5p与FOXO1的靶向关系,双荧光素酶报告基因检测细胞荧光素酶活性。Ishikawa细胞分为mimic NC组、miR-96-5p组、inhibitor NC组、miR-96-5p inhibitor组,qRT-PCR检测各转染组miR-96-5p和FOXO1 mRNA的表达,Western blot法检测FOXO1蛋白表达。【结果】子宫内膜癌组织中miR-96-5p的相对表达量较正常组织上调,相反,FOXO1 mRNA和蛋白相对表达量下调(P<0.01)。子宫内膜癌患者中miR-96-5p高表达与病理分级和临床分期呈正相关(P=0.034,P=0.010),与年龄和是否绝经无明显相关性(P=0.370,P=0.166);FOXO1低表达与病理分级和临床分期呈负相关(P=0.023,P=0.007),与年龄和是否绝经无明显相关性(P=0.344,P=0.144)。过表达FOXO1或抑制miR-96-5p表达后,Ishikawa细胞活力明显降低(P<0.05)、侵袭细胞数减少(P<0.01),cyclin D1、Vimentin蛋白表达水平明显降低,而cleaved PARP、p21蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。与对照组比较,miR-96-5p组Ishikawa细胞活力明显升高(P<0.05)、侵袭细胞数增加(P<0.01),Cyclin D1、Vimentin蛋白表达水平明显升高,而cleaved PARP、p21蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。与miR-96-5p组比较,过表达FOXO1可明显逆转miR-96-5p对Ishikawa细胞活力和侵袭的促进作用(P<0.05)。miR-96-5p靶向并负调控FOXO1的表达(P<0.05)。【结论】miR-96-5p可通过靶向负调控FOXO1促进子宫内膜癌细胞的增殖和侵袭。

摘要： 目的:探讨碘化N-正丁基氟哌啶醇(F_(2))减轻小鼠心肌缺血再灌注损伤的机制。方法:通过结扎C57BL/6J小鼠的左冠状动脉前降支建立整体心肌缺血再灌注模型,采用超声心动图评估小鼠心功能,全自动生化分析仪检测血清心肌酶的活性,蛋白质印迹法检测心肌组织中FoxO1蛋白的表达,二氢乙锭探针法检测心肌组织的活性氧水平。结果:与模型组小鼠相比,小鼠心肌缺血再灌注前给予F_(2)预适应后,左室射血分数和短轴缩短率均升高(P值均<0.01),血清乳酸脱氢酶、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶的漏出减少(P值均<0.01),心肌组织中FoxO1蛋白的表达增加(P<0.01),给予FoxO1的特异性抑制剂AS1842586后,F_(2)对活性氧的抑制作用减弱(P<0.05)。结论:F_(2)可能通过上调FoxO1蛋白的表达来降低心肌组织的活性氧水平,从而减轻心肌缺血再灌注损伤。

摘要： 研究以初孵扬子鳄(Alligator sinensis)性腺组织为实验材料,开展Forkhead box家族蛋白-1(FoxO1)基因CDS区克隆和序列特征分析。利用免疫组织化学检测其在胃、肠和肺脏等组织中的表达谱,结合免疫荧光(IF)、RT-PCR和Western Blot探讨其在不同出壳后日龄(17日龄、63日龄和96日龄)雌性扬子鳄性腺组织中的时空表达规律,探讨其在雌性扬子鳄性腺发育过程中的生物学功能。研究成功克隆获得FoxO1基因长度为1941 bp的完整编码区及646个预测编码氨基酸序列。与其他物种间进行同源性比对和构建进化树分析发现,扬子鳄FoxO1基因与鸟类的亲缘关系相较中华鳖(Pelodiscus sinensis)和原矛头蝮(Protobothrops mucrosquamatus)等爬行动物更近。在其他脊椎动物中,哺乳动物、硬骨鱼和两栖物种也各自聚类称为子群,表明FoxO1兼具功能保守性和种间特异性;免疫组织化学结果表明FoxO1在初孵鳄性腺复合体、肺、胃和肠中均有表达,免疫荧光结果表明17日龄性腺组织中的FoxO1主要表达于肾上腺和中肾区但在皮质部呈微弱表达,在63日龄性腺皮质部表达逐渐上调且呈无规则随机分布,在96日龄性腺皮质部中卵母细胞发育程度更高的位置呈强表达;RT-PCR结果表明不同时期扬子鳄性腺组织FoxO1基因mRNA表达量差异不显著, Western Blot结果显示性腺组织中的FoxO1表达量呈先上升后下降的变化模式,表现为63日龄FoxO1基因表达量显著高于17日龄和96日龄,相关结果对于丰富扬子鳄卵子发生调控机制提供了重要的研究参考。

摘要： FoxO1是叉头框(forkhead box,FOX)转录因子“O”亚家族的成员之一。在多种人类肿瘤中FoxO1已经被确定为抑制因子,且表达水平下调,多种生物过程靶基因表达的调控都有FoxO1蛋白参与。FoxO1对于卵巢癌的发生发挥着重要作用,FoxO1通过PIK3/AKT信号通路、Mirk/DYRK1B信号通路、Wnt/β-catenin信号通路发挥抑制癌细胞增殖和促进癌细胞凋亡、增加其对化学药物的敏感性、抑制肿瘤细胞发生EMT的作用,以及Trx1通过诱导FoxO1增加卵巢癌细胞的耐药性等。本文就卵巢癌中FoxO1的多种作用及其分子机制进行综述,为卵巢癌发病分子机制的进一步深入研究及其有关治疗提供理论参考。

摘要： In order to explore the role of forkhead box protein O1(FoxO1)in the lipid metabolism and cell proliferation,goose primary hepatocytes were isolated and incubated with insulin or PI3K-Akt-mTOR pathway dual inhibitor NVPBEZ235,and then transfected with FoxO1 interference plasmid.The related parameters of lipid metabolism and cell proliferation were measured.The results firstly showed that FoxO1 interference increased the intracellular TG and lipids concentration(P0.05).Lastly,the decrease of intracellular TG and lipids concentration and PI induced by NVP-BEZ235 was up-regulated by FoxO1 interference significantly(P<0.05).In summary,FoxO1 could regulate the lipids metabolism and cell proliferation mediated by PI3K-Akt-mTOR signaling pathway in goose primary hepatocytes.Further investigations are required to highlight the potential role of FoxO1 in the lipid metabolism and cell proliferation mediated by insulin in goose primary hepatocyte.

摘要： 本发明公开了H3K27me3调控FoxO1基因表达在猪卵巢颗粒细胞中的应用。本发明通过研究H3K27me3对FoxO1基因表达的调控和FoxO1对卵巢颗粒细胞周期进程、增殖、凋亡及类固醇激素的分泌的影响，证明H3K27me3靶向结合FoxO1，抑制FoxO1的转录表达；激活H3K27me3抑制FoxO1基因的转录表达，抑制卵巢颗粒细胞的凋亡和孕酮分泌，促进卵巢颗粒细胞的分裂、增殖和睾酮分泌；抑制H3K27me3促进FoxO1基因的转录表达，促进卵巢颗粒细胞的凋亡和孕酮分泌，抑制卵巢颗粒细胞的分裂、增殖和睾酮分泌；为H3K27me3和FoxO1基因在卵巢颗粒细胞中的表达调控机制研究积累材料。

摘要： 本发明属于分子生物学检测领域，具体涉及一种FOXO1基因SNP标记检测藏鸡经济性状的方法及其应用。具体技术方案为：一种影响藏鸡性状的SNP分子标记，所述SNP分子标记位于藏鸡FOXO1基因对参考序列Genbank Accession No.NC_006088.5的第3187位点的碱基处，突变碱基为T或G。本发明首次发现，藏鸡FOXO1基因第3187位处，如果发生T‑G突变，会直接关系到是否出现BTSI‑V2酶切位点；且GT基因型的个体，各方面的经济性状均有明显提升。因此，利用该突变位点可简单、快速、准确、高效地检测藏鸡的经济性状，并可直接应用到藏鸡选育中，以提升藏鸡的经济性能。

摘要： 本发明公开了FOXO3和TP53的甲基化位点组合及其作为迟发性哮喘诊断标志物的应用，本发明首次发现了FOXO3和TP53基因的DNA甲基化水平与哮喘严重程度及迟发性哮喘发生发展相关，对于解释迟发性哮喘的发病具有重要意义；本发明提供了一种诊断产品，通过检测外周血中FOXO3和TP53基因的DNA甲基化水平，实现迟发性哮喘的早期无创诊断，以期实现迟发性哮喘的早期治疗。本发明通过检测外周血中FOXO3和TP53基因DNA甲基化水平来用于临床哮喘患者病情的严重程度评估及迟发性哮喘的早期预测。相比现有检测手段而言，具有创伤小，检测便捷，敏感性高，患者接受程度高的优势。

摘要： 本发明提出了JNK信号通路抑制剂以及任选的mTOR信号通路抑制剂和嘧啶吲哚衍生物在上调造血干细胞FOXO1基因表达中的用途。由此，将JNK信号通路抑制剂以及任选的mTOR信号通路抑制剂和嘧啶吲哚衍生物作用于造血干细胞，可以有效地上调FOXO1基因表达，为FOXO1基因的调控提供了可靠的研究手段，为通过FOXO1调控造血干细胞功能的研究和临床应用奠定了基础，具有重要的科研和临床转化价值。

摘要： 本发明涉及一种草鱼FoxO1多肽抗原、抗体及其制备方法、应用，属于生物化学及分子免疫学技术领域。本发明对草鱼FoxO1全长功能蛋白质氨基酸序列的二级结构、免疫原性、亲疏水性、表面可及性等进行分析，发现草鱼FoxO1蛋白近N端有15个氨基酸抗原性、亲水性及表面可及性较强，因此将其作为合适的草鱼FoxO1多肽抗原。以该FoxO1多肽抗原为免疫原免疫新西兰兔制备得到了抗草鱼FoxO1多肽抗原的多克隆抗体，可特异性识别草鱼组织中FoxO1全长功能蛋白质，填补了草鱼FoxO1全长功能蛋白质检测研究领域的空白，为草鱼FoxO1全长功能蛋白质调控动物脂肪代谢功能的研究奠定基础。

摘要： 本发明属于生物技术与缺血性脑卒中领域，具体涉及一种环状RNA circ‑FoxO3在制备防治缺血性脑卒中产品中的应用。该环状RNA在人源或小鼠源型物种中高度保守，具有相同的反向剪切位点，本发明证实circ‑FoxO3在MCAO/R小鼠脑血管内皮细胞中，以及经OGD/R处理的脑血管内皮细胞系中高表达；通过敲低或过表达circ‑FoxO3，显示其在经OGD/R处理的内皮屏障中具有一定的保护作用。本发明为预防急性缺血性脑卒中后出血转化提供了新思路，为开发神经血管保护剂提供了新的靶点。

摘要： 本发明提供了一种抑制FOXO1基因表达的siRNA及其前体和应用，具体地，本发明提供了一种siRNA前体序列以及由其产生的siRNA，本发明的siRNA及其前体可有效治疗FOXO1基因相关的疾病。

摘要： 本发明公开了FOXO3a‑DRI肽段、其药物组合物及应用，所述肽段以FOXO3a的147‑179氨基酸序列作为肽段母版进行氨基酸逆向排序，对获得的FOXO3a 147‑179逆向序列进行全D型合成得到；所述FOXO3a‑DRI肽段具有显著减少尿蛋白，改善足细胞凋亡与损伤，抑制肾小球损伤与肾脏纤维化和DKD进展的作用，可用于制备有效治疗或预防DKD的药物，有效推进了治疗或预防糖尿病肾病药物的研究进展。

摘要： 本发明属于分子生物学检测领域，具体涉及一种FOXO1基因SNP标记检测藏鸡经济性状的方法及其应用。具体技术方案为：一种影响藏鸡性状的SNP分子标记，所述SNP分子标记位于藏鸡FOXO1基因对参考序列Genbank Accession No.NC_006088.5的第3187位点的碱基处，突变碱基为T或G。本发明首次发现，藏鸡FOXO1基因第3187位处，如果发生T‑G突变，会直接关系到是否出现BSTI‑VⅡ酶切位点；且GT基因型的个体，各方面的经济性状均有明显提升。因此，利用该突变位点可简单、快速、准确、高效地检测藏鸡的经济性状，并可直接应用到藏鸡选育中，以提升藏鸡的经济性能。

摘要： 本发明属于生物技术与缺血性脑卒中领域，具体涉及一种环状RNA circ‑FoxO3在制备防治缺血性脑卒中产品中的应用。该环状RNA在人源或小鼠源型物种中高度保守，具有相同的反向剪切位点，本发明证实circ‑FoxO3在MCAO/R小鼠脑血管内皮细胞中，以及经OGD/R处理的脑血管内皮细胞系中高表达；通过敲低或过表达circ‑FoxO3，显示其在经OGD/R处理的内皮屏障中具有一定的保护作用。本发明为预防急性缺血性脑卒中后出血转化提供了新思路，为开发神经血管保护剂提供了新的靶点。