脂滴

摘要： 脂肪肝(fatty liver,FL)是肝细胞内脂肪过度贮集形成的,近来认为,脂滴(lipid droplets,LD)才是它形成的根。随着电镜、探针、高分辨率显微镜、显微分光术及组学检测的发展,在内质网(ER)形成的由脂质和蛋白质构成的LD,是一种高动力性多动能的细胞器。探讨LD的生物学和生化学的改变与FL的关联已是目前研究的热点;。

摘要： 目的 探讨二乙基二硫代氨基甲酸(DDC)对肝星状细胞(HSCs)中脂滴蛋白Perilipin 5(Plin5)表达的调控作用及对HSCs活化的影响。方法 将雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为3组:对照组给予正常饮食喂养;模型组给予胆碱缺乏、L-氨基酸替代蛋白饲料(CDAA)喂养,建立非酒精性脂肪性肝炎(NASH)纤维化模型;治疗组给予DDC灌胃治疗。GFAP和Plin5免疫荧光双染观察小鼠肝组织HSCs中Plin5表达,明确DDC对HSCs中Plin5表达的调控作用。应用DDC处理人肝星状细胞系LX-2,Real-time PCR方法检测Plin5表达,脂滴染色观察脂滴变化,明确DDC对LX-2细胞Plin5表达及脂滴形成的影响;Real-time PCR方法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Ⅲ型胶原等的表达,明确DDC对LX-2细胞活化的影响。结果 在CDAA饮食诱导的NASH肝纤维化小鼠肝组织中,Plin5在HSCs中的表达较对照组显著降低;与模型组相比,DDC治疗组小鼠肝组织中Plin5在HSCs中表达显著升高。与对照组相比,DDC组处理12 h及24 h时,Plin5的mRNA相对表达量均显著增高(1.00±0.15 vs.1.93±0.70;1.00±0.33 vs.1.86±0.09),差异有统计学意义(P <0.05)。同时,LX-2脂滴染色结果显示,与对照相比,DDC组处理后LX-2细胞中脂滴数量显著增多[(0.71±0.12)%vs.(1.32±0.15)%],差异有统计学意义(P <0.05),且脂滴多位于细胞核周围,提示DDC可促进LX-2细胞恢复静止状态。与对照组相比,DDC组处理12 h及24 h时可显著抑制LX-2细胞中α-SMA、Ⅲ型胶原表达(1.00±0.07 vs.0.36±0.21;1.00±0.12 vs.0.66±0.02;1.00±0.04 vs.0.63±0.26;1.00±0.15 vs.0.76±0.07),差异均有统计学意义(P <0.05),提示DDC可抑制LX-2活化。结论 DDC可以上调HSCs中Plin5表达,促进脂滴形成并抑制HSCs活化。

摘要： 脂滴是脂肪组织的基本单位,是维持脂质和能量稳态的一种动态细胞器,脂滴相关蛋白参与调控胞内脂类代谢、膜运输以及信号传导等多个生理过程。脂滴在动物各个组织器官中的功能不尽相同,可通过营养及生理手段调节畜禽外周组织中的脂滴变化,进一步影响畜禽胴体性状及肉品质。本文简述了脂滴的生物学结构、脂滴蛋白分类、脂滴重塑、脂滴生物学功能及脂滴与肉品质的关系,以期为调控动物体脂代谢提供理论依据,从而达到改善畜禽胴体和肉品质的目的。

摘要： 目的探究丙型肝炎病毒(HCV)感染细胞小泛素样修饰物特异性蛋白酶3(SENP3)对脂滴水平的调节及其对HCV复制的影响。方法以感染性HCV病毒颗粒感染人HepG2细胞,采用Western blot法检测感染前后SENP3蛋白表达水平。采用脂质体法转染SENP3-siRNA至HepG2细胞,在感染HCV后采用Western blot法检测HCV核心蛋白表达量,采用qRT-PCR法检测HCV RNA水平,采用油红O染色观察细胞脂滴水平。以软脂酸处理敲低SENP3后的HepG2细胞,采用qRT-PCR法检测感染HCV后HCV RNA水平。结果在HCV感染HepG2细胞后1 d、3 d和6 d,HCV核心蛋白相对表达量分别为0.01±0.00、0.17±0.02和0.43±0.04,SENP3蛋白相对表达量分别为0.23±0.04、0.42±0.03和0.46±0.04,差异显著(P<0.05);转染SENP3-siRNA可有效降低SENP3表达并降低HCV感染后细胞HCV核心蛋白表达水平;SENP3敲低细胞HCV RNA相对水平为54.2±11.4%,较转染非特异性siRNA细胞显著降低(P<0.01);敲低SENP3蛋白表达后细胞脂滴数量显著减少;敲低SENP3的HepG2细胞感染HCV后HCV RNA相对水平为58.2±5.2%,较转染非特异性siRNA细胞显著降低(P<0.01),而以软脂酸处理敲低SENP3的HepG2细胞,在感染HCV后HCV RNA相对水平为74.6±6.4%,较未经软脂酸处理细胞显著升高(P<0.01)。结论在HCV感染肝细胞时SENP3可通过调节脂滴代谢促进HCV复制。

摘要： 旨在获得CIDEB、CIDEC基因的CDS,检测该家族基因在山羊不同组织中的表达量,预测其互作蛋白,为进一步揭示CIDE家族基因在脂代谢中的调控网络提供参考。主要利用RT-PCR克隆获得山羊CIDEB、CIDEC基因序列并利用在线工具分析CIDE家族蛋白的生物学特性,并预测其互作蛋白。利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测了CIDE家族基因在山羊不同组织中的表达水平,并检测各互作蛋白在其表达水平最高的组织中的表达量,利用SPSS分析其表达量之间的相关性。克隆获得了CIDEB基因CDS区660 bp,共编码219个氨基酸,CIDEC基因CDS区714 bp,编码237个氨基酸。进化树分析显示,山羊CIDEA、CIDEB、CIDEC均与绵羊亲缘关系最近。RT-qPCR检测发现CIDEA、CIDEB、CIDEC基因分别在山羊瘤胃、肝脏、小肠中表达量最高。CIDEA与DFFB和ELOVL3在瘤胃中的表达量具有极显著相关性(P<0.01),与DIO2、TMEM26、PRDM16、PLIN1具有显著相关性(P<0.05)。CIDEB与DFFA和SDR39U1在肝脏中的表达量具有显著相关性(P<0.05)。CIDEC与PLIN2、GPLD1、ADIPOQ在小肠中的表达量具有显著相关性(P<0.05)。通过分析发现了与CIDE家族表达量具有相关性的基因,可为进一步揭示CIDE基因在脂质代谢中的作用及其调控网络提供理论基础,且CIDE家族蛋白均为脂滴相关蛋白,也可为进一步研究精确的脂滴形成机制提供参考。

摘要： 目的 探究京尼平苷对肝细胞脂滴积累和脂滴相关蛋白Perilipin-2表达的影响。方法 采用葡萄糖耐量实验检测ob/ob小鼠的空腹血糖和糖耐量,Vitros-250化学分析仪检测血清甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)水平,HE、油红O染色检测ob/ob小鼠肝组织及油酸诱导的HepG2细胞中脂滴形成情况,RT-qPCR和Western blot法检测ob/ob小鼠肝组织和油酸处理的HepG2细胞中Perilipin-2 mRNA和蛋白表达。结果 京尼平苷可改善ob/ob小鼠胰岛素抵抗(P<0.05),降低ob/ob小鼠体质量、血清中TG和TC水平(P<0.05,P<0.01),减少肝组织中脂滴数量和大小,抑制脂滴相关蛋白Perilipin-2表达(P<0.05)及油酸诱导的HepG2细胞中脂滴的积累和Perilipin-2表达(P<0.05,P<0.01)。结论 京尼平苷可能通过抑制Perilipin-2表达减少脂滴的积累,进而改善非酒精性脂肪性肝病症状。

摘要： 脂滴(LD)是一种参与细胞内脂质代谢的多功能细胞器,主要由中性脂芯和磷脂单层膜构成,表面镶嵌脂滴相关蛋白以调节脂质的储存、运输和代谢。脂滴调节失衡可造成脂质代谢异常、血脂改变和免疫紊乱。近年来研究表明脂滴表面相关蛋白可以通过调节心肌和血管细胞,影响心脏脂质代谢和动脉粥样硬化生理病理过程。本文综述了脂滴在心脏和血管领域的研究成果,阐释了脂滴对心肌细胞、泡沫细胞形成和动脉粥样硬化的发生发展的影响,并总结脂滴与心血管疾病的关系,为以脂滴为靶标治疗心血管疾病提供思路。

摘要： 探究脂滴的界面组成对消化特性的影响,可为开发具有极性脂界面的脂滴提供理论依据。从酪乳粉中提取并浓缩制得乳极性脂浓缩物(MPL),以MPL和酪蛋白酸钠(CN)为乳化剂制备具有不同界面组成的脂滴,基于婴儿体外胃肠道消化模型分析了两者的体外消化特性。结果表明:与以CN为界面的脂滴相比,以MPL为界面的脂滴在消化过程中具有较高的脂肪酸释放量,且脂解率较高;由消化过程中粒径的变化可知,MPL组脂滴在消化过程中产生了更多的小颗粒脂滴,表明更多的大颗粒脂滴被水解;Zeta-电位的变化表明MPL组脂滴在消化过程中具有较好的稳定性,有利于消化反应的进行;在消化终点时,MPL组较CN组脂滴释放更多的游离棕榈酸、油酸单甘酯和亚油酸单甘酯。综上可知,以MPL为界面的脂滴在模拟婴儿消化过程中具有较好的消化特性。

摘要： 含patatin样磷脂酶结构域蛋白7(patatin-like phospholipase domain containing protein 7,PNPLA7)是一种定位于内质网膜上的溶血磷脂酶。PNPLA7在能量代谢和脂质转换活跃的组织中高表达,并且其表达受营养状态的调控。PNPLA7通过与载脂蛋白E相互作用调节极低密度脂蛋白的分泌,进而调控脂肪在肝脏中的积累。环核苷酸,如环腺苷酸,调控PNPLA7与脂肪的储存细胞器脂滴的结合。本文综述了近年PNPLA7的研究现状,并就其未来研究进行了展望。

摘要： 脂滴(lipid droplets,LDs)是由单层磷脂包裹中性脂质的油状液滴,起源于内质网,在胞浆中膨胀变大,最后发生LDs分解,释放游离脂肪酸为细胞发挥正常生理功能提供物质基础,因而被称为是一种可调节细胞内脂质稳态的细胞器。LDs通过表面众多的脂滴相关蛋白实现储存能量及疏水物质、蛋白质周转、阻止细胞应激以及调节细胞免疫等生理功能。新近研究表明,LDs代谢异常与肥胖、2型糖尿病、非酒精性脂肪肝病等代谢性疾病的发生发展紧密相关。本文主要阐述了LDs的生命周期和功能及其分子基础,以期为研发针对LDs为靶点的防治代谢性疾病的药物提供参考。

摘要： 油茶花药发育中淀粉多糖和脂滴类物质的分布呈现一定的规律:(1)在小孢子母细胞时期,具有胼胝质壁的小孢子母细胞中有少量脂滴分布在细胞核周围,花药表皮细胞中有脂滴分布,其它药壁细胞中则没有脂滴;(2)在小孢子早期,花药表皮细胞中除了脂滴外,也出现了淀粉多糖,其他药壁细胞中没有明显变化;(3)在小孢子晚期,具有大液泡的小孢子中出现较多的淀粉多糖,花药绒毡层细胞开始退化;(4)小孢子分裂形成二胞花粉后,营养细胞中的大液泡消失,细胞中开始积累脂滴,花药壁绒毡层细胞已彻底降解,其细胞质内含物转变为较大的脂滴供二胞花粉吸收;(5)成熟时期的花粉中积累了较多的脂滴和较少的淀粉多糖作为储存物.

摘要： Adipophilin作为一种脂肪分化相关蛋白分布在脂滴表面,是脂质蓄积的特异性标记物,其过度表达可能促进细胞内胆固醇酯的蓄积,与动脉粥样硬化、病理性肥胖、胰岛素抵抗等病理过程密切相关.中性胆固醇酯水解酶(NCEH)是一种微粒体酶,可以在中性pH值环境中发挥胆固醇酯水解作用,在胆固醇逆向转运中发挥限速作用,在人类动脉粥样斑块区大量表达.Adipophilin与NCEH是细胞内脂滴形成和水解过程中起相反作用的两个蛋白,参与维持脂滴形成与水解的动态平衡.当机体受病理因素影响时,Adipophilin与NCEH之间的动态平衡被打破,细胞内胆固醇酯大量蓄积,导致动脉粥样硬化的发生发展.然而,目前关于Adipophilin和NCEH两者在脂滴的合成与水解中的相关机制及其在动脉粥样硬化发生中的具体作用尚不清楚,本文对该问题进行综述.Adipophilin抑制胆固醇流出促进CE蓄积。Adipophilin和NCEH在脂滴的合成与水解过程中起着重要的调控作用。一方面，当细胞内脂滴形成时可以促使NCEH从内质网向脂滴表面转移，此时脂滴上的Adipophilin的表达增加，作为物理屏障能够阻止NCEH靠近脂滴。另一方面，当细胞内肾上腺素、甲状腺素升高时，可以使cAMP增加，PKA活性增强。Adipophilin促进动脉粥样硬化的发生，NCEH抑制动脉粥样硬化的发生。

摘要： 本发明公开一种脂滴靶向荧光探针LD‑TTP，属于脂滴极性荧光探针技术领域。本发明一种脂滴靶向荧光探针LD‑TTP，可作为检测多种疾病模型中脂滴极性变化试剂的应用，检测手段简单灵敏，不受其它常见离子、氨基酸等小分子和微环境粘度、pH等变化的干扰，本发明脂滴靶向探针LD‑TTP具有良好的组织穿透性，利用LD‑TTP通过激光共聚焦显微成像技术首次实现对小鼠脂肪肝模型组织切片、炎症模型小鼠活体内，以及临床病人癌症组织切片内脂滴极性变化的可视化点亮成像，在脂滴生理学和病理学研究中具有潜在的应用前景。

摘要： 本发明公开了微生物脂质提取物作为细胞脂滴诱导试剂的应用，本发明所述的微生物脂质提取物可作为诱导脂滴产生的试剂或者用于制备诱导脂滴产生的试剂，开拓了微生物脂质提取物的新用途，为构建脂滴细胞模型提供了新选择，并有效解决了目前常用的脂滴诱导试剂如油酸的水溶性很差，限制了其脂滴诱导的效率，以及脂滴诱导剂如环孢菌素和全氟类化合物等存在安全性不佳等缺点。

摘要： 本发明属于生物医药技术领域，涉及萘‑茚二酮给受体类化合物及其制备方法与其在脂滴免洗荧光探针中的应用。其化学结构如式I所示：其中，R1、R2分别独立为氢、低级烃基、醚基、取代烷基或酰基；R3、R4、R5、R6分别独立为氢、甲基、氟、氯、溴、碘、氰基、三卤甲基、硝基、苯基或吡啶基。以本发明提供的萘‑茚二酮给受体类化合物作为脂滴荧光探针，在高极性溶剂中表现出非常微弱的荧光，但在低极性环境中却显著增加了荧光发射，可以以免洗的方式高选择性和高对比度地点亮脂滴，同时能够成功实现脂肪肝组织的选择性区分。与现有油红O染色比，本发明的荧光探针具有灵敏度高、选择性好、省时、操作简单、孵育浓度低等优点。

摘要： 本发明属于细胞技术领域，具体涉及一种诱导骨骼肌卫星细胞生成脂滴的方法。所述方法包括以下步骤：从刚出生1‑5d的仔猪背肌中采集骨骼肌卫星细胞，并纯化，纯化后的骨骼肌卫星细胞待贴壁汇合到60％‑70％时，进行生脂诱导。本发明的方法能够有效地诱导猪骨骼肌卫星细胞生成脂滴。采用本发明的方法，猪骨骼肌卫星细胞生脂效果明显，从而能够有效提高猪肉质品质。

摘要： 本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种靶向脂滴和水环境的双色荧光探针及其合成方法和应用。本发明通过简单的一步反应合成了三种典型的D‑π‑A型荧光探针(LDs‑DM、LDs‑HO、LDs‑M0)。双色荧光探针在水中表现出近红外发射，在油中表现出绿色发射，实现了细胞内脂滴和水环境的特异性荧光成像。由于LDs‑DM具有良好的双发射特性和优异的光物理特性，因此在无组织切片的情况下成功应用于区分脂肪肝组织和动脉粥样硬化斑块中的水区域和脂质区域。其次LDs‑DM还可用于区分正常人肝组织和脂肪肝患者的肝组织。因此LDs‑DM在预测脂肪肝的进展、更准确地指导有效治疗方面具有巨大潜力。

摘要： 本发明提供一种双通道脂滴荧光探针，所述荧光探针的结构式如NAP‑a、NAP‑b、NAP‑c所示；本发明还提供上述荧光探针的制备方法和应用。本发明所述探针是一种对脂滴响应的新的结构单元，实现了对生物体系中脂滴的双通道荧光检测；本发明探针的合成只需要两步就可以完成，且后处理过程简单；本发明实现了脂滴分子探针的选择性快速检测，并且选择性好，抗其他离子干扰能力强。基于其特异性且显著的颜色变化，该试剂可作为显示水溶液中和生物细胞内脂滴分子存在的专一性指示剂，可进行实时定性的目视比色法检测。本发明是一种简单，快速，灵敏的脂滴分子特异性检测探针，在生物分子检测领域具有广阔的应用前景。

摘要： 本方案属于荧光纳米材料制造领域，涉及一种靶向脂滴的免洗荧光成像纳米探针制备及使用方法。该探针对溶剂极性敏感，具有单、双光子荧光特性。可免洗实现细胞内脂滴的快速成像。具体是将N,N‑二乙基对苯二胺与无水乙醇所形成的溶液在反应釜200°C条件下进行12h的溶剂热反应，以二氯甲烷和甲醇作为洗脱剂，后经旋转蒸发得到碳点类荧光探针。该探针量子产率高、稳定性好、生物相容性优异；在疏水性的油性介质里表现出极高的荧光强度，而在水环境中荧光得以淬灭，可实现脂滴的特异性成像。本发明所制备的纳米探针具有免洗特性，简化了细胞处理步骤，可实现成像信号与背景的高反差。可用作生物宽场成像、共聚焦成像、超分辨荧光成像等。

摘要： 本发明涉及一种癌细胞组织诊断的脂滴靶向和生物硫醇敏感的荧光探针及制备和应用，该荧光探针的具体结构式如下：该荧光探针对生物硫醇荧光信号具有超快的响应时间(Cys/Hcy/GSH为60s，Na2S为240s)，同时展现出显著的LDs靶向能力，已应用于活细胞LDs内的生物硫醇选择性成像；更重要的是，该探针可用于区分癌细胞/组织与正常细胞/组织，还可用于癌症患者手术标本的诊断。

摘要： 本发明属于聚集诱导发光(AIE)的荧光探针技术领域，公开了一种基于AIE性能的脂滴特异性荧光探针及制备方法和应用。通过本发明方法制备得到具有AIE性能的荧光探针，分子式为C36H23NO2S2。其合成简单，聚集状态下有较强的红光发射。此外，探针分子具有优异的光稳定性，可特异性靶向LD，并且实现了癌细胞与正常细胞的区分，对LD的动态追踪以及活体斑马鱼中LD的特异性成像。更重要的是，探针分子在白光照射下能够有效的产生活性氧，对癌细胞具有一定的光毒性，在肿瘤细胞光动力治疗方面有潜在的应用。

摘要： 一种基于喹吖啶酮骨架的细胞脂滴荧光成像探针及其应用，属于生物荧光成像技术领域。该荧光探针的结构式如下所示。本发明还公开了该荧光探针在特异性标记细胞中脂滴和追踪活细胞内脂滴动力学过程方面的应用。实验证实本发明的荧光探针Lipi‑QA是一种具有高荧光亮度、高脂滴染色选择性、长荧光寿命、优异生物相容性和超高光稳定性的脂滴荧光探针，具有巨大的应用前景。