棘孢木霉

摘要： 为减轻化学药剂防治烟草疫霉带来的弊端,提高生防菌剂效果,通过琼脂糖扩散法筛选抗性木霉并构建木霉和枯草芽孢杆菌Tpb55共培养体系,采用菌丝生长速率法评价了种间互作防治烟草疫霉的效果,利用单因素法优化共培养体系的培养基成分和发酵条件,并通过盆栽试验验证其对烟草黑胫病的防治效果。结果表明,棘孢木霉HG1具有良好的抗烟草疫霉活性,与枯草芽孢杆菌Tpb55的共培养体系如下:HG1(10^(6)CFU/mL)接种量为2%,与Tpb55(10^(6)CFU/mL)接种比例为10∶1,采用序列共培养方式,即先接种HG1,24 h后接种Tpb55。优化后的最适培养基成分为木糖10 g/L,蛋白胨和酵母粉(质量比为2∶1)5 g/L;最佳发酵为温度25°C,初始pH 7.5,转速140 r/min。共培养发酵液盆栽防病效果显著优于单培养,防治效果达到74.72%。该体系发酵后能够明显提升两株生防菌抑制烟草疫霉的活性,并对烟草黑胫病具有显著防病效果,为后续多菌株共发酵生防菌剂的开发提供基础。

摘要： 棘孢木霉(Trichoderma asperellum)作为一种生防菌,在植物病害的防控中具备较高的开发以及利用价值.根据棘孢木霉CBS 433.97菌株全基因组测序获得的12557个蛋白序列,利用SignalP、TargetP、TMHMM、WoLF PSORT和big-PI Predictor生物信息学软件和预测程序依次进行筛选,最终获得485个具有典型特征的分泌蛋白序列.进一步将485个分泌蛋白与碳水化合物活性酶数据库进行比对、半胱氨酸含量分析、与病原物-寄主互作数据库比对终获得137个蛋白;进一步筛选<300氨基酸的小分子蛋白作为候选效应蛋白,最终获得15个蛋白,其中1个为碳水化合物结合模块家族蛋白,1个为碳水化合物酯酶蛋白,其余13个均为假定蛋白.研究结果为进一步研究棘孢木霉基因的作用机理及其后续的改造利用提供了一定的参考.

摘要： 以棘孢木霉Trichoderma asperellum THGY-01(CGMCC No:22422)为试验菌株,对其在聚氨酯海绵载体上固体发酵产孢的培养基种类、浓度及促进产孢元素进行了筛选与优化。以聚氨酯海绵载体的单位质量产孢量为指标,通过单因素试验法对11种碳源、6种氮源和14种无机盐(8种含大量元素,6种含微量元素)进行了筛选。结果表明:糖蜜为产孢最佳的碳源,发酵6 d时,浓度为5%(V/V)处理的产孢量达4.92×10^(9)孢子/g;发酵8 d时,浓度为30.0%(V/V)处理的产孢量达到18.86×10^(9)孢子/g,其产孢量是其他碳源最高产孢量的11.45倍;筛选出产孢最佳的氮源为酵母粉,发酵6d时,浓度为0.4%(M/V)处理的产孢量可达1.42×10^(9)孢子/g,其产孢量是其他氮源最高产孢量的1.27倍。研究还发现,一定浓度范围内含钾离子的无机盐可提高聚氨酯海绵载体上木霉菌固体发酵的孢子产量,向培养基中添加浓度为0.20%(M/V)的KH_(2)PO_(4),发酵6 d时孢子产量达2.31×10^(9)孢子/g,比对照产孢量高203倍;一些微量元素如Cu、Zn、Mn在一定浓度范围内对菌株的产孢有显著的促进作用。该研究为棘孢木霉在聚氨酯海绵载体上的固体发酵提供了理论基础。

摘要： 木霉(Trichoderma spp.)是土壤中广泛存在的植物病害生防真菌。目前,国内外木霉生防菌剂研究开发主要针对农作物,相关产品在草坪上的应用效果并不理想。而来源于草坪的木霉且针对草坪病害生物防治的研究鲜有报道。本文以从草坪中分离的棘孢木霉菌株152-42(Trichoderma asperellum)为研究对象,检测其温度适应性和耐盐碱能力;以立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)和草坪币斑病菌(Clarireedia monteithiana)为拮抗对象,检测该棘孢木霉对草坪褐斑病和币斑病的防治效果,分析其拮抗机理。结果表明:棘孢木霉152-42具有耐高温和高盐碱的特性,可通过多种途径抑制病原菌生长,而且能够显著降低草坪褐斑病和币斑病的病情严重程度,是一种极具开发潜力的草坪病害生防真菌。

摘要： 几丁质酶是催化降解几丁质的水解酶,在防治植物真菌病害与虫害方面的应用越来越广泛,是一种重要的生防蛋白。棘孢木霉TD3104是一株优良的植物病害生防菌,几丁质酶在抑菌防病过程中发挥重要作用。为克隆表达棘孢木霉TD3104几丁质酶基因gene02514,明确酶学性质和抑菌活性,利用毕赤酵母表达系统对目的蛋白进行表达,并通过SephadexG-100凝胶进行纯化,对序列进行分析并研究其酶学性质及进行体外抑菌试验。本研究成功地构建了pPIC9K/gene02524重组载体,并且经过比对发现其包含GH18家族的特征氨基酸序列,获得了毕赤酵母转几丁质酶基因工程菌,表达的重组几丁质酶表观分子量44.4 ku,K_(m)=2.0482 g/L,V_(max)=0.6355×10^(3)μmol/(L·min),最适反应温度为50°C,最适pH值为5.0,在pH值为3.5时稳定性最高;金属离子Cu^(2+)、Hg^(2+)可强烈抑制酶活性;可抑制金黄壳囊孢菌等病原真菌的生长。研究结果为解析棘孢木霉几丁质酶在生防中的作用及功能奠定了基础,并为植物病虫害的防治提供了新的基因资源。

摘要： 磷和铁均为植物生长发育所必需的营养元素,但在土壤中大多以植物难以吸收利用的难溶或微溶性化合物形式存在。木霉菌(Trichoderma sp.)是植物根际有益真菌,在缺铁条件能够产生将不溶性铁转化为可溶性铁的嗜铁素,在促进植物生长、缓解生物及非生物胁迫等方面起着重要作用。但磷胁迫对嗜铁素的合成以及磷,铁胁迫对木霉菌在植物根际定殖的影响尚未见研究。本试验发现,磷胁迫同样能提高嗜铁素产量以及嗜铁素合成相关基因sidA的表达,采用抗利福平标记法测定棘孢木霉菌(Trichoderma asperellum)T6以及sidA敲除突变株△sidA在拟南芥根际的定殖能力,发现在缺磷、缺铁培养基中,棘孢木霉菌(T.asperellum)T6在拟南芥根际的定殖量分别是含磷、含铁对照组的3倍和2.l倍,与△sidA相比分别提高1.7倍和0.9倍,而△sidA在两种培养基中的定殖量却无显著性差异,由此可见,磷、铁胁迫下棘孢木霉菌(T.as-perellum)产生的嗜铁素能够提高菌体在植物根际的定殖。

摘要： 【目的】探究自主筛选获得的2株生防菌棘孢木霉Trichoderma asperellum QZ2与草酸青霉Penicillium oxalicum QZ8对青枯劳尔氏菌Ralstonia solanacearum(简称青枯菌)的生防效果。【方法】以青枯菌作为靶标菌,通过平板培养法、生长曲线法测定2株生防菌及其发酵液对青枯菌生长的抑制作用;通过土培试验、基于稀释涂布法测定生防菌在土壤中对青枯菌的抑制效果。【结果】平板对峙培养试验发现:棘孢木霉QZ2和草酸青霉QZ8对青枯菌有显著的抑制作用(P<0.05),抑制率分别达80.9%和45.9%;棘孢木霉QZ2与草酸青霉QZ8生防菌高温灭菌发酵液对平板培养青枯菌,同样呈显著的抑制作用(P<0.05),抑制率分别达33.3%和34.8%。无菌滤膜处理的未高温灭菌2株生防菌发酵液的青枯菌液培养结果表明:其D(600)显著小于未添加生防菌发酵液的对照D(600)(P<0.05),且棘孢青霉QZ8抑制效果好于草酸木霉QZ2。土壤培养结果显示:2株生防菌处理的土壤中青枯菌的活菌数量显著低于未添加生防菌的对照(P<0.05)。【结论】棘孢木霉QZ2和草酸青霉QZ8对青枯菌均有显著的抑制效果,可作为番茄Lycopersicon esculentum青枯病的潜在生防菌。图5表2参32。

摘要： 以麦麸、玉米粉、稻壳、秸秆、甘蔗渣等固体基质为原料,采用单因素和正交试验,对棘孢木霉DQ−1分生孢子固体发酵基质和发酵条件进行了筛选和优化;并通过盆栽试验研究了其发酵产物对黄瓜、辣椒、番茄和西瓜幼苗生长的影响。结果表明:以单一麦麸为发酵基质时,棘孢木霉DQ−1产孢量最大,发酵5 d产孢量为1.51×109 CFU/g;以麦麸:玉米粉:稻壳:硅藻土复配比例为5.8:0.5:1.7:1.0时产孢量最大,发酵5 d棘孢木霉DQ−1产孢量可达2.63×10^(9) CFU/g。固体发酵条件以液体接种量为2%时,发酵第12 d棘孢木霉DQ−1的产孢量最高,可达7.18×10^(9) CFU/g。盆栽试验表明,棘孢木霉菌DQ−1分生孢子粉对黄瓜、辣椒、番茄和西瓜幼苗具有明显的促进生长效果。本研究结果为棘孢木霉菌DQ−1产业化生产和应用奠定了基础。

摘要： [背景]棘孢木霉菌制剂被广泛应用于生物防治和次生盐渍化土壤的微生物修复,但是关于棘孢木霉在盐渍化胁迫条件下生长的耐盐机理及其富集盐离子的能力尚缺乏深入研究.[目的]揭示一株耐盐棘孢木霉菌(Trichoderma asperellum)CTCCSJ-W-SBW10264(T264)对钠胁迫的生理响应机制及其对钠离子的吸附和累积特性.[方法]设计梯度浓度钠胁迫培养实验,采集不同培养时期的菌丝样本,测定细胞氧化损伤相关指标H2O2和丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的含量及细胞抗氧化相关酶的活性变化.[结果]钠胁迫实验表明,棘孢木霉T264能够在1.22 mol/L的钠胁迫环境中生存,在低于0.25 mol/L的钠胁迫下其生长不会被明显抑制.细胞氧化损伤及氧化损伤响应相关指标的研究结果表明,培养液中钠离子浓度越高,棘孢木霉的膜系统氧化水平(MDA含量)越高,而且随着细胞中MDA和H2O2的累积,细胞抵御氧化损伤相关酶的活性也有明显提高,在钠盐处理24 h后,0.5、1.0和1.22 mol/L的钠离子胁迫分别使过氧化物酶(Peroxidase,POD)、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)和过氧化氢酶(Catalase,CAT)活性达到峰值,依次为36.66、3.34和233.3 U/mg.钠离子吸附和累积特性实验结果表明,棘孢木霉T264的菌丝对钠离子有强的吸附能力.在0.05 mol/L的钠离子环境中培养72 h后,菌丝表面钠离子吸附量为1 347.6 mg/g,菌丝内部钠离子累积量为218.6 mg/g,木霉菌菌丝通过菌丝表面吸附和菌丝内部累积对培养液中钠离子的去除率达到32％.[结论]T264的抗氧化损伤相关酶在其耐受钠离子胁迫过程中发挥重要作用,菌株T264对高浓度钠离子有强适应性,而且对环境中钠离子有高效的吸附和累积作用.

摘要： 针对烟草黑胫病和根黑腐病两种烟草土传病害日益加重的现状,利用生防真菌棘孢木霉MX菌株和产紫青霉Q2菌株分别与植物诱抗剂氨基寡糖素进行组合,在盆栽条件下测定了其分别在两种病害胁迫下的抗病效果.结果表明,产紫青霉Q2和棘孢木霉MX对烟草黑胫病菌和根黑腐病菌均有较强的拮抗作用,其发酵滤液能有效抑制两种病原菌的生长,与氨基寡糖素组合后能够更好地促进烟草幼苗的生长,对黑胫病和根黑腐病的防治效果均达到65％以上,能显著提高发病烟草中防御酶PAL、SOD、POD的活性.

摘要： 本发明提供一株棘孢木霉TZ312及其应用、棘孢木霉TZ312的挥发性代谢产物及其应用，涉及微生物技术领域，所述棘孢木霉TZ312，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号：GDMCC NO:60253。所述棘孢木霉TZ312平板上能完全抑制和覆盖香蕉枯萎病菌的菌丝生长；温室盆栽试验中，能明显降低香蕉枯萎病的发生率，防效在65％以上。所述棘孢木霉TZ312还可抑制黄瓜枯萎病菌、番茄灰霉病菌、柚木溃疡病菌、香蕉鞘腐病菌、稻瘟病菌、拟茎点霉、拟盘多毛孢、葡萄座腔菌或炭疽菌等，抑菌谱广。棘孢木霉TZ312的挥发性代谢产物可用于抑制储藏性病害的发生。

摘要： 本发明提供一株棘孢木霉TZ312及其应用、棘孢木霉TZ312的挥发性代谢产物及其应用，涉及微生物技术领域，所述棘孢木霉TZ312，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号：GDMCC NO:60253。所述棘孢木霉TZ312平板上能完全抑制和覆盖香蕉枯萎病菌的菌丝生长；温室盆栽试验中，能明显降低香蕉枯萎病的发生率，防效在65％以上。所述棘孢木霉TZ312还可抑制黄瓜枯萎病菌、番茄灰霉病菌、柚木溃疡病菌、香蕉鞘腐病菌、稻瘟病菌、拟茎点霉、拟盘多毛孢、葡萄座腔菌或炭疽菌等，抑菌谱广。棘孢木霉TZ312的挥发性代谢产物可用于抑制储藏性病害的发生。

摘要： 本发明属于基因工程领域，具体地说是一种利用毕赤酵母工程菌株表达棘孢木霉几丁质酶的方法。发明以棘孢木霉（Trichoderma asperellum）为材料获得了1个几丁质酶基因，命名为tachi1，DNA序列为1679bp，含有3个内含子、1个1275bp的ORF，编码424个氨基酸。构建重组表达载体pPIC9K/tachi1，利用电击法转化Pichia pastoris GS115，工程菌株GS-tachi1-K接种于含BMMY培养基中，在28°C、200 rpm/min振荡培养7.5 d，几丁质酶活达到17.93 U/mL，蛋白表达量为6.19 g/L。SDS-PAGE检测该蛋白的分子量为44 kDa，酶反应最适的温度和pH分别为50 °C和5.5，50 °C以下保持较高的酶活力，在酸性条件下稳定。该酶活性高、稳定性好，有比较重要的经济价值和社会价值。

摘要： 本发明公开了一种棘孢木霉微生物菌剂在防治农作物病害中的应用，所述菌株的分类命名为棘孢木霉（Trichoderma asperellum），已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 20211179，保藏日期为2021年9月15日。所述棘孢木霉可抑制诸多病原真菌的生长，可有效防治尖孢镰刀菌、小麦全蚀病菌、黄瓜褐斑病菌、西瓜枯萎病菌、南瓜叶斑病菌、辣椒疫霉病菌、黄瓜枯萎病菌等引起的农作物病害。该微生物菌剂对环境及植物无毒害作用，并对农作物生长具有一定的促生作用，可应用在制备防止农作物致病菌拮抗菌剂中。

摘要： 本发明提供了一种捕食香蕉枯萎病菌的棘孢木霉及其应用，所述的棘孢木霉命名为棘孢木霉(Trichoderma asperellum)MM7，于2021年3月30日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO：M2021302。本发明的棘孢木霉MM7，能够使香蕉枯萎病菌4号生理小种(Foc4)的病原菌丝出现明显的稀缺、断裂及溶解等现象，破坏Foc4病菌细胞，对Foc4捕食效用较强，为香蕉枯萎病害的防控提供了新的思路和生防资源，具有广阔的发展空间和良好的开发应用前景。

摘要： 本发明公开了一株内生棘孢木霉YN4及应用，于2021年10月22日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC NO：62007。该菌株可以显著抑制尖孢镰刀菌大豆专化型、尖孢镰刀菌古巴专化型、腐皮镰刀菌、镰状镰刀菌、暹罗炭疽菌、胶孢炭疽菌、平头炭疽菌、齐整小核菌、球黑孢菌、立枯丝核菌、稻瘟病菌和灰葡萄孢的生长；其可以高效防治番茄灰霉病、菜心立枯病、辣椒炭疽病、大豆纹枯病；其挥发性有机物也具有生防作用；该菌也可以显著抑制土壤中菌核的萌发，有望用于防治菌核病害。该菌株来源于植物内生菌，安全性高，可以用于微生物杀菌剂的开发，其应用可以减少或替代化学杀菌剂，为农作物绿色防控提供有力的支撑。

摘要： 本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种类棘孢木霉的应用及植物生长促进菌剂。类棘孢木霉在促进植物生长中的应用；并利用该菌株制备微生物菌剂。本发明提供的如上述的类棘孢木霉菌微生物菌剂的制备及如上所述的类棘孢木霉菌剂在促进植物生长中的应用。

摘要： 本发明提供了一种高效促进作物生长的棘孢木霉生物有机肥，含有棘孢木霉，所述棘孢木霉命名为棘孢木霉(Trichoderma asperellum)MM7，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M2021302。本发明棘孢木霉生物有机肥含有新种棘孢木霉MM7，对香蕉枯萎病菌4号生理小种具有良好的抑菌作用，还能有效提高植物株高、增大植物茎围、提高植物地上部分的鲜重和干重、提高植物地下部分的鲜重和干重、提高植物叶片叶绿素含量等，同时促进植物地上部分生长和地下部分生长，为香蕉枯萎病害的防控以及促进植物的生长提供了新的思路和生防资源，具有广阔的发展空间和良好的开发应用前景。

摘要： 本发明公开了一种利用棘孢木霉提高青钱柳叶药用品质的栽培方法，包括如下步骤（1）制备棘孢木霉孢子液；（2）于8月下旬进行接菌处理，每隔10天施用1次，共施用3次。采用环施法，施用位置为在距离根基部约4‑8倍地径的圆圈内，将发酵液均匀灌根。（3）10月下旬采集树叶。本发明的优点在于：本发明通过对生长旺盛的青钱柳植株进行“接菌”处理，以改善青钱柳土壤养分吸收情况，提高青钱柳植株生长和促进青钱柳次生代谢产物积累为主要目标，兼治土壤病害，提高青钱柳抗性；仅利用一种木霉菌株，发酵工艺容易优化，菌剂制备成本低，易于商业化大规模推广，具有很高的田间普遍使用价值。

摘要： 本发明提供了棘孢木霉在修复盐碱农田土壤中和/或促进植物生长中的应用，属于盐碱农田修复和微生物技术领域。所述棘孢木霉在修复盐碱农田土壤和/或促进植物生长中的应用中，将棘孢木霉菌剂施用于盐碱农田土壤中，能够提高土壤养分和生物酶活性，缓解了盐碱土壤对玉米生长的影响；同时，所述棘孢木霉菌剂能够增强玉米叶片光合作用特性，提高盐碱农田玉米产量，显著缓解吐丝后盐碱胁迫对玉米叶片Fv/Fm和Y(II)的负面影响，使叶绿素含量保持在较高水平，从而提高光合速率，最终提高玉米产量。棘孢木霉菌剂可以有效的充当玉米生长促进真菌，缓解盐碱胁迫。