PIK3CA

摘要： 目的探讨藏族结直肠癌患者K-ras和PIK3CA基因突变及其与临床病理因素的相关性。方法收集70例藏族结直肠癌患者手术标本/内镜活检标本,提取组织DNA。采用实时荧光PCR法检测K-ras和PIK3CA基因突变情况,分析其与临床病理特征的相关性。结果K-ras基因突变率为40.0%,PIK3CA基因突变率为8.6%。右半结肠癌患者较左半结肠癌患者、TNMⅢ~Ⅳ期结直肠癌患者较Ⅰ~Ⅱ期患者,K-ras基因突变率更高;而低分化结直肠癌患者较中-高分化患者、TNMⅢ~Ⅳ期结直肠癌患者较Ⅰ~Ⅱ期患者,PIK3CA基因突变率更高(P均<0.05)。K-ras基因和PIK3CA基因共同突变率为7.1%,K-ras基因突变与PIK3CA基因突变之间呈正相关(r=0.271,P=0.023)。结论藏族结直肠癌患者K-ras和PIK3CA基因突变率较高,有必要对藏族结直肠癌患者进行K-ras和PIK3CA基因突变检测,利于精准治疗,改善患者预后。

摘要： 【目的】本研究旨在揭示miR-145-4在蛋鸭卵泡发育中的作用及调控机制。【方法】分离培养蛋鸭卵泡颗粒细胞,转染miR-145-4相似物(mimic)、抑制物(inhibitor)后,利用实时荧光定量PCR法检测细胞增殖凋亡相关基因的表达情况,采用RNAhybrid和Targetscan程序预测miR-145-4的靶基因及其与靶基因磷脂酰肌醇-3-激酶催化亚单位α(phosphatidylinositol-3-kinase catalytic subunitα,PIK3CA)3′-UTR的结合位点,分别构建PIK3CA基因3′-UTR的野生型和突变型双荧光素酶载体,与miR-145-4 mimic和mimic-NC共转染蛋鸭卵泡颗粒细胞后,采用双荧光素酶报告系统验证miR-145-4与靶基因PIK3CA的结合关系,最后采用实时荧光定量PCR法检测miR-145-4对蛋鸭卵泡颗粒细胞中PIK3CA基因表达的影响。【结果】实时荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,过表达miR-145-4后CyclinB2基因的表达量极显著降低(P<0.01),BCL2基因的表达量极显著增加(P<0.01);抑制miR-145-4后,CyclinB2基因表达量极显著升高(P<0.01),BCL2基因表达量极显著降低(P<0.01)。预测结果显示,miR-145-4与PIK3CA基因3′-UTR存在结合位点。PCR扩增和测序结果显示,PIK3CA基因3′-UTR的野生型和突变型载体构建成功。双荧光素酶检测结果显示,与突变型及空载体共转染组相比,野生型组双荧光素酶活性显著降低(P<0.05),说明miR-145-4能够与PIK3CA基因3′-UTR结合。实时荧光定量PCR结果表明,在蛋鸭卵泡颗粒细胞中过表达miR-145-4后,PIK3CA基因表达量显著降低(P<0.05),而抑制miR-145-4后,PIK3CA基因表达量极显著升高(P<0.01)。【结论】miR-145-4通过正向调控靶基因PIK3CA促进蛋鸭卵泡颗粒细胞的凋亡,进而调控蛋鸭的卵泡发育。

摘要： 目的:采用16S rDNA二代高通量测序技术,研究PIK3CA突变型与野生型结直肠癌患者中的肠道菌群特征。方法:选取2016年12月至2017年12月华中科技大学同济医学院附属协和医院结直肠癌患者19例,采用16S rDNA高通量测序技术分析PIK3CA突变型(n=4)和PIK3CA野生型(n=15)之间肿瘤组织中微生物多样性和组成差异。结果:在门水平上,结直肠癌患者的肠道菌群主要由变形菌门、栖热菌门、放线菌门、厚壁菌门和拟杆菌门组成,占总群落的98%以上。Alpha多样性分析显示,PIK3CA突变型与野生型结直肠癌患者之间微生物多样性有显著性差异,且PIK3CA突变型患者中微生物多样性明显高于野生型。Beta多样性分析显示PIK3CA突变型与野生型结直肠癌患者的肿瘤微生物特征有显著性差异。Spearman关联网络分析结果显示,在PIK3CA野生型结直肠癌肿瘤组织中,双歧杆菌属与假单胞菌呈正相关。结论:PIK3CA突变型与野生型结直肠癌患者肿瘤组织中的微生物群落结构有显著性差异,且PIK3CA突变患者中的肠道微生物多样性更丰富。

摘要： 目的探讨磷脂酰肌醇-3-激酶催化亚单位α(PIK3CA)、10号染色体上缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)在弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)中的表达情况及其与临床病理参数间的相关性。方法选择2010年1月1日—2013年12月31日在新疆医科大学第一附属医院病理科首次诊断的、且未接受治疗的DLBCL患者组织标本82例,运用免疫组织化学技术检测PIK3CA、PTEN的表达情况、临床病理参数及其预后相关性。结果PIK3CA、PTEN在DLBCL中阳性表达率分别为90.2%(74/82)、11.0%(9/82);病理参数研究结果显示,PIK3CA与肿瘤物直径、临床分期有关,其中肿瘤物直径≤4 cm、临床分期Ⅲ~Ⅳ期阳性率更高,差异具有统计学意义(P0.05),而PTEN表达与PIK3CA表达有关(P0.05)。结论PIK3CA和PTEN表达与DLBCL的发生、发展相关,有望为DLBCL的靶向治疗提供新的理论依据。

摘要： 目的探讨HPV感染与PIK3CA、PIK3CB突变在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)癌变过程中的表达差异及其临床意义。方法采用免疫组化EnVision法检测32例食管正常黏膜、35例食管低级别异型增生(low-grade intraepithelial neoplasia,LGIN)、34例食管高级别异型增生(high-grade intraepithelial neoplasia,HGIN)及137例ESCC中HPV16/18 E6蛋白、p53、PIK3CA、PIK3CB的表达,并分析蛋白表达之间的相关性及与临床病理特征的关系。结果HPV16/18 E6蛋白在食管正常黏膜组、LGIN组、HGIN组、ESCC组的阳性率分别为0、8.6%、26.5%、29.9%,HPV16/18 E6蛋白在ESCC和HGIN中的表达高于食管正常黏膜和LGIN(P0.05)。HPV16/18 E6、p53、PIK3CA和淋巴结转移与ESCC预后相关,HPV16/18 E6是ESCC的良好预后因素,p53、PIK3CA和淋巴结转移是ESCC的不良预后因素。结论HPV感染与ESCC的发生密切相关,其可能通过异常激活PI3K/Akt信号通路而促进肿瘤的发生、发展,联合检测HPV16/18 E6蛋白和PIK3CA突变对ESCC的预后判断和优化治疗具有重要意义。

摘要： 目的:探讨磷酸肌醇3激酶的p110α催化亚基(PIK3CA)对中性粒细胞抗子宫内膜癌(UCEC)细胞增殖的影响及其机制。方法:将PI3KCA过表达载体(pcDNA-PI3KCA)转染至UCEC细胞MFE-296后,与中性粒细胞dHL-60共培养24 h。取出培养下室的MFE-296细胞,CCK-8法检测MFE-296细胞增殖能力,RT-qPCR法检测MFE-296细胞内CEACAM1、β-catenin、血管内皮生长因子A(VEGF-A)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和白细胞介素-8(IL-8)mRNA表达,Western blotting法检测PIK3CA、CEACAM1和β-catenin蛋白表达。应用癌症基因组图谱(TCGA)和UCEC mRNA-seq数据分析PIK3CA在UCEC中的表达。免疫荧光检测UCEC患者组织中PIK3CA和CEACAM1的定位,Spearman法分析74例UCEC组织中PIK3CA表达与CEACAM1表达的相关性。结果:转染pcDNA-PI3KCA后,MFE-296细胞PIK3CA mRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05);与dHL-60共培养24 h后,过表达PIK3CA的MFE-296细胞中VEGF-A、MMP9和IL-8 mRNA表达及CEACAM1和β-catenin蛋白表达上调(均P<0.05)。MFE-296与dHL-60共培养24 h后MFE-296细胞增殖率降低,而过表达PIK3CA减弱了dHL-60细胞对MFE-296细胞的增殖抑制作用(均P<0.05),且anti-CEACAM1处理后,过表达PIK3CA的MFE-296细胞增殖率降低(P<0.05)。TCGA数据库分析显示,PIK3CA在UCEC组织中的表达水平低于正常组织(P<0.0001);Kaplan-Meier生存分析显示,PIK3CA高表达组生存率低于PIK3CA低表达组(P<0.05)。免疫荧光结果显示CEACAM1与PIK3CA蛋白在UCEC中的共定位,两者表达呈正相关关系(P<0.05)。结论:PIK3CA通过上调CEACAM1/β-catenin表达减弱中性粒细胞对UCEC细胞的增殖抑制作用。

摘要： 目的探讨KRAS/PIK3CA、TP53/PIK3CA共突变对晚期非小细胞肺癌(NSCLC)预后的影响。方法选取郑州大学第一附属医院收治的66例初治晚期NSCLC患者,根据基因突变分成KRAS/PIK3CA(KI组)、TP53/PIK3CA(TI组)等2组,根据治疗方式分成化疗和免疫治疗。其中KI组化疗21例,免疫治疗12例,TI组化疗19例,免疫治疗14例。比较2组化疗和免疫治疗的临床疗效,采用多因素COX回归模型分析预后影响因素。结果KI组免疫治疗的疾病控制率(DCR)(83.33%)高于同组化疗(23.81%),同时高于TI组免疫治疗(28.57%),差异均有统计学意义(χ^(2)=8.644,P=0.003;χ^(2)=10.437,P=0.008)。KI组和TI组化疗的疾病无进展生存期(PFS)分别为3.98个月和3.83个月,免疫治疗的PFS分别为9.00个月和6.30个月,免疫治疗均较化疗偏高,差异均有统计学意义(χ^(2)=24.561,P<0.001;χ^(2)=15.654,P<0.001);KI组免疫治疗的PFS较TI组偏高,差异有统计学意义(χ^(2)=16.077,P<0.001);KI组化疗的PFS与TI组比较差异无统计学意义(χ^(2)=0.187,P=0.773)。多因素COX模型结果显示,KRAS/PIK3CA突变和免疫治疗为延长PFS独立影响因素(P=0.001;P<0.001)。结论KRAS/PIK3CA和TP53/PIK3CA共突变免疫治疗预后较化疗好,KRAS/PIK3CA突变免疫治疗的预后较TP53/PIK3CA突变好,且KRAS/PIK3CA、免疫治疗是晚期NSCLC预后的独立保护性因素。

摘要： 【目的】研究连翘叶酶-醇提取物(FLEAE)抗药物性肝损伤(DILI)的作用及其机制。【方法】将48只昆明小鼠随机分为6组,每组8只,分别为正常对照组(NC)、FLEAE对照组(FC)、DILI模型组(DILI)及FLEAE高、中、低剂量治疗组(HFC、MFC、LFC),其中NC组和FC组小鼠腹腔注射生理盐水,其余各组小鼠腹腔注射300 mg/kg APAP注射液,每天2次,连续注射4 d,第5天开始NC组和DILI组小鼠灌胃生理盐水,FC、HFC、MFC和LFC组小鼠分别灌胃FLEAE 600,600,400和200 mg/kg,每天2次,连续灌胃3 d。最后1次灌胃12 h后,检测各组小鼠谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平及氧化应激指标谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢(H_(2)O_(2))和丙二醛(MDA)水平,肝组织切片苏木精伊红(HE)染色观察肝损伤情况。用网络药理学方法构建FLEAE调控DILI的靶点集,GO和KEGG分析靶点的基因功能及通路,筛选FLEAE抗DILI的核心靶点。qRT-PCR和Western Blot检测核心靶点PIK3CA及其下游凋亡抑制分子B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)基因和蛋白的表达水平。【结果】FLEAE可显著降低DILI组小鼠血液中的ALT和AST水平,改善药物性肝损伤。FLEAE可显著降低DILI小鼠的GSH和SOD水平,提高H_(2)O_(2)和MDA水平。网络药理学分析表明,FLEAE抗DILI靶点与凋亡过程的负调控、氧化应激等有关,主要富集于PI3K/Akt信号通路,可能通过PIK3CA发挥作用;qRT-PCR和Western Blot结果显示,FLEAE可能通过提高PIK3CA基因和蛋白的表达发挥抗DILI及抑制细胞凋亡的作用。【结论】FLEAE通过上调DILI中PIK3CA的表达抑制细胞凋亡和改善氧化应激,发挥抗DILI的作用。

摘要： 目的探讨西藏藏族结直肠癌患者K-ras、PIK3CA基因突变与EGFR基因表达及三者之间的相关性。方法选取2020年9月—2021年9月于西藏大学附属阜康医院住院诊治的藏族结直肠癌患者70例。检测K-ras、PIK3CA基因突变及EGFR基因表达情况,并分析三者之间的相关性。结果K-ras基因突变率40.0%,PIK3CA基因突变率8.6%,EGFR基因阳性表达率61.4%。右半结肠癌及TNMⅢ~Ⅳ期结直肠癌患者K-ras基因突变率更高;低分化结直肠癌及TNMⅢ~Ⅳ期结直肠癌患者PIK3CA基因突变率更高;TNMⅢ~Ⅳ期结直肠癌患者EGFR基因阳性表达率更高,差异有统计学意义(P<0.05)。K-ras基因突变和PIK3CA基因突变之间为正相关(r=0.271,P=0.023);K-ras、PIK3CA基因突变与EGFR基因表达阳性之间无相关性(r=0.033,P=0.787)。结论西藏藏族结直肠癌患者K-ras基因突变和PIK3CA基因突变之间存在一定相关性,但K-ras、PIK3CA基因突变与EGFR基因阳性表达之间无显著相关性。

摘要： 目的:分析胃癌中错配修复缺陷(dMMR)和PIK3CA基因突变分别与临床病理特征的关联,以及两者之间的相关性。方法:选取本中心554例胃癌肿瘤组织标本,收集临床病理参数。免疫组化检测错配修复蛋白MSH2、MSH6、MLH1和PMS2,评判是否为dMMR。ARMS-PCR检测PIK3CA基因突变。应用统计学方法,分析dMMR和PIK3CA突变与临床病理特征的关系,以及dMMR与PIK3CA突变的关联。结果:554例胃癌患者中,dMMR 30例(5.4%)。其中,MLH1和PMS2双缺失27例(90.0%),MSH2和MSH6双缺失2例(6.7%),PMS2缺失1例(3.3%)。PIK3CA突变34例(6.1%),其中15例E545K(44.1%),7例E542K(20.1%),1例E545D(2.9%),6例H1047R(17.6%),4例H1047L(11.8%),1例E545K和E542K双突变(2.9%)。9号外显子突变24例(70.6%),20号外显子突变10例(29.4%)。单因素分析发现,dMMR与女性,年龄>65岁,肿瘤直径>5 cm,肿瘤未侵及浆膜,无淋巴结转移,Ki-67增殖指数较大相关,且dMMR组肿瘤更容易发生在胃窦幽门部(均P<0.05)。PIK3CA突变与肿瘤直径较大(P=0.008),神经侵犯(P=0.031)相关。PIK3CA 20号外显子突变的胃癌有70%发生于胃窦幽门部,显著高于9号外显子的12.5%(P=0.013)。比较dMMR和pMMR中PIK3CA突变率,dMMR组中PIK3CA突变7例(23.3%),pMMR组中PIK3CA突变27例(5.2%),有统计学差异(P=0.001)。dMMR患者中,PIK3CA突变组神经侵犯发生率高于野生组,但是差异无统计学意义。结论:胃癌患者中,相对于pMMR组,dMMR肿瘤较少侵及浆膜,较少发生淋巴结转移。dMMR组PIK3CA突变率显著高于pMMR组。PIK3CA突变患者,更容易发生神经侵犯,肿瘤直径较大。因此PIK3CA突变可能会削弱dMMR对于预后的较好影响,同时20号外显子突变可能比9号外显子突变预后良好,对胃癌临床治疗方案选择有一定参考意义。

摘要： 本发明属于作物分子遗传育种领域，涉及水稻抗稻瘟病

摘要： 本发明公开了一套具有包容性且精准鉴别并挖掘稻瘟病Pik抗病等位基因家族的技术体系。该技术体系根据该基因家族存在清晰的“单元型‑亚单元型‑等位基因”等三级分化而设置其三级检测标记。该技术体系可用于稻瘟病Pik抗病等位基因家族之抗病基因的鉴定及挖掘，具有系统而严谨的包容性及可比较性。而且同样适用于普遍存在抗病等位基因家族情形的其他各种植物病害系统抗病基因的鉴定及挖掘，具有显著的开放性及通用性。可广泛应用于提高禾本科作物包括但不限于水稻种质资源利用的目的性及效率，提高抗病育种工作的目的性及效率，以及提高抗病品种的合理布局并延长其使用寿命。

摘要： 本发明涉及一种PIK3CA基因和BRAF基因突变多重检测引物探针及其试剂盒包括检测PIK3CA基因和BRAF基因20号外显子T790M突变的上游引物F‑T790M、下游引物R‑T790M、野生型探针WP‑T790和突变型探针MP‑T790M，检测PIK3CA基因和BRAF基因21号外显子L858R突变的上游引物F‑L858R、下游引物R‑L858R、野生型探针WP‑L858和突变型探针MP‑L858R，以及检测PIK3CA基因和BRAF基因19号外显子片段缺失突变的上游引物F‑E19del、下游引物R‑E19del、野生型探针WP‑E19和突变型探针MP‑E19del。本发明的PIK3CA基因和BRAF基因突变多重检测引物探针及其试剂盒快速高效，标准品的配制简单，检测体系的特异性与灵敏度高，游离DNA的利用率高，准确度高。

摘要： 本公开的主题提供用于治疗癌症(例如乳腺癌)的方法和组合物。本发明涉及特异性靶向突变型PIK3CA肽(例如，人突变型PIK3CA肽)的靶向突变型PIK3CA的TCR和包含此类TCR的免疫应答细胞。本公开的突变型PIK3CA肽‑特异性TCR具有增强的包括抗肿瘤活性在内的免疫激活特性。

摘要： 本发明属于作物分子遗传育种领域，涉及水稻抗稻瘟病Pik位点等位基因鉴别分子标记及其应用。申请人对Pik基因进行重测序，通过序列多态性分析发现Pik‑1起始密码子下游806位、901位和4210位核苷酸类型组成的身份代码，即3个SNP，可以有效识别Pik、Pike、Pi1、Pikm和Piks。本发明提供的分子标记可对Pik位点等位基因类型快速筛查，且只需要经过PCR和电泳检测即可获得准确结果，具有高通量、低成本的特点。

摘要： 本发明公开了用于鉴定水稻Pik座位多个稻瘟病抗性等位基因的功能标记组，所述功能标记组为KASP功能标记组，包括功能标记MPik1、MPik2、MPik3、MPik4、MPik5，所述稻瘟病抗性等位基因包括Pi1、Pikm_TS、PiKs、PiKa、Pik、PiKp和Pi7。还公开了用于检测功能标记组的成套的KASP引物组及检测方法。通过在不同抗病等位基因及感病基因间进行多序列比对，从中筛选出可以用于区分Pik座位不同等位基因的SNP位点，在此基础上成功开发了可用于Pik座位抗感基因区分，以及不同抗性等位基因区分的功能标记组；用这些功能标记组可以准确区分不同的抗性等位基因，有重要育种应用价值。

摘要： 本发明公开了一种粪便样本PIK3CA基因突变试剂盒，用于PIK3CA突变检测与GAPDH内参；包含核酸提取、肽核酸钳(PNA)法检测，所述核酸提取采用丽纳芯核酸提取试剂盒，对保存液中粪便进行核酸提取，Nanodrop检测A26/A280，检测DNA浓度，所述肽核酸钳(PNA)法检测PIK3CA的突变80％发生在9号和20号外显子上，有E542K E545D E545K H1047R H1047L5种突变类型，包括隔离盒，所述隔离盒的顶部设置有用于封闭隔离盒或开启隔离盒的盒盖，所述隔离盒的外部两侧均设置有平行槽；本发明具有检测多样性、特异性及准确性高、试剂盒重心可调整，方便不同需求的稳定放置、可根据实际情况同步进行试剂盒内部的方向转变，确保内部物体不会因试剂盒的位置变化而发生倾斜或颠覆的现象，不易渗漏的优点。

摘要： 本发明提供了一种人PIK3CA基因突变的数字PCR检测方法及应用。具体地，提供了优选的针对PIK3CA E545、E542和PIK3CA H1047所在序列的引物对、扩增方法、核酸探针以及检测体系，进一步还提供了用于检测PIK3CA基因突变的试剂盒。本发明通过优化的引物对和探针以及相应反应条件，从而可以对不同样本高灵敏度、强特异性地检测PIK3CA基因突变。

摘要： 本发明公开了一种乳癌HER2丰度PIK3CA突变检测探针组和试剂盒，属于分子杂交领域，乳癌HER2丰度PIK3CA突变检测探针组和试剂盒包含了E542K的突变型探针与野生型探针、E545K的突变型探针与野生型探针、H1047R的突变型探针与野生型探针。探针组和试剂盒的灵敏度可高达0.001%，且适于复杂背景下的靶标序列检测，是珍贵样本或样本核酸存在降解时的最佳选择，在穿刺样本、胸腹水、外周血中即可完成靶标序列的检测，特异性强，有利于快速、灵敏地通过血液ctDNA测出乳腺癌。

摘要： 本发明公开了一种检测KRAS、NRAS、BRAF和PIK3CA基因突变的引物探针组合及其应用。所述引物探针组合包括检测KRAS、NRAS、BRAF和PIK3CA基因突变的引物和探针。本发明设计检测KRAS、NRAS、BRAF和PIK3CA基因突变的引物探针组合，利用数字PCR对肿瘤中KRAS、NRAS、BRAF和PIK3CA基因的14种热点突变进行定性检测，具备良好特异性和灵敏度，且操作简便、成本低。