发育潜能

摘要： 目的 研究猪孤雌激活胚胎初次卵裂时间对早期胚胎发育潜能的影响,以筛选最优胚胎.方法 将猪卵母细胞进行体外成熟培养,孤雌激活后,胚胎采用时差成像系统(TLI)筛选,分为早期卵裂组(<24 h)、中期卵裂组(24～30 h)和晚期卵裂组(30～48 h).各组分开培养至囊胚期,统计比较各组的桑椹胚率和囊胚率,并对囊胚中凋亡相关基因Bcl-2、Bax、P53和细胞周期蛋白Cyclin B1、Cdk1、Cdk2的表达水平进行检测.结果 早期卵裂组桑葚胚率、囊胚率高于中期卵裂组(P<0.05)和晚期卵裂组(P<0.01);凋亡相关基因Bax、P53表达在早期卵裂组中显著低于中期和晚期卵裂组(P<0.01),而抗凋亡基因Bcl-2表达则显著高于中期和晚期卵裂组(P<0.01);早期卵裂组细胞周期蛋白Cyclin B1、Cdk1和Cdk2的表达显著高于中期和晚期卵裂组(P<0.05).结论 猪孤雌激活胚胎初次卵裂时间较早的胚胎具有较高的发育潜能,利用TLI确定的初次卵裂时间可作为筛选优质胚胎的重要参数.

摘要： 目的探讨通过泛Caspase抑制剂Z-VAD-FMK抑制凋亡通路对体外培养玻璃化冷冻未成熟卵母细胞(VIOs)的DNA完整性和发育潜能的影响。方法取200只雌性ICR小鼠未成熟卵丘-卵母细胞复合体(COCs)。实验Ⅰ:将未成熟COCs分为阴性对照组(FOs组,n=31,新鲜COCs)、阳性对照组(HPOs组,n=32,过氧化氢暴露COCs约3 h)、2 h VIOs组(n=31,玻璃化复苏COCs 2 h)、18 h VIOs组(n=32,玻璃化复苏COCs 18 h),探讨玻璃化冷冻对未成熟卵母细胞凋亡通路的影响。实验Ⅱ:将未成熟COCs分为VIOs(-/-)组(n=36,未加入Z-VAD-FMK)、VIOs(+/-)组(n=37,仅在玻璃化冷冻复苏培养基中添加Z-VAD-FMK)和VIOs(+/+)组(n=34,在玻璃化冷冻复苏培养基和复苏后培养基中均添加Z-VAD-FMK),复苏后孵育18 h进行染色,探讨Z-VAD-FMK对凋亡标志物[未成熟卵母细胞DNA片段化(TUNEL阳性卵母细胞百分比)、Caspase活性]的影响。实验Ⅲ:将未成熟COCs分为FOs组(n=130)、VIOs(-/-)组(n=129)和VIOs(+/+)组(n=128),分组操作同上,分析Z-VAD-FMK对VIOs体外发育潜能的影响。结果实验Ⅰ结果显示,HPOs组、18 h VIOs组未成熟卵母细胞DNA片段化比例高于FOs组(P0.05)。实验Ⅱ结果显示,与VIOs(-/-)组相比,VIOs(+/-)组未成熟卵母细胞DNA片段化比例较低(P=0.007);VIOs(+/+)组未成熟卵母细胞DNA片段化比例和Caspase活性低于VIOs(+/-)组和VIOs(-/-)组(P0.05),但VIOs(+/+)组和VIOs(-/-)组闭锁率高于FOs组(P<0.001);VIOs(-/-)组和VIOs(+/+)组5~8细胞、9~16细胞胚胎发育率均低于FOs组(P<0.001);在胚胎发育后期,VIOs(-/-)组和VIOs(+/+)组均无囊胚形成,与FOs组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论玻璃化冷冻提高了VIOs的凋亡标志物水平,而Z-VAD-FMK能够抑制DNA损伤和Caspase活性,但其可能并不是胚胎发育的决定因素。

摘要： 卵泡液构成了卵母细胞生长发育的微环境,一定程度影响并决定了卵母细胞的发育与成熟。卵泡液代谢组学分为靶向和非靶向分析技术,如今通常利用色谱–质谱技术检测卵泡液中的代谢物。葡萄糖在卵泡液中的含量相对丰富,通过检测卵泡液中的葡萄糖含量、种类及代谢通路,能够预测卵母细胞的质量和发育潜能。本文现就卵泡液葡萄糖代谢组学预测卵母细胞发育潜能的研究进展作一综述。

摘要： 2022年7月,上海交通大学基础医学院组织胚胎学与遗传发育学系李令杰课题组在Briefings in Bioinformatics杂志发表题为FitDevo:accurate inference of single-cell developmental potential using sample-specific gene weight的研究论文。

摘要： 目的 探讨抗氧化物原花青素对卵胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)周期中人类未成熟卵母细胞体外成熟(in vitro maturation,IVM)、受精及胚胎发育的影响.方法 选取2019年1月至2020年12月在成都市妇女儿童中心医院行ICSI治疗周期321例,共获得未成熟卵母细胞837枚,随机分为对照组和原花青素组两组,原花青素组在人未成熟卵母细胞IVM培养液中添加原花青素,对照组不添加原花青素.未成熟卵母细胞在两组培养液中培养24h,观察两组的成熟率、受精率、卵裂率、可利用胚胎率以及囊胚形成率,并通过荧光染料Hoechst33342对胚泡进行染色,检测囊胚的总细胞数.结果 无论是GV期还是MI期卵母细胞,原花青素组的成熟率、可利用胚胎率及囊胚形成率均高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),但受精率和卵裂率两组间比较差异无统计学意义(P＞0.05);原花青素组孵化囊胚细胞总数均高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 添加原花青素能提高人类未成熟卵母细胞的体外成熟率和胚胎发育潜能.

摘要： 目的 探讨维生素D对体外成熟小鼠卵母细胞发育潜能的影响.方法 采集小鼠生发泡(GV)期卵母细胞进行体外成熟培养,根据培养液的不同分为对照组(采用IVM培养基,取卵数188个)和实验组(在对照组基础上添加固体维生素D,取卵数123个).所有细胞体外进行培养,记录并分析不同条件下处理下两组卵母细胞成熟率、孤雌激活率、囊胚形成率以及表观遗传相关基因表达水平情况.结果 两组MII卵母细胞率、孤雌激活率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).实验组囊胚形成率显著高于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05).与对照组相比,实验组所选13个基因(Mat2a、Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b、Dn-mt3L、Mbd1、MeCP2、Mbd3、Ezh2、Suz12、Phc2、Rnf2和YY1)表达明显高于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 维生素D可促进卵母细胞在体外成熟,可以提高卵母细胞的发育潜能.

摘要： 在IVF-ET中常采用超排卵方案使多个卵泡发育，以便得到多个卵子和多个可供移植的胚胎，胚胎移植后往往有不少胚胎剩余，因此，对质量良好的剩余胚胎进行冷冻保存可增加累积妊娠率，避免胚胎浪费，节省医药费用。目前，大多数生殖中心冷冻剩余卵裂期胚胎，另有一些生殖中心将剩余卵裂期胚胎培养至囊胚再进行冷冻，胚胎冷冻标准主要根据不同时期胚胎的发育情况及形态特征来制定。剩余胚胎中除正常受精(即2PN)胚胎外，有部分是由3PN或多PN、0PN、1PN而成的胚胎。对于这部分胚胎其发育潜能如何?有无冷冻价值?尚存在不同观点和争议，值得进一步研究和探讨。

摘要： 本研究旨在探讨初次卵裂时间与猪克隆胚胎发育潜能的关系。实验结果表明初次卵裂时间可以作为猪克隆胚胎发育潜能的重要标识，选择早裂的胚胎进行移植，有助于提高克隆效率。

摘要： 幼畜超数排卵技术可以充分挖掘和利用优良母畜的早期繁殖潜力，大大加快家畜育种及品种改良进程，同时也将解决种畜胚胎移植商业化所需胚胎来源匮乏及胚胎生产成本昂贵的问题，将大大促进胚胎生产的商业化应用，前景十分广阔。但是，这种幼畜超排的卵，在体外受精后，发育到囊胚期的潜能比成年动物超排的卵发育潜能有所降低，例如，犊牛和成年牛，羔羊和成年羊中就存在此类现象。这种差异可能具有普遍性。本文就幼畜与成年畜超排卵发育潜能的差异做了综述。

摘要： 本发明公开了一种利用颗粒细胞GRIM‑19相对表达量来评价卵母细胞发育潜能的方法，卵母细胞的颗粒细胞中GRIM‑19的相对表达量为0.16‑0.35时，判断得到的卵母细胞为高发育潜能的卵母细胞，当GRIM‑19的相对表达量为0‑0.12时，判断得到的卵母细胞为低发育潜能的卵母细胞，内参选用β‑肌动蛋白(β‑action)基因。本发明是一种较为客观、准确、可量化的卵母细胞质量评价方法，无创、且无需反复拿出培养箱观察，减少了不良环境刺激。由于本发明可量化，有具体的数值范围，操作容易，避免了因人为主观因素使判断标准出现不统一的问题。

摘要： 本发明公开了一种通过获取高发育潜能精子提高妊娠率的方法，通过将卵母细胞与空透明带进行共孵育，然后对共孵育后的透明带进行酶消化，得到大量与透明带结合的精子，该精子进行ICSI注射，显著提高了小鼠的受精率、囊胚形成率和出生率。通过该方法的应用，一方面提高了透明带与精子的结合率，避免了透明带反应，阻止多精受精的现象，获得大量与透明带结合的精子。同时，通过消化酶消化透明带，将透明带内部结合的优质精子释放，用于ICSI注射，最终显著提高了小鼠出生率，以期改善人类辅助生殖患者的临床结局。

摘要： 本发明提供了一种通过检测miR‑290家族表达来鉴定胚胎发育潜能的方法。具体地，本发明提供了miR‑290家族的miRNA或其检测试剂的用途，用于制备检测体外胚胎发育潜能的试剂盒。本发明阐明miR‑290家族可以成为小鼠合子基因组被激活的标志物，这提示miR‑290家族在小鼠植入前胚胎发育中发挥重要的作用，因此，可通过检测miR‑290家族表达来鉴定胚胎体外发育潜能。

摘要： 本发明属于人类辅助生殖领域，具体涉及一种人类胚胎体外培养基及提高体外培养人类胚胎发育潜能的方法。所述人类胚胎体外培养基中添加有NMN（β‑烟酰胺单核苷酸）。本发明发现在G1培养基中添加NMN，可以有效提升着床前胚胎中NAD+水平，有效的提升了人类胚胎的发育潜能。

摘要： 发明公开了一种基于ACLY蛋白表达定位的评估胚胎发育潜能的方法，包括以下步骤：对囊胚激光打孔，随机获取囊胚滋养外胚层的2‑5个细胞，进行固定、透膜、封闭和ACLY一抗孵育、二抗孵育等免疫荧光染色步骤，拍照检测ACLY蛋白表达定位并统计ACLY定位的细胞核/质比例，根据ACLY蛋白定位情况判断出着床前胚胎发育潜能；本发明比较表达ACLY野生型和ACLY出核的胚胎，发现ACLY出核导致早期胚胎发育囊胚比例显著下降，且发现人囊胚中ACLY蛋白核定位与高质量胚胎显著相关。本发明通过对ACLY表达于囊胚卵裂球细胞核的比例，将评估方法定量化，减少因技术人员不同引起的评估差异，并且将Gardner囊胚评分系统下处于同一级别的胚胎进一步细分，可优选出最高发育潜能的胚胎进行移植。

摘要： 本发明涉及医疗人工智能技术领域，尤其涉及一种胚胎发育潜能预测方法、系统、设备及存储介质，包括：将所述胚胎初始图像输入囊胚预测模型，得到胚胎特征向量；将所述胚胎特征向量输入双向长短期记忆网络，得到胚胎发育特征；基于跨模态特征融合机制，根据临床数据及所述胚胎发育特征，得到融合特征；将所述融合特征输入第一多层感知器，预测得到胚胎妊娠率。本发明通过分析早期拍摄的多焦段胚胎视频，利用多焦段选择模型以及时间转移模型得到具有时空特性的融合特征，从而实时预测体外培养的胚胎妊娠率，提高了预测的准确度；同时本发明通过预测囊胚形成概率以及整倍体概率，辅助医生进行早期胚胎筛选，从而减少人力成本。

摘要： 本发明提供了一种基于线粒体DNA拷贝数的染色体平衡易位患者囊胚发育潜能评估方法，主要流程包括活检取囊胚中3‑6个滋养外胚层细胞，采用MALBAC方法对活检细胞进行单细胞基因组扩增，扩增产物进行高通量DNA测序，测序量不低于20GB；通过测序数据分析囊胚的染色体整倍性和单位核基因组对应的线粒体DNA拷贝数即MCN，MCN=（常染色体映射区域×2×线粒体映射reads数）/（常染色体映射reads数×线粒体映射区域），在染色体整倍性囊胚中优先选择MCN低于320.5的囊胚进行移植。本发明方法有助于筛选出最具发育潜能的囊胚进行移植，使得行PGT的染色体平衡易位患者最大限度和最快实现妊娠，并且不增加患者的花费，还可以有效节约临床资源和成本。

摘要： 本发明公开了一种适合代谢组学的水牛胚胎二步培养法，该法经体外成熟、体外受精后获得假定受精胚胎进行群体培养，待胚胎发育到囊胚阶段，进行单胚胎培养。以此为基础，发明人还建立了一种检测水牛胚胎发育潜能的方法，即按上述培养方法进行培养，单胚胎培养后收集代谢液；通过LC/MS检测囊胚代谢液成分，通过PCA数据分析鉴定胚胎发育能力。试验表明，本发明根据PCA数据的特点，以孵化能力作为判定，可以对胚胎发育潜能进行预测，直接应用与胚胎体外生产中胚胎移植前，对胚胎质量进行有数据依据的检测，避免了肉眼预测选择胚胎的缺陷，弥补了人为判断的不足，将大大节约生产中的经济成本。

摘要： 本实用新型公开了一种用于提高胚胎发育潜能的胚胎培养液试剂盒，包括试剂盒体，所述试剂盒体内部设置有试管固定机构；所述试管固定机构包括方形槽、弧形槽、电动伸缩缸、固定条板和试管插槽；所述试剂盒体顶部等距开设有多个方形槽，所述方形槽内壁左右两侧均等距开设有多个弧形槽，所述方形槽内部底端螺栓连接有电动伸缩缸，所述电动伸缩缸顶部螺栓连接有固定条板，所述固定条板顶部等距开设有多个试管插槽。本实用新型通过在方形槽内部设置电动伸缩缸以及电动伸缩缸上的固定条板，可以在固定条板上插入多个试管，并根据试管的不同长度，利用电动伸缩缸调节，使不同方形槽内的试管处于同一高度，便于试管的取出和取样。

摘要： 本实用新型属于生物医药领域，尤其为一种用于提高胚胎发育潜能的胚胎培养液试剂盒，所述盒体的内部安装有海绵支撑垫，所述海绵支撑垫的下端粘合有橡胶底板，所述盒体下端以及橡胶底板的内部均设置有磁块，且上下两个磁块的磁极反向，所述海绵支撑垫的上表面开设有试剂存放槽，所述试剂存放槽的内表面一体成型有支撑板，所述盒盖的下表面安装有端部限位组件；通过试剂存放槽内表面一体成型的支撑板，便于支撑板对放置在试剂存放槽内部的试剂管进行限位，从而增加了对试剂管进行定位的便捷性，同时橡胶底板通过磁块与盒体固定连接，同时磁块分别设置在盒体和橡胶底板的内部，从而便于对海绵支撑垫进行定位。