共聚焦显微镜

摘要： 目的观察睑缘炎患者蠕形螨感染和角膜上皮树突状细胞的相关性。方法收集2020年3月—12月就诊于沧州市中心医院眼科门诊的50例(50只眼)睑缘炎患者为试验组,对照组为性别和年龄相匹配的健康志愿者50例(50只眼)。所有入组病人均进行裂隙灯显微镜检查,运用活体共聚焦显微镜(IVCM)对睑缘炎患者睫毛根部毛囊内的蠕形螨进行定量检测,观察记录角膜上皮树突状细胞密度。结果试验组和对照组蠕形螨感染阳性率为分别为92%和68%,2组蠕形螨感染阳性率差异有统计学意义(χ^(2)=9.000,P=0.003)。试验组平均每个眼睑感染蠕形螨数量(7.28±3.86)只,显著高于对照组(4.02±3.79)只,差异有统计学意义(t=4.260,P=0.000)。试验组角膜上皮树突状细胞密度(53.44±11.55)个/mm2,显著高于对照组(20.28±6.96)个/mm2,差异有统计学意义(t=17.388,P=0.000)。结论IVCM可以有效地对睑缘炎患者睫毛毛囊内的蠕形螨和角膜上皮树突状细胞进行无创、定量检测,为睑缘炎的诊断和治疗提供依据。

摘要： 通过拼接角膜神经图像可以减小显微图像视场小的影响。由于显微图像存在渐晕效果,拼接图像会在拼接处产生伪影,影响医生诊断。为解决拼接图像的渐晕伪影问题,提出了一种通过非线性多项式函数建模进行图像渐晕校正的方法。首先,对单张角膜神经图像建立渐晕模型,设置符合渐晕物理性质的约束条件,利用L-M优化算法对渐晕模型参数进行迭代优化。在每次迭代优化过程中,计算对数信息熵,对当前渐晕模型的校正效果进行判断,防止图像过度校正。迭代优化结束后,将渐晕模型反向补偿原图像,完成渐晕校正处理。通过对比校正前后的拼接图像,校正后图像在拼接处无明显的渐晕伪影。实验测试5组不同患者的图像,校正后图像MSE、PSNR、SSIM评估指标平均值分别达到0.0042、72.2251 dB、0.9600,具有最佳的校正效果。本文算法的校正效果明显优于其他同类算法的校正效果。该方法能够有效地对角膜图像渐晕效果进行校正,无须提前设置固定的相机和环境亮度参数。校正后图像拼接效果良好,可获得更加准确、清晰、视野范围大的角膜神经拼接图像。

摘要： 目的 探究红外线照相技术联合活体共聚焦显微镜(in vivo confocal microscopy,IVCM)在轻度睑板腺功能障碍(meibomian gland dysfunction,MGD)患者中的诊断价值.方法 选取2018年4月至10月于我院就诊的轻度MGD患者30例(30眼)为MGD组,健康受检者17人作为健康组(均取左眼),依次进行OSDI评分、Schirmer I试验、非侵入性泪膜破裂时间(non-invasive tear-film break-up time,NIBUT)、泪河高度(tear meniscus height,TMH)、睑板腺红外线照相及IVCM检查.IVCM主要关注睑板腺开口、腺泡形态及炎症细胞浸润情况.各项计量参数比较均用两独立样本t检验,OSDI评分对睑板腺各项指标的影响采用Spearman秩相关性分析.结果 两组的OSDI评分、NITBUT avg及睑板腺缺失率比较,差异均有统计学意义(均为P0.05).MGD组睑板腺开口直径、开口面积与健康组相比差异均无统计学意义(均为P>0.05).MGD组腺泡的最长径(92.14±12.11)μm、最短径(48.27±8.12)μm、面积(5796.67±1427.43)μm2及炎症细胞密度(550.74±80.48)个·mm-2均高于健康组相应指标[(79.94±7.39)μm、(28.96±5.66)μm、(3129.06±353.92)μm2、(270.72±52.76)个·mm-2],差异均有统计学意义(均为P0.05).结论 红外线照相技术联合IVCM可帮助解释MGD的病理生理过程.IVCM对轻度MGD的早期诊断具有一定意义.

摘要： 角膜上皮屏障破坏是多种角膜疾病的基础,探讨其危险因素是目前研究的热点。本研究利用基因敲除技术获得了角膜上皮细胞Cdc42基因敲除小鼠,发现该小鼠角膜荧光素钠染色呈阳性,角膜屏障功能破坏。12周龄出现角膜混浊、白斑。角膜病理观察发现基因敲除导致小鼠的上皮变薄,细胞层数减少。共聚焦显微镜、扫描和透射电镜观察均发现角膜上皮细胞间隙增宽,表层细胞剥脱增加,说明Cdc42缺失导致小鼠角膜上皮屏障结构、功能破坏。

摘要： 皮肤恶性黑色素瘤(CMM)起源于外胚层神经嵴黑色素细胞,是一种恶性程度很高的肿瘤,其临床及病理表现复杂多样,不易辨认.近年来发病率逐渐上升,是最常见的皮肤恶性肿瘤之一,本文就CMM的诊断研究进展进行综述.

摘要： 扁平苔藓是一种常见的慢性炎症性疾病,病因不明,其诊断基于皮肤组织病理,随着皮肤影像技术的发展,皮肤镜和反射式共聚焦显微镜成为本病的重要诊断方法及评价治疗效果和疾病进展的手段.本病治疗方法较多,但缺乏特效方法,目前较多学者在研究发病机理的基础上,尝试应用生物制剂、JAK抑制剂等治疗,均取得较好疗效.本文就皮肤影像技术在扁平苔藓诊断中的应用情况及扁平苔藓的治疗进展做一综述.

摘要： 对于感染性角膜炎患者而言,尽早明确诊断对治疗该病至关重要.共聚焦显微镜具有高放大率的特征,在活体角膜中能观察体积小至微米级的微生物,具备对活体细胞进行非侵入性、动态观察的优势.感染性角膜炎根据不同病原体分为不同类型,而不同类型感染性角膜炎的临床特点及诊疗具有差异.近年来,为明确引起感染性角膜炎的病原体、观察病灶范围及深度、评估疗效及患者预后情况,越来越多学者将共聚焦显微镜运用于感染性角膜炎的诊疗中,并取得了显著成果.

摘要： 目的:分析念珠菌性角膜炎的发病特征和临床表现,并评估其治疗预后。方法:回顾性系列病例研究。收集2013年1月至2019年12月于山东第一医科大学附属眼科医院明确诊断为念珠菌性角膜炎的患者29例(29眼),其中男18例,女11例,均为单眼发病;1例患者为7月大女婴,其余28例患者年龄为29~91(59.0±13.5)岁;发病时间为2~90 d,中位数12 d。分析其发病趋势、感染前相关因素、临床表现、角膜激光共聚焦显微镜图像特点、治疗方法和疗效。结果:角膜念珠菌培养阳性共29例(其中白念珠菌10例,近平滑念珠菌6例,其他菌种13例),占同期真菌性角膜炎患者2%。感染前患者最常见的情况是眼部手术史26例(90%),其次是局部糖皮质激素使用史24例(83%)、全身疾病9例(31%)和眼部外伤2例(7%),25例(86%)患者合并2个或更多上述因素。念珠菌性角膜炎结膜充血一般较轻,不伴有典型的伪足、苔被、免疫环等体征。4例早期患者角膜病变表现为单个或多个孤立圆点状病灶,角膜病灶切除联合药物治疗治愈。病变进展后病灶表现多样,最常见为散在多灶性浸润灶(10例,占35%)。最终23例(80%)患者需行手术治疗。结论:念珠菌性角膜炎患者的眼部手术史和局部激素使用史是感染前常见的情况,发病早期特征性表现为孤立圆点状病灶,病灶清除联合药物治疗预后好,晚期病灶表现多样,多数患者需要行角膜移植手术治疗。

摘要： 目的:分析念珠菌性角膜炎的发病特征和临床表现,并评估其治疗预后.方法:回顾性系列病例研究.收集2013年1月至2019年12月于山东第一医科大学附属眼科医院明确诊断为念珠菌性角膜炎的患者29例(29眼),其中男18例,女11例,均为单眼发病;1例患者为7月大女婴,其余28例患者年龄为29～91 (59.0± 13.5)岁;发病时间为2～90 d,中位数12d.分析其发病趋势、感染前相关因素、临床表现、角膜激光共聚焦显微镜图像特点、治疗方法和疗效.结果:角膜念珠菌培养阳性共29例(其中白念珠菌10例,近平滑念珠菌6例,其他菌种13例),占同期真菌性角膜炎患者2％.感染前患者最常见的情况是眼部手术史26例(90％),其次是局部糖皮质激素使用史24例(83％)、全身疾病9例(31％)和眼部外伤2例(7％),25例(86％)患者合并2个或更多上述因素.念珠菌性角膜炎结膜充血一般较轻,不伴有典型的伪足、苔被、免疫环等体征.4例早期患者角膜病变表现为单个或多个孤立圆点状病灶,角膜病灶切除联合药物治疗治愈.病变进展后病灶表现多样,最常见为散在多灶性浸润灶(10例,占35％).最终23例(80％)患者需行手术治疗.结论:念珠菌性角膜炎患者的眼部手术史和局部激素使用史是感染前常见的情况,发病早期特征性表现为孤立圆点状病灶,病灶清除联合药物治疗预后好,晚期病灶表现多样,多数患者需要行角膜移植手术治疗.

摘要： 为了精确测量边缘产生凸起的超显微硬度压痕,采用高分辨率且能获得压痕三维形貌的激光扫描共聚焦显微镜,获得压痕边缘复杂的三维凸起结构.对压痕的三维形貌数据进行分析,利用压痕对角线方法提取压痕的4个角点,计算超显微硬度.然而,压痕对角线法并不能反映残余压痕的复杂结构,尤其是边缘凸起结构.在测量压痕三维形貌的基础上,为寻找更符合接触力学和压痕形成规律的压头与试样的接触面积,提出了基准平面的概念.通过对压痕面积函数进行微分,寻找最优的基准平面位置,既考虑压痕的边缘凸起,也能很好地反映接触面积.实验结果表明,通过接触力学规律寻找到的最优基准平面测量硬度,其测量误差小于±1.5％、稳定性小于1％.基准平面法可以稳定且准确地得到更符合硬度定义的硬度值.

摘要： 目的：运用共聚焦显微镜观察早期胬肉患者角膜缘结构改变,并与正常人角膜缘结构相比较,探讨胬肉发生的机理. 方法：对23例胬肉组织刚长入角膜边缘的早期翼状胬肉患者(27眼)四个象限(上、下、鼻、颞侧)的角膜缘进行共聚焦显微镜检查,观察角膜缘龛结构、基底细胞密度、血管形态及免疫细胞浸润等,并与两个年龄组(青年组2030岁,中老年组6070岁)正常人(每组15人共30眼)四个象限的角膜缘结构相比较. 结果：三组角膜缘共聚焦显微镜观察发现上方、下方象限龛结构形态良好,可见典型的波浪状Vogt栅结构及密集的高亮基底细胞,青年组高亮基底细胞密度与老年组及胬肉组比较存在显著差异（P＜0.01）,老年组与胬肉组比较无差异（P＞0.05）.三组鼻侧及颞侧象限未见典型的波浪状Vogt栅结构,但仍可见高亮的基底细胞,青年组高亮基底细胞密度与老年组、老年组与胬肉组比较存在显著差异（P＜0.01）.胬肉组角膜缘可见纤维组织与角膜上皮细胞不规则交接,交接区可见较多树突状朗格汉斯细胞浸润,细胞密度与正常人比较存在显著差异（P＜0.01）,下方栅栏样或花边样血管增生. 结论：正常人角膜缘上方及下方象限Vogt栅结构明显优于鼻侧及颞侧象限,胬肉患者胬肉侵犯的角膜缘基底细胞密度下降、血管增生伴随免疫细胞浸润,这些可能是胬肉好发于鼻侧及颞侧角膜缘以及胬肉发生、进展的因素.

摘要： 为研究人肝癌组织中热休克蛋白70(HSP72)与甲胎蛋白(AFP)的相互作用，采用免疫化学、免疫荧光与共聚焦显微镜检测HSP72和AFP在肝癌细胞中的表达和定位。HSP72与AFP的相互关系通过免疫共沉淀和蛋白印迹杂交进行分析。结果免疫化学显示人肝癌细胞中存在高水平的HSP72和AFP共表达，均定位于细胞浆。AFP存在于HSP72单抗的免疫沉淀中，而HSP72则存在于AFP单抗的免疫沉淀中。结果表明人肝癌细胞HSP72与AFP相伴。两者之间的相互关系研究将成为探讨肝癌的发生和免疫治疗的新途径。

摘要： 本文从整体透明法入手,采用不同植物的不同组织作材料,用不同的固定剂,染色方法,透明剂,透明时间等作参数,探索一种适用于激光扫描共聚焦显微镜的实验方法以代替传统的石蜡切片,得到高质量的二维及三维植物显微结构图像,推动激光扫描共聚焦显微镜在植物学研究中的应用.

摘要： 利用量子点的荧光特性进行金属裂纹扩展的检测，发现添加了量子点的环氧树脂膜裂纹处可见明显亮线，对裂纹处的光谱测试发现其荧光强度明显高于非裂纹处。共聚焦显微镜观测其裂纹宽度在7-10 μm之间，其探测极限比已知的测试方法有了显著提高。

摘要： 本文设计和制作了一种双层PDMS芯片，通过中间PDMS薄层的壁垒作用可以在短时间内捕获大量细胞。我们利用共聚焦显微镜在该芯片上对伪狂犬病毒侵染Vero细胞（非洲绿猴肾癌细胞）的行为进行了长时间的跟踪，观察到宿主细胞被病毒侵染后，细胞逐渐变圆并脱离芯片的玻璃基底，细胞内的荧光强度由于GFP的表达量增加而增强。

摘要： 探讨ERK1/2信号通路在Jurkat T细胞增殖调控中的作用。采用共聚焦显微镜和MTT法检测不同浓度PD98059对Jurkat T细胞集落形成和增殖指数的影响，PI染色结合流式细胞术分析不同浓度PD98059对Jurkat T细胞细胞周期的影响。rn 利用不同浓度、不同信号通路特异性阻断剂LY294002、AG490、GF109203X和Genistein以及LY294002联合AG490处理Jurkat T细胞，观察它们对Jurkat T细胞集落形成和增殖指数的影响。选用最佳浓度PD98059、LY294002、AG490、GF109203X和Genistein，通过Western Blot检测它们对Jurkat T细胞中ERK1/2、P-ERK1/2和反向CCAAT盒结合蛋白(ICBP90)不同时间表达的影响。rn 结果显示，PD98059可显著抑制Jurkat T细胞的增殖，呈剂量依赖关系。PD98059可使Jurkat T细胞停滞于G1/G0期，并阻止其进入S期和G2/M期。不同浓度各阻断剂对Jurkat T细胞的集落形成和增殖指数也具有不同的抑制作用，且呈剂量依赖关系。PD98059作用3 h可部分下调ERK1/2的表达，而其它阻断剂对ERK1/2的表达均无影响。PD98059、LY294002作用3 h可明显下调P-ERK1/2的表达，LY294002+AG490、AG490、GF109203X和Genistein也可使P-ERK1/2的表达不同程度下调，各阻断剂作用3 h均能上调Jurkat T细胞中ICBP90蛋白的表达，并以PD98059最为突出；而在24 h这种上调作用更为明显。这些结果提示阻断ERK1/2信号通路可显著抑制Jurkat T细胞的增殖，这种抑制作用与其使Jurkat T细胞停滞于G1/G0期，阻止细胞进入S期和G2/M期有关；PI-3K、TPK、PKC和JAK信号通路可能与ERK1/2信号通路上游关联，ERK1/2信号通路的下游可能通过ICBP90所介导。

摘要： 钙火花(即Ca2+ sparks)是肌兴奋-收缩偶联关键性假说-Ca2+诱导Ca2+释放(CICR)局部控制理论的基础,是肌兴奋-收缩偶联的基本单位.钙火花是肌浆网(sarcoplasmic reticulum,SR)膜上钙释放通道(RyRs)自发开放或由T管膜上单个L-型钙通道(DHPr)开放触发引起的局部钙释放现象.虽然对"钙火花"的研究已有近10年,但目前确切的发生机制还不清楚.我们利用激光扫描共聚焦显微镜对经Flou-3 AM染色的人工剥离的蟾蜍骨骼肌肌纤维进行连续扫描分析,在骨骼肌肌纤维中捕获钙火花现象。

摘要： 激光扫描共聚焦显微术是先进分子和细胞生物学研究技术.它在荧光显微镜成像的基础上加装激光扫描装,结合数据化图像处理技术,采集组织和细胞内荧光标记图像,在亚细胞水平观察钙等离子水平的变化,并结合电生理等技术观察细胞生理活动与细胞形态及运动变化的相互关系.由于它的应用范围较广泛,已成为形态学、分子细胞生物学、神经科学和药理学等研究领域中很重要的研究技术.

摘要： 非磨削激光胶原重组技术是临床方兴未艾的新型技术，目前临床研究较多，但缺乏实验探讨，本研究通过动物实验研究探讨激光非磨削胶原重组的机制和激光无创检测的新方法，结果证实了不同作用机制的激光对胶原增生的关系，也证实了共聚焦激光扫描显微镜在体成像技术在非磨削激光胶原重组技术的评价上非常有意义。为激光胶原重组临床提供了一种新型的、有效的评价方法。

摘要： 非磨削激光胶原重组技术是临床方兴未艾的新型技术，目前临床研究较多，但缺乏实验探讨，本研究通过动物实验研究探讨激光非磨削胶原重组的机制和激光无创检测的新方法，结果证实了不同作用机制的激光对胶原增生的关系，也证实了共聚焦激光扫描显微镜在体成像技术在非磨削激光胶原重组技术的评价上非常有意义。为激光胶原重组临床提供了一种新型的、有效的评价方法。

摘要： 本发明涉及一种皮肤共聚焦显微镜吸附式扫描头及共聚焦显微镜成像系统；该扫描头利用微型抽气泵将胶质外罩内的空气抽出，使移动镜罩向前移动完全贴合人体皮肤，然后进行显微成像，能够避免使用过程中扫描头出现回弹现象；包含上述扫描头的共聚焦显微镜成像系统将皮肤镜相机和显微镜集成在了一起，利用皮肤镜相机所成的像获得病变部位准确位置，然后利用XY运动机构带动移动镜罩及人体皮肤作二维微位移使得显微镜能够精确对准病变部位，无需二次操作就可以对患者皮肤进行大范围可见光成像并对皮肤病变部位精确定位，从而对皮肤病变部位进行显微成像。

摘要： 本发明提供共聚焦扫描仪、显微镜系统以及共聚焦显微镜。安装在显微镜的共聚焦扫描仪包括：线状光源，射出线状光；线状检测器，具有将入射的光按照每行进行检测的线状的检测部；以及移动机构，使线状光源与线状检测器相对于显微镜并进移动，所述线状光源与所述线状检测器分别配置在相对于所述显微镜的焦平面位于共轭的位置的成像面内的相互对应的位置关系上。

摘要： 实施方式的共聚焦显微镜单元(1A)包括：第1子单元(6a)，其具有光源(10a)、针孔板(12a)、和光检测器(13a)；第2子单元(6b)，其具有光源(10b)、针孔板(12b)、和光检测器(13b)；扫描镜(4)，其使从第1和第2子单元(6a、6b)输出的激发光经由显微镜光学系统在试样(M)上扫描，并将根据激发光而从试样(M)产生且由显微镜光学系统成像的荧光向第1和第2子单元(6a、6b)引导；和主壳体(2)，其构成为能够安装于连接端口(P1)，且固定有扫描镜(4)、第1子单元(6a)、和第2子单元(6b)，第1子单元(6a)和第2子单元(6b)以向扫描镜(4)的2个激发光的入射角错开规定的角度(θS)的方式配置于主壳体(2)内。

摘要： 实施方式的共聚焦显微镜单元(1)包括：第1子单元(6a)，其具有光源(10a)、针孔板(12a)、和光检测器(13a)；第2子单元(6b)，其具有光源(10b)、针孔板(12b)、和光检测器(13b)；扫描镜(4)，其使激发光在试样(M)上扫描，并将从试样(M)产生的荧光向第1和第2子单元(6a、6b)引导；扫描透镜(7)，其对激发光进行导光，并将荧光导光至扫描镜(4)；和主壳体(2)，其能够安装于连接端口(P1)，并且固定有扫描镜(4)、扫描透镜(7)、和子单元(6a、6b)，第1子单元(6a)具有将由自身单元处理的激发光和荧光与第2子单元(6b)处理的激发光和荧光分离的分色镜(9a)。

摘要： 本发明涉及一种皮肤共聚焦显微镜吸附式扫描头及共聚焦显微镜成像系统；该扫描头利用微型抽气泵将胶质外罩内的空气抽出，使移动镜罩向前移动完全贴合人体皮肤，然后进行显微成像，能够避免使用过程中扫描头出现回弹现象；包含上述扫描头的共聚焦显微镜成像系统将皮肤镜相机和显微镜集成在了一起，利用皮肤镜相机所成的像获得病变部位准确位置，然后利用XY运动机构带动移动镜罩及人体皮肤作二维微位移使得显微镜能够精确对准病变部位，无需二次操作就可以对患者皮肤进行大范围可见光成像并对皮肤病变部位精确定位，从而对皮肤病变部位进行显微成像。

摘要： 本发明提供共聚焦扫描仪、显微镜系统以及共聚焦显微镜。安装在显微镜的共聚焦扫描仪包括：线状光源，射出线状光；线状检测器，具有将入射的光按照每行进行检测的线状的检测部；以及移动机构，使线状光源与线状检测器相对于显微镜并进移动，所述线状光源与所述线状检测器分别配置在相对于所述显微镜的焦平面位于共轭的位置的成像面内的相互对应的位置关系上。

摘要： 本发明属于激光共聚焦显微镜成像技术领域，一种激光共聚焦显微镜的自动聚焦的方法，利用数字CCD进行实时采集样品玻片表面（反射激光的面）的反射光，将采集到的图像转换成原始图片灰度值二维矩阵，利用压缩模块将原始图片灰度值二维矩阵压缩成压缩图片灰度值二维矩阵，压缩图片灰度值二维矩阵中图片灰度值最大的值即压缩聚光特征值a即为实际聚焦点位置；改变放有样品纳米台z轴的位置，得到不同位置所对应的a值，通过比较这些a值，其中最大的a值所对应的显微镜的位置就是激光的聚焦位置。

摘要： 本实用新型公开了一种共聚焦显微装置及共聚焦显微镜，具有构成共聚焦结构的光源组件、光源针孔组件、照明镜筒组件、半反半透组件、振镜组件、物镜模块、成像镜筒组件、出光针孔组件及光探测器，还具有：底板；集成座，其固接在底板上；照明镜筒组件的一端与集成座固接，另一端与光源针孔组件固接；光源针孔组件还与底板固接；成像镜筒组件的一端与集成座固接，另一端与出光针孔组件固接；出光针孔组件还与底板固接；半透半反组件固接在底板上且与集成座连接；振镜组件固接在底板上。

摘要： 本实用新型公开了一种集成共聚焦显微镜和显微内镜的成像系统，包括主光源照明元件组、显微镜元件组和显微内镜元件组，其中，所述显微镜元件组和显微内镜元件组共用所述主光源照明元件组。本实施例中通过将共聚焦显微镜和共聚焦显微内镜集成一体，克服了共聚焦显微镜和显微内镜无法兼容的问题，并且本实施例中共聚焦显微镜成像系统和共聚焦显微内镜成像系统可以共用部分光学元件和软件，从而降低了需要制造出两个独立成像系统的成本，克服单个使用时功能单一，且成本高的问题。

摘要： 本实用新型涉及一种用于皮肤镜和共聚焦显微镜与皮肤贴合的贴合机构，该机构包括贴合薄片、组织环；其中，所述贴合薄片带第一外凸把手，贴合薄片与组织环接触的一侧付有背胶，通过背胶使贴合薄片贴合在组织环上；所述组织环为两侧带第二外凸把手的磁性不锈铁圆环，组织环与贴合薄片贴合的一面加工有适配贴合薄片厚度的凹槽，组织环与贴合薄片的第一外凸把手接触的位置加工有避让槽。该机构结构简单，使用方便，通过共用同一可拆卸组织环，在使用皮肤镜检测后，只要保证组织环位置不变，即可保证在切换到共聚焦显微镜时检测点位置不发生改变。