免疫酶

摘要： 本研究旨在探究饲料中添加酵母水解物对吉富罗非鱼(Oreochromis niloticus)生长性能、免疫力和抗病力的影响.在基础饲料中添加0(对照组)、0.5％、1.0％、1.5％和2.0％的酵母水解物制成5种实验饲料,对5组初始体重为(25.80+0.45)g的吉富罗非鱼进行为期8周的养殖实验,每组3个重复,每个重复30尾鱼.实验结束后,每个重复选择12尾鱼进行无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)攻毒实验,每尾鱼腹腔注射0.2 mL浓度为8.3× 105 CFU/mL的菌液,连续观察14 d,统计累积死亡率.结果 显示,随着酵母水解物添加量的增加,吉富罗非鱼终末体质量(FBW)和特定生长率(SGR)均呈先显著上升(P＜0.05)后下降的趋势.回归分析表明,当SGR达到最大值时,对应的酵母水解物添加量为1.29％.罗非鱼血清一氧化氮合酶、酚氧化酶、酸性磷酸酶、过氧化氢酶和超氧化物歧化酶活性均随饲料中酵母水解物添加量的提高呈先上升后下降的趋势(P＜0.05),添加量为1.5％时达最大值.饲料添加酵母水解物对吉富罗非鱼无乳链球菌的抵抗力有显著影响(P＜0.05),除添加量为0.5％的实验组死亡率与对照组差异不显著外,其他实验组罗非鱼的死亡率均显著低于对照组(P＜0.05).本研究中,饲料添加酵母水解物可有效提高吉富罗非鱼的生长性能、免疫力和抗病力,且在添加量为1.5％时,效果最显著.

摘要： 本试验旨在研究饲料中添加不同水平菊粉对克氏原螯虾消化酶活性、肠道组织形态和非特异性免疫能力的影响。试验选用240尾平均体重为(6.58±0.16) g的克氏原螯虾,随机分为6个组,分别饲喂在基础饲料中添加0(对照组)、0.20%、0.40%、0.60%、0.80%和1.00%菊粉的饲料,每组4个重复,养殖密度为10尾/箱。试验期7周,试验结束后测定胃组织中的消化酶活性和肝胰腺中的免疫酶活性,并用显微镜观察后肠的组织形态。结果表明:1)与对照组相比,0.40%~1.00%菊粉添加组胃组织中淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶活性显著提高(P<0.05);其中,0.60%菊粉添加组胃组织中蛋白酶活性最高,0.80%菊粉添加组胃组织中淀粉酶和脂肪酶活性最高。2)与对照组相比,随着饲料中菊粉添加水平的提高,后肠黏膜的皱襞数量增加,结缔组织更为紧密,肌层更加明显和完整;其中,0.40%~1.00%菊粉添加组后肠黏膜皱襞长度和宽度显著高于对照组(P<0.05)。3)与对照组相比,0.40%~1.00%菊粉添加组肝胰腺碱性磷酸酶、酸性磷酸酶和溶菌酶活性显著提高(P<0.05),且均以0.60%菊粉添加组活性最高。结果提示,饲料中添加菊粉可以提高克氏原螯虾胃组织中消化酶活性,改善肠道形态结构,增强非特异性免疫能力,且以0.6%添加水平效果较佳。

摘要： 研究表明,微塑料对生物体具有不利影响。本研究以剑尾鱼Xiphophorus helleri为实验对象,将其暴露于不同粒径(0、1μm、5μm、1μm与5μm按颗粒数1∶1混合粒径)、不同浓度(0、1×10^(6)粒/L、1×10^(7)粒/L)聚苯乙烯微塑料水环境72 h后,测定其消化酶、抗氧化酶及免疫酶活性。与对照组相比,各暴露组肠道淀粉酶、脂肪酶和胰蛋白酶活性均显著升高(P<0.05),超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性显著下降(P<0.05),过氧化氢酶活性显著升高(P<0.05),丙二醛和溶菌酶活性显著升高(P<0.05)。微塑料急性暴露会干扰剑尾鱼对食物的消化吸收,并影响其肠道抗氧化酶和免疫酶的活性。

摘要： 本试验旨在研究饲料中添加枯草芽孢杆菌对大口黑鲈幼鱼生长、肠道组织结构、抗氧化能力、免疫能力和肠炎的影响。试验设置3个组(对照组,饲喂基础饲料;0.5%枯草芽孢杆菌组,饲喂基础饲料+0.5%枯草芽孢杆菌制剂;1.0%枯草芽孢杆菌组,饲喂基础饲料+1.0%枯草芽孢杆菌制剂),每组设置3个重复,每个重复20尾鱼,对初始体重为(16.0±0.5)g的大口黑鲈幼鱼开展6周的投喂试验。结果表明:1)饲喂6周后,枯草芽孢杆菌组大口黑鲈幼鱼的增重率、特定生长率、体重均高于对照组,但没有显著差异(P>0.05)。2)在注射2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导肠炎后,各组大口黑鲈均发生死亡情况,但添加枯草芽孢杆菌降低了累积死亡率。3)添加枯草芽孢杆菌后大口黑鲈幼鱼中肠绒毛纤长紧密、排列整齐,肠绒毛高度和数量以及肌层厚度较对照组显著增加(P<0.05)。TNBS诱导的肠炎损害了以绒毛融合、黏膜下层增宽和肌层为特征的肠道结构,但添加枯草芽孢杆菌明显减轻了TNBS对后肠的损害。4)大口黑鲈幼鱼肠道抗氧化酶活性均随饲料中枯草芽孢杆菌添加量的提高而上升,其中1.0%枯草芽孢杆菌组肠道总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著高于对照组和0.5%枯草芽孢杆菌组(P<0.05),丙二醛(MDA)含量显著低于对照组(P<0.05)。肠炎可提高大口黑鲈幼鱼肠道中抗氧化酶活性,且添加枯草芽孢杆菌后大口黑鲈幼鱼肠道的抗氧化能力更强。5)大口黑鲈幼鱼肠道酸性磷酸酶(ACP)、溶菌酶(LZM)活性随着枯草芽孢杆菌添加量的增加显著升高(P<0.05),1.0%枯草芽孢杆菌组肠道碱性磷酸酶(AKP)活性显著高于对照组与0.5%枯草芽孢杆菌组(P<0.05)。经注射TNBS诱导肠炎后,3组大口黑鲈幼鱼肠道免疫酶活性均显著升高(P<0.05),且1.0%枯草芽孢杆菌组大口黑鲈肠道ACP、AKP、LZM活性均显著高于对照组(P<0.05)。6)与对照组相比,添加0.5%或1.0%枯草芽孢杆菌均能显著降低肠道促炎因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-15(IL-15)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-8(IL-8)的mRNA相对表达量,显著升高抗炎因子白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的mRNA相对表达量(P<0.05)。综上可知,饲料中添加枯草芽孢杆菌可提高大口黑鲈幼鱼的肠道抗氧化能力和免疫能力,并缓解由TNBS引起的肠道促炎因子的表达,以1.0%的添加量效果较好。

摘要： 在适宜的投饲率范围内,随着投饲率的增加,鱼类的生长性能得到增强。为探明不同投饲率对鲻幼鱼生长、体成分、肝脏消化酶和免疫酶活性的影响,以平均体质量(37.96±0.89) g的鲻幼鱼为试验对象,设置饥饿、次饱食、饱食和过饱食4个不同投饲率(2.5%、5%、10%和15%),每组3个平行,每个平行20尾,养殖56 d后测量各指标。试验结果显示:不同投饲率对鲻幼鱼的质量日增加率、特定生长率、饲料利用率、肥满度、肝体指数、全鱼水分含量、粗蛋白含量、粗脂肪含量、肝脏蛋白酶活性、脂肪酶活性、过氧化氢酶活性、超氧化物歧化酶活性和溶菌酶活性均有显著影响(P0.05)。随着投饲率的升高,鲻幼鱼质量日增加率、特定生长率、肥满度、肝体指数、粗脂肪含量、肝脏蛋白酶活性、过氧化氢酶活性和溶菌酶活性呈先增高后趋于平稳的趋势;饲料利用率、全鱼水分含量、粗蛋白含量随投饲率升高呈显著下降趋势;肝脏脂肪酶、超氧化物歧化酶活性随投饲率的增高呈先升后降的趋势,在投饲率为10%时达到最大值。综合生长速率、饲料利用率、营养成分含量及消化酶活性、免疫酶指标来分析,确定鲻幼鱼的最适投饲率为10%。

摘要： 为揭示热带海参环境适应调节机制,为其人工增养殖提供科学依据,探究了红腹海参(Holothuria edulis)摄食和生理状况随时间的变化,对不同季节海参的消化道指标、组织学和酶活性变化进行了跟踪监测。结果表明,春、夏季红腹海参的摄食比较旺盛,冬季出现了与刺参(Stichopus japonicus)夏眠相似的特性——体质量下降,消化道组织萎缩、细胞凋亡而出现大量空腔,横行皱襞厚度降低、肠壁结构中的柱状上皮密集程度下降。消化道的消化酶和免疫酶分别在3和6月活性最高,而在12月各项酶(除调节代谢的碱性磷酸酶外)活性则均处于低值,因此判断红腹海参具有冬眠现象。

摘要： 为揭示方斑东风螺(Babylonia areolata)在低pH和高pH胁迫时的急性毒性和生理变化,以pH=8.0为对照组,pH=5.0、6.0、7.0和9.0为试验组,测定方斑东风螺体内4种免疫酶:谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)和酸性磷酸酶(ACP)活性。结果显示:不同时间pH胁迫对免疫酶活性有显著影响(P0.05);方斑东风螺经过pH急性胁迫后,在低pH和高pH的水体养殖6 h后都出现了活力下降、爬壁缓慢,而在48 h后开始出现死亡;各试验组GSH-PX活性均呈现“抑制-诱导”的变化趋势;随着时间的不断延长,各pH处理组CAT活力均呈现“诱导-抑制-诱导”的变化趋势;POD活性总体表现出了“诱导-抑制”的趋势;低pH处理组(pH=5.0、6.0)ACP活性表现出“诱导-抑制”的趋势。该研究对于方斑东风螺的养殖具有参考意义,同时丰富贝类免疫系统方面的基础资料。

摘要： 为探讨益生菌制剂对仿刺参生长、消化和免疫功能的影响,选用分离自仿刺参肠道的地衣芽孢杆菌作为潜在的益生菌株进行仿刺参投喂试验.选择初始体质量为(7.17±0.86)g的仿刺参为试验对象,设计空白对照组及益生菌处理组进行投喂.益生菌在饲料中的添加密度分别为105、107、109、1011 cfu/g,每10 d测定相关指标.40 d投喂试验结束后,通过注射灿烂弧菌的方式对各组仿刺参进行攻毒试验.试验结果显示,105、1011 cfu/g处理组与对照组相比,各指标差异不显著.而投喂含有107 cfu/g和109 cfu/g地衣芽孢杆菌饲料时,仿刺参质量增加率、特定生长率、消化酶活性(胰蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶)及免疫酶活性(酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、超氧化物歧化酶、溶菌酶)均显著高于对照组.试验期间,淀粉酶及超氧化物歧化酶活性呈先升后降的趋势,其他指标呈上升趋势.攻毒试验表明,投喂107 cfu/g和109 cfu/g地衣芽孢杆菌的仿刺参累积死亡率较低,相对免疫保护率较高,仿刺参抵抗灿烂弧菌的能力得到提高.试验结果表明,当饲料中地衣芽孢杆菌密度为107 cfu/g和109 cfu/g时,仿刺参生长指标、消化酶活性和免疫酶活性均显著提高.

摘要： 采用温度渐变的方法,研究了 18、22、26、30°C共4个温度梯度对美洲黑石斑幼鱼[(73.74±3.76)g]生长及免疫因子活力的影响.结果表明,温度对美洲黑石斑幼鱼的生长和存活均有不同程度的影响.在实验温度范围内,随着温度的升高,美洲黑石斑幼鱼最终体重、特定增长率(SGR)、日增重(DWG)、增重率(GBW)和增长率(GBL)均出现先升高后降低的趋势,且部分温度组间差异显著(P＜0.05),其中上述各项指标中,温度22°C组均最高,与温度26°C组差异不显著(P＞0.05),而与温度18°C、30°C组存在显著性差异(P＜0.05);幼鱼的饲料系数(FCR)随温度升高先降低后升高,且部分温度组间差异显著(P＜0.05).在成活率方面,除温度30°C组的成活率为82.2％,显著低于其他温度组外(P＜0.0 5),其他各温度组成活率均达到9 0％以上.温度对美洲黑石斑幼免疫相关酶活力和基因表达也存在一定影响.在实验第1d时,碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)和溶菌酶(LSZ)活力随温度的升高呈逐渐升高的趋势,而在实验第60 d时,碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)和溶菌酶(LSZ)活力随温度升高呈先升高后降低的趋势,且22°C和26°C组显著高于18°C和30°C组(P＜0.05);而超氧化物歧化酶(SOD)活力在实验第1 d时随温度的升高呈先下降后升高的趋势,实验第60 d时超氧化物歧化酶(SOD)活力随温度的升高逐渐上升.温度也影响HSP70和HSP90基因的表达,尽管实验期间各实验组HSP70和HSP90基因的表达变化未呈现明显的规律性,但30°C组HSP70和HSP90的表达量显著高于其他组(P＜0.05).从以上结果可见,温度对美洲黑石斑幼鱼的生长和免疫因子活力有一定影响,综合实验鱼的生长和免疫因子实验数据,美洲黑石斑幼鱼最适的生长温度应为22-26°C.

摘要： 研究了饥饿胁迫对猛虾蛄Harpiosquilla harpax肠道、血液、肝胰脏和肌肉的六种免疫酶活性的影响.实验虾蛄禁食1、6、11和21 d后,分别采集样品并测定酶活力.结果表明:饥饿胁迫时间对猛虾蛄免疫酶活性影响显著(P<0.05).轻度饥饿时猛虾蛄免疫酶活性被诱导,重度时则被抑制.随着饥饿时间的延长:1)肠道中各免疫酶(过氧化氢酶(CAT)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和过氧化物酶(POD))的活力均呈现"先增后降"的趋势;2)血液中除了CAT呈现"先降后增"外,其他为"先增后降";3)肝胰腺中CAT活力逐渐下降,而GSH-PX却"先降后增",其他"先增后降";4)肌肉组织中AKP略微下降,其他为"先增后降".

摘要： 为了探究紫花苜蓿草粉的适宜添加比例，达到用廉价的原料代替高价的原料，以降低饲料成本、提高养殖效益的目的，本研究选取了A和B两种规格的刺参，采用了海泥、紫花苜蓿和配合饲料三种基础原料，配制成首稽草粉的添加水平依次为:0、5%、10%、15%和20%的五种饲料，对A、B组刺参进行了为期60天的投喂饲养试验。对A、B组刺参幼参生长性能和B组刺参的消化道性状指数、免疫酶活性进行了计算与测定。结果表明:在特定的室内养殖条件下，对于A组和B组这两种不同规格的刺参来说，当苜蓿草粉的添加比例分别为15%和10%～15%时的养殖效果最佳。对于B组刺参来说，适当比例的苜蓿草粉不仅可以促进刺参的生长，而且可提高刺参的免疫机能。研究为刺参营养学和为生产刺参专用的配合饲料提供了资料参考和理论依据。

摘要： @@建立间接免疫荧光(IFA)检测冰冻切片、间接免疫酶组织化学法(IHC)检测石蜡切片中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染的方法和抗原定位，为PRRSV感染的实验室诊断、PRRSV在感染猪组织细胞中的亚细胞定位和动态研究提供有效的检测手段。以PRRSVHUB-4株作为抗原,制备兔抗PRRSV高免血清建立IFA检测冰冻切片中PRRSV的方法；利用PRRSV单抗，建立的IHC对不同日龄猪人工感染PRRSV死亡猪不同组织器官以及临床样品进行检测。

摘要： 本实验以来自广西梧州、博白和北海地区的3株猪瘟野毒和中国标准石门株病毒、疫苗毒为材料,研究其在宿主体内和体外PK-15细胞中增殖的基本特性和差异.结果显示,广西的一部分毒株很可能在毒力和生长特性上已经发生了一些变异.本实验用免疫酶实验检测PK-15细胞中的猪瘟病毒抗原,发现其主要存在于细胞的核膜以及内质网和高尔基体富集的区域.

摘要： 本发明涉及酶联免疫检测技术领域，具体的说是一种酶联免疫转移机构及酶联免疫工作站；包括依次设置的制冷机构、转移机构、注液机构和读数机构；所述注液机构包括托板，所述注液机构还包括震荡单元和压力传感器；所述托板上端面设置有凹槽；所述震荡单元和压力传感器安装在凹槽内，当孔板内注射入一定量的液体后，托板通过压力传感器实现对孔板的重量监测启动震荡单元对孔板进行震荡；本发明通过在托板内固连压力传感器实现对孔板重量的检测，从而启动震荡单元对孔板进行震荡，实现自动化，将震荡位与孵育位结合减少酶联免疫工作台所占的空间，减去了转移机构在震荡位与孵育位之间的转移的这一操作步骤，节约时间，提高了工作效率。

摘要： 本发明提供了一种酶免疫检测板条、酶免疫检测板及其检测方法，酶免疫检测板条包括微孔板条本体和环状体，环状体包括环状本体和连接件，环状本体至少部分位于微孔内，且环状本体与微孔之间存在环形间隙，环形间隙与第一凹槽连通，连接件的一端连接于环状本体上靠近第一平面的部分，且连接件另一端与微孔板条本体可拆卸连接，环状本体包括一用于连通微孔的底部与外界的中空通道，环状本体靠近微孔的底部的一端面与微孔之间存在一用于连通中空通道与环形间隙的连通通道。实现了临床根据病人的具体情况进行固相载体的自由组合以完成同一标本的多测试项目可任意组合的检测，提高了酶免疫检测的效益，具有灵敏度高、重复性好和检测时间短的优点。

摘要： 本发明公开一种酶联免疫转移机构及酶联免疫工作站，立板侧部设有震荡位,与震荡位并列设置有一个基准孵育位,基准孵育位下方设有若干层缓存孵育位,相邻两层缓存孵育位之间形成有转移通道；底板外侧连接有转移单元，转移单元设有机械手，机械手通过转移通道将置于基准孵育位上的载体架转移到缓存孵育位上。洗板位上方设有洗板头，洗板头连接有洗板针，洗板头外侧连接有移动载架，洗板头连接有Y向洗板电机，转移单元通过转移通道将置于缓存孵育位上的载体架转移到洗板位上进行冲洗，洗板位下方设有洗板导液槽，洗板导液槽设有导液孔。本发明分层式设计，能在不同的孵育和洗板区域进行转移，占用空间少，效率高。

摘要： 一种酶联免疫分析方法及全自动酶联免疫分析仪，所述分板仪包括机架组件、洗涤组件、加样/加试剂组件、加热及温度控制组件、液路系统、输入输出装置、光学测量组件、控制系统；所述机架组件包括机架底板，在机架底板上设有支柱，在支柱上从下往上依次设有下固定板和上固定板，在下固定板和上固定板之间设有圆形反应盘，所述圆形反应盘通过中心轴与上固定板和下固定板连接，在下固定板下部固定设有第一电机，第一电机通过第一传动机构带动圆形反应盘转动。本发明在使用时只要有一份样品即可进行对应项目的检测而无试剂的浪费；无需将检测试剂分别用不同的试剂瓶来盛装，不但操作极为简便，而且不容易造成操作差错，从而保证检测结果的正确性。

摘要： 酶联免疫试剂盒及用酶联免疫试剂盒检测牛乳铁蛋白的方法，它涉及一种试剂盒及其试剂盒检测牛乳铁蛋白的方法。本发明解决了现有的牛乳铁蛋白的检测方法存在的检测成本较高、操作复杂的问题。本发明酶联免疫试剂盒包括酶联板、牛乳铁蛋白标准品、样品稀释液、检测溶液、底物溶液、洗涤液和终止液；本发明的检测方法主要经过溶液的配制，将抗体结合在酶联板上，封闭酶联板，将标准品、待测样品固定在酶联板上，然后用酶标仪检测光吸收值，并根据检查结果制作标准曲线，然后计算出待检测样品的牛乳铁蛋白血清的含量。本发明的方法采用了工作液形式，成本低廉，本发明的酶联免疫试剂盒检测牛乳铁蛋白含量的方法操作简单。

摘要： 本发明公开了一种酶标抗溶菌酶金抗体及检测溶菌酶酶联免疫试剂盒及其应用。该酶标抗溶菌酶金抗体同时具有结合溶菌酶能力及辣根过氧化物酶的特性，并将其应用于酶联免疫中检测鸡蛋清溶菌酶。该酶联免疫试剂盒包括：酶标抗溶菌酶金抗体、酶标板、溶菌酶标准品、标准品稀释液、包被有溶菌酶特异性抗体的酶标板、显色液、样品稀释液、洗涤液和终止液。本发明还公开了利用该试剂盒进行样品检测的方法。本试剂盒采用酶链免疫分析法中的直接法原理，可以对鸡蛋清中的溶菌酶进行定量检测。本试剂盒使用金抗体代替天然抗体进行检测，既降低了生产成本，也避免了交叉反应，且兼具酶联免疫试剂盒的其他优点。

摘要： 本文提供了治疗自身免疫性疾病的方法，其包括向患有所述自身免疫性疾病的受试者施用免疫蛋白酶体抑制剂和免疫抑制剂。

摘要： 本实用新型公开一种酶联免疫转移机构及酶联免疫工作站，立板侧部设有震荡位,与震荡位并列设置有一个基准孵育位,基准孵育位下方设有若干层缓存孵育位,相邻两层缓存孵育位之间形成有转移通道；底板外侧连接有转移单元，转移单元设有机械手，机械手通过转移通道将置于基准孵育位上的载体架转移到缓存孵育位上。洗板位上方设有洗板头，洗板头连接有洗板针，洗板头外侧连接有移动载架，洗板头连接有Y向洗板电机，转移单元通过转移通道将置于缓存孵育位上的载体架转移到洗板位上进行冲洗，洗板位下方设有洗板导液槽，洗板导液槽设有导液孔。本实用新型分层式设计，能在不同的孵育和洗板区域进行转移，占用空间少，效率高。

摘要： 本实用新型提供了一种酶免疫检测板条和酶免疫检测板，酶免疫检测板条包括微孔板条本体和环状体，环状体包括环状本体和连接件，环状本体至少部分位于微孔内，且环状本体与微孔之间存在环形间隙，环形间隙与第一凹槽连通，连接件的一端连接于环状本体上靠近第一平面的部分，且连接件另一端与微孔板条本体可拆卸连接，环状本体包括一用于连通微孔的底部与外界的中空通道，环状本体靠近微孔的底部的一端面与微孔之间存在一用于连通中空通道与环形间隙的连通通道。实现了临床根据病人的具体情况进行固相载体的自由组合以完成同一标本的多测试项目可任意组合的检测，提高了酶免疫检测的效益，具有灵敏度高、重复性好和检测时间短的优点。

摘要： 本发明公开了一种免疫组化的免疫酶标方法，主要包括，石蜡切片，二甲苯脱蜡、梯度酒精脱水、阻断、抗原修复、封闭、加入一抗、加入二抗以及加入SP、显色复染等步骤。该方法操作简易化，且通过镜检可以准确控制颜色，以免过染，确保染色效果。各个溶液的制备方法简单，且剂量适合，使用方便，避免造成浪费。还包括用于免疫酶标方法的试剂盒，包括内源性过氧化酶阻断剂、高效封闭液、生物素标记的羊抗鼠IgG和链霉菌抗生物素蛋白‑过氧化酶。该试剂盒中包括上述免疫酶标方法所需的溶剂，各个溶剂采用滴瓶分瓶包装，使用方便。