黑斑病菌

摘要： 南京农业大学果树生物技术实验室/园艺学院联合江苏丘陵地区镇江农业科学研究所、浙江省农业科学院园艺研究所以黑斑病抗性较弱的草莓主栽品种“红颊”为试验材料,先从病株中分离和鉴定草莓黑斑病的致病菌,然后进行外源喷施褪黑素和接种黑斑病菌处理,通过统计病菌致病性、褪黑素的抑菌效果和促进草莓的抗菌性能力,并测定各处理草莓发病过程中叶片相关酶活性和抗性基因的表达水平,初步探讨了外源褪黑素提高草莓对黑斑病抗病性的作用机理。

摘要： 据《果树资源学报》2021年第3期《3种植物提取物对梨叶黑斑病菌抑制作用研究》(作者高小宽等)报道,以梨黑斑病原菌为供试菌株,采用离体叶盘法、菌丝生长速率测定法和病原孢子萌发率方法,研究了三七、五味子和银杏3种提取物不同浓度对梨叶黑斑病病原菌的抗菌活性。

摘要： 为了对柑橘黑斑病和柚黑斑病提出更科学的化学防治方法,浙江大学农业与生物技术学院等单位研究人员研究了柑橘黑斑病菌和柚黑斑病菌对杀菌剂多菌灵的抗性频率、抗性水平及其抗性分子机制。结果表明,在江西114个柑橘黑斑病菌株中发现了2个多菌灵抗性菌株,抗性频率为1.75%,抗性系数分别为5333.6和379.2;在四川32个柑橘黑斑病菌株中发现了1个多菌灵抗性菌株,抗性频率为3.13%,抗性系数为303.3;在浙江23个菌株和重庆3个菌株中没有出现抗性菌株。

摘要： SGT1(suppressor of the G2 allele of skp1)基因作为植物抗病信号途径中的重要元件,广泛参与植物细胞周期、逆境反应和信号转导等过程.为研究不结球白菜(Brassica rapa ssp.chinensis)抗病相关基因BcSGT1的结构和表达特征,本研究通过RACE (rapid-amplification of cDNA ends)技术,以抗病品种‘苏州青’叶片为材料克隆到BcSGT1基因的全长cDNA序列;采用qRT-PCR分析该基因在霜霉病菌(Peronospora parasitica)及黑斑病菌(Alternaria brassicicola)诱导处理条件下的表达模式;用十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)技术分析该基因的原核表达特征.序列分析结果表明,BcSGT1基因的cDNA全长为1 418 bp,其中开放阅读框长度为1 074 bp,共编码358个氨基酸(GenBank No.AB495003).氨基酸同源性的系统进化分析表明,不结球白菜BcSGT1基因与同科植物的进化关系相近,其中与大白菜(Brassica rapa ssp.pekinensis)第3号染色体的基因(Bra000741)同源性最高(97％).qRT-PCR分析表明,霜霉病菌侵染处理下,BcSGT1基因在抗病品种‘苏州青’和感病品种‘矮脚黄’中的表达量分别于24、48 h达到峰值,且在‘苏州青’中的表达量峰值约为‘矮脚黄’中的2.1倍(P＜0.01);黑斑病菌侵染处理下,BcSGT1基因在抗病品种‘苏州青’和感病品种‘矮脚黄’中的表达量分别于12、24 h达到峰值,且在‘苏州青’中的表达量峰值约为‘矮脚黄’中的2.0倍(P＜0.01);霜霉病菌侵染处理24和48 h后,黑斑病菌侵染处理12、24和48 h后,BcSGT1基因在抗病品种‘苏州青’中的表达量均显著高于感病品种‘矮脚黄’中的表达量(P＜0.01).原核表达载体经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropy1β-D-thiogalactoside,IPTG)诱导表达出相对分子质量约为39kD的融合蛋白.BcSGT1基因是不结球白菜霜霉病菌及黑斑病菌抗病反应的重要组成部分,且本研究成功将BcSGT1融合表达进大肠杆菌(Escherichia coli)中.本研究为高产、优质及抗病不结球白菜新品种的选育提供重要的理论依据.

摘要： 【目的】以枣黑斑病菌产生的细胞壁降解酶为研究对象,明确其产生细胞壁降解酶种类和活性,探讨细胞壁降解酶在病菌致病中的作用,为细胞壁降解酶参与病原菌侵染机理的研究提供理论依据。【方法】利用3,5-二硝基水杨酸(DNS)法和考马斯亮蓝(Bradford)法,通过紫外-可见分光光度计测定反应混合物吸光度,根据酶反应所释放的还原糖计算细胞壁降解酶活性。【结果】枣黑斑病菌在寄主体外不同碳源诱导下均能产生多聚半乳糖醛酸酶(Polygalacturonase,PG)、羧甲基纤维素酶(Carboxymethyl cellulase, Cx)、β-葡萄糖苷酶(β-glucosidase)、木聚糖酶(Xylanase)、聚甲基半乳糖醛酸酶(Polymethylgalacturonase, PMG)和果胶甲基反式消除酶(Pectin methyltranseliminase, PMTE)等6 种细胞壁降解酶(Cell wall degrading enzyme,CWDE),但细胞壁降解酶活性存在一定差异,以骏枣果肉为外源诱导物,枣黑斑病菌产生β-葡萄糖苷酶活性明显高于其他5 种酶,说明β-葡萄糖苷酶在枣黑斑病菌致病过程中有着重要的作用,而以滤纸为诱导物产生的β-葡萄糖苷酶活性高于其他诱导物,其活性高达10.104 U·mg-1。枣黑斑病菌侵染枣果后产生的细胞壁降解酶种类及活性与体外不同碳源诱导的结果一致,可产生6 种细胞壁降解酶,其中β-葡萄糖苷酶活性高于其他5 种酶,且病健交界处β-葡萄糖苷酶的活性明显高于受侵染后的发病部位和未被侵染的部位。【结论】枣黑斑病菌在致病过程中起关键作用的细胞壁降解酶为β-葡萄糖苷酶,且在侵染过程中病健交界处的活性最高,而在寄主体外诱导β-葡萄糖苷酶最佳碳源为滤纸诱导物。

摘要： 目的:为明确拮抗真菌zjts7分类地位和对肿节风黑斑病菌Colletotrichum dematiu的抑菌率以及对病原菌的菌丝形态的影响.方法:本研究采用平板稀释法和平板对峙法,从健康肿节风的根系土壤里分离筛选到一株对肿节风黑斑病菌具有抑菌作用的真菌zjts7.结果:结果表明,真菌zjts7对肿节风黑斑病菌的抑菌率达到81.82％ ～100％.经显微镜观察,真菌zjts7可造成肿节风黑斑病菌的菌丝断裂、膨大和畸形.结论:结合形态特征和ITS rDNA序列分析,将该拮抗真菌zjts7鉴定为棘孢木霉Trichoderma asperellum.

摘要： 为了探讨花生几丁质酶在抵御真菌性病害中的作用,克隆了花生几丁质酶基因并通过遗传转化验证了该基因的功能.以花生品种花育23号基因组DNA和RNA为模板,通过PCR及RT-PCR扩增分别获得长度为1779 bp的花生几丁质酶基因DNA序列及795 bp的全长cDNA序列.DNA及cDNA序列比对结果表明,该基因包含3个外显子和2个内含子,内含子剪切符合"GT……AG"规则,其cDNA序列被命名为Ah-Chi,编码265个氨基酸,GenBank注册号为HQ439775.利用NCBI在线Blast进行序列比对,结果表明,该蛋白产物与水稻、玉米、紫花苜蓿、大豆、拟南芥的相关蛋白的同源性分别达到83％,83％,72％,58％,49％.用Ah-Chi替换掉植物表达载体pCAMBIA1301上的Gus基因,成功构建了植物过表达载体pCAMBIA1301-Ah-Chi.利用农杆菌介导法将pCAMBIA1301-Ah-Chi转化花生胚小叶外植体,获得再生小苗,经嫁接移栽获得再生植株.利用PCR扩增筛选获得转基因阳性植株,RT-PCR扩增结果表明,转基因植株中Ah-Chi基因表达量增加.用黑斑病菌接种转基因植株和非转基因对照植株离体叶片7 d后,发现非转基因植株叶片褐化及坏死程度较为严重,而转基因植株叶片褐化及坏死程度相对较轻,初步说明转基因植株抗病性增强.

摘要： 梨黑斑病是梨的一大病害。梨黑斑病菌分生孢子萌发时产生的寄主专化性毒素(AK毒素)是病原菌致病性的第1决定因子。AK毒素通过抑制寄主的抗性反应而使病原菌对寄主的侵染得以成功。为进一步了解梨黑斑病菌与寄主的互作,准确评价AK毒素对寄主的效应,作者对该菌的侵染是否导致寄主系统获得抗性进行了探讨。

摘要： 用采自黑龙江省各地的大白菜黑班病菌(Alternara Brasscae (Berk,)Sacc.)的22 个单孢菌株，对国内当前生产上应用的大白菜、萝卜、甘蓝、油菜等十字花科蔬菜作物51份试材进行苗期接种鉴定，根据同一品种在相同条件下对不同菌株抗感反应存在差异，而在不同条件下对同一菌株抗感反应趋近一致，借用模糊聚类分析方法、筛选出5个大白菜黑班病 菌鉴别寄主，并把黑龙江省的大白菜黑斑菌按照其在鉴别寄主上的反应划分为5个致病型。

摘要： 用采自黑龙江省各地的大白菜黑班病菌(Alternara Brasscae (Berk,)Sacc.)的22 个单孢菌株，对国内当前生产上应用的大白菜、萝卜、甘蓝、油菜等十字花科蔬菜作物51份试材进行苗期接种鉴定，根据同一品种在相同条件下对不同菌株抗感反应存在差异，而在不同条件下对同一菌株抗感反应趋近一致，借用模糊聚类分析方法、筛选出5个大白菜黑班病 菌鉴别寄主，并把黑龙江省的大白菜黑斑菌按照其在鉴别寄主上的反应划分为5个致病型。

摘要： 用采自黑龙江省各地的大白菜黑班病菌(Alternara Brasscae (Berk,)Sacc.)的22 个单孢菌株，对国内当前生产上应用的大白菜、萝卜、甘蓝、油菜等十字花科蔬菜作物51份试材进行苗期接种鉴定，根据同一品种在相同条件下对不同菌株抗感反应存在差异，而在不同条件下对同一菌株抗感反应趋近一致，借用模糊聚类分析方法、筛选出5个大白菜黑班病 菌鉴别寄主，并把黑龙江省的大白菜黑斑菌按照其在鉴别寄主上的反应划分为5个致病型。

摘要： 用采自黑龙江省各地的大白菜黑班病菌(Alternara Brasscae (Berk,)Sacc.)的22 个单孢菌株，对国内当前生产上应用的大白菜、萝卜、甘蓝、油菜等十字花科蔬菜作物51份试材进行苗期接种鉴定，根据同一品种在相同条件下对不同菌株抗感反应存在差异，而在不同条件下对同一菌株抗感反应趋近一致，借用模糊聚类分析方法、筛选出5个大白菜黑班病 菌鉴别寄主，并把黑龙江省的大白菜黑斑菌按照其在鉴别寄主上的反应划分为5个致病型。

摘要： 用采自黑龙江省各地的大白菜黑班病菌(Alternara Brasscae (Berk,)Sacc.)的22 个单孢菌株，对国内当前生产上应用的大白菜、萝卜、甘蓝、油菜等十字花科蔬菜作物51份试材进行苗期接种鉴定，根据同一品种在相同条件下对不同菌株抗感反应存在差异，而在不同条件下对同一菌株抗感反应趋近一致，借用模糊聚类分析方法、筛选出5个大白菜黑班病 菌鉴别寄主，并把黑龙江省的大白菜黑斑菌按照其在鉴别寄主上的反应划分为5个致病型。

摘要： 本发明公开了一种用于检测梨黑斑病菌的引物，包括一对引物，其上游引物序列如HB1所述，下游引物序列如HB2所述,其中，HB1为：TCACCCTTGTCTTTTGCGTA，HB2为：ACCTTTGCTGATAGAGAGTG。及利用该引物检测梨黑斑病菌的方法。本发明通过设计一对特异性引物，结合PCR扩增的方法可以有效地检测植物组织中的梨黑斑病菌。本发明方法具有准确、快速、简单易操作等优点，可以在病害侵染初期鉴定出病原物，可参考应用于田间调查和植物产品的检验，对控制梨黑斑病的大面积爆发和跨区域传播具有重要意义，同时，本发明体系的建立也为其他病原菌的检测提供了技术指导和理论依据。

摘要： 本发明公开了红景天提取物在抑制番茄灰霉病菌和白菜黑斑病菌中的应用。本发明所提供的红景天提取物，其制备方法包括：用95％乙醇水溶液提取红景天根，收集提取液并除去所述提取液中的乙醇，得到红景天95％乙醇提取物，所述红景天95％乙醇提取物为红景天提取物。实验证明大花红景天95％乙醇提取物、小花红景天95％乙醇提取物和高山红景天95％乙醇提取物在浓度为1mg/ml时，对番茄灰霉病病菌和白菜黑斑病菌具有明显的抑制作用。说明大花红景天、高山红景天和/或小花红景天可用于制备番茄灰霉病病菌和白菜黑斑病菌抑制剂。

摘要： 本发明公开了一种甘薯黑斑病菌的实时荧光RPA检测引物，所述的引物由SEQ ID No：1和SEQ ID No：2所示的核苷酸序列组成；本发明还公开了RPA检测引物和探针的组合，所述探针由SEQ ID No：3所示的核苷酸序列组成；还公开了它们在甘薯黑斑病菌检测上的应用。本发明实时荧光RPA检测引物特异性强，尤其使用探针后特异性更好；其次，本发明RPA引物检测灵敏度高，仅需不到10个孢子的DNA即可进行检测；检测速度快，只需20分钟即可完成；此外，本发明检测方法反应温度低、操作简便、检测成本低，适于口岸检疫和田间现场实时检测。

摘要： 本发明涉及检测薄壳山核桃黑斑病菌(Pestalotiopsis microspora)的padlock探针及其检测方法，属于生物技术领域。用于检测薄壳山核桃黑斑病菌的padlock探针P‑Pm，其特征在于，所述探针P‑Pm的序列为：P‑Pm:5’‑GCGCATGGAAATGTCCAGAGTGCAGGGGCTCGACCGTTAGCAGCATGACCGAGATGTACCGCTATCGTacgtcgtattaggtagtcacTCTCACAGAACCAG‑3’。以此探针为基础的检测试剂盒具较强的特异性、灵敏性及稳定性，为薄壳山核桃黑斑病菌检测提供了快速、灵敏、特异的技术方法。

摘要： 本发明公开了一种利用LAMP检测三七黑斑病菌的方法。所述引物序列如SEQ ID NO.1‑4所示。三七黑斑病菌LAMP检测步骤如下：首先以三七黑斑病菌RPB2基因为检测靶标，设计LAMP特异性引物；提取待测样品DNA；配制LAMP反应体系；将反应体系于64°C恒温反应40 min；通过自然光下或紫外光下判断结果或是二者结合判断结果。本发明解决了现有技术检测周期长、灵敏度不高、特异性不强、操作复杂、仪器设备要求高等缺陷，提供了一种特异性强、灵敏度高、操作简便、对环境设备要求不高、低成本的LAMP快速准确检测技术，可用于三七黑斑病的检测与鉴定，为三七黑斑病的诊断与防控提供了一种方法。

摘要： 本发明公开了一种用于检测梨黑斑病菌的引物，包括一对引物，其上游引物序列如HB1所述，下游引物序列如HB2所述,其中，HB1为：TCACCCTTGTCTTTTGCGTA，HB2为：ACCTTTGCTGATAGAGAGTG。及利用该引物检测梨黑斑病菌的方法。本发明通过设计一对特异性引物，结合PCR扩增的方法可以有效地检测植物组织中的梨黑斑病菌。本发明方法具有准确、快速、简单易操作等优点，可以在病害侵染初期鉴定出病原物，可参考应用于田间调查和植物产品的检验，对控制梨黑斑病的大面积爆发和跨区域传播具有重要意义，同时，本发明体系的建立也为其他病原菌的检测提供了技术指导和理论依据。

摘要： 本发明公开了一种用于甘薯黑斑病抗性鉴定中的黑斑病菌培养方法，主要包括如下步骤：病原菌分离和纯化、甘薯液体培养基制备、黑斑病菌的培养和孢子悬浮液制备等步骤，该方法利用甘薯液体培养基对分离纯化的甘薯黑斑病菌进行活化、扩大培养，极大地缩短了黑斑病菌的增殖时间，且不易污染。并且该鉴定方法科学，结果准确，过程简单易于操作。

摘要： 本发明公开了红景天提取物在抑制番茄灰霉病菌和白菜黑斑病菌中的应用。本发明所提供的红景天提取物，其制备方法包括：用95％乙醇水溶液提取红景天根，收集提取液并除去所述提取液中的乙醇，得到红景天95％乙醇提取物，所述红景天95％乙醇提取物为红景天提取物。实验证明大花红景天95％乙醇提取物、小花红景天95％乙醇提取物和高山红景天95％乙醇提取物在浓度为1mg/ml时，对番茄灰霉病病菌和白菜黑斑病菌具有明显的抑制作用。说明大花红景天、高山红景天和/或小花红景天可用于制备番茄灰霉病病菌和白菜黑斑病菌抑制剂。

摘要： 本发明提供了一种利用CRISPR/Cas12a体系可视化检测杭白菊黑斑病菌Alternaria alternata的方法，包括如下步骤：借助PCR技术对杭白菊黑斑病菌Alt特异性基因片段进行扩增；在crRNA的介导下，Cas12a可特异性识别扩增产物，并激活核酸酶活性，从而切割两端修饰有FAM和BHQ1的任意碱基序列ssDNA(Reporter)，形成FAM‑ssDNA片段与BHQ1‑ssDNA片段；FAM‑ssDNA和BHQ1‑ssDNA能在蓝光透射仪的照射下展现出荧光，由此实现对于杭白菊黑斑病菌Alt的检测。该方法操作简单便携，不依赖大型仪器设备，成本低廉，且灵敏度高、特异性强，具有一定的应用前景。

摘要： 本发明公开了一套月季黑斑病菌生理小种的鉴别寄主体系及其鉴别方法，该月季黑斑病菌寄主包括：粉蕾木香、朱红蔷薇、小金樱、大花白木香、法国蔷薇、大花香水月季、山刺玫、拟木香、无刺蔷薇和丁香蔷薇，所述月季黑斑病菌寄主均为蔷薇科蔷薇属植物活体，该发明中，通过筛选的10份蔷薇属植物作为主要寄主，通过将不同地区的月季黑斑病菌对这10种寄主的感染情况来判断该月季黑斑病菌的生理小种的种类，相比较传统的植物抗性检测方法其对植物的抗性进行检测，该方法能够简单明确对所鉴别的黑斑病菌生理小种类别进行分类，并且通过新型统计分类方法能够使人更加直观的看出具体数据，同时鉴别周期短，节约人力物力。