蒺藜皂苷

摘要： 背景蒺藜皂苷是从中药蒺藜内提取的活性成分,具有抗癌、抗炎、调节免疫、等多种药理活性,已有研究表明蒺藜皂苷能抑制胃癌细胞生长和诱导凋亡,本研究主要探究蒺藜皂苷可能抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭.目的探讨蒺藜皂苷通过调控Wnt3a/β-catenin信号通路抑制胃癌细胞增殖、迁移侵袭的机制研究.方法以胃癌细胞HGC-27为体外研究对象,用浓度0、20 mg/L、40 mg/L蒺藜皂苷进行处理,记为对照组(Control)、蒺藜皂苷20 mg/L组、蒺藜皂苷40 mg/L组;将siRNA NC、siRNA Wnt3a转染胃癌细胞中,用40 mg/L蒺藜皂苷处理,记为蒺藜皂苷+siRNA NC组、蒺藜皂苷+siRNA Wnt3a组.用噻唑蓝(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)检测细胞增殖活性;伤口愈合实验检测细胞迁移;Transwell小室检测细胞侵袭;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测p21、细胞增殖核抗原-67(proliferating nuclear antigen-67,Ki67)、上皮性钙黏附素(epithelical cadherin,E-cadherin)、神经性钙黏附素(neural cadherin,N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、Wnt3a、β-catenin蛋白表达.结果与Control组比较,蒺藜皂苷20 mg/L组、蒺藜皂苷40 mg/L组胃癌细胞活性、迁移率、侵袭细胞数显著降低,p21、E-cadherin蛋白表达增加,Ki67、N-cadherin、Vimentin、Wnt3a、β-catenin蛋白表达降低.与蒺藜皂苷+siRNA NC组组相比,蒺藜皂苷+siRNA Wnt3a组胃癌细胞活性、迁移率、侵袭细胞数显著降低,Wnt3a、β-catenin、Ki67、N-cadherin、Vimentin蛋白表达降低,p21、E-cadherin蛋白表达增加.结论蒺藜皂苷可能通过抑制Wnt3a/β-catenin信号通路抑制胃癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间质转化.

摘要： 缺血/再灌注(Ischemia reperfusion,I/R)损伤是指组织在缺血情况下恢复血液灌注后,组织损伤反而加重,甚至发生不可逆性损伤的现象[1]。研究表明[2,3],中药对I/R损伤有保护作用,中药及其制剂治疗靶点多、治疗环节丰富,作用于I/R损伤的复杂机制效果显著。因此,深入研究中药的作用机制可为临床上治疗I/R损伤提供理论依据。蒺藜皂苷(Gross saponin tribulus terrestris,GSTT)是传统中药蒺藜的主要成分.

摘要： 目的 探讨蒺藜皂苷对结肠癌细胞增殖和凋亡的影响及分子机制.方法 实验设置对照组,蒺藜皂苷低、中、高剂量组,pcDNA 组,pcDNA-AGAP2-AS1 组,si-NC 组,si-AGAP2-AS1 组,miR-NC 组,miR-646组,蒺藜皂苷+pcDNA组和蒺藜皂苷+pcDNA-AGAP2-AS1组.四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞增殖抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹(Western blot)法检测细胞周期蛋白D1 (CyclinD1)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(p21)、B细胞淋巴瘤/白血病-2 (Bcl-2)、Bcl-2相关X (Bax)的蛋白表达;实时荧光定量PCR (RT-qPCR)检测ln-cRNA AGAP2-AS1和miR-646的表达;荧光素酶报告实验检测lncRNA AGAP2-AS1和miR-646的靶向关系.结果 不同浓度蒺藜皂苷处理结肠癌HCT116细胞后,细胞增殖抑制率升高,细胞凋亡率升高,CyclinD1、Bcl-2蛋白表达降低,p21、Bax表达升高,lncRNA AGAP2-AS1表达降低,miR-646表达升高,并呈浓度依赖性(P＜0.05).lncRNA AGAP2-AS1靶向调控miR-646,抑制lncRNA AGAP2-AS1表达或过表达miR-646可抑制结肠癌细胞增殖并诱导细胞凋亡.蒺藜皂苷处理的同时过表达lncRNA AGAP2-AS1,增殖抑制率降低,细胞凋亡率降低,CyclinD1、Bcl-2蛋白表达升高,p21、Bax表达降低(P＜0.05).结论 蒺藜皂苷可通过调控lncRNA AGAP2-AS1/miR-646表达抑制结肠癌细胞的增殖、诱导细胞凋亡.

摘要： 目的:研究蒺藜皂苷(STT)对肺癌A549细胞周期和凋亡的影响和机制.方法:肺癌A549细胞分成Control、STT、STT+si-NC、STT+si-PDCD4组,使用噻唑蓝(MTT)方法测定细胞增殖,平板克隆实验测定细胞克隆能力,碘化丙啶(PI)单染法检测细胞周期,膜联蛋白V-FITC(Annexin V-FITC)/PI双染法检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、p27、剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(C-caspase-3)、caspase-3、程序性细胞死亡4(PDCD4)蛋白表达.结果:与Control组比较,STT组细胞增殖能力、克隆能力显著降低(P＜0.05),细胞G0/G1比例和凋亡率显著升高(P＜0.05),Cyclin D1蛋白表达明显减少(P＜0.05),p27、C-caspase-3、caspase-3、PDCD4等蛋白表达水平升高(P＜0.05).与STT+si-NC组比较,STT+si-PDCD4组细胞存活率和克隆形成数目明显增加(P＜0.05),G0/G1细胞比例降低与细胞凋亡率明显降低(P＜0.05),细胞中Cyclin D1蛋白水平升高(P＜0.05),p27、C-caspase-3、caspase-3、PDCD4等蛋白水平下降(P＜0.05).结论:蒺藜皂苷通过上调PDCD4表达阻滞肺癌A549细胞周期并诱导细胞凋亡.

摘要： 目的 探讨蒺藜皂苷对同型半胱氨酸诱导的人脐静脉内皮细胞氧化应激及炎症损伤的影响.方法 本次实验分为对照组(正常模型组)、正常组和联合组.建立体外的损伤模型运用同型半胱氨酸诱导的人脐静脉内皮细胞,进行细胞增殖活力的检测利用MTT法,检测SOD(超氧化物歧化酶)的活性以及MDA(丙二醛)的含量,利用生化的方法,对ROS(活性氧簇)利用化学荧光的方法进行检测,培养肿瘤坏死因子(TNF-α)利用ELISA进行检测,以及对细胞间黏附分子(ICAM-1)、白细胞素(IL-6)、白细胞介素(IL-1β)的水平进行检测.结果 同型半胱氨酸在对内皮细胞进行刺激后能够诱导氧化应激反应以及释放大量的炎症因子.通过与模型组的相互比较,发现蒺藜皂苷的干预能够将细胞增殖活力以及SOD活性增强,能够将细胞内的 MDA 含量和ROS降低(P＜0.05);联合组TNF-α、ICAM-1、IL-6及IL-1β水平均低于对照组(P＜0.05);高于正常组(P＜0.05);正常组细胞TNF-α、ICAM-1、IL-6及IL-1β水平均低于对照组(P＜0.05).结论 蒺藜皂苷对同型半胱氨酸诱导的人脐静脉内皮细胞氧化有着一定的保护作用,对于炎症损伤也能够起到一定的保护作用.

摘要： 目的:研究蒺藜皂苷对胃癌细胞AGS增殖和凋亡的影响及机制.方法:以胃癌细胞AGS作为研究对象,用蒺藜皂苷处理细胞,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,碘化丙啶(PI)单染法检测细胞周期,膜联蛋白V-FITC(Annexin V-FITC)/PI双染法检测细胞凋亡,Western blot检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved caspase 3)、Nin1结合蛋白(NOB1)蛋白表达.在胃癌细胞中转染pcDNA3.1-NOB1,给予蒺藜皂苷处理,检测细胞增殖、周期、凋亡和Cyclin D1、cleaved caspase 3、NOB1蛋白表达变化.结果:蒺藜皂苷处理后,胃癌细胞增殖能力和Cyclin D1、NOB1蛋白表达水平下降(P<0.05),细胞G1期比例、细胞凋亡率、cleaved caspase 3蛋白表达水平升高(P<0.05).转染pcDNA3.1-NOB1后,胃癌细胞增殖能力和Cyclin D1、NOB1蛋白表达水平升高(P<0.05),细胞G1期比例、细胞凋亡率、cleaved caspase 3蛋白表达水平下降(P<0.05).结论:蒺藜皂苷通过下调NOB1抑制胃癌细胞增殖并诱导细胞凋亡.

摘要： 目的:探讨蒺藜皂苷对同型半胱氨酸(Hcy)诱导的内皮细胞损伤的保护作用及其分子机制.方法:采用Hcy诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)建立体外损伤模型,采用MTT法检测细胞增殖活力,生化方法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量,化学荧光法检测活性氧簇(ROS)水平,应用ELISA检测细胞培养上清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)水平,Real-time PCR检测TNF-α、核因子κB(NF-κB)p65 mRNA表达,Western Blot检测NF-κB p65、p-IκBα、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、NADPH氧化酶4(NOX4)蛋白表达.结果:Hcy刺激内皮细胞后可诱导氧化应激反应和炎症因子的大量释放.与模型组比较,蒺藜皂苷干预可显著增强细胞增殖活力和SOD活性,降低细胞内MDA含量和ROS、TNF-α、ICAM-1、IL-6、IL-1β水平,抑制TNF-α、NF-κB p65 mRNA和NF-κB p65、p-IκBα、MMP-2、NOX4蛋白表达(P<0.05或P<0.01).与蒺藜皂苷20μg·ml-1干预组比较,蒺藜皂苷20μg·ml-1+BAY 11-7082组可显著降低TNF-α、ICAM-1、IL-6、IL-1β含量、细胞TNF-α、NF-κB p65 mRNA表达水平及NF-κB p65、p-IκBα、MMP-2、NOX4蛋白表达水平(P<0.05).结论:蒺藜皂苷对Hcy诱导的内皮细胞氧化应激及炎症损伤具有保护作用,其作用机制可能与抑制NOX4表达,进而降低氧化应激诱导的NF-κB活化有关.

摘要： 目的 建立从蒺藜全草中分离制备蒺藜皂苷对照品Terrestrinin B的方法。方法 结合醇沉、D101大孔树脂、中低压制备色谱分离制备蒺藜全草中蒺藜皂苷Terrestrinin B单体。结果 分离制备的Terrestrinin B的质量分数达99.55%。结论 该方法可快速、有效制备高纯度的Terrestrinin B,提供可用于蒺藜药材的定性、定量分析用的对照品。

摘要： 目的 探究蒺藜皂苷(GSTT)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠炎症模型的抗炎效果及可能的机制如对IL-17、TNF-α和NF-κB通路等相关基因和蛋白质表达量的影响.方法 将小鼠随机分为空白对照组、模型组、地塞米松阳性组和蒺藜皂苷给药组(50 mg/kg).先给药7d,第8天用LPS诱导产生炎症小鼠模型,3h后进行眼眶取血.ELISA法检测血清中的细胞因子表达程度和免疫组化法检测小鼠胸腺IL-17、TNF-α和NF-κB通路的蛋白质表达水平的变化.结果 对比模型组,蒺藜皂苷能显著降低血清中IL-17和TNF-α的水平(P＜ 0.01).通过免疫组化检测,蒺藜皂苷能下调IL-17、TNF-α和NF-κB蛋白表达量,对比模型组具有不同程度的下降(P＜ 0.01).结论 蒺藜皂苷能对由LPS诱导的炎症具有防治作用,其抗炎效果通过IL-17炎症通路下调TNF-α和NF-κB蛋白质水平的表达有关,本研究为开发新型的抗炎新药提供了理论依据.

摘要： 目的探究蒺藜皂苷(GSTT)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠炎症模型的抗炎效果及可能的机制如对IL-17、TNF-α和NF-κB通路等相关基因和蛋白质表达量的影响。方法将小鼠随机分为空白对照组、模型组、地塞米松阳性组和蒺藜皂苷给药组(50 mg/kg)。先给药7 d,第8天用LPS诱导产生炎症小鼠模型,3 h后进行眼眶取血。ELISA法检测血清中的细胞因子表达程度和免疫组化法检测小鼠胸腺IL-17、TNF-α和NF-κB通路的蛋白质表达水平的变化。结果对比模型组,蒺藜皂苷能显著降低血清中IL-17和TNF-α的水平(P<0.01)。通过免疫组化检测,蒺藜皂苷能下调IL-17、TNF-α和NF-κB蛋白表达量,对比模型组具有不同程度的下降(P<0.01)。结论蒺藜皂苷能对由LPS诱导的炎症具有防治作用,其抗炎效果通过IL-17炎症通路下调TNF-α和NF-κB蛋白质水平的表达有关,本研究为开发新型的抗炎新药提供了理论依据。

摘要： 目的：观察蒺藜皂苷对大鼠皮层神经元经缺氧/复氧后细胞凋亡的影响，并探讨其可能的作用机制。rn 方法：离体培养大鼠皮层神经元，先用95％N2与5％CO2混合气体造成细胞缺氧3小时，再给予95％O2与5％CO2混和气复氧12小时，建立缺氧/复氧损伤的皮层神经元凋亡模型.中药组于缺氧和复氧时均加入蒺藜皂苷进行干预。比色法测定皮质神经元乳酸脱氢酶(LDH)释放漏出率;Annexin V-FITC/PI双染，流式细胞仪定量分析细胞凋亡百分率;Fluo-3和JC-1荧光染色，激光扫描共聚焦显微镜分别观察细胞内钙和线粒体膜电位的变化，荧光酶标仪测定神经元胞浆内Caspase3/7的活性，并采用免疫细胞化学法观察细胞Bax蛋白表达情况.rn 结果：细胞经缺氧3h复氧12h后，凋亡率明显增加，细胞内钙增加，线粒体膜电位显著降低，胞浆内Caspase3/7活性增多，Bax蛋白大量表达(P<0.01).蒺藜皂苷能降低细胞内钙浓度，抑制缺氧-复氧损伤的皮层神经元线粒体膜电位的降低，减少Caspase3/7的活性，并可降低Bax蛋白的表达，从而抑制细胞凋亡的发生(P<0.01)。rn 结论：缺氧/复氧可以诱导皮层神经元的凋亡。蒺藜皂苷可降低缺氧/复氧诱导细胞凋亡的发生，其机制与降低细胞内钙维持线粒体膜电位的稳定，抑制Caspase酶活性，降低Bax蛋白表达有关。

摘要： 本文通过观察急性脑梗死(ACI)病例125例，做近远期跟踪，其中83例随访2年，着重探讨ACI初期CD11b表达水平对ACI不同治疗时期神经功能缺损程度评分(NDS)的影响及不同时间窗高压氧和蒺藜皂苷(GSTT)干预对ACI神经功能恢复的影响。

摘要： 本发明涉及植物提取技术领域，具体设计一种利用蒺藜全草提取蒺藜总皂苷的工艺。本发明为克服现有技术存在的原料资源有限和总皂苷的含量较低的问题，提供一种利用蒺藜全草提取蒺藜总皂苷的工艺，依次包括下述步骤：(一)取蒺藜全草，切成短段(0.5～1cm)，醇提、浓缩，浓缩液低温(4°C左右)静置12～48小时，滤过；(二)滤液加水至每1ml含原药材0.5g，以2～5BV/h流速通过已处理好的非极性大孔吸附树脂吸附2～3次，用水洗脱至流出液无色；(三)再用10～30%乙醇洗脱至无色，浓缩，干燥。通过现代研究，我们采用蒺藜全草为原料经提取纯化并将其最终制成制剂。与传统用药习惯相比，其药材来源更广，真正做到了变废为宝。

摘要： 本发明涉及植物提取技术领域，具体设计一种利用蒺藜全草提取蒺藜总皂苷的工艺。本发明为克服现有技术存在的原料资源有限和总皂苷的含量较低的问题，提供一种利用蒺藜全草提取蒺藜总皂苷的工艺，依次包括下述步骤：(一)取蒺藜全草，切成短段(0.5～1cm)，醇提、浓缩，浓缩液低温(4°C左右)静置12～48小时，滤过；(二)滤液加水至每1ml含原药材0.5g，以2～5BV/h流速通过已处理好的非极性大孔吸附树脂吸附2～3次，用水洗脱至流出液无色；(三)再用10～30％乙醇洗脱至无色，浓缩，干燥。通过现代研究，我们采用蒺藜全草为原料经提取纯化并将其最终制成制剂。与传统用药习惯相比，其药材来源更广，真正做到了变废为宝。

摘要： 本发明公开了从蒺藜中提取分离蒺藜总呋甾皂苷和蒺藜总螺甾皂苷的新方法。将蒺藜提取物经大孔吸附树脂吸附后用低浓度有机溶剂的水溶液洗脱获得蒺藜总呋甾皂苷，然后用高浓度有机溶剂的水溶液洗脱获得蒺藜总螺甾皂苷。

摘要： 本发明提供了一种刺蒺藜提取物的制备方法，包括如下步骤：原料经食醋水蒸煮后堆埋、乙酸乙酯提取、聚酰胺柱层析以及干硅胶柱层析，微波真空干燥，最终得到蒺藜皂苷含量大于95 wt.%的刺蒺藜提取物。

摘要： 本发明公开了蒺藜皂苷D在治疗银屑病中的应用，属于中医药技术领域。本发明经药理试验发现，蒺藜皂苷D可改善银屑病样小鼠皮损组织病理形态，降低其表皮厚度，减少角质形成细胞增殖，减少树突状细胞、B淋巴细胞、T淋巴细胞等免疫细胞的数量，改善银屑病样小鼠焦虑行为学，降低神经递质SP的分泌，具有改善银屑病样皮损的作用。本发明提供了蒺藜皂苷D单体新的医疗用途，开拓了蒺藜皂苷D新的应用领域。

摘要： 本发明涉及植物提取领域，具体涉及一种蒺藜皂苷的提取方法，包括以下步骤：S1.将蒺藜果实烘干粉碎；S2.按照固液比为1:8.5~9.5加入蒸馏水回流提取，提取时间为2.5~4h，提取次数为2~4次；S3.将步骤S2的溶液在4500~5000r/min的转速下离心10~20min，然后过滤，浓缩；S4.在步骤S3所得到的浓缩液中加入乙醇和正丁醇，所述乙醇和正丁醇的体积比为1:2~4；S5.对S4得到的混合物进行过滤，得到的滤液进行浓缩干燥。本发明在现有技术的基础上，对水提过程中的固液比、提取时间和提取的次数进一步优化，并且用正丁醇和乙醇的混合物替代单纯的乙醇沉淀蒺藜皂苷，获得了更高皂苷得率，蒺藜皂苷的得率达到2.29%。

摘要： 本发明属于功能性食品成分的制备技术领域，涉及一种蒺藜中降血糖成分皂苷的提取纯化及制备技术和蒺藜皂苷提取物与应用。包括如下步骤：步骤1：将蒺藜材料低温零度存储，取出后干燥，然后粉碎粉末状，再经过筛，制得蒺藜粉；步骤2：将蒺藜粉按料液比1：10‑30加入提取液，超声提取2‑4h；步骤3：离心，取上层清液，得到蒺藜粗提液；步骤4：将上述蒺藜粗提液浓缩，得到蒺藜粗提浓缩液；步骤5：将蒺藜粗提浓缩液进行柱层析，再进行浓缩操作和冷冻干燥处理，制得蒺藜降糖活性成分提取物。本发明制得的蒺藜皂苷具有良好的降血糖活性，可开发成新型降血糖药物或功能食品，使得蒺藜资源得到充分利用。

摘要： 本发明公开了一种炒蒺藜或蒺藜中蒺藜皂苷K含量的测定方法，包括供试品溶液制备、对照品溶液制备、检测和分析步骤，本发明首次利用超高效液相色谱仪和蒸发光散射检测(UPLC‑ELSD)检测炒蒺藜或蒺藜标准汤剂和配方颗粒中蒺藜皂苷K的含量。本发明的检测方法灵敏度高，重复性好，回收率高。本发明建立了以蒺藜皂苷K为检测指标的检测方法，对于炒蒺藜或蒺藜标准汤剂和配方颗粒的质量控制研究具有重要意义。

摘要： 本发明提供了一种刺蒺藜提取物的制备方法，包括如下步骤：原料经食醋水蒸煮后堆埋、乙酸乙酯提取、聚酰胺柱层析以及干硅胶柱层析，微波真空干燥，最终得到蒺藜皂苷含量大于95wt.%的刺蒺藜提取物。

摘要： 本发明公开了一种蒺藜皂苷D抗肺纤维化作用机制的研究方法，属于药理学机制研究领域。本发明基于UHPLC‑MS技术检测博莱霉素(BLM)致肺纤维化小鼠及TED干预后的血浆代谢物，通过代谢组学的处理方法共识别到29种生物标志物，经TED治疗后其中19种生物标志物均有回调趋势，对上述生物标志物进行通路富集分析并利用Cytoscape构建生物标志物‑靶标‑疾病网络图。本发明通过对生物标志物和疾病靶点的相关性进行分析，可更全面、可靠的从整体水平评价TED治疗肺纤维化作用机制，为中药治疗疾病作用机制的阐明提供新方法。