柑橘黄龙病

摘要： 【背景】柑橘黄龙病(Huanglongbing,HLB)是由候选韧皮部杆菌亚洲种(‘Candidatus Liberibacter asiaticus’,CLas)侵染引起的一种柑橘病害。对于该病害的防治主要采取综合措施,包括实施检疫、种植无病苗木、及时挖除病树和集中大面积联防联控柑橘木虱等。前3种方法都需要依靠准确的柑橘黄龙病诊断技术。【目的】利用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification, LAMP),结合膜吸附法DNA快速提取和Gelgreen荧光染料可视化,建立黄龙病田间核酸快速检测方法。【方法】以黄龙病菌β-操纵子与原噬菌体DNA聚合酶基因为模板设计LAMP特异性引物,包括外引物F3/B3、内引物FIP/BIP、环引物LoopF/LoopB和茎引物StemF/StemB。通过对环引物和茎引物设定不同的用量组合,对LAMP引物体系进行优化,确定合适的引物浓度。用优化后的LAMP引物体系对188份田间柑橘叶片进行检测,并构建受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析实时荧光LAMP(qLAMP)在CLas检测上的准确性。对qLAMP预混反应液进行两步的常温干燥,分别设定不同的存放条件,评估LAMP常温干燥试剂的稳定性。用本研究建立的CLas可视化LAMP快速检测方法,对田间71个柑橘叶片样品和35个柑橘果实样品进行检测,与实时荧光定量PCR(qPCR)比较两者的符合率。【结果】在LAMP体系中加入环引物、茎引物或增加其浓度都能促进反应速率的提升,并且同时加入终浓度均为1.6μmol·L-1的环引物和茎引物能进一步提高LAMP反应速率。LAMP预混液通过两步法干燥在不同温度存放1—4周均能保持反应活性基本不变,表明制备的两步法干燥LAMP试剂检测性能较好,在低温和常温环境下的稳定性尚可,仅35°C高温存放会略微增加LAMP试剂的反应时间。使用孔径0.1μm尼龙膜代替纤维素滤纸作为核酸吸附材料能提升CLas快速诊断技术的灵敏度。结合DNA快速提取和可视化LAMP建立的CLas快速核酸诊断方法最低能检测到浓度为102 copies/μL的重组质粒样品,总体准确率高。经配对卡方检验,该方法的诊断结果与qPCR无显著差异。可视化LAMP快速检测相较常规检测有着更低的成本和耗时,而且可视化LAMP快速检测无需离心机和PCR仪等昂贵的仪器,仅需一台65°C恒温设备即可。【结论】建立的CLas快速核酸检测方法成本低,30 min即可观察到检测结果,操作简便,准确性高,可替代qPCR在田间进行黄龙病的快速鉴定。

摘要： 【背景】在中国,柑橘黄龙病(citrus Huanglongbing,HLB)是由候选韧皮部杆菌亚洲种(‘Candidatus Liberibacter asiaticus’,CLas)所引起的一种毁灭性病害,严重威胁着柑橘产业的可持续发展。前期研究表明CLas全基因组上鉴定出3种单独类型的原噬菌体基因序列,而广东黄龙病菌主要以Type-2原噬菌体类型和Type-1+3混合原噬菌体类型为主。这两种CLas菌株在传病媒介——柑橘木虱(Diaphorina citri)体内的增殖及其对寄主植物的致病力差异依然不清楚。【目的】比较Type-2-CLas菌株和Type-1+3-CLas菌株在柑橘木虱体内的增殖能力和对砂糖橘(Citrus reticulata Blanco cv.Shatangju)的致病力差异。【方法】嫁接准备含有不同CLas菌株的砂糖橘,分别将50头柑橘木虱若虫和50头成虫放置到含有不同CLas菌株的砂糖橘嫩梢上刺吸获菌6、12、18 d,利用荧光定量PCR检测并统计柑橘木虱若虫期、成虫期对Type-2-CLas和Type-1+3-CLas的获菌率和获菌量差异。饲养分别携带Type-2-CLas和Type-1+3-CLas菌株的柑橘木虱种群,分别将携带Type-2-CLas和Type-1+3-CLas菌株的20头柑橘木虱成虫置于健康砂糖橘嫩梢上刺吸2周,移除木虱后统计柑橘木虱获菌率和获菌量,每月追踪砂糖橘症状变化和叶片病菌浓度,利用光学显微镜观察接种360 d时叶片韧皮部和薄壁细胞形态学变化情况。【结果】柑橘木虱以若虫形态对Type-2-CLas和Type-1+3-CLas菌株的获菌率和获菌量无显著差异,但柑橘木虱以成虫形态对Type-2-CLas的获菌率和获菌量显著高于Type-1+3-CLas菌株。在虫传后120 d时接种Type-2-CLas菌株的叶片附近新叶会呈现更严重的斑驳症状。Type-2-CLas菌株侵染砂糖橘一年后抽出的新叶转绿不正常,出现均匀黄化、小叶的明显症状,而Type-1+3-CLas菌株新叶症状则为典型斑驳和革质化。叶片解剖观察结果发现,在叶片病菌浓度相近的情况下,相比于接种了Type-1+3-CLas的叶片,接种了Type-2-CLas菌株的叶片韧皮部细胞发生更严重的细胞塌缩,在叶脉和叶肉薄壁细胞内造成较多的淀粉粒积累。【结论】Type-2-CLas比Type-1+3-CLas更容易在柑橘木虱成虫体内增殖,且达到较高的病菌浓度,间接证明了Type-2-CLas菌株具有高传染性。感染Type-2-CLas的新叶呈现均匀黄化、叶小的症状,而感染Type-1+3-CLas的新叶呈现较为斑驳和革质化的症状,Type-2-CLas比Type-1+3-CLas造成更严重的叶脉韧皮部塌缩和淀粉粒积累情况,说明Type-2-CLas比Type-1+3-CLas对柑橘具有更强的致病力。

摘要： 为促进湖南省柑橘产业的可持续发展,加强对柑橘黄龙病(Huanglongbing,HLB)的监测预警,根据黄龙病菌耐热性亚洲种“Candidatus Liberibacter asiaticus”(CLas)DNA不同保守区域设计了8组引物,分别采用常规PCR和qPCR进行检测,比较2种方法的灵敏度。结果表明:常规PCR供试的4组引物中,In1/In2引物未扩增出目的条带,其他3组引物的灵敏度由高到低排列依次为OI1/OI2>LB1/LB2=OL1/OL2,OI1/OI2这组引物对HLB菌的检测下限为98 pg/μL;qPCR供试的4组引物的灵敏度由高到低排列依次为LJ900f/LJ900r>Las-I-f/Las-I-r>HLBas/HLBr>Las-O-f/Las-O-r(根据可检测到最低浓度样本的Ct值排序),其中LJ900f/LJ900r这组引物对HLB菌的检测下限为9.8 pg/μL。另外,以湖南省郴州市汝城县农业局提供的11个柑橘HLB疑似样品为材料进行检测,引物LJ900r/LJ900f进行的qPCR检测,检出率为72.7%;引物OI1/OI2进行的常规PCR,检出率为45.5%;表明引物LJ900r/LJ900f结合qPCR方法对于HLB菌的检测效率更高。

摘要： 引导“退果还粮”,落实稳粮补贴,推广良种良法,桂林市采取一系列硬措施,为保障粮食安全打下坚实基础。目前,该市早稻生产已近尾声,已插早稻面积10.40万hm^(2),完成计划任务的101.86%,同比快660.67 hm^(2)。桂林市结合柑橘黄龙病综合防控,对基本农田或粮食功能区内的失管果园、“三低”(低产、低质、低效)果园积极引导“退果还粮”,让农田恢复种植水稻、玉米等粮食作物。目前,全市2022年“退果还粮”、撂荒地治理种植粮食面积达3533.33 hm^(2)。

摘要： 近期,全国农技中心组织科研、教学和推广单位专家,对2022年全国农作物重大病虫害发生趋势进行分析会商。综合分析病虫源基数、种植制度、作物布局和气候等因素,预计小麦、水稻、玉米、马铃薯等主要粮食作物重大病虫害呈重发态势,全国发生面积20.26亿亩次,比2021年和2016-2020年均值分别增加13.8%和10.1%,对70%以上的粮食作物产区构成威胁;预计柑橘黄龙病、梨火疫病、红火蚁、马铃薯甲虫、苹果蠹蛾等重大检疫病虫发生面积989万亩,比2021年和2016-2020年均值分别增加11.9%和8.7%,部分地区存在重发和扩散的风险,需加力加密监测,及时采取有效措施防控,防止蔓延危害,努力减轻产量损失。

摘要： 黄龙病是侵染柑橘的一种毁灭性病害,一旦暴发与蔓延,将会严重影响柑橘的产量与品质,甚至导致柑橘树大量枯死,给果农造成严重的经济损失。为确保柑橘产业持续健康发展,须重视黄龙病对柑橘产业造成的危害。基于此,本文以南宁市武鸣区的柑橘种植为例,对其黄龙病疫情监测进行了分析,并提出了黄龙病防控措施,以期为广大柑橘种植户防控黄龙病提供参考。

摘要： 采用五点取样法从柳州市柑橘产区正常管理的果园采集柑橘样品,通过提取DNA及常规PCR技术检测,分析柳州市柑橘黄龙病发生情况。结果表明,柳州市市郊及五县都有不同程度的柑橘黄龙病发生,采集的600份样品中24份检出阳性,阳性率为4.00%。其中,柳城县黄龙病阳性率8.89%,发生情况较为严重。

摘要： 为了探究柑橘黄龙病发生的特点和防控策略,以广西地区为例,分析广西地区柑橘种植优势,总结当地柑橘黄龙病的发生特点和规律,以及黄龙病的蔓延原因,发现黄龙病具有高发性、普遍性、黄化性等特点,并在主客观原因的多重作用下,柑橘黄龙病出现蔓延和扩散。因此,在今后工作中,种植户应该开展对柑橘木虱的(黄龙病传播媒介)监测、预报,提高专业化防治水平,将多种防控措施相结合,最大化地保障柑橘生产安全,提高柑橘种植的生态效益和经济效益。

摘要： 岩溶区黄龙病柑橘园土壤氮转化存在特殊性。土壤改良剂生物炭对岩溶区黄龙病柑橘园土壤N_(2)O排放的影响及其微生物调节途径目前尚不清楚。本文通过室内培育试验研究了生物炭添加对岩溶区黄龙病脐橙园土壤N_(2)O排放、土壤氮素净硝化率/矿化率、硝化和反硝化功能基因的影响及其相互关系。结果表明,添加生物炭改变了土壤氮素净硝化率/矿化率、反硝化相关功能基因nosZ和硝化相关功能基因AOA-amoA、AOB-amoA的丰度,添加量为2%时是多数指标增长的峰值,与对照差异显著。添加生物炭降低了岩溶区脐橙园土壤N2O的平均排放速率和累积排放量,但各处理间差异不显著。DCA排序显示生物炭添加不同处理N_(2)O的排放速率主要受NH_(4)^(+)-N含量、nirK丰度、nosZ丰度的负向影响,NO_(3)^(–)-N含量和AOA-amoA丰度的正向影响。若要进一步提升生物炭对该土壤的减排效果,应注意提升土壤NH_(4)^(+)-N水平和反硝化相关功能基因丰度,抑制土壤NO_(3)^(–)-N水平和硝化相关功能基因AOA-amoA的丰度。本研究结果可为岩溶区黄龙病柑橘园土壤N_(2)O减排及调节机制研究提供借鉴。

摘要： 柑橘木虱是传播毁灭性病害柑橘黄龙病的重要媒介。江西境内,柑橘品种多,栽培面积大,分布范围广,环境气候适宜,具备柑橘木虱发生与扩张的条件。为降低柑橘黄龙病对江西柑橘产业的影响,需要禁止柑橘木虱发生区域的寄主植物向未发生区域或新果园转移调运,也需要通过增强树势、黄板诱杀、施用生物和化学农药等手段降低柑橘木虱在柑橘园内的发生密度。然而,由于柑橘木虱传播途径多样,生活习性复杂,江西各区县缺乏统一有效的管理体系,致使柑橘木虱在江西各区县的发生扩张难以控制。根据柑橘木虱在江西橘园的发生现状,提出不同区域的管理与控制对策,对抑制柑橘木虱的发生危害和传播扩张提供参考。

摘要： 柑橘黄龙病(Citrus Huanglongbing,HLB)最早于1919年在广东的潮汕地区发生,随着全球柑橘业的发展,柑橘黄龙病也已经传播到亚、非、美等柑橘主产区,并成为危害全球柑橘产业发展最严重的病害国家和湖南省农委应进一步加大柑橘黄龙病防控经费的支持力度，加强疫区苗木的调运检疫，阻止柑橘黄龙病向临近省市蔓延。同时，在疫区建立柑橘黄龙病快速检测实验室，加强与科研单位的合作与创新，进一步全面深入开展柑橘黄龙病的综合防控，确保柑橘黄龙病防控及时、措施得力，从而保障湖南省柑橘产业的健康有序发展。

摘要： 丽水市莲都区是"全国椪柑之乡"、"中国水果百强县".一直以来,柑橘是莲都区传统水果,也是农业主导产业之一,现有种植总面积6万亩,总产量为8万吨,是农民主要收入来源之一.2001年莲都区发现柑橘黄龙病疫情,2004年发生范围涉及16个乡镇(街道),发生面积5.89万亩,病株数21.5万株,果园病株率5.21％,曾经的"致富树、摇钱树"变成了"伤心树".近年来,莲都区坚持"挖治管并重,综合防控"策略,在区委、区政府和上级有关部门的统一领导下,全力以赴持续开展防控阻截,有效控制了疫情扩散蔓延.2014年普查全区发病面积1.01万亩,病株数0.46万株,病株率0.13％,分别比2004年下降了81.6％、97.8％和97.5％,防控工作取得了明显成效.坚持挖治管并重原则，在坚决彻底有效挖除柑橘黄龙病树的同时，注重柑橘黄龙病防控和产业平稳发展的有机结合，积极探索柑橘产业在黄龙病发生区的健康发展，在每个疫情发生乡镇建立柑橘黄龙病综合防控示范点，以点带面，示范引路，大力推进柑橘木虱统防统治和无病果园保护建设工作。通过向橘农发送柑橘木虱的发生情报，发放柑橘木虱防治药剂、机动喷雾器，指导农户在最佳时间对柑橘木虱进行统一防治。

摘要： 本文通过简单介绍柑橘黄龙病的基本情况，分析了其发生防控形势，指出目前进展较大的是对变异度大的前噬菌体区域的研究，近2年在带菌长春花中和罹病甜橙中分别观察到亚洲种前噬菌体颗粒。本报告还将对木虱取食传病的行为习性，应对声、光、色、热的反应，天敌、生防菌和化防药剂的筛选等取得的进展，以及防控措施的改进建议等，做阐述。

摘要： 本文建立了荧光定量PCR TaqMan水解探针检测柑橘黄龙病菌体系,检测出HL-Baspr和CQULAP两组TaqMan水解探针引物的灵敏度,并利用这两组TaqMan水解探针引物对60个样品进行了柑橘黄龙病菌检测.结果发现,HLBaspr探针的灵敏度是1.7×10-7g/μl,CQULAP探针的灵敏度是9.7×10-6g/μl;在60个样品的柑橘黄龙病菌的检测中,HLBaspr探针检测出32个阳性样品,CQULAP探针检测出18个阳性样品,由此说明,HLBaspr探针比CQULAP探针灵敏度更高,更适合在实际检测工作中使用.

摘要： 为提高柑橘黄龙病PCR检测方法的灵敏度,便于柑橘黄龙病的早期检测,对影响PCR检测的引物设计的特异性、退火温度、不同植物材料DNA的提取等因素进行了研究.经多次平行PCR比较实验,筛选出对亚洲韧皮杆菌有稳定的PCR扩增效率的563bp OL1/OL2引物.同时,研究结果还表明,以柑橘枝梢韧皮部为材料提取DNA的PCR检出率比叶片高.

摘要： 近几年,通过对柑橘黄龙病综合防控技术的应用,结果表明,采取及时挖除柑橘黄龙病的田间病株、专治柑橘木虱、加强柑橘肥水管理等系列综合技术措施,可有效地遏制柑橘黄龙病的田间扩散和蔓延,同时能延长柑橘生产期,达到柑橘可持续发展的目的.

摘要： 柑橘黄龙病[Citrus huang long bing (HLB)]是世界性的柑橘病害,是柑橘生产中的癌症.近年来在我国福建省、广东省、广西自治区等柑橘产区黄龙病以10％～20％的速度扩散蔓延,造成很大的经济损失.目前世界各地最有效的防控措施就是大量地砍伐病树,其次就是用化学药剂防治柑橘木虱[(Diaphorina citri (Kuwayama)].“以螨治螨”生防措施减缓柑橘黄龙病蔓延的速度。胡瓜钝绥螨捕食柑橘木虱是减少传播媒介的直接因素。“以螨治螨”生防园减少了化学农药的使用次数达60%—70%，改善橘园的生态环境、使得橘园自然天敌生存条件得到明显改善，因此，柑橘木虱在自然天敌控制下不发生或少发生，从而减缓柑橘黄龙病蔓延的速度。柑橘木虱的自然天敌很多，保护与助迁自然天敌，能有效地控制柑橘木虱的种群增长，从而减缓柑橘黄龙病蔓延的速度。

摘要： 柑橘黄龙病是柑橘产业的一种毁灭性病害，由韧皮部限制性细菌所引起，目前我国只发现亚洲种韧皮杆菌。本研究改变传统的纯培养的研究思路，以催病柑橘寄主植物为材料，凭借高效灵敏的检测方法监测靶标细菌的种群数量动态变化，优化体系培养基配方及最适培养条件，以筛选鉴定对病原菌具有促生作用的伴生微生物为突破口，旨在建立一种模拟原生态的病原细菌和伴生菌的共培养体系，实现病原菌的增殖培养。柑橘黄龙病菌共培养体系的建成不但可以推动黄龙病病原学、病原生物学等基础研究，还有助于黄龙病杀菌剂的研制与开发、病害早期诊断和治疗性抗体研制等应用基础研究，为全世界柑橘黄龙病的病害防控开辟全新的途径。

摘要： 柑橘黄龙病(Huanglongbing,HLB)是柑橘产业的一种毁灭性病害,由韧皮部限制性细菌(Candidatus Liberibacter)所引起,目前我国只发现亚洲种韧皮杆菌.黄龙病病原菌培养是攻克黄龙病的关键所在,迄今为止国内外在柑橘黄龙病病原菌人工培养的研究中投入了大量的人力和物力,但仍然无法获得稳定的纯培养,极大限制了对黄龙病的病原学及其致病机理的研究以及病害防治.本研究改变传统的纯培养的研究思路，以罹病柑橘寄主植物为材料，凭借高效灵敏的检测方法监测靶标细菌的种群数量动态变化，优化体系培养基配方及最适培养条件，以筛选鉴定对病原菌具有促生作用的伴生微生物为突破口，旨在建立一种模拟原生态的病原细菌和伴生菌的共培养体系，实现病原菌的增殖培养。

摘要： 为下一步进行砂糖橘黄龙病亚洲种综合防控及遗传多样性研究奠定基础,调查了不同地理来源砂糖橘黄龙病发生情况,利用黄龙病亚洲种的特异引物对对采自广西、广东两省区的234个砂糖橘叶片样品,16S rDNA片段进行PCR扩增.结果显示:来自广西南宁市、桂林市、柳州市、百色市、崇左市、梧州市、来宾市、防城港市、东兴市及广东杨村大部分砂糖橘均扩增出1160bp的条带,部分样品还扩增出1500bp的条带,推测可能是黄龙病亚洲种的多样性引起.检出率分别为66.9%, 69.4%,70.0%, 69.6%,91.7%,73%,88.9%,80%,100%,95%,表明这些地区的砂糖橘均感染了黄龙病,且为害已经十分普遍,生产上应进一步引起重视。

摘要： 本发明公开了一个柑橘黄龙病菌效应子作为筛选抗柑橘黄龙病菌药物靶点的应用，本发明发现了黄龙病菌鞭毛基体P‑ring蛋白作为效应子能够引起胼胝质沉积量显著，其抑制剂可用于防治柑橘黄龙病，在柑橘黄龙病防治领域具有很好的应用前景。同时，本发明利用酿酒酵母基因组小、培养简单、生命周期短、遗传操作稳定的特点，作为研究难培养菌CLas的效应子的模式生物。在酵母中过表达柑橘黄龙病菌效应子菌鞭毛基体P‑ring蛋白，扰乱了酿酒酵母的内在生理机能，导致酿酒酵母表型发生变化，抑制酵母细胞的增殖。同时在农杆菌介导下在本氏烟叶片中的瞬时表达，验证鉴定其可以诱导烟草叶片局部过敏性坏死及胼胝质沉积等植物防御反应。

摘要： 本发明涉及一种防止柑橘树感染柑橘黄龙病的方法，包括如下步骤：步骤一，将每亩土地表面均匀铺撒由50‑80kg的高岭土、10‑20kg的草炭土、5‑15kg的杀虫剂、1‑10kg的引诱剂、10‑15kg的杀菌剂、2‑3kg的生长调节物质组成的混合物；然后深翻地20‑30cm，将翻上来的土敲碎，再进行灌水，然后盖上透明薄膜静置10‑15天；静置结束后将薄膜揭掉，耕翻、晾晒，即可种植；步骤二，将柑橘树苗定植到处理后的土壤中；步骤三，定期检测和评估柑橘树上柑橘黄龙病的发生情况，如发现黄龙病树，则立即铲除已感染柑橘黄龙病的柑橘树，并且定期对柑橘树使用驱虫剂和灭虫剂。

摘要： 本发明涉及柑橘病害检测，具体涉及一种柑橘叶片DNA快速提取方法及其在柑橘黄龙病高通量分子检测中的应用。DNA快速提取方法包括：将来自待测柑橘植株的柑橘叶片的叶柄和叶中脉切碎，每30mg样品加入40μL裂解液，涡旋震荡10～15s后，95°C水浴15s，然后加入4倍裂解液体积的0.1mol/L，pH＝8的Tris‑HCL，涡旋震荡10～15s后，离心取上清，即得DNA溶液；所述裂解液的配方为：0.5mol/L NaOH，1％TritonX‑100。该方法与qPCR的结合可实现对柑橘黄龙病的高通量快速分子检测，为黄龙病的大规模精确化诊断提供了有利工具。

摘要： 本发明涉及农业种植技术领域，尤其涉及一种用于柑橘黄龙病的复合微生物菌剂及其制备方法和用其制备的柑橘黄龙病专用生物制剂。本发明通过苏云金芽孢杆菌、球孢白僵菌、哈茨木霉菌控制地上柑橘黄龙病原及杀灭传播源木虱及其虫卵从而达到有效控制黄龙病的发生，地下部分四种微生物菌有效的控制病原微生物的侵害，有效控制线虫对病原菌的传播，同时调节土壤结构，分解有机质，提高土壤肥力；通过柑橘专性AM真菌促进柑橘根部的生长，使柑橘长出簇生新根，扩大新根数量，增强树势，提高树的免疫抗病能力，形成固氮系统，将控制病原和改善柑橘生长的生态环境结合在一起，达到预防和治疗柑橘黄龙病的效果。

摘要： 本发明属于分子生物学领域，公开了柑橘黄龙病菌PAP蛋白抗体在制备柑橘黄龙病早期感染检测试剂盒中的应用。利用常规方式制备的PAP蛋白多克隆抗体，经酶联免疫吸附测定（ELISA）方法，测定其工作效价在1：500~1：1000之间。利用PAP多克隆抗体进行ELISA检测，最低能检测到PAP的蛋白含量约为0.005μg。实际应用中，利用制备的PAP多克隆抗体能用于HLB早期感染样品的ELISA检测，且最低能检测到7个病原菌。

摘要： 本发明公开了一个柑橘黄龙病菌效应子作为筛选抗柑橘黄龙病菌药物靶点的应用，本发明发现了黄龙病菌鞭毛基体P‑ring蛋白作为效应子能够引起胼胝质沉积量显著，其抑制剂可用于防治柑橘黄龙病，在柑橘黄龙病防治领域具有很好的应用前景。同时，本发明利用酿酒酵母基因组小、培养简单、生命周期短、遗传操作稳定的特点，作为研究难培养菌CLas的效应子的模式生物。在酵母中过表达柑橘黄龙病菌效应子菌鞭毛基体P‑ring蛋白，扰乱了酿酒酵母的内在生理机能，导致酿酒酵母表型发生变化，抑制酵母细胞的增殖。同时在农杆菌介导下在本氏烟叶片中的瞬时表达，验证鉴定其可以诱导烟草叶片局部过敏性坏死及胼胝质沉积等植物防御反应。

摘要： 本发明公开了一组快速同步鉴定柑橘黄龙病、溃疡病、衰退病、碎叶病和裂皮病的分子标记引物组合，以及鉴定方法。本发明建立柑橘叶片组织RNA和DNA同步快速提取与一步法RT‑PCR反应体系，开发了一组可以同步鉴定柑橘黄龙病、溃疡病、衰退病、碎叶病和裂皮病的多重特异分子标记引物组合，适用于荧光毛细管电泳等高通量分型检测平台，灵敏度高，可用于柑橘病害的快速鉴定。本发明基于开发的分子标记引物组合经过反复试验及优化，可以同步检测上述5种柑橘常见病害，对检测柑橘大规模样板病害的有重要的技术指导意义，具有操作简单、高效快速等优点。

摘要： 本发明提供了一种柑橘栽培中柑橘黄龙病的抑制方法，包括以下步骤：A、对柑橘根部生长的土壤灌入高锰酸钾溶液；B、4～10天后，对柑橘根部土壤灌入复合微生物溶液和黄芪提取液；C、4～10天后，再对柑橘根部土壤灌入复合微生物溶液和黄芪提取液，并使用复合微生物溶液对柑橘进行全树喷洒；所述步骤C的处理次数为1～3次；D、4～10天后，再使用复合微生物溶液对柑橘进行全树喷洒；所述步骤D的处理次数为1～8次。本发明结合了土壤杀菌、微生物溶液和中药溶液灌根以及微生物溶液页面喷洒的多重优势，因此效果稳定；该发明的方案简单，成本低廉，便于大面积推广，广泛实施。

摘要： 本实用新型公开了一种控制柑橘新生苗感染柑橘黄龙病的种植装置，属于柑橘种植技术领域。一种控制柑橘新生苗感染柑橘黄龙病的种植装置，包括培养框，培养框上方设有固定框，固定框顶面右部固设有安装架，安装架顶面中部安装有电机，电机输出轴上套接有转框A及转框B，转框A及转框B下方设有两个连通管，连通管两端及中部均设有喷杆，喷杆内方设有定位框，定位框内设有定位杆。本实用新型设计精巧合理，通过三个喷杆的周期往复运动可以对培养框内的苗木进行全方位的药液喷洒，如此不仅可以避免人工喷洒药液效率低，同时还可以提高药液的喷洒均匀度，增加喷洒效果，有效解决了柑橘木虱的危害。

摘要： 本实用新型涉及一种可精准防控柑橘黄龙病及柑橘木虱的树干注射施药装置，包括具有柱形注射腔的注射器，注射腔周部经第一单向气阀连接有药液箱，注射腔内部设有活塞，活塞上方为气腔，活塞下方为液腔，液腔的腔底自上往下依次设有第二单向气阀、过滤器、药剂针管，活塞经压缩弹簧与液腔的腔底相连接，气腔上设有放气螺栓，并连接脚踏式的打气筒；药液箱的顶部具有可启闭的加药口。结构简单。