摘要:目的:将全反式维甲酸(ATRA)与替莫唑胺联(TMZ)合应用,观察ATRA能否增强TMZ对人脑胶质瘤细胞株U251的化疗作用,从而减轻U251细胞对替莫唑胺(TMZ)的耐药性,并探讨其可能的机制.rn 方法:用ATRA和TMZ单独及联合作用于U251细胞株,观察各组不同时间细胞的形态学变化,Western blot测细胞凋亡相关蛋白如B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2/bax)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(caspase)-3、caspase-8、caspase-9的表达情况,免疫荧光检测各组CD133细胞阳性率等情况.rn 结果:对照组U251细胞多数呈梭形,突触较多,折光度好,胞浆丰富,边缘清晰,与培养板黏合紧密.ATRA、TMZ作用12、24、48h后,见多数细胞变圆、缩小,折光度降低,部分细胞漂浮,随着时间延长,上述变化越来越明显.而联合用药组作用96后,可见大部分细胞变圆、缩小、脱壁漂浮,边缘毛糙,折光度降低,可见胞膜包裹的细胞碎片.与对照组相比,两用药组均出现细胞密度减小及细胞凋亡的形态学变化,呈剂量-时间依赖性,上述变化在联合用药组中最明显.各用药组中BAX、caspase-3、caspase-8、caspase-9均有不同程度表达增高,而在联合用药组中表达最高;而Bcl-2表达相反,在各用药组中表达下调,联合用药组最低;各用药组与对照组比较、联合用药组与两药单用组差异均有统计学意义(P<0.01),ATRA组与TMZ组两药单用组之间Bcl-2比较无统计学意义(P>0.05),而bax、caspase-3、caspase-8、caspase-9在ATRA组表达较TMZ组高,差异有统计学意义(P<0.05).对照组CD133细胞阳性率为(7.05±0.27)%;ATRA组阳性率明显下降,为(0.66±0.30)%;在TMZ组中,其阳性率最高,达(36.32±3.22)%;而在联合用药组中,其阳性率回落,为(4.70±0.52)%.各组间比较差异均有统计学意义(P<0.01).rn 结论:ATRA和TMZ两药均可诱导U251细胞凋亡,减少其数量;两药联合应用时ATRA可增强TMZ对U251细胞的促凋亡作用,说明ATRA联合TMZ能对U251细胞起化疗增敏作用,减轻其耐药性;其机制可能与ATRA减少CD133阳性细胞率有关.