AKT1

摘要： 目的采用“多成分药学团-多靶点-多通路”网络药理学方法分析补中益气方调控头颈鳞癌的主要活性成分。方法在中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)和BATMAN数据库(http://bionet.ncpsb.org/batman-tcm/)中,以“毒理药物动力学”(ADME)的口服生物利用度(OB),药物相似性(DL)以及药物半衰期(HL)为参数,筛选补中益气方组分黄芪、白术、陈皮、升麻、柴胡、人参、甘草、当归的药效团活性成分。采用PharmMapper服务器预测药效团模型的高度差异化靶蛋白和靶蛋白交叉验证的方法构建化合物-靶点网、蛋白互作(PPI)网。最后使用cytoscape插件ClueGO+CluePedia进行基因本体(GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)的生物多通路富集分析。结果补中益气方中有184种活性成分,其中18个靶蛋白的显著富集47条,GO和KEGG富集功能的通路有73条。排名前五位的关键靶点蛋白包括AKT1、TNF、IL1B、PTGS2、ESR1。主要通路涉及:PI3K-AKT、Toll-NF-κB、T细胞受体信号通路、细胞凋亡与增殖通路、TNF信号通路。PPI蛋白互作主要涉及:BAX,APAF1和FAS等细胞凋亡相关基因。结论本研究结果初步验证了补中益气方药理作用的分子机制,进一步深入揭示补中益气方的有效活性成分有可能通过调控PI3K-AKt信号通路抑制凋亡途径从而抑制头皮鳞癌细胞增殖。为深入研究补中益气方的活性成分和作用分子机制研究提供前沿新思路。

摘要： 目的检测长链非编码RNA DBH-AS1在胰腺癌中的表达情况,探讨DBH-AS1在胰腺癌进展中潜在的分子作用。方法选择2015年7月至2017年12月海军军医大学第一附属医院普外三科收治的原发胰腺癌患者45例,收集患者经手术切除的胰腺癌组织和对应癌旁组织。利用在线数据库GEPIA分析DBH-AS1在胰腺癌肿瘤组织的表达情况。采用实时荧光定量PCR检测DBH-AS1在胰腺癌肿瘤组织及胰腺癌细胞系中的表达水平。分别通过CCK-8实验、克隆形成实验和transwell实验,检测DBH-AS1对胰腺癌细胞增殖、克隆形成和迁移侵袭能力的影响。采用Western印迹法测定蛋白质水平。结果GEPIA数据库和定量PCR结果显示,与癌旁正常胰腺组织相比,DBH-AS1在胰腺癌组织中表达水平下调,差异有统计学意义(P<0.05)。在胰腺癌肿瘤组织中DBH-AS1的低表达与肿瘤分化差(P=0.038)、TNM分期晚期(P=0.029)、淋巴结转移(P=0.006)以及预后不良(短无瘤生存时间和总体生存时间,P<0.05)有关。DBH-AS1基因敲低可促进胰腺癌细胞的增殖、克隆形成,增强其迁移和侵袭能力,与对照组差异均有统计学意义(P<0.05)。机制研究表明,在胰腺癌中,DBH-AS1通过下调AKT1表达水平,抑制mTOR信号通路。结论DBH-AS1能通过降低AKT1的表达抑制胰腺癌的进展。

摘要： 目的 基于网络药理学方法分析丁香酚治疗心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的作用靶点及相关通路。方法 将丁香酚“Eugenol”输入TCMSP数据库检索丁香酚作用靶点,将“Myocardial Ischemia Reperfusion Injury”输入GeneCards、OMIM数据库检索MIRI相关靶点;将两者交集后获得丁香酚-MIRI共同靶点,导入String数据库建立蛋白质互作网络(PPI)图,导入Cytoscape3.7.2软件进行聚类分析并寻找核心靶点;将丁香酚-MIRI共同靶点导入Matescape基因富集分析在线工具数据平台,进行GO功能和KEGG通路富集分析。结果 共得到不重复的丁香酚作用靶点100个、MIRI相关靶点1 085个、丁香酚-MIRI共同靶点33个。丁香酚-MIRI共同靶点的PPI图显示每个活性成分平均节点度7.09,PPI富集P值为1×10^(-16)。基于聚类分析的核心靶点筛选结果显示共得到2个基因簇和2个核心基因,核心基因分别为蛋白激酶B-α(Akt1)、血管内皮生长因子A(VEGFA)。丁香酚-MIRI共同靶点的GO生物功能富集分析结果显示,其主要涉及的生物学过程包括蛋白质磷酸化的正向调节、离子平衡、细胞迁移等,主要涉及的细胞成分包括突触后膜、膜筏、微膜区等,主要涉及的分子功能包括蛋白激酶活性、血红素结合、转录因子等。丁香酚-MIRI共同靶点的KEGG富集通路共有177条,主要包括晚期糖基化终末产物(AGE)—糖基化终末产物受体(RAGE)信号通路、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路、Toll样受体(TLR)信号通路等。结论 丁香酚治疗MIRI的核心靶点主要有Akt1、VEGFA,主要涉及AGE-RAGE、MAPK、TLR等相关通路。

摘要： Objective:The study aims to investigate the molecular mechanism and druggability of Atractylide I(AT-I)for the treatment of diabetic nephropathy(DN)using network pharmacology,molecular docking,and pharmacokinetic analysis.Method:Multiple databases and service platforms were used to predict and screen the potential genes of AT-I for the prevention and treatment of DN.Further,gene ontology and kyoto encyclopedia of genes and genomes enrichment analyses were performed on the genes to evaluate the mechanism of AT-I against DN.The protein interaction network was constructed by the STRING database,and the key gene targets of AT-I against DN were screened by Cytoscape software.The binding activity of AT-I with the essential target proteins was analyzed by molecular docking technique.Finally,the pharmacokinetic parameters of AT-I were evaluated to determine its druggability.Result:AT-I has 45 drug action targets intersecting with DN targets,which may be the potential targets of AT-I for the prevention and treatment of DN.The enrichment analysis indicated that gene expression regulation,insulin resistance,hypoxia inducible factor-1 signaling pathway,tumor necrosis factor signaling pathway,and PI3K-Akt signaling pathway determine the biological mechanism of AT-I in the prevention and treatment of DN.Further,network pharmacology and molecular docking results indicated that key genes such as AKT1,MAPK8,EGFR,MAPK1,MMP9,and MTOR bind well with AT-I,while AKT1 is probably the primary target gene of AT-I against DN.Pharmacokinetic analysis showed that AT-I conforms to Lipinski’s rule of five drug-like properties,has good gastrointestinal absorption,can pass the blood-brain barrier,and has superior biological properties.Conclusion:AT-I has desirable druggability and multi-target,multi-pathway,and multi-mechanism activity against DN.This study provides an important basis for future research on the activity of AT-I against DN.

摘要： Glioma is a common primary intracranial tumor with high mortality and postoperative recurrence.Developing efficient therapies with lower toxicity is urgently needed.Sophora flavescens(SF)is a common Chinese medicine used to treat eczema,wet ulcers and itchy skin.Modern pharmacological studies have showed that SF has anti-glioma effects,but the mechanism of action remains unclear.This study aims to reveal the pharmacological mechanism of SF in treating glioma.The active components and related targets of SF were obtained from TCMSP.Genecard and Online Mendelian Inheritance in Man(OMIM)databases were used to explore the therapeutic targets for glioma.By making Venn diagram,we obtained 132 common targets of compounds and diseases.STRING databases and Cytoscape were used to construct diagrams of Protein-Protein Interaction(PPI)networks.Through the construction of PPI network,potential targets with degree value greater than the median were taken as core targets for further analysis.A total of 66 core targets were screened out.The degree values of TP53,HSP90AA1,MAPK1,and AKT1 were higher,indicating that these genes played important roles in this network.Gene Ontology(GO)and Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)pathway enrichment analyses were used to further discover the mechanism of active components in SF.Through enrichment analysis,it was found that the core targets were mainly enriched in PI3K/AKT signaling pathway,cell senescence related signaling pathway and IL-17 signaling pathway.In order to further explore the binding between active components and selected target,molecular docking was carried out.Finally,SwissADME was used to determine whether the compound could cross the blood-brain barrier.Based on network pharmacology,we speculated that matrine and formononetin in SF might inhibit PI3K/AKT signaling pathway and cellular senescence related signaling pathway by targeting AKT1,TP53,MAPK1 and other key targets.In summary,this study preliminarily explored the target and mode of action of SF in the treatment of glioma,laying the foundation for further research on its mechanism.

摘要： 目的探讨激酶纤溶酶原激活剂(PLAU)和蛋白激酶B1(AKT1)在口腔鳞癌(OSCC)及正常组织中的表达、预后和两分子在OSCC组织中的相关性。方法采用免疫组化法检测70例OSCC及50例正常组织中PLAU和AKT1的表达水平,分析PLAU和AKT1表达与临床病理特征、预后和两分子在OSCC组织中的相关性,并使用生物信息学数据库进一步验证实验结果。结果PLAU和AKT1在OSCC组织中的表达高于正常组织(P<0.05);Kaplan-Meier分析显示,PLAU和AKT1低表达患者的生存时间长于高表达患者(P<0.05);Spearman秩和相关检验显示,在OSCC组织中,PLAU和AKT1表达有着较强的相关性(r=0.357,P<0.05);GEPIA生物信息学数据库分析结果与实验结果一致。结论PLAU和AKT1在OSCC组织中高表达,且与患者不良预后相关,在OSCC组织中PLAU和AKT1存在相关性。

摘要： 目的 通过网络药理学的方法,筛选黄芩Scutellariae Radix的主要活性成分,构建药物-成分-疾病-靶点网络,探讨其治疗鼻咽癌分子机制.方法 采用TCMSP、String及Genecard等数据库,获取黄芩化学成分及其相关靶点、鼻咽癌疾病的靶点,并制作蛋白互作网络.通过Cytoscape 3.7.2绘制药物-成分-疾病-靶点网络.基于生物信息学开源软件Bioconductor以及R统计程序设计语言对黄芩作用的生物学过程以及KEGG进行富集分析.结果 黄芩的36个有效成分通过调控48个靶点和99条通路对鼻咽癌进行治疗,4个关键的化合物为汉黄芩素、黄芩素、刺槐素及β-谷甾醇,可通过AKT1、JUN、CASP3、VEGFA等关键靶蛋白介导AGE-RAGE、乙型肝炎、白细胞介素17等信号通路发挥抗鼻咽癌作用.结论 黄芩可以通过多靶点、多途径参与鼻咽癌的治疗.

摘要： 目的 探究长链非编码RNA LINC00665通过靶向微小RNA(microRNA,miR)-138/AKT1促进Hela细胞增殖和抑制凋亡的机制.方法 分析TCGA数据库中宫颈癌患者miR-138水平与生存之间的关系.通过双荧光素酶报告验证LINC00665靶向miR-138和miR-138靶向AKT1.将宫颈癌细胞系Hela分为4组:对照组、mimic组、mimic+LINC00665组和LINC00665组,通过质粒转染技术过表达miR-138和/或LINC00665.分别通过qPCR和Western blot检测RNA和蛋白的水平.分别通过CCK-8法和流式细胞术检测各组的细胞活力和凋亡率.通过荷瘤裸鼠实验在体内验证miR-138和LINC00665对肿瘤生长的影响.结果 在TCGA数据库中,miR-138高表达的宫颈癌患者的生存率显高于miR-138低表达患者(P<0.05).LINC00665直接靶向miR-138,miR-138直接靶向AKT1.Mimic组的miR-138水平显著高于对照组,LINC00665、AKT1 mRNA和蛋白水平显著低于对照组(P<0.05).LINC00665组miR-138水平显著低于对照组,LINC00665、AKT1 mRNA和蛋白水平显著高于对照组(P<0.05).mimic+LINC00665组的miR-138水平显著低于mimic组,LINC00665、AKT1 mRNA和蛋白水平显著高于mimic组(P<0.05).mimic组的细胞活力显著低于对照组,细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05),LINC00665组的细胞活力显著高于对照组,细胞凋亡率显著低于对照组(P<0.05).mimic+LINC00665组的细胞活力显著高于mimic组,细胞凋亡率显著低于mimic组(P<0.05).miR-138组荷瘤裸鼠的肿瘤体积和质量均显著低于对照组(P<0.05),miR-138+LINC00665组肿瘤体积和质量显著高于miR-138组(P<0.05).结论 miR-138靶向抑制AKT1的表达,LINC00665直接靶向miR-138,并且可通过靶向miR-138促进AKT1的表达.LINC00665通过靶向调控miR-138/AKT1促进Hela细胞的增殖并抑制凋亡.

摘要： Circadian rhythm is involved in the development and diseases of many tissues.However,as an essential environmental regulating factor,its effect on amelogenesis has not been fully elucidated.The present study aims to investigate the correlation between circadian rhythm and ameloblast differentiation and to explore the mechanism by which circadian genes regulate ameloblast differentiation.Circadian disruption models were constructed in mice for in vivo experiments.An ameloblast-lineage cell(ALC)line was used for in vitro studies.As essential molecules of the circadian system,Bmal1 and Per2 exhibited circadian expression in ALCs.Circadian disruption mice showed reduced amelogenin(AMELX)expression and enamel matrix secretion and downregulated expression of BMAL1,PER2,PPARγ,phosphorylated AKT1 andβ-catenin,cytokeratin-14 and F-actin in ameloblasts.According to previous findings and our study,BMAL1 positively regulated PER2.Therefore,the present study focused on PER2-mediated ameloblast differentiation and enamel formation.Per2 knockdown decreased the expression of AMELX,PPARγ,phosphorylated AKT1 andβ-catenin,promoted nuclearβ-catenin accumulation,inhibited mineralization and altered the subcellular localization of E-cadherin in ALCs.Overexpression of PPARγpartially reversed the above results in Per2-knockdown ALCs.Furthermore,in in vivo experiments,the length of incisor eruption was significantly decreased in the circadian disturbance group compared to that in the control group,which was rescued by using a PPARγagonist in circadian disturbance mice.In conclusion,through regulation of the PPARγ/AKT1/β-catenin signalling axis,PER2 played roles in amelogenin expression,cell junctions and arrangement,enamel matrix secretion and mineralization during ameloblast differentiation,which exert effects on enamel formation.

摘要： 目的 探究α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑-丙酸(α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole-propionic acid,AMPA)受体内化抑制剂GluA2-3Y对慢性脑低灌注大鼠认知功能及海马突触后蛋白表达的影响.方法 48只成年雄性SD大鼠按照随机数字表法分为Sham组、2VO组、高剂量GluA2-3Y组和低剂量GluA2-3Y组,每组12只.采用双侧颈总动脉永久性结扎法(two vessel occlu-sion,2VO)构建慢性脑低灌注模型,其中Sham组行假手术.高剂量GluA2-3Y组和低剂量GluA2-3Y组分别腹腔注射剂量为3 μmol/kg和0.03μmol/kg的GluA2-3Y,1次/d,共2周,2VO组和Sham组大鼠腹腔注射对照肽.采用Morris水迷宫和新物体识别实验评测大鼠的学习记忆能力,免疫印迹法评测大鼠海马 Akt1、GSK3β(glycogen synthase kinase-3β)、p-GSK3β、GluA2和 PSD-95(postsynaptic density-95)的表达,免疫荧光法评测大鼠海马GluA2和PSD-95的表达.采用SPSS 23.0进行数据分析,组间比较采用单因素方差分析,Morris水迷宫结果采用重复测量方差分析,两两比较采用独立样本t检验.结果 (1)重复测量方差分析结果显示,在Morris水迷宫实验中,各组大鼠逃避潜伏期的分组与时间的交互作用不显著(F=0.79,P＞0.05),组别主效应与时间主效应均显著(F=24.44,40.42,均P＜0.05).在第5天的定位航行检测中,2VO组大鼠的逃避潜伏期较Sham组长(t=5.87,P＜0.05),低剂量GluA2-3Y组和高剂量GluA2-3Y组大鼠的逃避潜伏期均明显短于2VO组(t=2.20,3.41,均P＜0.05),而高剂量GluA2-3Y组与低剂量GluA2-3Y组的逃避潜伏期差异无统计学意义(t=1.37,P＞0.05).2VO组的目标象限停留时间和分辨系数[(14.57±1.40)s,(0.15±0.10)]均明显低于Sham组[(23.71±2.57)s,(0.40±0.06)](t=3.23,2.24,均 P＜0.05),而高剂量 GluA2-3Y 组[(20.19±1.53)s]和低剂量GluA2-3Y组[(20.31±2.06)s]的目标象限停留时间均较2VO组长(t=2.71,2.35,均P＜0.05).高剂量GluA2-3Y组(0.47±0.10)和低剂量GluA2-3Y组(0.59±0.06)的新物体辨别系数均高于2VO组(t=2.21,3.94,均P＜0.05).(2)免疫印迹实验中,2VO组大鼠海马组织PSD-95和GluA2表达较 Sham 组明显减少(t=2.31,2.20,均 P＜0.05),高剂量 GluA2-3Y 组 PSD-95表达(1.026±0.056)较2VO组[(0.760±0.061)]显著增加(t=2.49,P＜0.01),而低剂量 GluA2-3Y 组 PSD-95表达与2VO组比较差异无统计学意义(t=0.96,P＞0.05).低剂量GluA2-3Y组的GluA2表达高于2VO组[(1.130±0.087),(0.766±0.080),t=2.37,P＜0.05],但是高剂量 GluA2-3Y 组与2VO组间 GluA2的表达差异无统计学意义(t=1.06,P＞0.05).(3)免疫荧光结果显示,与Sham组比较,2VO组大鼠PSD-95和GluA2的表达均减少(t=4.23,2.57,均P＜O.05).与2VO组比较,高剂量GluA2-3Y组与低剂量G1uA2-3Y组的PSD-95和GluA2均显著增加,差异有统计学意义[PSD-95:(7.757±0.578),(12.057±0.578),t=3.14,6.96,均 P＜0.05;GluA2:(9.721±0.950),(16.610±0.950),t=4.56,9.34,均P＜0.05].(4)免疫印迹结果显示,各组大鼠海马组织GSK3β的表达差异无统计学意义(F=2.03,P＞0.05).各组大鼠海马组织Akt1、p-GSK3β及p-GSK3β/GSK3β百分比均差异有统计学意义(F=8.30,4.76,3.57,均 P＜0.05).与 Sham 组比较,2V0组的 Akt1、p-GSK3β及 p-GSK3β/GSK3β 百分比均降低,差异有统计学意义(t=3.00,2.81,3.17,均P＜0.05).与2VO组比较,低剂量GluA2-3Y组和高剂量GluA2-3Y组Akt1、p-GSK3β和p-GSK3β/GSK3β百分比均显著升高,差异有统计学意义(Akt1:t=2.05,5.20,均P＜0.05;p-GSK3β:t=2.49,4.15,均 P＜0.05;p-GSK3β/GSK3β 百分比:t=2.30,2.97,均P＜0.05).结论 AMPA受体内化抑制剂GluA2-3Y可以改善慢性脑低灌注大鼠的认知损伤,这可能与增加Akt1、p-GSK3β及突触后蛋白表达有关.

摘要： 揭示一种包含结合AKT同工型AKT1、2及3的GDC‑0068类似物的双官能化合物，药物组合物，以及用于治疗由功能异常AKT活性所介导的疾病或状况的方法。

摘要： 本发明公开大黄素作为PI3K/Akt/mTOR信号转导通路活化分子p-Akt和p-mTOR的抑制剂及其应用，大黄素是从中药大黄提取的纯天然蒽醌类单体化合物，具有抗微生物、抗炎、抗氧化、免疫调节、肝保护等多种生物学活性。本发明发现，急性白血病多药耐药细胞HL-60/ADR、急性早幼粒白血病维甲酸耐药细胞MR2和相应敏感细胞NB4以及急性白血病原代细胞经大黄素作用后，PI3K/Akt/mTOR信号转导通路关键信号活化分子尤其是被p-Akt和p-mTOR被特异性抑制，体内研究证实，大黄素给药后急性白血病裸鼠移植瘤组织蛋白中PI3K/Akt/mTOR信号通路关键活化分子p-Akt、p-p65和p-mTOR均表达下调，说明大黄素可作为一种新型的PI3K/Akt/mTO信号转导活化分子特别是p-Akt和p-mTOR靶向抑制剂，应用于治疗血液系统恶性肿瘤。

摘要： 本文提供了包含ATP竞争性AKT抑制剂、氟维司群和CDK4/6抑制剂的组合疗法，其用于治疗激素受体阳性和HER2阴性的局部晚期不可切除的或转移性乳腺癌。

摘要： METTL3抑制剂在制备抑制PI3K/Akt和ERK1/2信号通路的药物中的应用，本发明属于细胞内信号通路技术领域，是要解决现有PI3K/Akt和ERK1/2信号通路抑制剂存在副作用的问题。METTL3抑制剂在制备抑制PI3K/Akt和ERK1/2信号通路的药物中的应用。敲低METTL3能够抑制结肠癌细胞增殖，能够抑制结肠癌细胞侵袭、迁移和克隆形成，能够抑制EphA2和VEGFA的表达，抑制血管拟态的形成。本发明应用于结肠癌靶向药物的筛选领域。

摘要： 本发明提供了AKT/STAT3作为免疫检查点抑制剂的靶点的用途，并提供了AKT/ATAT3抑制剂在制备治疗肿瘤和/或自身免疫性疾病的药物及制备PD‑1/PD‑L1抑制剂中的新用途；AKT/ATAT3抑制剂在抑制AKT/STAT3通路活性的同时，能显著抑制PD‑L1的表达水平，进而阻断PD‑1与PD‑L1的结合，使T细胞恢复活性，从而增强T细胞抗肿瘤免疫应答，能抑制肿瘤细胞体外增殖，诱导肿瘤细胞凋亡，具有很好的临床应用前景。

摘要： 本发明公开了一种AKT抑制剂IV的应用、革兰氏阳性菌抑制剂及革兰氏阳性菌的体外抑制方法，属于药物用途技术领域。本发明公开了AKT抑制剂IV在在抑制革兰氏阳性菌生长中的应用，为抗革兰氏阳性菌的药物开发提供了一种新的方案。相应地，本发明还提供了革兰氏阳性菌抑制剂，其包括AKT抑制剂IV、其药学上可接受的溶剂化物、其药学上可接受的盐、其多晶型物和其互变异构体中的至少一种，该革兰氏阳性菌抑制剂具有广阔的应用前景。此外，本发明还提供了一种革兰氏阳性菌的体外抑制方法，为相关的体外研究提供了技术支持。

摘要： 本发明公开了DNA拓扑异构酶Ⅰ抑制剂与Akt抑制剂联合用于制备抗结直肠癌药物的用途。本发明发现，DNA拓扑异构酶Ⅰ抑制剂伊立替康和Akt抑制剂MK‑2206具有协同抑制结直肠癌细胞增殖的活性，这两种抑制剂的组合物具有开发成治疗结直肠癌的药物的前景。

摘要： 本发明公开了作为AKT抑制剂的三环喹唑啉或二氢喹唑啉化合物，该三环喹唑啉化合物的结构如通式I所示，各取代基的定义如说明书所述，本发明还提供了其制备方法。本发明的三环喹唑啉类化合物具有显著的AKT抑制活性，能够用作AKT抑制剂。

摘要： 本发明涉及基于SREBP‑1/PI3K/AKT信号通路调控乳腺癌增殖迁移的抑制剂及其应用，所述抑制剂为短肽，所述短肽具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。本发明的抑制剂可以采用现有短肽合成技术生成，成本低，但是效果好，安全性高，选择性高。

摘要： 本发明属于生物技术领域，公开了一种Akt1磷酸化PMS2蛋白在作为卵巢癌治疗靶点中的应用，所述鉴定Akt1磷酸化PMS2蛋白作为卵巢癌治疗靶点的方法包括：通过Western Blot检测活化Akt1和p‑PMS2关系；检测p‑PMS2 T156下调后卵巢癌细胞迁移能力的变化；检测p‑PMS2 T156下调后卵巢癌细胞侵袭能力的变化；通过平板克隆法检测转染PMS2‑T156A后卵巢癌细胞克隆形成能力的变化；通过流式细胞仪及Western Blot检测转染PMS2‑T156A卵巢癌细胞凋亡的影响。本发明首次证实Akt1磷酸化PMS2 156位点的苏氨酸，为卵巢癌研究和治疗提供一个新的方向及靶点。