转基因小麦

摘要： 与一般作物相比,转基因作物在目标性状得到改良的同时,其他农艺性状可能会受到影响.前期研究发现,与受体小麦扬麦158相比,转WYMV-Nib8基因小麦N12-1对小麦黄花叶病具有较强抗性.为了明确N12-1的生存竞争能力及在长江中下游麦区的生态适应性,在2017—2018年以转基因小麦N12-1及其受体扬麦158和3个当地主栽品种扬麦11、宁麦13、宁麦14为比较对象,对小麦的主要农艺性状(基本苗数、株高、穗数、粒数、穗粒数、千粒质量)和对主要病害的抗性进行研究.2年的试验结果表明,N12-1与扬麦158的基本苗数、穗数、粒数无显著差异,但N12-1显著矮于其受体扬麦158,而穗粒数显著高于扬麦158.N12-1与当地主栽品种扬麦11相比,株高、穗粒数、千粒质量有显著差异,其他性状无显著差异;N12-1与宁麦13仅在株高上有显著差异,其他性状均无显著差异;N12-1与宁麦14仅千粒质量有显著差异,其他性状均无显著差异.转基因植物与受体之间对赤霉病、纹枯病的抗性均无显著差异.研究结果可为该转基因小麦申请安全证书提供基础.

摘要： 为了提高小麦的抗旱能力,通过转基因将拟南芥RD29A:DREB1A转入到小麦品种陇春30中,成功获得三个单拷贝本底DREB1A蛋白低表达水平的纯合转基因家系,并在干旱胁迫下测定了其生理指标及产量相关农艺性状。结果表明,与陇春30相比,转基因小麦的脯氨酸和可溶性糖含量以及SOD、CAT和POD活性都显著提高,H2O2含量、MDA含量和相对导电率均显著降低,株高、穗长、穗粒数、千粒重、地上生物量显著增加,说明RD29A:DREB1A外源基因的导入能够显著增强陇春30的抗旱性。

摘要： 利用"智慧芽"数据库对我国1997-2018年间的转基因小麦专利文件进行统计分析,从申请趋势 、IPC分类 、核心专利分析等层面得出转基因小麦技术发展趋势,从专利角度分析目前我国研究机构所面临的问题并提出专利布局的思路.

摘要： 目的:研究转GmDREB3基因抗旱小麦长期食用对大鼠免疫系统的影响.方法:将140只大鼠随机分为7组,分别为AIN93对照组(CN)、转GmDREB3基因小麦低、中、高剂量组(GL、GM、GH)和亲本小麦低、中、高剂量组(nGL、nGM、nGH),各组大鼠按比例掺入一定量小麦喂养90d后,取外周血进行全血淋巴细胞分型、免疫球蛋白和补体、细胞因子、免疫器官重量及肝肾组织免疫复合物检查.结果:全血淋巴细胞分型结果显示,与CN组相比,nGM组雌性大鼠CD4细胞百分比明显减少(P ＜0.01);GM组和nGM组雄性大鼠T淋巴细胞明显降低(P＜0.05或P＜0.01);GH、nGL、nGM、nGH组B淋巴细胞明显降低(P＜0.05或P＜0.01);nGL组NK细胞明显升高(P＜0.05).转基因小麦与相应亲本小麦组比较,除nGM组雌性大鼠CD4细胞百分比与GM组相比明显减少(P＜0.01)外,其他各指标组间均无显著性差异(P＞0.05).脏器重量结果显示,与CN组相比,各剂量组转基因小麦和亲本小麦雄性大鼠胸腺重量明显降低(P＜0.01);但转基因小麦和亲本小麦相应剂量组之间比较无显著性差异(P＞0.05).其他各检测指标各组间均未见显著性差异(P＞0.05).结论:转GmDREB3基因小麦喂养大鼠90d未对大鼠免疫系统产生不良影响.

摘要： [目的]将bZIP类转录因子基因AtTGA4转化小麦创制耐低磷转基因小麦新材料,同时分析AtTGA4提高小麦抗逆性的生理机制,为小麦耐低磷胁迫分子育种奠定基础.[方法]采用最小表达框基因枪转化法将AtTGA4和筛选标记基因Bar共转化受体小麦石4056,通过PCR检测筛选出无Bar并能稳定遗传AtTGA4的转基因小麦新株系.基于试验地土壤养分含量状况施用不同水平的磷肥,形成一定程度的正常和低磷营养胁迫,对AtTGA4转基因小麦新株系进行低磷胁迫耐受性试验.在开花期进行了光系统Ⅱ原初光能转化效率(lightefficiency of the light system Ⅱ,Fv/Fm),叶绿素相对含量(soil and plant analyzer development readings,SPAD值)和气冠温差(canopy temperature depression,CTD)等生理指标的测定,在成熟期进行了株高、分蘖数、穗粒数等农艺性状的调查,并在小麦收获后进行了产量及不同组分(根、茎、叶、籽粒)磷浓度和磷吸收、残留总量的测定和统计.[结果]PCR分析结果证明,AtTGA4已在石4 056小麦中稳定遗传至T4代,共获得4个稳定转基因株系.根据土壤养分含量测定结果,在正常条件地块施加812.39 kg·hm-2的过磷酸钙,低磷处理地块不施磷肥.产量及农艺性状统计结果显示,AtTGA4转基因株系L1和L2在正常和低磷胁迫条件下的产量相对于受体对照小麦显著增加,正常条件下产量增幅为5.3％-8.6％,低磷胁迫下产量增幅为4.4％-7.7％.在低磷胁迫条件下,过表达AtTGA4的转基因小麦种子千粒重显著比受体显著增加.开花期田间生理指标测定结果显示,转基因株系L1和L2在低磷条件下的Fv/Fm和CTD明显优于受体,而SPAD值没有明显差异.田间调查时发现,低磷条件下受体比转基因材料提早结束灌浆,表现在穗子提早变黄.成熟末期磷含量测定结果显示,转基因株系L1和L2在低磷条件下茎杆磷浓度比受体显著提高,在其他组织中则无显著差异.2个转基因株系在低磷条件下茎、叶和籽粒吸收、残留的总磷含量都要高于受体,地上部总磷含量增幅达6.38％-17.47％.转基因材料AtTGA4表达量分析结果显示,目标基因在株系L2中的表达量较株系L1中的低,是株系L1的0.69倍.[结论]在低磷胁迫条件下AtTGA4可以显著提高转基因小麦对磷元素的吸收及运输,提高转基因小麦的产量,进而提高转基因小麦对低磷胁迫的耐性.

摘要： 转基因小麦基因漂移的研究有助于建立防止外源基因逃逸以及小麦品种间种质污染.以抗小麦黄花叶病毒(WYMV)转基因冬小麦品种N12-1为花粉供体,以扬麦158和矮杆败育小麦为花粉受体,平行设置2种不同面积(100和400 m2)的花粉源,通过调查距花粉源不同距离处转基因小麦的基因漂移频率,研究了花粉源大小及不同品种对转基因小麦基因漂移的影响.结果表明,花粉源大小对小麦基因漂移频率没有显著影响;不同花粉受体材料中的基因漂移频率有显著差异,在0和2 m处矮杆败育小麦中的基因漂移频率显著偏高;小麦的基因漂移频率随着距花粉源距离的增加显著下降,5 m以后降为0.研究结果表明花粉竞争是影响转基因小麦基因漂移的主要因素,距离隔离是控制小麦花粉介导的基因漂移的最有效措施之一.%Studying gene flow of transgenic wheat helps establish a corresponding strategy to prevent transgene escape and germplasm contamination between compatible wheat genotypes. An experiment was carried out using transgenic wheat with resistance to wheat yellow mosaic virus(WYMV)as pollen donor,and Yangmai 158 and dwarf male-sterile wheat as pol-len receptors,and two plots of the transgenic wheat,different in size(100 and 400 m2)and laid out in parallel as pollen sources. Gene flow frequency was monitored at different intervals from the pollen source to investigate effects of size of the pollen source and competition between pollens on gene flow of the transgenic wheat. Results show that size of the pollen source did not significantly affect transgene flow frequency, but variety of the two pollen receptors did. The male-sterile dwarf wheat was found to be significantly higher in transgene flow frequency at distance intervals of 0 and 2 m from the pol-len source. The gene flow frequency of transgenic wheat declined dramatically with increasing distance from the source and was reduced to 0 over the test distance of 5 m. All the findings indicate that pollen competition may be a major factor influ-encing transgene flow and isolation by distance is one of the most effective methods to control pollen-mediated gene flow in wheat.

摘要： 目的 分析2015~2017年深圳市场小麦及其制品转基因阳性率的变化, 了解深圳市场是否存在未获授权的转基因小麦污染及其本底情况.方法 依据相关国家标准对2015~2017年期间在深圳各大超市抽取的97份小麦及其制品, 进行转基因成分检测, 评估3年来深圳市场转基因小麦及其制品转基因阳性率的变化,并分析其变化的原因.结果 3年来共检出13份阳性小麦类样品, 小麦类样品总体阳性率为13.40%.2015~2017年, 转基因小麦及其制品转基因阳性率分别12.50%、8.11%、25.00%.不同产地、不同采样地点样品阳性率无明显差异.结论 2017年深圳市场转基因小麦及其制品转基因阳性率明显升高, 但阳性样品均为弱阳性, 提示小麦及其制品中检出的转基因阳性成分可能来源于其他转基因生物的基因污染.%Objective To investigate the change trend of transgenic wheat and its products in Shenzhen markets during the period of 2015~2017, in order to understand the status of unauthorized genetically modified wheat pollution and its background. Methods On the basis of standard methods, a total of 97 wheat samples and its products were used for the qualitative detection of genetically modified components in order to assess the differences in genetically modified positive rate of wheat from Shenzhen markets during 2015~2017. Results In three years, a total of 13 positive samples were detected, and the total positive rate of wheat and its products was 13.40%. From 2015 to 2017, the positive rates of transgenic wheat and its products were 12.50%, 8.11% and 25.00%, respectively. There were no significant differences in samples from different regions or different sampling sites. Conclusions The positive rate of transgenic wheat and its products in 2017 increased significantly in Shenzhen market, but the positive samples were weakly positive. The genetically modified ingredients in wheat and its products may come from the genetic pollution of other genetically modified organisms.

摘要： 以4个T4代转TaEBP、GhDREB、GmDREB1、GmDREB3等抗旱相关转录因子基因的小麦株系为供体,以‘矮败周麦18’为受体,通过温室加代条件下的有限回交、滚动回交途径,应用分子跟踪检测手段,创制转基因矮败小麦抗旱新种质.BC2F2植株目的基因的PCR检测结果表明,获得了分别聚合不同外源基因于一体的抗旱相关转基因‘矮败周麦18’小麦新种质,其中有TaEBP和GhDREB、GmDREB3和GmDREB1、TaEBP和GmDREB3、GhDREB和GmDREB3分别聚合于同一植株的矮败种质;及TaEBP、GhDREB、GmDREB3三个基因聚合在同一植株的矮败种质.这些转基因新种质为进一步开展抗旱转基因矮败小麦轮回选择育种理论与方法研究提供了重要材料基础.

摘要： 目的:对小麦中氨基酸分析的水解方法进行研究,比较非转基因和转基因小麦中氨基酸的含量.方法:样品用含0.1％巯基乙酸的盐酸溶液水解提取,样液经定容、过滤、浓缩、复溶、过膜后,用氨基酸分析仪测定,外标法定量.结果:应用含巯基乙酸的盐酸水解液对小麦样品进行水解的同时有效防止了含硫氨基酸(蛋氨酸和半胱氨酸)的氧化,相对氧化水解方法节省前处理时间,方法的回收率为93％ ～ 99％,相对标准偏差小于2.4％.非转基因和转基因小麦样品的17种氨基酸分析,氨基酸含量不存在显著性差异.结论:该方法准确快速、重现性好,适用于小麦中氨基酸含量分析的检测要求.%[Objective]A new method for the determination on 17 amino acids in wheat was established by amino acid analyzer (AAA).The contents of the amino acids in the non-transgenic wheat and the transgenic wheat were compared.[Method] The samples were subjected to hydrolysis by the hydrochloric acid solution containing 0.1％ thioglycolic acid,and were caTied out by AAA.The external standard method was used for quantitative analysis.[Result] This hydrolysis pretreatment process could effectively prevent oxidation of sulfur-containing amino acids (methionine and cysteine).The recoveries were 93％ ～99％,and the relative standard deviations were no more than 2.4 ％.There was no significant difference of the 17 amino acids contents in the non-transgenic wheat and the genetransfer wheat [Conclusion] The method was accurate,and had good repeatability which could meet the requirements for determination of 17 amino acids in wheat.

摘要： 麦长管蚜(Sitobion avenae Fabricius)是我国多数麦区麦蚜的优势种.目前我国生产上对蚜虫的防治以化学防治为主.随着生物技术的发展,转基因抗虫作物的成功开发对减少农药使用量、降低环境污染程度具有重要经济与生态意义.反-β-法尼烯(E-β-farnesene,简称EβF)是蚜虫报警信息素的主要成分,属萜烯类信息化合物,具有驱避蚜虫和吸引天敌的作用.为了明确测定对引发蚜虫嗅觉行为反应的最低阈值浓度，为EβF的田间应用提供依据，以麦长管蚜为目标蚜虫，EβF矿物油溶液为试剂， 观察麦长管蚜对不同浓度EβF的逃逸行为和“Y”型管嗅觉行为反应；结果表明，随着EβF浓度升高，麦长管蚜若蚜3 min内逃离数显著增加，有翅蚜比例显著增加，种群个体数量显著下降，驱避效果明显增强。EβF浓度为200 ng/μL和≥600ng/μL使蚜虫逃离数显著增加（P<0.05）。“Y”型管选择行为测试结果表明， EβF≥600 ng/μL 对3 龄若蚜具有极显著的驱避作用（P<0.01）。与对照相比，EβF浓度≥600 ng/μL处理极显著提高了有翅蚜比例（P<0.01）；EβF浓度≥400 ng/μL极显著抑制蚜虫种群个体数量增长（P<0.01），但与600 ng/μL处理差异不显著。综上所述，600 ng/μL EβF矿物油溶液为麦长管蚜驱避剂的最低阈值浓度。以转EBF 合成酶基因小麦（中国农科院作科所提供）为材料，采用PCR技术对转基因小麦进行分子鉴定，利用PCR法检测转基因小麦EBF 合成酶基因表达谱，GC×GC-TOFMS检测转基因小麦EBF释放谱，应用四臂嗅觉仪检测蚜虫与天敌嗅觉行为反应。本研究确定EβF引发蚜虫嗅觉行为反应的最低阈值浓度，初步建立转EBF合成酶基因小麦的抗蚜评价技术规范，为筛选适于田间防治麦蚜的转EBF合成酶基因小麦株系的选育等提供实验依据。

摘要： 大麦黄矮病毒(Barley yellow dwarf viruses BYDVs)是一类+ssRNA病毒,分布广泛,是世界上危害最严重、流行最广泛的植物病毒之一。研究发现普通小麦种质资源中缺乏抗黄矮病基因。国内外自20世纪60年代首先从大麦中找到一些抗病基因,但在小麦育种中的利用价值不大。70年代,通过杂交育种的方法,育出了一批抗黄矮病的异附加系、易位系材料和少数几个抗病品种,20世纪90年代开始利用基因工程的方法获得抗病毒小麦。以上研究都还存在很多的问题,主要表现在利用近缘植物基因存在种间不亲和性、杂种F1代难以成活、后代不育以及带入不良农艺性状等;利用病毒的CP基因获得的转基因植株仅能推迟发病和减轻症状,这些都有待于研究解决。本文研究RNAi介导的小麦抗BYDV转基因小麦。

摘要： 本文对我国转基因小麦的研究进展，特别是近5a的研究进展作了综述。主要包括，转基因方法与体系、转基因小麦基因型、转入的基因及其主要来源、转基因小麦品系与品种、转基因小麦的中试与环境释放、转基因小麦对环境影响的评估和研究队伍。同时，对未来5a转基因小麦的发展作了展望。

摘要： 以小麦品种H6756和藁城8901作为基因转化的靶材料,取其护颖至雌雄蕊原基形成期的幼穗,用含逆境诱导转录因子DREB1A和bar基因的质粒pAHC25轰击胚性愈伤组织,在分别含有5mg/L和10mg/L Basta溶液的培养基上进行筛选.得到的抗性愈伤组织在不含Basta溶液的培养基上再生培养,获得218颗再生植株.田间涂抹浓度为100mg/L的Basta溶液检测后,对抗性植株作PCR检测,获得54颗再生植株.通过对其中20株T代的PCR和Southern杂交分析,已获得14株含DREB1A和bar基因的转基因小麦植株,其中H675613株,藁城8901 1株.

摘要： 采用离子束介导法将大豆DNA导入中育5号,淮阴9628两个小麦品种.结果表明:T1代获得高蛋白(＞15%)单株114株.最高株蛋白质含量为21.44%,明显提高了小麦单株蛋白质含量,而且,这些高蛋白性状变异,从T1到T3代大都可以遗传,部分系统在T3代基本稳定,说明离子束介导外源DNA,明显提高了基因转移和诱变作用,变异性状可稳定遗传,有可能成为实现超级小麦发育种突破的一条最有效途径.

摘要： 用基因枪法将来自于棉花的DREB转录因子基因和诱导型启动子Rd29A构建的植物表达载体pRdGH转入小麦品种鲁麦22号,获得转基因小麦植株.T0、T1、T2、T3代分子生物学鉴定证实:GH-DREB基因可以稳定遗传.孕穗期到开花期T3代叶片可溶性糖、蒸腾速率、净光合速率测定结果表明:正常条件下,转基因后代与受体鲁麦22的各生理指标无明显差异,而水分胁迫下,转基因后代的净光合速率随着干旱处理时间的延长而逐渐下降,蒸腾速率随着干旱处理时间的延长而逐渐上升,但是,下降与上升幅度比对照低,其中,在胁迫第3天、第6天都与对照差异极显著,叶片的可溶性糖含量与对照相比差异不显著.说明GH-DREB基因在干旱条件下可通过减少蒸腾速率、维持光合作用.

摘要： 以小麦转HM—GSlDx5+1Dyl0基因获得的1Axl和1Ax2*近等基因系08K860(HWM—GS组成为1，7+9，5+10)和08K871(HWM—GS亚基组成为2*，7+9，5+10)为材料，研究了近等基因系籽粒品质、粉质仪参数、拉伸仪参数、色度仪参数、植物学特性和农艺性状等方面的差异。研究结果表明，近等基因系08K860和08K871的上述性状差异很小，经统计分析差异未达显著水平。近等基因系08K860和08K871遗传背景相近，1Ax1和1Ax2*亚基对品质的贡献率相同。在小麦品质育种上应同样重视具有1Ax1亚基后代的选择。

摘要： 以小麦转HM—GSlDx5+1Dyl0基因获得的1Axl和1Ax2*近等基因系08K860(HWM—GS组成为1，7+9，5+10)和08K871(HWM—GS亚基组成为2*，7+9，5+10)为材料，研究了近等基因系籽粒品质、粉质仪参数、拉伸仪参数、色度仪参数、植物学特性和农艺性状等方面的差异。研究结果表明，近等基因系08K860和08K871的上述性状差异很小，经统计分析差异未达显著水平。近等基因系08K860和08K871遗传背景相近，1Ax1和1Ax2*亚基对品质的贡献率相同。在小麦品质育种上应同样重视具有1Ax1亚基后代的选择。

摘要： 以小麦转HM—GSlDx5+1Dyl0基因获得的1Axl和1Ax2*近等基因系08K860(HWM—GS组成为1，7+9，5+10)和08K871(HWM—GS亚基组成为2*，7+9，5+10)为材料，研究了近等基因系籽粒品质、粉质仪参数、拉伸仪参数、色度仪参数、植物学特性和农艺性状等方面的差异。研究结果表明，近等基因系08K860和08K871的上述性状差异很小，经统计分析差异未达显著水平。近等基因系08K860和08K871遗传背景相近，1Ax1和1Ax2*亚基对品质的贡献率相同。在小麦品质育种上应同样重视具有1Ax1亚基后代的选择。

摘要： 以小麦转HM—GSlDx5+1Dyl0基因获得的1Axl和1Ax2*近等基因系08K860(HWM—GS组成为1，7+9，5+10)和08K871(HWM—GS亚基组成为2*，7+9，5+10)为材料，研究了近等基因系籽粒品质、粉质仪参数、拉伸仪参数、色度仪参数、植物学特性和农艺性状等方面的差异。研究结果表明，近等基因系08K860和08K871的上述性状差异很小，经统计分析差异未达显著水平。近等基因系08K860和08K871遗传背景相近，1Ax1和1Ax2*亚基对品质的贡献率相同。在小麦品质育种上应同样重视具有1Ax1亚基后代的选择。

摘要： 本申请公开了一种基于小麦花粉致死基因Ki的转基因水稻不育系的培育方法，包括以下步骤：小麦花粉致死基因Ki的扩增；B、mVenus基因表达盒的获得；C、水稻基因表达盒的获得；D、小麦花粉特异性启动子Pg47的扩增；E、各基因表达元件的连接。包括：第一步，将小麦致死基因Ki引入到pCAMBIA1300载体上，再连接mVenus基因表达元件、完整的水稻EAT1基因、小麦花粉特异性启动子Pg47到pCAMBIA1300载体上。本发明F1代杂合体在自交结实过程中遵循孟德尔分离定律，产生的后代既有能保持三连锁基因的杂合体，又有无育性的不育系。

摘要： 本发明提供了一种基于气相色谱-质谱联用技术的抗小麦黄花叶病毒转基因小麦代谢物检测方法，通过对抗小麦黄花叶病毒转基因小麦代谢物基于气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）检测方法进行优化，分别从提取溶液的种类及配比、提取时间、提取液体积、衍生过程温度和时间进行优化，结果表明在提取溶液为水：乙腈：异丙醇=2：3：3的提取条件下，加入1mL提取溶液浸提20min时，相对峰面积为最佳检测状态，能检测到较多的代谢物成分。在30°C、90min的衍生条件下，相对峰面积较大，信号强度明显。本发明建立的检测方法为抗小麦黄花叶病毒转基因小麦的代谢组学研究提供了可靠且有效的数据结果，并为转基因作物的安全评价奠定了基础。

摘要： 本发明公开了一种利用基因枪获得转基因小麦的方法及其专用培养基。本发明以小麦幼胚为外植体，不经过预培养直接使用本发明所提供的高渗培养基进行高渗处理后进行基因枪轰击，轰击后再用本发明提供的专用培养基进行高渗处理、愈伤组织诱导、分化和生根培养，且在分化和生根阶段使用筛选剂，在愈伤组织诱导阶段不使用筛选剂，可明显提高小麦的基因转化效率，最高可达36%；且本发明还具有转化周期短（从取幼胚至获得具有根茎叶的再生植株仅需8—10周）、转化稳定性和重复性高的优点。本发明为小麦遗传改良产业化提供了一个有效途径，具有广阔的应用前景。

摘要： 本发明公开了抗草甘膦基因、专用表达载体及其在获得抗草甘膦转基因小麦中的应用。本发明提供的一种蛋白，是如下(a)或(b)：(a)由序列表中序列3所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(b)将序列表中序列3所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与抗草甘膦相关的由序列2衍生的蛋白质。本发明的实验证明，本发明利用小麦密码子偏好性对其进行人工设计，并在N段添加来自小麦RubisCO小亚基的叶绿体导肽，通过人工合成法获得了改造的基因，并将其应用于小麦转化时的作为筛选标记基因，获得了抗草甘膦的转基因小麦，经过研究证明，该转基因小麦的抗性高于优化前小麦的转基因抗性。

摘要： 本发明公开了一种适合转基因小麦定量检测的内标准基因引物设计及应用，其步骤：A、通过NCBI数据库BlastN筛选物种特异性好的基因，查找非同源区段设计引物，扩增区段，将上下游序列进行Primer-Blast检测；B、选取16个不同物种种子和35个不同小麦品种提取DNA；C、Southern Blot鉴定候选特异性好的PSG719、UCB基因位点数为6个，拷贝数为2个；D、PCR鉴定内标准基因引物物种特异性：E、PCR鉴定内标准基因引物不同小麦品种间稳定性。方法易行，操作简便，定性检测极限为0.95个小麦基因组，定量检测为5个小麦基因组,通过Real-time PCR检测,线性关系良好。

摘要： 本发明公开了一种适合转基因小麦定量检测的内标准基因引物设计及应用，其步骤：A、通过NCBI数据库BlastN筛选物种特异性好的基因，查找非同源区段设计引物，扩增区段，将上下游序列进行Primer-Blast检测；B、选取16个不同物种种子和35个不同小麦品种灭菌消毒、萌发取叶片提取DNA；C、SouthernBlot鉴定候选特异性好的PSG719、UCB基因位点数为6个，拷贝数为2个；D、普通PCR鉴定内标准基因引物物种特异性：E、普通PCR鉴定内标准基因引物不同小麦品种间稳定性。确定两对引物做转基因小麦检测时的定性或定量检测内标准基因引物。方法易行，操作简便，定性检测极限为0.95个小麦基因组，定量检测为5个小麦基因组,通过Real-timePCR检测,线性关系良好。

摘要： 本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种检测小麦转基因成分和转基因品系的引物组合、试剂盒、检测方法及应用。所述的检测小麦常用的转基因元件及转基因品系的引物对组合包括以扩增9种常用小麦转基因元件、3种转基因品系Ta_B73‑6‑1、Ta_B72‑8‑1、Ta_B102‑1‑2特异性序列以及2种小麦内参基因Ta_Waxy‑D10和Ta_GAG56D的引物组。本发明还涉及检测小麦转基因元件和品系的试剂盒与检测方法。本发明技术方案操作简单，检测效率高，检验对象全面，具有较高的检测特异性、准确度和灵敏性等特点；可用于转基因小麦及其制品的大规模检测，具有较好的应用前景。

摘要： 本发明提供了一种基于气相色谱-质谱联用技术的抗小麦黄花叶病毒转基因小麦代谢物检测方法，通过对抗小麦黄花叶病毒转基因小麦代谢物基于气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）检测方法进行优化，分别从提取溶液的种类及配比、提取时间、提取液体积、衍生过程温度和时间进行优化，结果表明在提取溶液为水∶乙腈∶异丙醇=2∶3∶3的提取条件下，加入1mL提取溶液浸提20min时，相对峰面积为最佳检测状态，能检测到较多的代谢物成分。在30°C、90min的衍生条件下，相对峰面积较大，信号强度明显。本发明建立的检测方法为抗小麦黄花叶病毒转基因小麦的代谢组学研究提供了可靠且有效的数据结果，并为转基因作物的安全评价奠定了基础。

摘要： 本发明公开了一种适合转基因小麦定量检测的内标准基因引物设计及应用，其步骤：A、通过NCBI数据库BlastN筛选物种特异性好的基因，查找非同源区段设计引物，扩增区段，将上下游序列进行Primer-Blast检测；B、选取16个不同物种种子和35个不同小麦品种灭菌消毒、萌发取叶片提取DNA；C、SouthernBlot鉴定候选特异性好的PSG719、UCB基因位点数为6个，拷贝数为2个；D、普通PCR鉴定内标准基因引物物种特异性：E、普通PCR鉴定内标准基因引物不同小麦品种间稳定性。确定两对引物做转基因小麦检测时的定性或定量检测内标准基因引物。方法易行，操作简便，定性检测极限为0.95个小麦基因组，定量检测为5个小麦基因组,通过Real-timePCR检测,线性关系良好。

摘要： 本发明公开了一种利用基因枪获得转基因小麦的方法及其专用培养基。本发明以小麦幼胚为外植体，不经过预培养直接使用本发明所提供的高渗培养基进行高渗处理后进行基因枪轰击，轰击后再用本发明提供的专用培养基进行高渗处理、愈伤组织诱导、分化和生根培养，且在分化和生根阶段使用筛选剂，在愈伤组织诱导阶段不使用筛选剂，可明显提高小麦的基因转化效率，最高可达36%；且本发明还具有转化周期短（从取幼胚至获得具有根茎叶的再生植株仅需8—10周）、转化稳定性和重复性高的优点。本发明为小麦遗传改良产业化提供了一个有效途径，具有广阔的应用前景。