基因盒

摘要： 该研究采用纸片扩散法对生鲜食品源沙门氏菌分离株进行耐药表型检测,玻片凝集法测定血清型,MLST方法分析其序列型。用PCR检测结合序列比对,对多重耐药沙门氏菌携带的Ⅰ类整合子及其基因盒、ISCR1及其基因盒进行分析。共筛选出32株多重耐药菌株,多重耐药率为48.48%。多重耐药株中分为11种血清型,优势血清型为S. Thompson(21.88%)和S. Agona(18.75%),MLST的序列分型将多重耐药株分为15种ST型,优势序列型为ST26(21.88%)和ST13(12.50%)。多重耐药菌株中,Ⅰ类整合子的检出率为43.75%(14/32),其中有5株扩出耐药基因盒,检出率为35.71%(5/14);11株检出ISCR1序列,检出率为34.38%(11/32),其中4株扩增出耐药基因盒,检出率为36.36%(4/11);同时含有这两种遗传元件(Ⅰ型复合整合子)的菌株共检测出9株,检出率为28.13%(9/32),检出的基因盒大多包含1~2种耐药基因,与耐药表型具有较好的相关性。通过blast比对,发现28号菌株中的Ⅰ型复合整合子耐药基因盒与沙门氏菌Nsa217质粒和肺炎克雷伯菌的KP15-2-53质粒具有同源性。生鲜制品中沙门氏菌耐药性相对严重,且沙门氏菌多重耐药性与携带的Ⅰ型复合整合子之间具有相关性。

摘要： 为了解东北地区狐源大肠杆菌的耐药性及其整合子—基因盒系统的流行特征,本研究采用K-B纸片法检测东北地区分离的330株狐源大肠杆菌对6类15种抗菌药物的敏感性;通过PCR检测这些分离菌株中I类整合酶基因(intI1)、II整合酶基因(intI2)和I类、II类整合子基因并测序,采用DNAStar软件分析I类、II类整合子基因携带基因盒的组成方式,根据PCR结果分析整合酶及整合子基因与大肠杆菌耐药表型的相关性。药敏试验结果显示:330株狐源大肠杆菌对β-内酰胺类药物和四环素类药物耐药性较高,耐药菌株均超过80%;其次是对氨基糖苷类药物和磺胺类药物,耐药菌株超过60%;对β-内酰胺类药物亚胺培南、氨基糖苷类药物阿米卡星相对敏感,敏感菌株分别占86.97%(287/330)和83.94%(277/330),且87.88%(290/330)的狐源大肠杆菌表现为多重耐药性。整合酶和整合子基因的检测结果显示,intI1和intI2基因的检出率分别为63.64%(210/330)和15.45%(51/330),且有36株(10.9%)狐源大肠杆菌同时携带intI1和intI2基因。I类整合子基因的检出率为62.86%(207/330),其中33.81%(70/207)I类整合子基因中携带基因盒,其余66.19%(137/207)I类整合子基因中未携带基因盒,为空整合子,且未检出II类整合子基因;70个I类整合子基因的测序结果显示,共检测出10种基因盒,且存在6种不同的基因盒组成方式,其中aadA22基因盒数量最多,达48.57%(34/70),其余基因盒组成分别为dfrA17-aadA5、dfrA27-aadA2、dfrA5、dfrA1-aadA1、dfrA12-orfF-aadA2。且上述整合酶基因(与氨基糖苷类和磺胺类耐药基因相关)及整合子基因(与甲氧苄啶类和氨基糖苷类药物的耐药性相关,但未做甲氧苄啶类的耐药性试验)与狐源大肠杆菌对氨基糖苷类和磺胺类药物的耐药表型基本一致。以70株携带基因盒的I类整合子的狐源大肠杆菌为供体菌,E.coli NK5449株作为受体菌进行接合转移试验,提取接合子质粒并经PCR测序后统计接合率;通过PCR分别检测接合子携带的整合酶和整合子基因,分析接合子中耐药基因的水平转移情况。结果显示,共获得23株接合子,接合率为32.86%(23/70),23株接合子中I类整合酶基因的检出率为34.78%(8/23),I类整合子基因检出率为43.48%(10/23)。上述结果表明,耐药基因具有水平转移的能力,但并不能将全部的耐药基因转移到受体菌中。本研究为东北地区狐源大肠杆菌的风险评估和抗菌药的合理应用提供参考依据。

摘要： 为探究晋北地区部分养殖场腹泻犊牛中大肠杆菌耐药表型与所携带耐药基因和整合子的关系,本研究采集晋北地区3个规模场腹泻犊牛肛拭子27份进行大肠杆菌分离鉴定,采用K-B法和PCR检测分离株药物敏感性和耐药基因、整合子-基因盒的携带情况,采用SPSS软件进行相关性分析。结果显示,24株大肠杆菌分离株对6类15种常用抗菌药物呈现不同程度的耐药,对β-内酰胺类抗菌药头孢噻肟、头孢唑林和氨苄西林耐药的菌株均达95.83%(23/24),但对氧氟沙星耐药的菌株只占12.50%(3/24);多重耐药菌株占比70.83%(17/24),4重耐药菌株占比最高,为33.33%(8/24);β-内酰胺类、氨基糖苷类、磺胺类、喹诺酮类、氯霉素类和四环素类耐药基因均有检出,喹诺酮类耐药基因GyrB检出率为100%;Ⅰ类整合子检出率为79.17%,最主要的基因盒排列为dfrA17-aadA5,Ⅱ、Ⅲ类整合子未被检出;耐药基因bla_(TEM)、bla_(CTX-M-1)、sul1、sul2、tetA、tetB、cat与耐药表型符合率均为100%;整合子阳性株的多重耐药表型的发生率极显著高于整合子阴性株(P<0.01)。综上,晋北地区部分养殖场犊牛源大肠杆菌分离株多重耐药情况严重,耐药表型与所携带耐药基因和Ⅰ类整合子密切相关。

摘要： 细菌整合子具有独特的结构,能够捕获和表达外源基因,通过转座子和质粒可以在细菌间水平传播。多重耐药细菌的出现是临床抗感染治疗面临的巨大挑战,而耐药细菌多携带整合子。因此,整合子的早期检测对尽早判断细菌耐药非常重要。目前,检测细菌整合子的方法主要是基于整合子的整合酶及其基因盒。文章对基于聚合酶链反应(PCR)的各种检测方法和环介导等温扩增(LAMP)、宏基因组测序(mNGS)、基因芯片等细菌整合子检测方法,以及各种检测方法的原理和特点进行介绍,并比较每种方法的优缺点,帮助临床实验室选择更适合的检测方法,及时了解细菌携带整合子的情况,尽早确定细菌耐药特点,为临床诊治提供参考。

摘要： [背景]整合子在细菌耐药性的获得及传播中占据重要地位,对于整合反应检测方法的改良及反应机制的研究,可以加深我们对细菌耐药性产生和播散的理解,为遏制耐药菌株的产生和播散提供新的途径.[目的]在细菌染色体上构建第1类整合子反应模型,用于评价整合酶介导的基因盒位点特异性重组.[方法]采用PCR分别扩增含氯霉素耐药基因cat的CM片段、含基因盒aadA5的LacA5片段、含整合子重组位点attI1及强可变区启动子的PcS片段和插入位点两侧的同源臂,重叠延伸聚合酶链反应连接上述5个片段制备整合子模型插入片段,通过同源重组将构建好的整合子模型片段插入大肠埃希菌JM109染色体中.转入高表达第1类整合酶的质粒pHSint,在链霉素平板上筛选发生整合的菌株,并用聚合酶链反应和测序验证.[结果J构建的整合子模型片段经测序与预期一致,整合子模型片段成功插入大肠埃希菌JM109染色体中.转入高表达整合酶的质粒pHSint后,在链霉素平板上成功筛选出基因盒aadA5发生整合的菌株,经聚合酶链反应扩增并测序与预期一致.[结论]在大肠埃希菌染色体上成功构建第1类整合酶介导基因盒位点特异性重组反应模型,为进一步揭示整合子捕获耐药性基因盒的反应机制奠定基础.

摘要： 目的 调查金黄色葡萄球菌中I类整合子携带情况和所携带I类整合子可变区基因分布.方法 收集临床分离金黄色葡萄球菌600株,分别分离自儿童447株和成人153株,用BD Phoenix 100进行细菌鉴定和药物敏感性试验;PCR扩增Ⅰ类整合子;用限制性片段长度多态性分析和Sanger测序技术进行基因盒分析,并比较分析不同分群分离菌株基因盒携带情况及与耐药性的关系.结果 600株金黄色葡萄球菌中236株检出Ⅰ类整合酶基因,检出率为39.3％;检出14种基因盒并组成13种组合形式,可介导氨基糖苷类抗菌药物、氯霉素、甲氧苄啶及季铵盐耐药.成人与儿童Ⅰ类整合酶和整合子可变区阳性检出率差异无统计学意义,dfrA12基因盒在儿童分离株检出率高于成人分离株(P<0.05).儿童与成人分离株在甲氧苄啶、环丙沙星和红霉素的耐药率差异有统计学意义(P<0.05).儿童与成人分离株均表现出携带耐药基因盒的菌株对相关抗菌药物的耐药率更高.结论 儿童与成人分离金黄色葡萄球菌Ⅰ类整合子及可变区检出率较高,并参与相应药物耐药;儿童分离菌株所携带磺胺类耐药基因盒高于成人分离株.

摘要： 目的 研究芜湖地区肺炎克雷伯菌携带的整合子-基因盒分布情况,分析耐药基因盒与耐药表型两者的相关关系.方法 收集2018年6月至2019年8月皖南医学院弋矶山医院105株肺炎克雷伯菌的分离株.通过PCR扩增技术,对整合酶基因进行扩增,对含有整合子的肺炎克雷伯菌的可变区进行PCR扩增,检测碱基序列,并对序列进行耐药基因盒比对及分析.结果 对105株肺炎克雷伯菌整合子进行检测,发现含Ⅰ类整合子的菌株有61株(58.1％),未发现含有Ⅱ、Ⅲ类整合子菌株.对含有Ⅰ类整合子菌株的可变区进行PCR扩增,扩增产物进行凝胶成像系统检测,有39株可见亮条带,其中非多重耐药肺炎克雷伯菌有3株,仅产超广谱β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌有18株,既产超广谱β-内酰胺酶又产碳青霉烯酶的肺炎克雷伯菌有18株.将显示出亮条带的39株肺炎克雷伯菌菌株的5'-3'可变区的PCR产物进行测序,其中27株可比对出耐药基因,总共有5种耐药基因,分别为磺胺类dfrA1、dfrA12和氨基糖苷类aacA4、aadAl、aadA2,且这27株的药敏试验显示均对磺胺类、氨基糖苷类的抗菌药物耐药.结论 研究发现芜湖地区肺炎克雷伯菌以Ⅰ类整合子为主,尚未发现Ⅱ、Ⅲ类整合子.多重耐药菌较非多重耐药菌整合子的检出率高,芜湖地区肺炎克雷伯菌菌株对氨基糖苷类及磺胺类药物的耐药率较高,应尽量避免使用.

摘要： 目的 探讨社区泌尿系感染大肠埃希菌中整合子的分布及其与系统发育群、细菌耐药性的关系.方法 回顾性研究2015年11月至2018年12月非重复分离自上海市奉贤区中心医院肾内科门诊就诊患者尿液样本的大肠埃希菌152株.采用Phoenix 100全自动微生物分析仪进行细菌鉴定及药敏分析.PCR筛查第1、第2类整合酶基因、整合子可变区和各分离株的系统发育群,通过测序分析确定可变区启动子类型及基因盒组合,并分析第1类整合子与系统发育群、细菌耐药性的关系.结果 152株大肠埃希菌对氨苄青霉素的耐药率为70.39％(107/152),对其他抗菌药物的耐药率均低于40.00％.152株大肠埃希菌中65株(42.76％)检测到第1类整合酶基因intI1,共检出68个第1类整合子,8种基因盒组合和14种耐药基因盒,其中基因盒组合dfrA17-aadA5检出率最高(51.47％,35/68),12株intI1阳性菌株未扩增出可变区.第1类整合子可变区中共检出5种可变区启动子,相对较弱的PcH1检出率最高(77.94％,53/68),同时检测出基因盒组合arr-2-cmlA5-blaOXA-10-aadA1.65株intI1阳性菌株中各系统发育群以B2群和D群为主.4株(2.63％,4/152)检出第2类整合酶基因intI2,其可变区基因盒组合均为dfrA1-sat2-aadA1.结论 社区泌尿系感染中分离到的大肠埃希菌第1类整合子与细菌耐药性密切相关,其携带的第1类整合子可变区启动子以弱启动子为主.intI1阳性菌株中各系统发育群的分布与总体菌株的分布一致.在大肠埃希菌中检出基因盒组合arr-2-cmlA5-blaOXA-10-aadA1.

摘要： 细菌耐药性逐年上升和耐药性快速传播近年来已成为临床治疗感染性疾病的难题，细菌最常见的对抗和逃避抗菌药物的方式，是从外源获得耐药基因，而耐药基因的传播可以是从一个细菌到另一个细菌，也可以从一个DNA分子到另一个DNA分子。本文介绍了基因盒的结构，分析了基因盒的融合，探讨了整合子结构及其分类，浅谈了基因盒、整合子的移动，研究了基因盒的表达，以及基因盒-整合子系统与细菌耐药性。

摘要： 本文对某猪场分离大肠杆菌I型整合子及基因盒的分子流行病学进行了研究。结果表明：猪场大肠杆菌I型整合子流行较普遍。192株分离菌中105株携带I型整合子，检出率达54.7％。共检测出6种整合不同基因盒的I型整合子，其中100％整合有氨基糖腺苷转移酶基因，78%整合有二氢叶酸还原酶基因，仅少数整合β-内酰胺酶基因(bla)、红霉素酯酶基因(ereA)及链丝菌素乙酰转移酶基因(sat)，以同时整合二氢叶酸还原酶基因(dhfr)及氨基糖腺苷转移酶基因(aadA)的I型整合子检出率最高，达36.6％。6种I型整合子以8种形式在大肠杆菌中流行。各来源大肠杆菌，以小猪群分离株I型整合子检出率最高，饲养员最低，同栏猪有较一致的I型整合子流行。菌株携带I型整合子及基因盒与其耐药谱及多重耐药表型有密切关系，敏感菌株、I耐药菌株及2耐药菌株几乎不携带I型整合子，携带I型整合子的菌株均耐受磺胺药，绝大部分耐受链霉素和/或壮观霉素。

摘要： 目的：研究临床分离的59株耐头孢西丁大肠埃希菌整合子的分类、结构、及其在介导耐药中的作用。rn 方法：用PCR方法检测整合酶基因，用限制性片段长度多态性技术(RFLP)进行分类，进一步对阳性样本可变区的基因盒序列鉴定分析，采用微量稀释法测定22种抗生素对试验菌株的最低抑菌浓度。rn 结果：整合酶基因阳性率为76%，均为I类整合酶基因；所携带的耐药基因盒绝大多数为aadA和dfr，编码氨基糖苷类、磺胺类抗生素耐药；仅有两株携带β-内酰胺酶耐药基因盒；整合子阳性组抑菌浓度明显高于阴性组，主要在磺胺类药物、四环素、氯霉素、及氨基糖苷类，而两组其它药物比较差异无显著性。rn 结论：I类整合子广泛地存在于头孢西丁耐药的大肠埃希菌中；耐药基因盒是整合子阳性菌株对氨基糖苷类、磺胺类药物及氯霉素耐药的主要原因，但对介导β-内酰胺类耐药方面，不起主要角色。

摘要： 目的:检测Ⅰ类、Ⅱ类和Ⅲ类整合子及相关基因盒在嗜麦芽窄食单胞菌临床分离株中的分布,分析整合予对细菌耐药性的影响。rn 方法:应用微量肉汤稀释法测定12种抗菌药物对嗜麦芽窄食单胞菌MIC：应用多重PCR方法筛选嗜麦芽窄食单胞茼整合酶基因：对整合子阳性菌株进行整合子相关基因盒榆测。rn 结果:82株菌中有11株(13．4%)含有Ⅰ类整合子,其中3株菌同时带有Ⅰ型和Ⅱ型整合子,Ⅱ型整合子的阳性率为3．6%,未检测到Ⅲ类整合子。Ⅰ类整合子所携带的耐药基因盒主要是aadB、aadA5、aphA15、aacA4、aadA1、dfrA17,介导对氨基糖苷类、磺胺类耐药。Ⅰ类整合子阳件菌株的耐药率高于整合子阴性的菌株。rn 结论:嗜麦芽窄食单胞菌中主要分布Ⅰ类整合子,首次发现嗜麦芽窄食单胞菌中含有Ⅱ类整合子,整合子在细菌耐药中发挥重要作用。

摘要： 随着抗生素的广泛使用，细菌在抗生素的选择压力下耐药菌株不断产生，其中细菌通过基因的水平转移，获得外源性耐药基因是加快临床耐药菌株产生的重要原因。与细菌耐药基因水平转移密切相关的遗传结构有质粒、转座子、整合型噬菌体以及近年来在细菌中发现的一种天然的克隆表达系统——整合子(integron)。整合子通过位点特异性重组捕获外源基因盒(gene cassettes)并使之表达，同时整合子可位于质粒上，或自身作为转座子的一个组成部分而参与转移，使耐药基因发生播散。整合子因其在细菌耐药基因水平转移中的重要作用而受到研究者的关注。本文对整合子、基因盒的结构和表达、整合子与耐药性的关系、整合子的检测及意义等内容进行了简述。

摘要： 目的：研究南京地区鲍曼不动杆菌中整合子的流行现状、与耐药的相关性及携带的耐药基因。方法 收集106株南京地区鲍曼不动杆菌,纸片扩散法测定其药敏情况;PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)筛查整合子并分类;整合子PCR法扩增整合子可变区;联合RFLP和DNA测序技术分析整合子携带的耐药基因。结果52.8﹪(56/106)的鲍曼不动杆菌中检出整合子,PCR-RFLP结果显示均为Ⅰ类整合子;94.6﹪(53/56)的整合子阳性菌株可变区扩增阳性,扩增片段大小从0.15kb到2.8kb不等;共检出7种不同的可变区,含有编码对氨基糖苷类抗生素(aadA1、aadA2、aadA5、aadB、aacA4)、磺胺类抗生素(dfrⅫ、dfr17)、B-内酰胺类抗生素(bla)和氯霉素(catB-like、catB8)耐药的基因及两个功能不清的开放阅读框(orfF、orfI);发现一例新型基因盒组合形式orfI-aadA1,Genbank基因号为DQ092497。结论 Ⅰ类整合子广泛存在于南京地区鲍曼不动杆菌中;整合子与鲍曼不动杆菌的耐药和多重耐药有关;鲍曼不动杆菌整合子主要携带氨基糖苷类耐药基因。

摘要： 整合子被认为是耐药基因在水平传播的重要因子,具有特异重组位点,能够将携有耐药基因的基因盒,选择性地整合到整合子上获得耐药性。通过整合子的整合作用,耐药基因之间能够互相交换,再借助于转化,转导与接合作用,使得耐药基因在病原菌上广泛的传播造成多重耐药.本文就整合子、基因盒的概念、结构和分类,基因盒的表达和传播的进展做一综述.

摘要： 本文基于国内外一些研究结果,对整合子系统在细菌耐药机制中的作用,以及整合子的结构、来源、分布等加以论述。

摘要： 本文基于国内外一些研究结果,对整合子系统在细菌耐药机制中的作用,以及整合子的结构、来源、分布等加以论述。

摘要： 本文基于国内外一些研究结果,对整合子系统在细菌耐药机制中的作用,以及整合子的结构、来源、分布等加以论述。

摘要： 一种自闭症的致病基因、易感基因和可能相关基因变异检测试剂盒，其特征在于，包括以下部分：RNA探针组，引物，封闭缓冲液，RNA酶封闭液，杂交缓冲液，结合缓冲液，1倍浓度的SSC的漂洗液，0.1倍浓度的SSC的漂洗液，PCR反应液和TE缓冲液；所述的RNA探针组包括282条RNA探针，所述的RNA探针序列如Seq ID No1～Seq ID No282。本发明提供的一种用于检测自闭症的致病基因、易感基因和可能相关基因的试剂盒，可同时检测6个疾病相关的致病/易感基因，可以为自闭症患病个体进行分子遗传学诊断，也可以对自闭症患者的父母亲再生育时进行新生儿的自闭症患病风险评估。

摘要： 本发明提供了一种含基因工程抗体基因表达盒的微环DNA重组母质粒及其制备方法，该微环DNA重组母质粒能在宿主菌内完成位点特异性重组，消除原核质粒元件，形成含基因工程抗体基因表达盒的微环DNA；本发明还提供了一种含基因工程抗体基因表达盒的微环DNA及其制备方法和应用，该微环DNA可在宿主细胞内稳定、持久地表达基因工程抗体基因，是一种高效、安全的基因治疗载体；其次，本发明还提供了一种含有该微环DNA的宿主细胞及其制备方法和应用；此外，本发明还提供了一种基因工程抗体及其制备方法和应用。

摘要： 本发明涉及一种基因表达盒及其应用，该基因表达盒包括依次连接的无细胞特异性的启动子、LoxP位点、终止子、细胞特异性启动子、Cre重组酶基因、终止子、LoxP位点、目的基因及终止子，其中，两个LoxP位点是同向的。与传统技术相比，该基因表达盒无需使用转基因动物就能实现目的基因的高效表达，同时保证细胞的选择性；且无需使用多个表达载体，只要按要求将基因表达盒克隆到实验所需的表达载体就可以达到实验目的，节省了实验步骤和时间。

摘要： 本发明涉及在微生物中异源产生表面活性剂蛋白Lv‑ranaspumin‑1(Lv‑Rsn‑1)预测同种型的经修饰形式，所述表面活性剂蛋白Lv‑Rsn‑1预测同种型的序列是从对来自东北胡椒蛙(Leptodactylus vastus)巢的泡沫蛋白质提取物进行的分析中推理而来。更具体地，本发明涉及以下：两种表面活性剂蛋白，其由Lv‑Rsn‑1预测同种型的经修饰形式组成；两种合成基因，其各自编码Lv‑Rsn‑1预测同种型的所述经修饰形式之一；两种表达盒，其各自包含编码Lv‑Rsn‑1预测同种型的经修饰形式之一的合成基因之一；两种表达载体，其各自包含编码Lv‑Rsn‑1预测同种型的经修饰形式的合成基因之一；以及两种转基因微生物(细菌和酵母)，其各自被所述合成基因之一转化并异源产生Lv‑Rsn‑1预测同种型的经修饰形式之一。Lv‑Rsn‑1尤其具有表面活性剂特性、乳化和分散特性，并且其异源产生使得其能够用于多种应用和工业产品，而无需从来自蛙巢的泡沫中提取。

摘要： 一种基因敲入方法，是向基因组DNA的靶部位敲入外源性DNA的方法，包括向细胞导入包含所述外源性DNA的供体DNA以及以Cas9蛋白质和其向导RNA作为构成要素的CRISPR－Cas9系统的工序，所述供体DNA从5’侧依次包含由可通过微同源介导的连接与所述基因组DNA的所述靶部位的5’侧的第1核苷酸序列连接的第1’核苷酸序列构成的5’－微同源区域、所述外源性DNA、由可通过微同源介导的连接与所述基因组DNA的所述靶部位的3’侧的第2核苷酸序列连接的第2’核苷酸序列构成的3’－微同源区域，所述CRISPR－Cas9系统是如下系统：将所述基因组DNA中的所述靶部位与第1核苷酸序列之间的第1被切断区域以及所述靶部位与第2核苷酸序列之间的第2被切断区域切断，并且将所述供体DNA中的所述5’－微同源区域的5’侧的第3被切断区域、所述外源性DNA与所述5’－微同源区域之间的第4被切断区域、所述外源性DNA与所述3’－微同源区域之间的第5被切断区域以及所述3’－微同源区域的3’侧的第6被切断区域切断；在所述基因组DNA的第1核苷酸序列与第2核苷酸序列之间插入所述外源性DNA。

摘要： 本发明涉及人类遗传学和内科心血管技术领域，具体涉及了一种突变的VHL基因，在基因组位置chr3:10191647处，碱基T突变为碱基G；参考基因组版本是GRCh37。本发明还涉及一种单基因高血压基因检测试剂盒，包括用于扩增突变的VHL基因的引物。本发明提供的突变的VHL基因可以作为临床辅助诊断的生物标志物；检测该变异的携带者，为受试者提供优生优育指导和遗传咨询，减少患儿出生，对单基因高血压中的嗜铬细胞瘤的早期诊断，或者辅助临床判断具有重要意义。

摘要： 本发明提供包含序列号3和序列号7的组合、序列号2和序列号9的组合、序列号1和序列号8的组合、序列号1和序列号9的组合、序列号4和序列号11的组合、序列号5和序列号12的组合、序列号6和序列号10的组合或序列号6和序列号12的组合的引物对作为用于实现灵敏度高的甲氧西林耐药性基因检测的甲氧西林耐药性基因检测用引物。

摘要： 本申请涉及基因芯片杂交盒、基因芯片套装和基因芯片杂交方法。基因芯片杂交盒包括：基板，其具有基因芯片布置区域，基因芯片的第一表面能够接合到基因芯片布置区域；盖板，其设置有通孔，通孔与基因芯片布置区域相对；设置在基板和盖板之间的间隔片，其用使基板和盖板之间产生预定间隔，并且间隔片在面对至少一个基因芯片布置区域的区域中具有开孔，从而在基板、盖板之间限定基因芯片容纳空间；预定间隔设置成使得当基因芯片固定在基因芯片布置区域中时，基因芯片的与第一表面相对并且包括探针区的第二表面与盖板的面向所第二表面的表面的间隔在0.05mm至0.15mm之间，使得当通过盖板的通孔注入杂交液时，杂交液能够通过毛细作用布满第二表面。

摘要： 本发明提供了一种用于修复HBB1基因点突变的gRNA、基因编辑系统、表达载体和基因编辑试剂盒。本发明同时针对β17(A→T)以及β41‑42(‑TCTT)定点修复，通过一次基因编辑即可修复HBB基因两个常见的突变位点，拓展了地中海贫血症和镰刀型贫血症的治疗方法；另外，本发明直接在造血干细胞(HSC)中进行编辑，与现有技术中对iPS细胞进行基因编辑相比，避免了细胞致癌和突变的安全风险，临床使用更为安全。

摘要： 本发明提供了一种用于修复HBB1基因点突变的gRNA、基因编辑系统、表达载体和基因编辑试剂盒。本发明同时针对β17(A→T)以及β41‑42(‑TCTT)定点修复，通过一次基因编辑即可修复HBB基因两个常见的突变位点，拓展了地中海贫血症和镰刀型贫血症的治疗方法；另外，本发明直接在造血干细胞(HSC)中进行编辑，与现有技术中对iPS细胞进行基因编辑相比，避免了细胞致癌和突变的安全风险，临床使用更为安全。