口腔黏膜下纤维化

摘要： 目的:探讨加味丹玄口康调控口腔黏膜下纤维化大鼠Wnt/β-catenin信号通路表达作用机制。方法:从35只SPF级成年雄鼠中随机挑选5只作为正常组,剩余30只大鼠采用槟榔提取物建模,成功建立25只口腔黏膜下纤维化(OSF)大鼠模型。将25只OSF模型大鼠随机分为OSF模型组、加味丹玄口康低剂量组、加味丹玄口康中剂量组、加味丹玄口康高剂量组和Wnt抑制剂组,每组各5只。加味丹玄口康低剂量组、加味丹玄口康中剂量组、加味丹玄口康高剂量组大鼠分别给予4、8、12 ml/kg加味丹玄口康灌胃,Wnt抑制剂组大鼠给予25 mg/kg的KYA1797K腹腔注射,OSF模型组和正常组大鼠给予4 ml/kg的0.9%氯化钠溶液灌胃。1次/d,持续给药4周。分别于治疗前、治疗2周、治疗4周比较各组大鼠张口度和颊黏膜评分。给药4周后处死大鼠,采用PCR和Western blot分别检测Wnt-1、β-catenin、Cylin D1和Axin基因及蛋白表达情况。结果:治疗2周及治疗4周后,Wnt抑制剂组、加味丹玄口康中剂量组、加味丹玄口康高剂量组大鼠的张口度增大,颊黏膜评分减小,加味丹玄口康高剂量组大鼠的张口度最大、颊黏膜评分最低,差异有统计学意义(均P0.05)。加味丹玄口康高剂量组与OSF模型组、加味丹玄口康低剂量组、加味丹玄口康中剂量组、Wnt抑制剂组比较,Wnt-1、β-catenin、Cylin D1 mRNA和蛋白表达水平降低,Axin mRNA和蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(均P0.05)。结论:加味丹玄口康可有效改善OSF模型大鼠临床症状,通过抑制Wnt/β-catenin信号通路相关基因及蛋白表达,抑制大鼠口腔黏膜纤维化。

摘要： 目的采用Nd:YAG激光联合曲安奈德治疗口腔黏膜下纤维化患者,观察治疗后纤维化组织的修复、愈合及病情进展情况。方法选取2018年6月-2019年10月于杭州师范大学附属医院口腔科就诊的80例口腔黏膜下纤维化患者,采用随机数字表法分为观察组与对照组,每组40例。对照组患者使用曲安奈德注射液治疗,观察组在此基础上使用Nd:YAG激光治疗,2组均持续治疗9周。2组患者治疗前后采用视觉模拟评分法(VAS)评分进行评价,并测量张口程度和口腔黏膜病损面积;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清血管内皮生长因子(VEGF)、血小板反应蛋白(TSP)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)水平及血清IL-6、TNF-α水平。结果治疗后,对照组口腔黏膜病损面积为(1.47±0.62)cm^(2),观察组为(0.86±0.23)cm^(2),观察组口腔黏膜病损面积小于对照组(P<0.05);2组患者血清VEGF均升高,观察组高于对照组[(0.75±0.19)pg/mL vs.(0.61±0.23)pg/mL,P<0.05],而血清TSP、MMP-2、IL-6和TNF-α水平均降低,观察组低于对照组(均P<0.05)。结论Nd:YAG激光联合曲安奈德可有效缓解口腔黏膜下纤维化患者口腔灼痛,抑制纤维化发展,并促进纤维化组织的修复与愈合,控制病情进一步发展。

摘要： 目的探讨曲安奈德联合丹参酮注射液治疗口腔黏膜下纤维化(OSF)的临床效果。方法选择2019年9月至2020年12月在我院口腔科进行OSF治疗的118例患者为研究对象,采用单双号随机数字法将其分为对照组和试验组,各59例。对照组患者采用曲安奈德注射液进行治疗,试验组患者在对照组基础上采用丹参酮注射液进行治疗。比较两组患者的临床疗效、黏膜病损面积、最大张口度、转化生长因子-β1(TGF-β1)、白细胞介素-6(IL-6)水平、疼痛程度、口腔健康状况、血流变学指标。结果试验组的治疗总有效率显著高于对照组(P<0.05)。治疗后4个月,两组患者的黏膜病损面积显著减小,最大张口度显著增大,且试验组优于对照组(P<0.05)。治疗后4个月,两组患者的TGF-β1、IL-6水平均显著降低,且试验组显著低于对照组(P<0.05)。治疗后4个月,两组患者的VAS、OHIP-14评分均显著降低,且试验组显著低于对照组(P<0.05)。治疗后4个月,试验组的低切全血黏度、红细胞压积及FBI水平均显著低于治疗前及对照组(P<0.05)。讨论曲安奈德联合丹参酮注射液治疗OSF的效果显著优于单用曲安奈德,其能减轻患者的疼痛程度,改善口腔健康状况,减小黏膜病损面积,增大最大张口度,改善生化指标及血流变学指标水平,值得在临床上推广。

摘要： 槟榔是一味传统中药,也是我国“四大南药”之首。大量研究表明,槟榔在驱虫、消食、醒酒、消炎、改善消化道功能、降血脂、预防动脉粥样硬化、抗抑郁、抗病毒等方面均有药理作用。近年来,因嚼食槟榔的人数越来越多,过量嚼食槟榔与人们健康之间的关系引起了国内外众多学者的关注。长期大量嚼食槟榔可能导致腹痛、恶心呕吐、昏睡等不良反应,也可能引起口腔黏膜下纤维化,存在致癌、生殖毒性和遗传毒性,但其毒性作用机制尚未完全明晰。本文收集了近年来国内外关于槟榔活性成分及药理毒理研究进行综述,以期为槟榔与人类健康关系的研究提供科学依据,并为相关产业发展提供参考。

摘要： 目的探讨Nd∶YAG激光联合曲安奈德治疗口腔黏膜下纤维化(OSF)的疗效。方法选取2017年9月—2019年9月辽阳市某医院诊治的101例OSF患者,采用随机数字表法分为观察组(49例)和对照组(52例)。对照组患者给予曲安奈德治疗,观察组患者在对照组基础上给予Nd∶YAG激光进行治疗,比较2组患者的临床疗效,治疗前后炎症因子水平、黏膜病损面积、血液流变学指标、张口程度等。结果观察组患者治疗总有效率为95.92%,高于对照组的80.77%,差异有统计学意义(χ^(2)=5.530,P=0.019)。2组患者治疗后红细胞压积、低切全血黏度、纤维蛋白原(FIB)水平低于治疗前,且观察组低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。2组患者治疗后血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))水平低于治疗前,且观察组低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。2组患者治疗后口腔视觉模拟评分法(VAS)评分、黏膜病损面积小于治疗前且观察组小于对照组,张口度大于治疗前且观察组大于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论Nd∶YAG激光联合曲安奈德治疗OSF疗效较好,有助于减轻患者机体炎症反应,改善血液流变学指标及黏膜受损情况。

摘要： 目的观察加味丹玄口康对口腔黏膜下纤维化(oral submucous fibrosis,OSF)大鼠血清乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)及γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)水平的影响,进一步验证加味丹玄口康治疗OSF的疗效机制。方法60只雄性SD大鼠随机均分为5组(正常组、模型组及加味丹玄口康低、中、高剂量组)。正常组自然饲养,其余4组采用颊黏膜下注入槟榔提取物(areca nut extract,ANE)后再用自制刷蘸ANE刷颊黏膜的方法造模8周。加味丹玄口康高、中、低剂量组通过灌服4、8、12 g/kg剂量的加味丹玄口康进行干预,模型组灌以10 mL/(kg·d)蒸馏水,均连续8周。实验结束后测定大鼠开口度,采用HE染法观察各组大鼠口腔颊黏膜病理形态,采用ELISA法检测各组大鼠血清中LDH、TNF-α、IL-1β、IL-6和IFN-γ水平。结果与正常组比较,模型组大鼠颊黏膜出现明显的纤维化表现,张口度和血清IFN-γ水平降低(P<0.05),血清LDH、TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著升高(P<0.05)。与模型组比较,加味丹玄口康高、中、低剂量组张口度、血清IFN-γ水平均升高(P<0.05),血清LDH、TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显降低(P<0.05)。与加味丹玄口康低剂量组比较,加味丹玄口康中剂量组血清IFN-γ水平升高(P<0.05),血清LDH、IL-1β、IL-6降低(P<0.05),加味丹玄口康高剂量组张口度和血清IFN-γ水平升高(P<0.05),血清LDH、TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显降低(P<0.05)。与加味丹玄口康中剂量组比较,加味丹玄口康高剂量组张口度和血清IFN-γ水平均明显升高(P<0.05),血清LDH、TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显降低(P<0.05)。OSF大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平与张口度均呈高度负相关,与血清LDH水平呈高度正相关(P<0.01),血清IFN-γ水平与张口度呈高度正相关,与血清LDH水平呈负相关(P<0.01)。结论加味丹玄口康能通过降低促纤维化免疫因子TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌,增加抑制纤维化免疫因子IFN-γ的分泌,影响机体免疫功能,并能增加张口度及降低OSF生物标志物LDH水平,进而改善口腔黏膜下纤维化,控制OSF病情进展。

摘要： 目的探讨丹玄口康治疗口腔黏膜下纤维化(oral submucosal fibrosis,OSF)的作用网络和药效机制。方法基于网络药理学的方法,结合TCMSP、UniProt、GeneCards等数据库联合分析丹玄口康的有效成分和OSF的作用靶点;通过Cytoscape构建有效成分与靶基因的网络,对靶基因进行GO富集分析和信号通路分析;依据网络药理学结果,设置每组10只共5组SD大鼠进行实验论证,包括正常对照组、模型组、丹玄口康低剂量组、丹玄口康中剂量组、丹玄口康高剂量组。除正常对照组外,其余组以槟榔碱对口腔黏膜机械刺激和注射造模。模型组和正常对照组予以生理盐水灌胃,丹玄口康低、中、高剂量组分别以4、8、12 mL/kg浓度的中药灌胃,每天灌胃1次,连续8周。HE观察大鼠口腔黏膜的病理变化,q-PCR检测HIF-1α的含量。结果丹玄口康的主要活性成分93个,包括丹参酮、芍药苷、黄芩素等;治疗OSF的关键靶基因有48个,包括EGFR、JUN、HIF-1α等,通过参与氧化应激进程和HIF-1信号通路等,发挥治疗OSF的作用。动物实验结果显示:丹玄口康能改善OSF大鼠口腔黏膜上皮萎缩和胶原沉积,同时能下调HIF-1α的转录(P<0.01)。结论丹玄口康治疗OSF体现了中药多成分、多靶点和多通路的作用特点。

摘要： 目的基于氧化应激介导的内皮间充质转化(EndMT)探讨槟榔碱(Arecoline)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的作用机制研究。方法采用槟榔碱干预复制HUVECs损伤模型。实验设对照组、槟榔碱高剂量组和槟榔碱低剂量组。采用CCK-8检测不同浓度槟榔碱对HUVECs存活率的影响,细胞成像分析检测HUVECs形态学变化,采用MitoSOX探针检测线粒体活性氧(ROS)水平,采用免疫荧光及激光共聚焦检测氧化应激相关蛋白PGC-1α、Nrf2及EndMT相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、SNAI1的表达情况,Western blotting检测氧化应激相关蛋白PGC-1α、Nrf2及EndMT相关蛋白N-cadherin、Vimentin的表达情况。结果槟榔碱可以浓度依赖性抑制HUVECs活性,降低细胞存活率,诱导细胞形态结构发生变化,明显下调PGC-1α、Nrf2蛋白的表达,促进细胞线粒体释放ROS,同时显著下调细胞中E-cadherin蛋白的表达,上调N-cadherin、Vimentin和SNAI1蛋白的表达,最终诱导HUVECs发生EndMT,显著加重细胞损伤。结论槟榔碱对HUVECs具有明显的损伤作用,可能是通过氧化应激介导的EndMT发挥作用,这可能是槟榔碱所致口腔黏膜下纤维化病变继而诱发口腔癌的重要病理机制。

摘要： 目的:了解C-erbB-2在不同剂量丹参注射液联合泼尼松龙治疗口腔黏膜下纤维化(OSF)前后的表达情况。方法:随机选取69例OSF患者作为研究对象,其治疗方案均为丹参注射液联合泼尼松龙,根据用药剂量的不同将其分为小剂量组(A组)、中剂量组(B组)、高剂量组(C组),每组各23例。随机选取同时期口腔黏膜正常患者10例作为对照。采用免疫组化二步法(S-P)检测OSF组织与正常口腔黏膜组织中C-erbB-2蛋白的表达情况。结果:C-erbB-2在OSF组织中的表达明显高于在正常口腔黏膜组织中的表达(PB组>C组(P<0.05)。结论:C-erbB-2在口腔黏膜中的表达水平会随着口腔病变恶性程度的增高而增高,该指标对于运用精确剂量丹参注射液联合泼尼松龙治疗OSF以及研究口腔病变恶性程度有一定意义。

摘要： 目的探究加味丹玄口康(DXKK)对口腔上皮损伤细胞增殖活性的影响及轴抑制蛋白1(axis inhibition protein 1,Axin1)的作用。方法选取不同干扰位点的Axin1干扰小RNA-1(small interfering RNA-1,siRNA-1)、Axin1 siRNA-2和Axin1 siRNA-3干预口腔上皮细胞,qRT-PCR检测Axin1的基因表达水平来筛选Axin1的有效干扰靶点。将细胞随机分为空白对照组、干扰对照组、Axin1干扰组、过表达对照组和Axin1过表达组,采用qRT-PCR检测Axin1 mRNA的表达水平,采用细胞计数试剂盒和平板克隆检测细胞增殖情况,采用流式分析检测细胞周期水平,采用Western blot检测Axin1、β-catenin、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、Bax、Bcl-2和cleaved Caspase-3蛋白的表达。采用氢溴酸槟榔碱(arecoline hydrobromide,AH)诱导口腔上皮细胞损伤模型,将口腔上皮细胞随机分为空白对照组、AH刺激组(50μg/mL)、空白血清干预组(10%空白血清+50μg/mL AH)、含DXKK血清干预组(10%含DXKK血清+50μg/mL AH)、含DXKK血清干预+Axin1过表达组(10%含DXKK血清+Axin1过表达质粒+50μg/mL AH),EdU染色检测口腔上皮细胞的增殖活性。结果与干扰对照组比较,Axin1干扰-1组、Axin1干扰-2组和Axin1干扰-3组Axin1的基因表达水平均显著降低(P<0.01);Axin1干扰组细胞增殖活性和β-catenin、PCNA、Bcl-2蛋白表达均显著升高(P<0.01),Axin1、Bax、cleaved Caspase-3蛋白和Axin1 mRNA的表达均显著降低(P<0.05或P<0.01)。与过表达对照组相比,Axin1过表达组处于G1期的细胞比例、细胞增殖活性和β-catenin、PCNA、Bcl-2蛋白表达均显著降低(P<0.01),处于S期的细胞比例和Axin1、Bax、cleaved Caspase-3蛋白及Axin1 mRNA的表达均显著升高(P<0.01)。与空白对照组比较,AH刺激组Axin1蛋白表达显著增加(P<0.01),细胞增殖活性显著降低(P<0.01)。与空白血清干预组比较,含DXKK血清干预组Axin1蛋白表达需显著降低(P<0.01),细胞增殖活性显著升高(P<0.01)。与含DXKK血清干预组比较,含DXKK血清干预+Axin1过表达组细胞增殖活性显著降低(P<0.05)。结论Axin1可调控口腔上皮细胞增殖活性。DXKK通过抑制Axin1信号,促进AH诱导的口腔上皮细胞增殖。

摘要： 本发明涉及用于预防或治疗受试者的各种纤维化疾病及病状，包括肺纤维化、肝纤维化、皮肤纤维化和心脏纤维化的经取代的芳族化合物，其中所述化合物具有下式：或其药学上可接受的盐，其中A为C5烷基、C6烷基、C5烯基、C6烯基、C(O)‑(CH2)n‑CH3或CH(OH)‑(CH2)n‑CH3，其中n为3或4；R1为H、OH或F；R2为H、OH、F或CH2‑OH；R3为H、OH、F或CH2Ph；R4为H、OH或F；Q为1)(CH2)mC(O)OH，其中m为1或2，2)CH(CH3)C(O)OH，3)C(CH3)2C(O)OH，4)CH(F)‑C(O)OH，5)CF2‑C(O)OH，或6)C(O)‑C(O)OH。

摘要： 本发明公开了一种制备大鼠口腔黏膜下纤维化实验模型的刷子。所述制备大鼠口腔黏膜下纤维化实验模型的刷子包括：刷柄，所述刷柄内形成有储液空腔，所述储液空腔内存储有槟榔提取液；导轨；刷头；多根第一刷毛；输液管，所述输液管的一端与所述储液空腔连通，所述输液管的另一端与所述第一刷毛连通。隔板；弹性件，所述弹性件弹性连接所述刷头与所述隔板；驱动杆，所述驱动杆的一端与所述刷头抵接，所述驱动杆的另一端伸入所述储液空腔；加速杆，所述加速杆自所述驱动杆的另一端弯折延伸而成，并伸入所述输液管。本发明提供的制备大鼠口腔黏膜下纤维化实验模型的刷子操作便捷，模拟效果良好，极大的节约了实验人员的人力与时间成本。

摘要： 本发明属于外用口腔癌治疗材料技术领域，具体涉及缓解口腔癌前期病变之一‑口腔黏膜下纤维化(OSF)水凝胶医用敷料，为化学交联铯离子的海藻酸盐/丙烯酸/蒙脱石复合水凝胶。此外，本发明还提供了所述的水凝胶的制备方法和应用。本发明所述的复合水凝胶，创新地在海藻酸盐/丙烯酸/蒙脱石复合水凝胶中加入铯离子，调控其对槟榔碱伤害后的细胞保护作用，可以降低口腔上皮细胞炎症反应，增加口腔粘膜黏连蛋白分泌从而构筑上皮屏障，调控胶原紊乱状态，阻止槟榔碱进一步伤害，阻止槟榔碱进一步伤害，从而阻止OSF恶化为口腔癌，达到预防目的。

摘要： 本发明公开了一种口腔黏膜下纤维化小鼠模型的构建方法，包括以下步骤：(1)动物选择及分组；(2)槟榔碱饮水剂配制；(3)动物喂养及处死；(4)实验观察；(5)构建小鼠OSF模型。本发明口腔黏膜下纤维化小鼠模型的构建方法，使用500～2000mg/L的槟榔碱饮水剂喂养Balb/c小鼠20周，获得小鼠OSF模型与人类OSF具有高度相似性，该动物模型发病率高(100％)、发病部位多样化，口腔内各部位黏膜均可发病，诱导的方法简便自然，通过小鼠自由饮水，防止了物理刺激及其它化学药物刺激的影响，效果理想，诱导时间短。

摘要： 本发明公开了一种口腔黏膜下纤维化恶性进展或其所致口腔癌的早期诊断和/或预后的生物标志物的应用及试剂盒，生物标志物包括LINC02147基因，试剂盒包含特异性扩增LINC02147的引物。能够准确检测样品中所含LINC02147 RNA表达水平，对口腔癌及口腔黏膜下纤维化癌变具有早期诊断及预测预后价值，操作简单，准确度高，成本低廉。还公开了检测样本中生物标志物的试剂在制备口腔黏膜下纤维化恶性进展或其所致口腔癌的早期诊断和/或预后产品中的应用，以及生物标志物在构建预测口腔黏膜下纤维化恶性进展或其所致口腔癌的计算模型或者嵌入了所述计算模型的系统中的应用，可以指导医生适时的采取治疗策略、手段及措施。

摘要： 本发明属于外用口腔癌治疗材料技术领域，具体涉及缓解口腔癌前期病变之一‑口腔黏膜下纤维化(OSF)水凝胶医用敷料，为化学交联铯离子的海藻酸盐/丙烯酸/蒙脱石复合水凝胶。此外，本发明还提供了所述的水凝胶的制备方法和应用。本发明所述的复合水凝胶，创新地在海藻酸盐/丙烯酸/蒙脱石复合水凝胶中加入铯离子，调控其对槟榔碱伤害后的细胞保护作用，可以降低口腔上皮细胞炎症反应，增加口腔粘膜黏连蛋白分泌从而构筑上皮屏障，调控胶原紊乱状态，阻止槟榔碱进一步伤害，阻止槟榔碱进一步伤害，从而阻止OSF恶化为口腔癌，达到预防目的。

摘要： 本发明公开了一种治疗口腔黏膜下纤维化的中药含片及制备方法，是由以下原料药按照重量配比制成的：丹参、当归、红花、生地黄、玄参、白花蛇舌草、生黄芪、薄荷。其制备方法，是通过原料预处理、配料、提取、制片或调制等一系列步骤制成含片或者口服液。本发明与目前主要治疗方法注射胶原酶溶解胶原纤维和手术切除纤维条索比，免除患者手术或注射造成的痛苦，也免除了患者手术后复发之虞，且疗效明显。

摘要： 本发明公开了一种制备大鼠口腔黏膜下纤维化实验模型的刷子。所述制备大鼠口腔黏膜下纤维化实验模型的刷子包括：刷柄，所述刷柄内形成有储液空腔，所述储液空腔内存储有槟榔提取液；导轨；刷头；多根第一刷毛；输液管，所述输液管的一端与所述储液空腔连通，所述输液管的另一端与所述第一刷毛连通。隔板；弹性件，所述弹性件弹性连接所述刷头与所述隔板；驱动杆，所述驱动杆的一端与所述刷头抵接，所述驱动杆的另一端伸入所述储液空腔；加速杆，所述加速杆自所述驱动杆的另一端弯折延伸而成，并伸入所述输液管。本发明提供的制备大鼠口腔黏膜下纤维化实验模型的刷子操作便捷，模拟效果良好，极大的节约了实验人员的人力与时间成本。

摘要： 本发明公开了一种口腔黏膜下纤维化小鼠模型的构建方法，包括以下步骤：(1)动物选择及分组；(2)槟榔碱饮水剂配制；(3)动物喂养及处死；(4)实验观察；(5)构建小鼠OSF模型。本发明口腔黏膜下纤维化小鼠模型的构建方法，使用500～2000mg/L的槟榔碱饮水剂喂养Balb/c小鼠20周，获得小鼠OSF模型与人类OSF具有高度相似性，该动物模型发病率高(100％)、发病部位多样化，口腔内各部位黏膜均可发病，诱导的方法简便自然，通过小鼠自由饮水，防止了物理刺激及其它化学药物刺激的影响，效果理想，诱导时间短。

摘要： 本实用新型提供一种模拟咀嚼槟榔诱发大鼠口腔黏膜下纤维化的试验装置，包括用于塞入大鼠口腔内的刷头、固定设置在刷头上的槟榔纤维、用于带动刷头进而带动槟榔纤维对大鼠口腔内壁进行摩擦的电机和用于将含槟榔碱的液体导入大鼠口腔内的滴液装置。本实用新型能高度模拟人类咀嚼槟榔过程中槟榔粗纤维对口腔黏膜的机械摩擦刺激及槟榔提取物的化学刺激，并且能通过大鼠辅助使用大鼠固定器能长期刺激大鼠口腔黏膜，能模拟人类咀嚼槟榔的长期慢性过程，是目前诱导大鼠口腔黏膜下纤维化的方法中最合适的刺激方法，有望在相对较短时间内诱导出更接近于临床口腔黏膜下纤维化患者的典型病理改变。